普通微生物微生物与基因工程
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是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法
高温变性
92～96℃
中温延伸 70～72℃
低温复性 （退火）
40～60℃
P C R 基 本 原 理
所用DNA聚合酶： Klenow聚合酶 1988年Saiki等从水生栖热菌(Thermus aquaticus)
分离到TaqDNA 聚合酶 校 火球菌(Pyrococcus furiosus)分离到Pfu DNA 聚合 正 酶;
2）变异部位位于基因的 中间
重组 PCR(recombinant PCR)—Higuchi,1988年
PCR定位诱变
§3 微生物与克隆载体
克隆载体(cloning vector)：
以扩增外源DNA为目的的载体 到目前为止，基因工程中使用的载体基本 上均来自微生物
克隆载体的基本要求
• 应是一个独立的复制子(replicon) • 具有多克隆位点 • 具有选择标记 • 安全性
因外源DNA的插入而导致基因失活的现象
3.其它质粒载体
➢pUC pGEM系列
二、λ噬菌体克隆载体
λ噬菌体克隆载体的优点 ➢ 分子遗传学背景十分清楚 ➢ 容量较大（23kbp） ➢ 具有较高的感染率 λ噬菌体克隆载体的构建 ➢ 删除基因组中非必需区 ➢ 除去多余的限制酶切位点
λ噬菌体克隆载体的种类
qRT-PCR (quantitative real-time PCR)
四、基因的定位诱变
在基因精确限定的位点引入突变 1、寡核苷酸指导的定位诱变 2、盒式诱变 3、PCR定位诱变
1.寡核苷酸指导的定位诱变
2.盒式诱变(cassette mutagenesis)
较大片段的诱变
3.PCR诱变 1）变异部位位于基因的 末端 引物5‘端限制位点的引入
基因的功能分类
• 结构基因（structure gene)： 决定蛋白质/多肽链或酶分子结构的基
因 • 调控基因 (regulatory gene)：
调节控制结构基因表达功能
基因的一般特性
• 半保留自我复制
• 决定生物表型或性状
• 基因突变
新的生物性状
DNA的结构
• 基本单位：核苷酸（碱基、五碳糖、磷酸）
( Transformation) 四、重组体的筛选鉴定 ( identification) 五、控制外源基因的表达(gene expression)
基因工程过程示意图
①从细胞中分 离出DNA
① ②
③ ④
②限制酶截取 DNA片断
③分离大肠杆 菌中的质粒
⑤ ⑥
④ DNA重组
⑤用重组质粒 转化大肠杆菌
• 一、从基因文库或cDNA文库分离目的基 因
• 二、酶法或化学方法人工合成基因 • 三、PCR扩增基因 • 四、基因的定位诱变
一、从基因文库或cDNA文库分离目的基因 基因文库
基因组DNA片段的全部克隆
建立基因文库步骤：
1、提取基因组DNA 2、DNA片段化 3、选择合适载体 4、DNA与载体连接 5、重组体转化或者转染
图1-1 肺炎双球菌转化实验
➢ 基因工程学重大的技术发现
➢ 基因工程酶技术
1970年 限制性核酸内切酶的分离和纯化（Hind III）
➢ 分子克隆
1972年 Berg 首次实现基因重组 1973年 Cohen 重组DNA转化
➢ DNA测序
1975年Sanger实验室建立酶法DNA测序技术 1977年Gilbert实验室又建立化学法DNA测序技术 1980年诺贝尔化学奖授予Berg、 Sanger、 Gilbert
外源DNA<15kbp
2.质粒pBR322的结构特点
1977年Bolivar构建 ➢ 环状双链DNA 4,361bp 外源DNA 5kbp左右 ➢ 松弛型质粒，一个复制起点
➢ 两个抗性基因 Tetr Ampr
➢ 多克隆位点（multiple cloning site; polylinker;24） 插入失活(insertional inactivation):
• 基因工程常用载体
真核生物基因组
• 基因组庞大3×106bp、染色质、染色体.
• 基因不连续性 断裂基因、内含子、外显子（大部分基 因含有内含子）
• 含有大量重复序列 非编码区域多于编码区域 • 非编码区较多 多于编码序列(9:1） • 转录和翻译不偶联
二、基因工程的基本过程
一、目的基因的制备( donor DNA ) 二、体外DNA重组(DNA recombination ) 三、重组DNA导入宿主细胞
四、M13噬菌体载体
E.coli丝状噬菌体 环状ssDNA 6,407bp 感染雄性菌后变 成复制型dsDNA,以滚环方式复制出ssDNA
特点： 1. 间隔区插入β-半乳糖苷酶N端一小段编码序列，编 码β-半乳糖苷酶的α肽，可与E.coli lacZ突变基因产 物ΔM15进行α互补，产生有活性的β-半乳糖苷酶。 在含有异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)和显色物5溴-4-氯-3-吲哚β- D-半乳糖苷(X-gal)的平板上 时出现蓝色噬菌斑 2. 在α肽的编码区插入多克隆位点， 外源基因插入这一 区段，破坏 α互补作用，使β-半乳糖苷酶失活， 重组体产生白色噬菌斑
• 指DNA分子由稳定的双螺旋 结构松解为无规则线性结构的 现象。
• 变性时维持双螺旋稳定性的氢 键断裂， 但不涉及到其一级结 构的改变。
• 凡能破坏双螺旋稳定性的因素， 均可引起核酸分子变性。
• 解链温度:Tm Tm=69.3＋0.41(%G+C)
DNA复性 ( DNA Renature )
• 是DNA变性的一种逆转过程。热变性后的DNA一般 经缓慢冷却后即可复性，此过程称之为退火(annealing)。
二、酶法或化学方法人工合成基因
➢ 适于遗传背景清楚的细菌染色体
➢ 酶切电泳分离DNA
➢ 化学方法人工合成基因
应用：
1、合成基因 2、合成核酸探针
探针(probe)：用同位素或其它非放射物质标 记的一段特定的DNA或RNA片段
3、合成DNA引物
三、PCR扩增基因
聚合酶链式反应 Polymerase Chain Reaction, PCR
➢ 基因工程理论基础
➢ 20世纪40年代：证明了遗传物质是DNA ➢ 20世纪50年代：DNA双螺旋结构 ➢ 20世纪60年代：确定了遗传信息的传递方式
(A)注射有荚膜（S型）的致病性肺炎双球菌，小鼠死亡 (B)注射突变的（R型）非致病性肺炎双球菌，小鼠存活。 (C)注射加热杀死的S型，小鼠存活。 (D)注射活的R型与加热杀死的S型的混合物，小鼠死亡。
⑥培养大肠杆菌 克隆大量基因/
使其表达
三、微生物学与基因工程的关系
1.提供丰富而独特的基因资源 2.工具酶 3.克隆载体 4.基因克隆的宿主 5.基因表达的反应器 6.有关基因结构、性质和表达调控的理论主要来自对微生
物的研究 一切基因工程操作都离不开微生物—操作技术和理论指导
§2 基因的分离、合成和定位诱变
载体的种类
一、质粒克隆载体 二、λ噬菌体克隆载体 三、柯斯质粒载体(cosmid vector—黏粒载体) 四、M13噬菌体载体 五、噬菌质粒载体(phagemid/phasmid)
一、质粒克隆载体
1.质粒克隆载体的特性：
➢ 具有独立的复制起点 ➢ 含有多种限制酶的单一识别位点 ➢ 具有较小的相对分子质量 1~200kbp ➢ 具有较高拷贝数 ➢ 具有便于选择的标记 ➢ 易于导入细胞 ➢ 具有安全性
DNA的分子克隆+ DNA测序
—使重组DNA技术系统得以产生
相关理论的复习
• 基因的概念和特性 • DNA的结构与性能 • DNA的复制与表达 • 基因组
一 基因的概念
• 遗传学概念：
基因: 是DNA分子中携带特定遗传信息的最小功能单位，控制遗传性状
• 分子生物学定义：
• 编码功能性蛋白质多肽链或RNA所必需的全部核酸序列， • 负载特定的遗传信息并在一定条件下调节、表达遗传信息， • 指令蛋白质合成。
2 原核生物基因与表达特点 ——细菌基因表达
1） 基因组较小 2） 基因是连续的 3） 没有转录后加工过程和翻译后加工过程。 4） 转录和翻译偶联，可同时进行。
• 细菌染色质
2. 原核生物基因组
• 质粒（plasmid）：wenku.baidu.com
细菌染色体以外的遗传物质，是环状闭合的双链DNA。
• 可自主复制
• 编码生物学形状
第十章
微生物与基因工程
基因工程(genetic engineering)
在基因水平上，根据人们的需要以人工的方法 取得特定基因，在体外重组于载体DNA分子上， 然后将重组DNA转入受体细胞进行无性繁殖（称 为“克隆” ）和行使正常功能（称为“表达 ” ）， 从而制备人类需要的基因、基因产物或创造出新的 生物类型的分子生物学技术。
oc
LC
ccc
DNA的性能
• 吸收光谱高峰为260nm
溴化乙啶（EB）嵌入DNA双链配对碱基之间，紫外线照射，可显示DNA位 置
• 在电场中的迁移率与分子量大小、构象有关
• DNA变性：在物理或化学因素作用下，氢键断裂成单链的过程 • DNA复性：变性因素去除后在适当条件下恢复
成双链的过程。
DNA变性(DNA Denature )
• 双螺旋结构
.两条脱氧核苷酸链成反向平行排列， (A)腺嘌呤
.一条呈5 ‘
3’方向
.另一条呈3 ‘ 5’方向。
.以碱基配对形成氢键而形成双螺旋结构
.遵循互补配对原则即：
A＝T G≡C
(G)鸟嘌呤
(C)胞嘧啶 (U) 尿嘧啶 (T) 胸腺嘧啶
DNA的三种构型：
-超螺旋：共价闭环（CCC）
-开环：单链缺口（OC） -线型：双链断裂（L）
插入型载体(insert vector) 取代型载体(replacement vector) 78%~105%
三、柯斯质粒载体(cosmid vector—黏粒载体)
由λ噬菌体的粘性末端(cos位点)和质粒构建而成 黏粒的优点 ➢ 具有噬菌体的高效感染率， 以质粒形式存在 ➢ 具有质粒的复制方式 ➢ 具有克隆大片段外源DNA的能力(45kbp)
载体（Vector）：
能容忍外源DNA片段插入，可在细胞间转 移。并在宿主细胞内自主复制的DNA分子。
DNA重组 （recombination)：
不同来源的DNA片段共价连接、通过
重新组合构成了具有两个DNA分子遗传
信息的新重组体DNA分子的过程。
转化(transformation)：
以质粒为载体构建的载体DNA，在一 定条件下引入受体细胞的过程。或指DNA 分子进入宿主细胞的过程。
• 最佳复性条件一般认为是比Tm低25℃左右的温度
• 复性时温度下降必须缓慢 ，若在超过Tm的温度下迅速冷却 至低温(如4℃以下)，复性几乎是不可能的，核酸实验中经常 以此方式保持DNA的变性(单链)状态。
DNA的复制与表达
• 半保留复制
（semi-conservative replication）
功
能 从Thermococcus litoralis分离到Vent DNA 聚合酶 从Thermus thermophilus中分离Tth DNA 聚合酶
PCR注意事项： 1. 引物的设计 2. 退火温度 3. 实验操作
PCR应用
1、基因扩增和制备DNA探针 2、临床医学上传染病的检测等 3、法医上判定亲缘关系 4、定性、定量检测基因表达水平
cDNA文库：
生物体全部mRNA的cDNA的克隆总体 1. mRNA的提取 2. 利用逆转录酶以寡聚dT或随机寡聚核苷酸为引物合
成cDNA的第一条链 3. 利用DNA聚合酶Ⅰ，以cDNA的第一条链为模板，
用适当引物合成cDNA的第二条链，常用RNA酶H在 杂交分子的mRNA链上造成缺口和切口，产生一系 列引物，或是除去杂交分子的mRNA后，加入随机 引物合成第二条链 4. 其它同基因文库的构建
• 基因表转达录（gmeRnNAe 翻译 蛋白 expression）
基因组（genome)
• 概念：细胞或生物体的全套遗传物质 • 常见基因组特点：
– 病毒基因组 – 原核生物基因组 – 真核生物基因组
1. 病毒基因组
• 基因组小，基因数少 • 带有重叠基因 • 大部分为编码蛋白质的结构基因
HB V 基 因 组
基因工程核心是构建重组体DNA的技术，因
此，基因工程和重组DNA技术(recombinant DNA technology)有时为同义词
基因工程的出现使得生物科学迅猛发展，并带 动了生物技术产业的兴起！
基因工程的特点
可设计性 稳定性 远缘性 风险性
§1 基因工程概述
一、基因工程发展历史
➢ 基因工程三大理论基础 ➢ 基因工程三大技术发现
高温变性
92～96℃
中温延伸 70～72℃
低温复性 （退火）
40～60℃
P C R 基 本 原 理
所用DNA聚合酶： Klenow聚合酶 1988年Saiki等从水生栖热菌(Thermus aquaticus)
分离到TaqDNA 聚合酶 校 火球菌(Pyrococcus furiosus)分离到Pfu DNA 聚合 正 酶;
2）变异部位位于基因的 中间
重组 PCR(recombinant PCR)—Higuchi,1988年
PCR定位诱变
§3 微生物与克隆载体
克隆载体(cloning vector)：
以扩增外源DNA为目的的载体 到目前为止，基因工程中使用的载体基本 上均来自微生物
克隆载体的基本要求
• 应是一个独立的复制子(replicon) • 具有多克隆位点 • 具有选择标记 • 安全性
因外源DNA的插入而导致基因失活的现象
3.其它质粒载体
➢pUC pGEM系列
二、λ噬菌体克隆载体
λ噬菌体克隆载体的优点 ➢ 分子遗传学背景十分清楚 ➢ 容量较大（23kbp） ➢ 具有较高的感染率 λ噬菌体克隆载体的构建 ➢ 删除基因组中非必需区 ➢ 除去多余的限制酶切位点
λ噬菌体克隆载体的种类
qRT-PCR (quantitative real-time PCR)
四、基因的定位诱变
在基因精确限定的位点引入突变 1、寡核苷酸指导的定位诱变 2、盒式诱变 3、PCR定位诱变
1.寡核苷酸指导的定位诱变
2.盒式诱变(cassette mutagenesis)
较大片段的诱变
3.PCR诱变 1）变异部位位于基因的 末端 引物5‘端限制位点的引入
基因的功能分类
• 结构基因（structure gene)： 决定蛋白质/多肽链或酶分子结构的基
因 • 调控基因 (regulatory gene)：
调节控制结构基因表达功能
基因的一般特性
• 半保留自我复制
• 决定生物表型或性状
• 基因突变
新的生物性状
DNA的结构
• 基本单位：核苷酸（碱基、五碳糖、磷酸）
( Transformation) 四、重组体的筛选鉴定 ( identification) 五、控制外源基因的表达(gene expression)
基因工程过程示意图
①从细胞中分 离出DNA
① ②
③ ④
②限制酶截取 DNA片断
③分离大肠杆 菌中的质粒
⑤ ⑥
④ DNA重组
⑤用重组质粒 转化大肠杆菌
• 一、从基因文库或cDNA文库分离目的基 因
• 二、酶法或化学方法人工合成基因 • 三、PCR扩增基因 • 四、基因的定位诱变
一、从基因文库或cDNA文库分离目的基因 基因文库
基因组DNA片段的全部克隆
建立基因文库步骤：
1、提取基因组DNA 2、DNA片段化 3、选择合适载体 4、DNA与载体连接 5、重组体转化或者转染
图1-1 肺炎双球菌转化实验
➢ 基因工程学重大的技术发现
➢ 基因工程酶技术
1970年 限制性核酸内切酶的分离和纯化（Hind III）
➢ 分子克隆
1972年 Berg 首次实现基因重组 1973年 Cohen 重组DNA转化
➢ DNA测序
1975年Sanger实验室建立酶法DNA测序技术 1977年Gilbert实验室又建立化学法DNA测序技术 1980年诺贝尔化学奖授予Berg、 Sanger、 Gilbert
外源DNA<15kbp
2.质粒pBR322的结构特点
1977年Bolivar构建 ➢ 环状双链DNA 4,361bp 外源DNA 5kbp左右 ➢ 松弛型质粒，一个复制起点
➢ 两个抗性基因 Tetr Ampr
➢ 多克隆位点（multiple cloning site; polylinker;24） 插入失活(insertional inactivation):
• 基因工程常用载体
真核生物基因组
• 基因组庞大3×106bp、染色质、染色体.
• 基因不连续性 断裂基因、内含子、外显子（大部分基 因含有内含子）
• 含有大量重复序列 非编码区域多于编码区域 • 非编码区较多 多于编码序列(9:1） • 转录和翻译不偶联
二、基因工程的基本过程
一、目的基因的制备( donor DNA ) 二、体外DNA重组(DNA recombination ) 三、重组DNA导入宿主细胞
四、M13噬菌体载体
E.coli丝状噬菌体 环状ssDNA 6,407bp 感染雄性菌后变 成复制型dsDNA,以滚环方式复制出ssDNA
特点： 1. 间隔区插入β-半乳糖苷酶N端一小段编码序列，编 码β-半乳糖苷酶的α肽，可与E.coli lacZ突变基因产 物ΔM15进行α互补，产生有活性的β-半乳糖苷酶。 在含有异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)和显色物5溴-4-氯-3-吲哚β- D-半乳糖苷(X-gal)的平板上 时出现蓝色噬菌斑 2. 在α肽的编码区插入多克隆位点， 外源基因插入这一 区段，破坏 α互补作用，使β-半乳糖苷酶失活， 重组体产生白色噬菌斑
• 指DNA分子由稳定的双螺旋 结构松解为无规则线性结构的 现象。
• 变性时维持双螺旋稳定性的氢 键断裂， 但不涉及到其一级结 构的改变。
• 凡能破坏双螺旋稳定性的因素， 均可引起核酸分子变性。
• 解链温度:Tm Tm=69.3＋0.41(%G+C)
DNA复性 ( DNA Renature )
• 是DNA变性的一种逆转过程。热变性后的DNA一般 经缓慢冷却后即可复性，此过程称之为退火(annealing)。
二、酶法或化学方法人工合成基因
➢ 适于遗传背景清楚的细菌染色体
➢ 酶切电泳分离DNA
➢ 化学方法人工合成基因
应用：
1、合成基因 2、合成核酸探针
探针(probe)：用同位素或其它非放射物质标 记的一段特定的DNA或RNA片段
3、合成DNA引物
三、PCR扩增基因
聚合酶链式反应 Polymerase Chain Reaction, PCR
➢ 基因工程理论基础
➢ 20世纪40年代：证明了遗传物质是DNA ➢ 20世纪50年代：DNA双螺旋结构 ➢ 20世纪60年代：确定了遗传信息的传递方式
(A)注射有荚膜（S型）的致病性肺炎双球菌，小鼠死亡 (B)注射突变的（R型）非致病性肺炎双球菌，小鼠存活。 (C)注射加热杀死的S型，小鼠存活。 (D)注射活的R型与加热杀死的S型的混合物，小鼠死亡。
⑥培养大肠杆菌 克隆大量基因/
使其表达
三、微生物学与基因工程的关系
1.提供丰富而独特的基因资源 2.工具酶 3.克隆载体 4.基因克隆的宿主 5.基因表达的反应器 6.有关基因结构、性质和表达调控的理论主要来自对微生
物的研究 一切基因工程操作都离不开微生物—操作技术和理论指导
§2 基因的分离、合成和定位诱变
载体的种类
一、质粒克隆载体 二、λ噬菌体克隆载体 三、柯斯质粒载体(cosmid vector—黏粒载体) 四、M13噬菌体载体 五、噬菌质粒载体(phagemid/phasmid)
一、质粒克隆载体
1.质粒克隆载体的特性：
➢ 具有独立的复制起点 ➢ 含有多种限制酶的单一识别位点 ➢ 具有较小的相对分子质量 1~200kbp ➢ 具有较高拷贝数 ➢ 具有便于选择的标记 ➢ 易于导入细胞 ➢ 具有安全性
DNA的分子克隆+ DNA测序
—使重组DNA技术系统得以产生
相关理论的复习
• 基因的概念和特性 • DNA的结构与性能 • DNA的复制与表达 • 基因组
一 基因的概念
• 遗传学概念：
基因: 是DNA分子中携带特定遗传信息的最小功能单位，控制遗传性状
• 分子生物学定义：
• 编码功能性蛋白质多肽链或RNA所必需的全部核酸序列， • 负载特定的遗传信息并在一定条件下调节、表达遗传信息， • 指令蛋白质合成。
2 原核生物基因与表达特点 ——细菌基因表达
1） 基因组较小 2） 基因是连续的 3） 没有转录后加工过程和翻译后加工过程。 4） 转录和翻译偶联，可同时进行。
• 细菌染色质
2. 原核生物基因组
• 质粒（plasmid）：wenku.baidu.com
细菌染色体以外的遗传物质，是环状闭合的双链DNA。
• 可自主复制
• 编码生物学形状
第十章
微生物与基因工程
基因工程(genetic engineering)
在基因水平上，根据人们的需要以人工的方法 取得特定基因，在体外重组于载体DNA分子上， 然后将重组DNA转入受体细胞进行无性繁殖（称 为“克隆” ）和行使正常功能（称为“表达 ” ）， 从而制备人类需要的基因、基因产物或创造出新的 生物类型的分子生物学技术。
oc
LC
ccc
DNA的性能
• 吸收光谱高峰为260nm
溴化乙啶（EB）嵌入DNA双链配对碱基之间，紫外线照射，可显示DNA位 置
• 在电场中的迁移率与分子量大小、构象有关
• DNA变性：在物理或化学因素作用下，氢键断裂成单链的过程 • DNA复性：变性因素去除后在适当条件下恢复
成双链的过程。
DNA变性(DNA Denature )
• 双螺旋结构
.两条脱氧核苷酸链成反向平行排列， (A)腺嘌呤
.一条呈5 ‘
3’方向
.另一条呈3 ‘ 5’方向。
.以碱基配对形成氢键而形成双螺旋结构
.遵循互补配对原则即：
A＝T G≡C
(G)鸟嘌呤
(C)胞嘧啶 (U) 尿嘧啶 (T) 胸腺嘧啶
DNA的三种构型：
-超螺旋：共价闭环（CCC）
-开环：单链缺口（OC） -线型：双链断裂（L）
插入型载体(insert vector) 取代型载体(replacement vector) 78%~105%
三、柯斯质粒载体(cosmid vector—黏粒载体)
由λ噬菌体的粘性末端(cos位点)和质粒构建而成 黏粒的优点 ➢ 具有噬菌体的高效感染率， 以质粒形式存在 ➢ 具有质粒的复制方式 ➢ 具有克隆大片段外源DNA的能力(45kbp)
载体（Vector）：
能容忍外源DNA片段插入，可在细胞间转 移。并在宿主细胞内自主复制的DNA分子。
DNA重组 （recombination)：
不同来源的DNA片段共价连接、通过
重新组合构成了具有两个DNA分子遗传
信息的新重组体DNA分子的过程。
转化(transformation)：
以质粒为载体构建的载体DNA，在一 定条件下引入受体细胞的过程。或指DNA 分子进入宿主细胞的过程。
• 最佳复性条件一般认为是比Tm低25℃左右的温度
• 复性时温度下降必须缓慢 ，若在超过Tm的温度下迅速冷却 至低温(如4℃以下)，复性几乎是不可能的，核酸实验中经常 以此方式保持DNA的变性(单链)状态。
DNA的复制与表达
• 半保留复制
（semi-conservative replication）
功
能 从Thermococcus litoralis分离到Vent DNA 聚合酶 从Thermus thermophilus中分离Tth DNA 聚合酶
PCR注意事项： 1. 引物的设计 2. 退火温度 3. 实验操作
PCR应用
1、基因扩增和制备DNA探针 2、临床医学上传染病的检测等 3、法医上判定亲缘关系 4、定性、定量检测基因表达水平
cDNA文库：
生物体全部mRNA的cDNA的克隆总体 1. mRNA的提取 2. 利用逆转录酶以寡聚dT或随机寡聚核苷酸为引物合
成cDNA的第一条链 3. 利用DNA聚合酶Ⅰ，以cDNA的第一条链为模板，
用适当引物合成cDNA的第二条链，常用RNA酶H在 杂交分子的mRNA链上造成缺口和切口，产生一系 列引物，或是除去杂交分子的mRNA后，加入随机 引物合成第二条链 4. 其它同基因文库的构建
• 基因表转达录（gmeRnNAe 翻译 蛋白 expression）
基因组（genome)
• 概念：细胞或生物体的全套遗传物质 • 常见基因组特点：
– 病毒基因组 – 原核生物基因组 – 真核生物基因组
1. 病毒基因组
• 基因组小，基因数少 • 带有重叠基因 • 大部分为编码蛋白质的结构基因
HB V 基 因 组
基因工程核心是构建重组体DNA的技术，因
此，基因工程和重组DNA技术(recombinant DNA technology)有时为同义词
基因工程的出现使得生物科学迅猛发展，并带 动了生物技术产业的兴起！
基因工程的特点
可设计性 稳定性 远缘性 风险性
§1 基因工程概述
一、基因工程发展历史
➢ 基因工程三大理论基础 ➢ 基因工程三大技术发现