临床检验仪器重点
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临床检验仪器重点
(八)分辨率;
(九)测量范围和示值范围;
(十)线性范围:是指输入与输出成比例的输入含量的范围。也就是反应曲线呈直线的那一段所对应的物质含量范围;
(十一)响应时间;
(十二)频率响应范围
重复性与精密度的关系
精密度主要考察检验仪器的稳定性,重复性主要是考察方法的稳定性。
4.检验仪器的选购原则
质量原则、实用原则、价格原则、服务原则、规范原则
第二章离心机
(掌握常用的离心方法、专用离心机的临床应用)
1.离心现象
物体在离心力场中表现的沉降运动现象。应用离心沉降进行物质的分析和分离的技术称为离心技术,实现离心技术的仪器是离心机。
2.离心机的工作原理
利用旋转运动的离心力以及物质的沉降系数或悬浮密度的差异进行分离、浓缩和提纯生物样品的一种方法。颗粒的沉降速度取决于离心机的转速、颗粒的质量、大小和密度。
3.常用的离心方法
根据离心原理,对不同样品的分离选择不同的离心方法。临床实验室常用的离心方法大致可分为平衡离心法、等密度离心法、经典式沉降平衡离心法等三类。
A、平衡离心法是根据粒子大小、形状不同进行分离的方法,包括差速离心法和速率区带离心法。
1.差速离心法:又称为分步离心法。根据被分离物的沉降速度不同,采用不同的离心速度和时间进行分步离心。该法主要用于分离大小和密度差异较大的颗粒。
2. 又称为区带离心法。该法又分为速率区带离心法和等密度区带离心法。该方法主要用于沉降速度差别不大的微粒,将样品放在一定惰性梯度介质中进行离心沉淀或沉降平衡,在一定离心力下把颗粒分配到梯度液中某些特定位置上,形成不同区带的分离方法。
B、等密度离心法(又称等比重离心法)是以粒子密度差进行分离的方法。等密度离心法和上述速率区带离心法合称为密度梯度离心法。
C、经典式沉降平衡离心法主要用于对生物大分子分子量的测定、纯度估计、构象变化等。
4.专用离心机的临床应用
A、低速离心机:临床实验室主要用于全血中的血浆、血清的分离及尿液、胸腹水、脑脊液等有形成分的分离。
B、高速离心机:基础实验室对各种生物细胞、无机物溶液、悬浮液及胶体溶液的分离、浓缩和提纯等。
C、超速离心机:主要用于科研,对样本中亚细胞器的分离,病毒、核酸、蛋白质及多糖的分离。第三章显微镜
(显微镜的结构及性能特点)
1.光学显微镜
显微镜是由两组会聚透镜组成的光学折射成像系统。把焦距较短、靠近观察物、成实像的透镜组
称为物镜(object lens),而焦距较长,靠近眼睛、成虚像的透镜组称为目镜(ocular lens)。
基本结构
① 机械部分:镜座、镜柱、镜臂、镜筒、调焦装置、载物台(物镜转换器)
② 光学部分:目镜、物镜、反光镜、聚光镜
放大倍数:
目镜的放大倍数×物镜的放大倍数
性能参数
(一)数值孔径
又叫镜口率,是物体与物镜间媒质的折射率n与物镜孔径角的一半(β)正弦值的乘积,通常缩写为NA,即
NA=nsinβ
(二)分辨率
显微镜的最重要参数,指透镜能分辨两点之间的最小距离。
提高显微镜分辨率的方法: 增大物镜的数值孔径、用短波长的光照射。如紫外光显微镜,电子显微镜。
(三)放大率
显微镜经多次成像后最终所成(放大的)像的大小相对于原物体大小的比值,常记作M。
(四)视野
又称视场(field),是指通过显微镜所能看到标本所在空间的范围。
(五) 景深与焦长
又称焦点深度,是指在成一幅清晰像的前提下,像平面不变,景物沿光轴前后移动的距离称“景深”。景物不动,像平面沿光轴前后移动的距离称“焦长”。
(六)镜像亮度和清晰度
镜像亮度即显微镜的图像亮度的简称。高倍率工作条件下的暗场、偏光、摄影显微镜等都需要足够的
亮度,与照明及物镜的性能参数相关。
镜像清晰度是指图像的轮廓清晰、衬度适中的程度。
(七)工作距离
从物镜前表面中心到被观察标本间满足工作要求的距离范围,与物镜的数值孔径成反比。
一般情况下,物镜的数值孔径赿大,其工作距离赿小。
2.电子显微镜
基本结构
电子光学系统(照明系统、成像系统)、真空系统、供电系统、机械系统、观察显示系统
分类
透射电镜、扫描电镜、扫描隧道显微镜
透射电镜:分辨率高,可用来观察组织和细胞内部的超微结构以及微生物和生物大分子的全貎,观察薄样品。
扫描电镜:特点分辨率高、立体感强、放大倍率范围广
扫描隧道显微镜:分辨率极高、可在真空、大气、液体等条件下工作、非破坏性测量、观看三维表面结构。
第四章紫外-可见分光光度计
(紫外-可见分光光度计工作原理、基本类型及其特点、紫外-可见分光光度计的基本结构及各部件的基本功能)
1.分光光度计:将各种波长的混合光分离出每一单色光,并测量其强度的仪器。200nm-400nm紫外,400-800nm可见光。
2.吸收光谱:不同的物质会吸收不同波长的光。改变入射光的波长,并依次记录物质对不同波长光的吸收程度,就得到该物质的吸收光谱。
3.紫外-可见分光光度计的基本结构:光源、单色器(复合光变成单色光)、吸收池(能透过紫外线时石英玻璃或蓝宝石制作)、检测器(光电管、光电倍增管)、显示系统;双光度紫外分光光度计的基本结构:结构是在以上基础上加入光束分裂器或斩波器。
4.光的吸收定律(朗伯-比尔定律):当用一束单色光照射吸收溶液时,其吸光度与液层厚度b及溶液浓度c的乘积成正比。
朗伯-比尔定律适用的条件是:入射光为单色光、溶液浓度不能过大。
5. 紫外-可见分光光度计的分类
单波长分光光度计:单光束单波长分光光度计、双光束单波长分光光度计、双波长分光光度计。
第五章临床血液常规检验仪器
(掌握血细胞分析仪的概念、库尔特原理、仪器的基本结构)