_套餐式_组织芯片法在免疫组化室内质控中的应用
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
1 材料与方法
1. 1 “套餐式”组织芯片的设计 选出我科免疫组化结果 为阳性的切片,找出原免疫切片和对应蜡块,在显微镜下找 出阳性部位并标记。阳性部位着色应有强弱,从标记出来的 阳性部位在蜡块上找出相应组织位置,用 0. 2 mm 的空心针 取出组织,放入空白芯片蜡块中。把相关联的抗体作为“套 餐式”芯片,通常四种抗体为一套餐单位,如标记乳腺癌的抗 体 ER、PR、c-erb-B2、E-cad 为一套 ( 或一组) ,组织芯片中 4 块小组织分别代表 4 种抗体等。按照我科常规的鉴别诊断, 把它分别做成“套餐式”芯片,这样其中一个为阳性对照,其 余为阴性对照。把制好的蜡块放入烤箱,烘烤至软,取出后 稍加揉捏,反复此过程做成“套餐式”芯片蜡块,再把它包埋 于包埋盒中,然后将组织芯片蜡块连续切片,2 ~ 3 μm 厚,裱 贴于经 APES 丙酮液处理过的载玻片的一端,然后储藏于干 燥的切片盒内备用。我 科 现 除 去 有 内 对 照 的 抗 体 无“套 餐 式”芯片以外,已有几十种抗体都做成相应的“套餐式”组织 芯片便于室内质控。 1. 2 免疫组化染色 当常规病例做免疫组化染色时,从备 用盒中取出 1 张相应的“套餐式”芯片,将常规病例组织切 片后,裱在阳性对照芯片旁,同时进行烤片、脱蜡、高压抗原 修复以及非生物素两步法免疫组化染色。
总之,“套餐式”组织芯片法作为室内质控的新方法,科 学简便易行,值得应用与推广。
参考文献:
[1] 王翠芝Leabharlann Baidu周小鸽,黄受方,张彦宁. 组织芯片在免疫组化染色阳 性对照中的应用[J]. 临床与实验医学杂志,2006,22( 4) : 481 - 4.
[2] Joshi A,Varma M,Wozniak S,Jasani B. Potential unreliability of normal tissue as positive control in diagnostic immunohistochemistry of poorly differentiated carcinoma[J]. Histopathology,2010, 57( 5) : 760 - 2.
2 结果
2. 1 芯片效果 我们观察了几十种抗体染色结果,未发现 阳性对照芯片中抗原丢失现象。每张芯片中至少能观察到
收稿日期: 2011 - 11 - 17 作者单位: 山西省人民医院病理科,太原 030012 作者简介: 赵丽平,女,主管技师。E-mail: zhaolipingdede@ 163. com
3 讨论
“套餐式”芯片,使得染色结果更加可靠,并且组织芯片 规整排列,方便阅片和查对; 组织芯片的面积小,与被测组织 在同一张载玻片上,染色条件相同,且不影响被测组织的染 色,因而更具有可比性,同时节约了试剂的使用量,与全自动 免疫组化仪的控制效果相当; “套餐式”组织芯片制作过程 简单,花费时间少,与多组织芯片阳性对照片[2]相比,其制作 无繁琐的组织处理过程,且大大节约了材料和准备时间; 当 被测组织和弱 阳 性 的 对 照 点 均 出 现 阴 性 时,应 重 复 染 色 过 程,避免假阴性结果的产生。
按传统方法阳性对照组织与待测组织不在同一张载玻 片上,试 验 条 件 未 必 完 全 一 样。Battifora 等[1] 报 道 了 一 种 “香肠”组织包埋方法,费时、费力且耗材; 随后经过多次改 良,也制成多 组 织 阳 性 对 照 片[2],用 于 免 疫 组 化 染 色[3],但 其面积大,造成抗体浪费。因此,选择以“套餐式”组织芯片 法作为室内质控的标准化方法,用于每张免疫组化切片的染 色过程控制,因芯片面积小、组织少与被测组织在同一张载 玻片上,界限清 楚,不 影 响 被 测 组 织 的 染 色,使 观 察 更 为 方 便,染色结果更为可靠。
[3] Chan J K,Wang C S,Ku W T,Kwan M Y. Reflection on the use of controls in immunohistochemistry and proposal for application of a multitissue spring-roll control block[J]. Ann Diagn Pathol, 2001,5( 5) : 320.
苏宏昌,男,主管技师,通讯作者。E-mail: shc2006@ sohu. com
一个阳性点位,其余点位为阴性对照,使旁边的被测组织有 明确的对照,所用抗体的“套餐式”芯片阳性信号均清楚,而 且强弱不同。 2. 2 优点 组织芯片整齐排列,阅片者很容易看到阳性对 照芯片,也不影响被测组织的染色。采用不同的抗体染色, 选择不同的“套餐式”芯片作对照,确保染色结果的可靠性。 同时减少重复工作,节省材料,给病理医师提供了准确而可 靠的切片,也给患者争取更多治疗的时间。
免疫组化染色是病理工作中不可或缺的项目,要获得一 致的、准确的免疫组化结果,室内质控尤为重要。要做到病 理质控的标准化,高端产品全自动免疫组化仪完全可以达到 要求,但因其价格昂贵,在短缺资金的医院存在困难。我们 在工作过程中摸索出了以“套餐式”组织芯片法[1]作为室内 质控的标准化方法,便于室内质控,现介绍如下。
·106·
临床与实验病理学杂志 J Clin Exp Pathol 2012 Jan; 28( 1)
“套餐式”组 织 芯 片 法 在 免 疫 组 化 室 内 质 控 中 的应用
赵丽平,苏宏昌
关键词: 室内质控; 免疫组化; 套餐式; 组织芯片 中图分类号: R 446. 8 文献标识码: B 文章编号: 1001 - 7399( 2012) 01 - 0106 - 01
1. 1 “套餐式”组织芯片的设计 选出我科免疫组化结果 为阳性的切片,找出原免疫切片和对应蜡块,在显微镜下找 出阳性部位并标记。阳性部位着色应有强弱,从标记出来的 阳性部位在蜡块上找出相应组织位置,用 0. 2 mm 的空心针 取出组织,放入空白芯片蜡块中。把相关联的抗体作为“套 餐式”芯片,通常四种抗体为一套餐单位,如标记乳腺癌的抗 体 ER、PR、c-erb-B2、E-cad 为一套 ( 或一组) ,组织芯片中 4 块小组织分别代表 4 种抗体等。按照我科常规的鉴别诊断, 把它分别做成“套餐式”芯片,这样其中一个为阳性对照,其 余为阴性对照。把制好的蜡块放入烤箱,烘烤至软,取出后 稍加揉捏,反复此过程做成“套餐式”芯片蜡块,再把它包埋 于包埋盒中,然后将组织芯片蜡块连续切片,2 ~ 3 μm 厚,裱 贴于经 APES 丙酮液处理过的载玻片的一端,然后储藏于干 燥的切片盒内备用。我 科 现 除 去 有 内 对 照 的 抗 体 无“套 餐 式”芯片以外,已有几十种抗体都做成相应的“套餐式”组织 芯片便于室内质控。 1. 2 免疫组化染色 当常规病例做免疫组化染色时,从备 用盒中取出 1 张相应的“套餐式”芯片,将常规病例组织切 片后,裱在阳性对照芯片旁,同时进行烤片、脱蜡、高压抗原 修复以及非生物素两步法免疫组化染色。
总之,“套餐式”组织芯片法作为室内质控的新方法,科 学简便易行,值得应用与推广。
参考文献:
[1] 王翠芝Leabharlann Baidu周小鸽,黄受方,张彦宁. 组织芯片在免疫组化染色阳 性对照中的应用[J]. 临床与实验医学杂志,2006,22( 4) : 481 - 4.
[2] Joshi A,Varma M,Wozniak S,Jasani B. Potential unreliability of normal tissue as positive control in diagnostic immunohistochemistry of poorly differentiated carcinoma[J]. Histopathology,2010, 57( 5) : 760 - 2.
2 结果
2. 1 芯片效果 我们观察了几十种抗体染色结果,未发现 阳性对照芯片中抗原丢失现象。每张芯片中至少能观察到
收稿日期: 2011 - 11 - 17 作者单位: 山西省人民医院病理科,太原 030012 作者简介: 赵丽平,女,主管技师。E-mail: zhaolipingdede@ 163. com
3 讨论
“套餐式”芯片,使得染色结果更加可靠,并且组织芯片 规整排列,方便阅片和查对; 组织芯片的面积小,与被测组织 在同一张载玻片上,染色条件相同,且不影响被测组织的染 色,因而更具有可比性,同时节约了试剂的使用量,与全自动 免疫组化仪的控制效果相当; “套餐式”组织芯片制作过程 简单,花费时间少,与多组织芯片阳性对照片[2]相比,其制作 无繁琐的组织处理过程,且大大节约了材料和准备时间; 当 被测组织和弱 阳 性 的 对 照 点 均 出 现 阴 性 时,应 重 复 染 色 过 程,避免假阴性结果的产生。
按传统方法阳性对照组织与待测组织不在同一张载玻 片上,试 验 条 件 未 必 完 全 一 样。Battifora 等[1] 报 道 了 一 种 “香肠”组织包埋方法,费时、费力且耗材; 随后经过多次改 良,也制成多 组 织 阳 性 对 照 片[2],用 于 免 疫 组 化 染 色[3],但 其面积大,造成抗体浪费。因此,选择以“套餐式”组织芯片 法作为室内质控的标准化方法,用于每张免疫组化切片的染 色过程控制,因芯片面积小、组织少与被测组织在同一张载 玻片上,界限清 楚,不 影 响 被 测 组 织 的 染 色,使 观 察 更 为 方 便,染色结果更为可靠。
[3] Chan J K,Wang C S,Ku W T,Kwan M Y. Reflection on the use of controls in immunohistochemistry and proposal for application of a multitissue spring-roll control block[J]. Ann Diagn Pathol, 2001,5( 5) : 320.
苏宏昌,男,主管技师,通讯作者。E-mail: shc2006@ sohu. com
一个阳性点位,其余点位为阴性对照,使旁边的被测组织有 明确的对照,所用抗体的“套餐式”芯片阳性信号均清楚,而 且强弱不同。 2. 2 优点 组织芯片整齐排列,阅片者很容易看到阳性对 照芯片,也不影响被测组织的染色。采用不同的抗体染色, 选择不同的“套餐式”芯片作对照,确保染色结果的可靠性。 同时减少重复工作,节省材料,给病理医师提供了准确而可 靠的切片,也给患者争取更多治疗的时间。
免疫组化染色是病理工作中不可或缺的项目,要获得一 致的、准确的免疫组化结果,室内质控尤为重要。要做到病 理质控的标准化,高端产品全自动免疫组化仪完全可以达到 要求,但因其价格昂贵,在短缺资金的医院存在困难。我们 在工作过程中摸索出了以“套餐式”组织芯片法[1]作为室内 质控的标准化方法,便于室内质控,现介绍如下。
·106·
临床与实验病理学杂志 J Clin Exp Pathol 2012 Jan; 28( 1)
“套餐式”组 织 芯 片 法 在 免 疫 组 化 室 内 质 控 中 的应用
赵丽平,苏宏昌
关键词: 室内质控; 免疫组化; 套餐式; 组织芯片 中图分类号: R 446. 8 文献标识码: B 文章编号: 1001 - 7399( 2012) 01 - 0106 - 01