免疫检测点介绍

免疫检测点介绍

（一）免疫检测点简介

“免疫检验点”，为抑制受体和抑制信号通路，这些“检验点”在正常情况下能抑制 T 细胞的功能，同时在肿瘤组织中可能被肿瘤利用形成免疫逃逸。

PD-1 、PD-L1、CTLA-4、B 和 T 细胞衰减器（B and T cell attenuator，BTLA）、T 细胞免疫球蛋白以及 Tim-3 等分子均属于“检验点”分子，在肿瘤组织中可能被肿瘤利用形成免疫逃逸，它们通过控制胞外以及胞内信号来控制细胞周期进程。

淋巴细胞活化基因3（LAG-3）是表达在活化T细胞、NK细胞及B细胞上的免疫抑制检验点分子。目前已知的唯一配体是MHC-II分子。

NK细胞表面存在杀伤抑制受体（KIRs，可抑制NK细胞的杀伤作用），在肿瘤微环境中可能会被诱导表达，从而抑制NK细胞的杀伤功能。因此，KIRs也被认为是免疫抑制检验点，通过阻断其信号可增强NK细胞的杀伤肿瘤的功能[53]。目前已有针对KIRs单抗进入临床实验（lirilumab单抗治疗急性粒细胞白血病已进入I期临床实验）很多免疫抑制检验点在肿瘤细胞中与PD-1/PD-L1共表达，另一方面，免疫抑制检验点的联合阻断中可供选择的目标增多有利于筛选出最佳组合从而达到最佳效果。

（二）临床常用的检测点

“程序性死亡分子1”（programmed deah-1， PD-1）和“细胞毒T淋巴细胞相关抗原4”（cytotoxic T lymphocyte-associated

antigen-4， CTLA-4）表达在T细胞表面，同属于抑制性共刺激分子，在免疫系统中扮演着类似“刹车”的角色。

CTLA的配体（即CD80和CD86）只表达在抗原递呈细胞上，而非肿瘤细胞表面，因此CTLA-4抑制T细胞活化发生在次级免疫器官（淋巴结）内，而不是肿瘤微环境中。同时CTLA-4主要表达在CD4+ T 细胞而非CD8+ T细胞，CTLA-4单抗的抗肿瘤作用可能是通过增强CD4+ T细胞间接促进CD8+ T细胞的功能。

不同于CTLA-4的是，PD-1的配体PD-L1在肿瘤细胞及肿瘤浸润淋巴细胞上均有表达，而不是在抗原递呈细胞上，因此PD-1/PD-L1抑制T细胞活化主要在肿瘤微环境中[5-7]。目前，在肺癌领域研究得比较多的免疫检验点抑制剂有抗PD-1（Nivolumab，Pembrolizumab）和PD-L1单抗（MPDL3280A和MEDI-4736）。

PD-L1仍然是现阶段PD-1/PD–L1类药物最有前景的预测疗效的生物标记物之一

在黑色素瘤相关研究中发现，抗PD-1抗体的疗效要好于抗CTLA-4抗体。在NSCLC，CTLA-4抗体单药治疗鲜有疗效，而PD-1/PD-L1阻断剂的单药均表现出肿瘤活性。

PD-1有两个配体，PD-L1和PD-L2；PD-L1有两个受体PD-1和CD80（B7.1）。所以，尽管抗PD-1抗体和抗PD-L1抗体都作用于PD-1/PD-L1信号轴，但阻断PD-1并不等同于阻断PD-L1。抗PD-1抗体能阻断PD-1与PD-L1、PD-L2结合，却不能阻断PD-L1与CD80相互作用，而抗PD-L1抗体能阻断PD-L1与PD-1、CD80结合，却不

与其他的共刺激分子仅表达于 T淋巴细胞不同，PD-1 持续性表达于T、B 淋巴细胞、骨髓细胞并上调于活化的 T细胞表面。

PD-1 是免疫球蛋白超家族CD28 家族成员，为 50 ~ 55 k D 的Ⅰ型跨膜糖蛋白，由类似 Ig G V 的结构域、跨膜结构域以及胞质尾部

结构域组成。Ig G V 的结构区是从质膜中分离的 20个氨基酸区域，与细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4（cytotoxic T lymphocyte associated antigen-4，CTLA-4）、CD28 及共刺激因子具有 22% ~ 33%的同源性；胞质尾区具有 2 个酪氨酸基序，即免疫受体酪氨酸抑制基序（immunoreceptor tyrosine-based inhibitory motif，ITIM）和免疫受体酪氨酸转换基序（immunoreceptor tyrosine-based switch motif，ITSM）。ITSM 对于 PD-1发挥免疫抑制功能十分必要［8］。

PD-1 的表达与细胞凋亡无关但与淋巴细胞活化相关。

PD-1 与肿瘤的免疫逃逸相关，其被T 细胞受体（T cell receptor，TCR）信号诱导，并在慢病毒感染及癌症中上调无衰竭 T 细胞［9］。

PD-L1（B7-H1）和 PD-L2（B7-DC）是 PD-1 结合配体，属于 B7 家族蛋白成员［10］。

人B7-H1与B7-1，B7-2 及 ICOS 的同源性约为 21 至23%。

PD-L1 在 T 细胞、B 细胞、巨噬细胞、DCs 以及一些非免疫细

胞中表达。

与其他的 B7 家族成员仅表达于造血细胞不同，PD-L1 可上调表达于活化的 T 细胞、B 细胞、DC、巨噬细胞、单核细胞，或经 IFN-γ刺激的角质细胞、内皮细胞及成肌细胞表面。此外，PD-L1也低水平的表达于非淋巴器官如心脏、胎盘、骨骼肌、肺、肝、脾及胸腺等器官。

而PD-L2 表达仅局限表达于造血系统来源的细胞如树突细胞、巨噬细胞、单核细胞并上调表达于活化的 T 细胞、B 细胞及其他组织来源的免疫细胞表面。

B7-H1 在维持外周耐受发挥主要作用，B7-DC 主要是在淋巴结的免疫应答中有重要的功能[4]。

PD-L1 配体涉及宿主免疫系统的逃逸及肿瘤抗凋亡的活性［ 8 ］。PD-L1 的广泛表达表明 PD-1／PD-L1 在调解效应 T 细胞应答中具有重要作用。

与PD-L1相同，IFNγ、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（granulocyte macrophage-colony sti-mutaing factor，GM-CSF）以及白细胞介素-4 （inte-rleukin-4，IL-4）等炎症信号可加强PD-L2 的表达。PD-Ls 在肿瘤中的表达可调解适应性 Tregs 导致肿瘤诱发的免疫抑制，包括 CD8+ T 细胞效应功能的抑制。

PD-1／PD-Ls 的Ig V 区域与 T 细胞的抗原受体及抗体相似，提高了PD-1／PD-Ls 复合物结合其他分子的可能性。

活化诱导的细胞死亡