_套餐式_组织芯片法在免疫组化室内质控中的应用

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乳腺癌HER-2免疫组化简易质控芯片的应用

乳腺癌HER-2免疫组化简易质控芯片的应用

1.3 方法 1.3.1 供体标本的染色 所有供体蜡块 4μm厚切片,使用 正电荷黏附载玻片捞片,65℃烤片 2h;全自动免疫组化仪 按照预设程序染色(CC1修复液 100℃ 修复 30min;一抗 HER237℃孵育 32min;二抗系统 HRPMultimer37℃孵育 8min;DAB显色 37℃ 8min;苏木精复染);染色结束后人工 清洗玻片并脱水透明封固。 1.3.2 结果判读 HER2阳性定位于肿瘤细胞膜,结果判 读标准参考《乳腺癌 HER2检测指南(2019版)》[2]。 1.3.3 供体蜡块的选择及简易芯片的制作 (1)从 30例供 体蜡块中选择染色效果最佳的 -、1+、2+、3+各 1例;(2) 镜下观察切片,选定目标区域并调取相对应蜡块,并用记号 笔在蜡块上对应 区 域 做 标 记;(3)融 解 蜡 块,用 刀 片 切 取 标 记的组织区域,切取组织区域,大小 3mm×3mm,然后将切 取的组织依次按照 -、1+、2+、3+的顺序包埋在同一蜡块 中;(4)在检测乳腺癌中 HER2的表达时,可将上述简易芯 片对照裱在切片一端,与 待 检 组 织 同 时 染 色,染 色 程 序 同 131。
临床与实验病理学杂志 JClinExpPathol 2021May;37(5)
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图 1 HER2的表达,EnVision法:A.3+;B.2+;C.1+;D.-

药和预后评价的关键。2006年我国发布了《乳腺癌 HER2 检测指南》,截至 2019年,专家多次对《乳腺癌 HER2检测 指南》进行更新,在乳腺癌检测的标准化、规范化及其判读的 客观化等方面 进 行 指 导,极 大 提 高 了 我 国 的 乳 腺 癌 诊 断 水 平。然而,我国乳腺癌 HER2的免疫组化检测水平不一,发 达地区地市级以上医院病理科基本配备了全自动免疫组化 染色仪,能 够 按 照 最 新 的 《乳 腺 癌 HER2检 测 指 南 (2019 版)》[2]标准采用推 荐 的 抗 体 及 方 法 标 准 化 检 测,并 建 立 了 本实验室的 SOP(实验室标准操作规程),但更多的基层医 院由于经济条件、技术水平等因素限制,并不能对 HER2的 免疫组化进 行 规 范 检 测。因 此,为 了 保 证 诊 断 结 果 的 准 确 性,乳腺癌 HER2的免疫组化检测需设立阳性对照,最好应 设立已明确的具有不同 HER2染色强度的对照,从而保证 不同批次染色的客观性。

组织芯片技术在检测肿瘤组织抗原表达中的应用

组织芯片技术在检测肿瘤组织抗原表达中的应用

组织芯片技术在检测肿瘤组织抗原表达中的应用申姜颖;姜晓玲;宫敏【期刊名称】《泰山医学院学报》【年(卷),期】2006(027)002【摘要】Kononen等于1998年创立并报道的组织芯片亦称组织微阵列(tissus microarray,TMA)技术,是一项以形态学为基础的分子生物学新技术。

组织芯片技术是将数十个、数百个乃至上千个小组织片,按实验设计的需求整齐地排列在同一张载玻片上而制备成的微缩组织切片。

它具有高信息量、体积小、快速、低耗、易于标准化等优点,已逐步应用于HE染色、组织化学、免疫组化、原位杂交和荧光原位杂交技术。

我们使用自制的组织芯片采样器制作组织芯片,将此技术初步尝试应用于免疫组织化学,检测VEGF、nm23、Ki-67和PCNA四种抗体在108冽肿瘤标本组织中的表达,以探讨和了解组织芯片技术在临床病理诊断及科研中的实用价值。

【总页数】3页(P154-156)【作者】申姜颖;姜晓玲;宫敏【作者单位】泰山医学院形态学实验室,山东,泰安,271000;解放军第八十八医院病理科,山东,泰安,271000;泰山医学院形态学实验室,山东,泰安,271000【正文语种】中文【中图分类】R392.3【相关文献】1.组织芯片技术在研究肿瘤组织中抗原表达的应用 [J], 魏荣;王晨;张晓琴;卫建平;李卫东2.应用组织芯片技术检测GPC3蛋白在肝细胞癌及其他肿瘤中的表达 [J], 苏宁;郑大勇;陈斌;申鹏;罗荣城3.采用组织芯片技术检测正常涎腺及其肿瘤组织中Skp2、P27的表达 [J], 郑立娟;王伟;李静;张众4.组织芯片技术检测肿瘤相关抗原在膀胱癌、癌旁组织中的表达 [J], 颜汝平;王剑松;李翀;柯昌兴;左毅刚;刘靖宇5.应用组织芯片技术检测COX-2在多种肿瘤中的表达——ZM-1型组织芯片制备系统的可行性验证 [J], 孟潘庆;陈曦;郑树;彭佳萍;董琦因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

组织芯片 免疫组化

组织芯片 免疫组化

组织芯片免疫组化1. 引言组织芯片是一种高通量的技术,可以在一个芯片上同时分析多个组织样本。

而免疫组化是一种常用的实验方法,用于检测和定位特定蛋白质在组织中的表达情况。

本文将讨论如何利用组织芯片进行免疫组化实验,包括实验步骤、技术优势以及应用领域。

2. 实验步骤2.1 制备组织芯片首先,需要制备组织芯片。

这可以通过将不同类型的组织标本切割成薄片,并将其固定在玻璃或硅片上来完成。

这些切片通常具有统一的尺寸和形状,以便于在芯片上布置。

2.2 免疫反应接下来,进行免疫反应。

首先,在组织切片上进行抗原修复处理,以恢复抗原的天然结构。

然后,在切片上加入特异性抗体,并进行孵育反应。

这些抗体可以与特定蛋白质结合,并形成可视化的信号。

2.3 信号检测在免疫反应完成后,需要对信号进行检测。

常用的方法包括荧光染色和酶联免疫吸附实验(ELISA)。

荧光染色可以通过显微镜观察到特定蛋白质的荧光信号,而ELISA可以通过酶的催化作用产生可见的颜色变化。

2.4 数据分析最后,进行数据分析。

根据组织芯片上不同区域的信号强度和位置信息,可以得出特定蛋白质在不同组织中的表达情况。

这些数据可以帮助科研人员了解蛋白质在生理和病理过程中的功能和作用。

3. 技术优势组织芯片免疫组化技术具有以下几个优势:3.1 高通量组织芯片可以在一个芯片上同时分析多个组织样本,大大提高了实验效率。

与传统的手工处理相比,组织芯片技术能够快速、准确地进行大规模样本分析。

3.2 空间信息通过在芯片上布置不同类型的组织切片,并记录其位置信息,可以获得蛋白质在组织中的空间分布情况。

这对于研究组织结构和功能具有重要意义。

3.3 样本节省由于组织芯片上可以同时进行多个实验,所需样本量相对较小。

这对于稀缺样本或有限的临床样本非常有益。

3.4 数据可靠性由于组织芯片上的实验条件一致,数据的可靠性更高。

这有助于减少实验误差,并提高结果的可重复性。

4. 应用领域组织芯片免疫组化技术在许多领域中都得到了广泛应用:4.1 癌症研究通过分析肿瘤标本中特定蛋白质的表达情况,可以帮助了解肿瘤发生和发展的机制,并为个体化治疗提供依据。

现成组织芯片进行免疫组化的方法学

现成组织芯片进行免疫组化的方法学

现成组织芯片进行免疫组化的方法学免疫组化技术是生物学和医学领域中一种重要的实验方法,它通过特异性抗原与抗体的结合反应,实现对细胞或组织中特定蛋白质的定位和定性分析。

组织芯片(Tissue microarray, TMA)作为高通量分析工具,可以同时对大量样本进行免疫组化研究。

本文将详细介绍使用现成组织芯片进行免疫组化实验的方法学。

一、实验材料与试剂1.现成组织芯片:包含多种不同类型的组织样本。

2.抗体:一抗、二抗及HRP标记的三抗。

3.DAB显色剂:3,3"-二氨基联苯胺(Diaminobenzidine)。

4.封闭血清:与一抗来源相同的物种血清。

5.0.01M PBS缓冲液(pH 7.4)。

6.0.01M柠檬酸钠抗原修复液(pH 6.0)。

7.脱水剂、透明剂、封片剂。

二、实验步骤1.组织芯片预处理:将组织芯片放入柠檬酸钠抗原修复液中,微波炉加热至沸腾,持续10-15分钟,自然冷却至室温。

2.封闭:使用封闭血清对组织芯片进行封闭,37℃孵育30分钟。

3.一抗孵育:甩掉封闭血清,滴加一抗,37℃孵育1-2小时或4℃过夜。

4.二抗孵育:甩掉一抗,滴加二抗,37℃孵育30分钟。

5.三抗孵育:甩掉二抗,滴加HRP标记的三抗,37℃孵育30分钟。

6.显色:甩掉三抗,滴加DAB显色剂,室温显色3-10分钟,自来水冲洗终止显色。

7.复染:使用苏木素-伊红(H&E)复染,脱水、透明、封片。

三、结果观察与分析1.显微镜下观察组织芯片各样本的免疫组化染色情况。

2.分析阳性细胞、阳性信号强度以及阴性对照等,判断抗体与抗原的结合情况。

四、注意事项1.组织芯片在实验过程中需保持湿润,避免干燥。

2.抗体稀释比例、孵育时间及温度需根据实验条件进行优化。

3.显色时间需严格控制,避免过度显色影响观察。

4.实验过程中应设立阴性对照和阳性对照,以保证实验结果的可靠性。

总结:使用现成组织芯片进行免疫组化实验,可以在短时间内对大量样本进行研究,提高实验效率。

免疫组化的室内质控

免疫组化的室内质控

免疫组化的室内质控
张卫琴
【期刊名称】《现代医药卫生》
【年(卷),期】2014(30)7
【摘要】在临床病理诊断中,免疫组化技术是一种很重要的手段,随着免疫组化
技术的改进、质控的完善,对于肿瘤的诊断及分类、判断预后产生了巨大影响。

免疫组化操作步骤繁多,不同的标本处理方法、不同的修复方法、修复液不同的pH 值、不同的检测系统,以及技术人员的操作水平等均会不同程度影响染色结果,导致结果的差异。

对于免疫组化的室内质控(internal quality control,IQC),目前一些实验室未能规范实施,引起染色结果参差不齐,导致病理医生的误诊,因此,每个实验室只有实现IQC,才能保证结果的可靠性,才能充分发挥该技术在诊断
肿瘤、指导治疗、判断预后中的作用[1]。

【总页数】4页(P1022-1025)
【作者】张卫琴
【作者单位】安徽省妇幼保健院病理科,安徽合肥230031
【正文语种】中文
【相关文献】
1."套餐式"组织芯片法在免疫组化室内质控中的应用 [J], 赵丽平;苏宏昌
2.利用自动免疫组化染色机进行免疫组化质控分析 [J], 郭海燕
3.组织悬液HER2阳性标本在免疫组化室内质控中作为阳性对照的作用和价值 [J], 吴景;何杰
4.组织悬液HER2阳性标本在免疫组化室内质控中作为阳性对照的作用和价值 [J], 吴景; 何杰
5.组织悬液HER-2阳性标本在免疫组化室内质控中作为阳性对照的作用和价值 [J], 罗胜;宋彦锟
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免疫组化技术的标准化质控管理

免疫组化技术的标准化质控管理

3、对ICU护理流程进行优化和改进,提高护理工作效率和质量; 4、定期向上级管理部门汇报ICU护理质控管理工作情况,提出改进意见和建议。
三、质控自查小组在提高护理质 量中的优势
1、数据统计与风险评估质控自查小组通过数据统计和风险评估,可以更加客 观地了解ICU护理工作中存在的问题和不足之处。此外,通过对不同时期数据 的对比分析,可以动态地评估ICU护理质量的变化情况,为后续的改进工作提 供依据。
2、质量督导与实时监控质控自查小组通过对ICU护理工作的日常督导和实时监 控,可以及时发现并纠正护理工作中的不规范行为和质量问题。同时,通过定 期组织内部成员的交流和分享,促进团队成员之间的相互学习和共同进步。
3、预防与改进质控自查小组不仅问题的解决,还注重问题的预防和改进。通 过对ICU护理工作的全面排查和分析,找出潜在的问题和风险点,采取针对性 的改进措施,降低问题发生的概率,提高护理工作的稳定性和可靠性。
标准化质控管理的重要性
免疫组化技术的标准化质控管理是其应用的关键。首先,标准化质控管理能够 确保实验结果的可靠性。免疫组化技术的结果受抗原-抗体反应的特异性、敏 感性以及实验操作中的误差等因素影响。通过实施标准化质控管理,可以最大 限度地降低这些误差,提高实验结果的可靠性。其次,标准化质控管理有助于 提高研究或临床实践的可比性。通过采用统一的质控标准,不同的研究或实践 结果可以进行直接比较,有利于推动学术交流和医学发展。
3、实验操作规范:实验操作过程中的细节决定了免疫组化技术的质量。因此, 应遵循标准的实验操作流程,包括样本的制备、加样、孵育、洗涤、显色等步 骤,确保每一步操作的准确性和一致性。
实验后质控:实验后质控主要涉及数据分析与处理。首先,应使用具有代表性 的图像分析软件对实验结果进行定量分析,以获取客观、可比的数据。其次, 对数据进行处理和解析时,应结合实际研究或临床实践需求,对数据进行分析 与评估,为后续的研究或临床实践提供有价值的参考。

组织芯片技术的应用方式

组织芯片技术的应用方式

组织芯片技术的应用方式常中飞;胡秀敏【期刊名称】《医学理论与实践》【年(卷),期】2006(019)002【摘要】组织芯片(tissue chip)又称组织微阵列(tissue microarray,TMA),由Kononen等于1998年首先建立并报道,是将数十至上千个小组织整齐有序地排列在一张载玻片上而形成的缩微组织切片。

它具有高效或高通量特点,并有省时、省力、节约经费和试验结果可比性强的优点,能应用于HE常规染色、免疫组化、原位杂交、基因芯片等各种技术,有广阔的应用前景。

由于组织芯片技术是一项新技术,其应用价值和应用范围正处于深入探索阶段。

本文初步探讨了目前组织芯片技术的主要应用方式。

【总页数】3页(P156-158)【作者】常中飞;胡秀敏【作者单位】浙江中医学院,浙江省,杭州市,310053;浙江中医学院,浙江省,杭州市,310053【正文语种】中文【中图分类】R318.04【相关文献】1.组织芯片技术在消化道肿瘤研究中的应用 [J], 罗成贵2.结合组织芯片技术的人体胃管状腺癌组织太赫兹光谱检测 [J], ZHANGYi;HUANG Ping-jie;GE Wei-ting;CAO Yu-qi;HOU Di-bo;ZHANG Guang-xin 3.应用组织芯片技术探讨乳腺癌TIMPs表达与激素受体及临床病理的关系 [J], 张艳胜;胡赟4.应用组织芯片技术对PRDX3与α-SMA的相关性研究 [J], 陈远洋;王志维5.基于组织芯片技术分析间皮素在人胆囊癌组织中的细胞定位及意义 [J], 倪庆强;高恒军;杨发基;刘方峰;朱化强;李洪光;周旭;常宏;卢俊因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

组织芯片免疫组化

组织芯片免疫组化

组织芯片免疫组化芯片免疫组化是一种生物学研究方法,用于定位来自大量外源样品中表达程度最高的基因或分子。

它是基于芯片技术来检测某些特定蛋白质或基因片段的表达水平。

芯片免疫组化是一种经常用于实现定制免疫基因组技术的有效途径。

一、特点1、芯片免疫组化运用的芯片技术通常可以用来同时对多达数千个不同的蛋白质或基因片段进行检测和分析;2、芯片免疫组化能够实现高通量的基因表达分析;3、它可以把同一个样本内的不同基因变异剂量化,具有灵敏度高和转录水平精细分辨率等优点;4、此外,芯片免疫组化也非常简便,大大简化了实验步骤。

二、技术步骤1、样品处理:将标本进行细胞培养、悬浮、分离等处理,并调制成符合要求的样品;2、反应混合:混合步骤实现了芯片检测过程,主要负责样品与基因组染料和素材之间的特异性结合;3、芯片检测:将样品放置到芯片上,用高光谱分析仪或其他分析仪器进行测试;4、信号分析:利用芯片检测产生的数据来计算芯片上不同基因特异性表达量上升和下降的值;5、功能分析:结合其他生物信息进行功能分析,以完整理解基因的表达。

三、应用1、芯片免疫组化的主要应用是实现多组分同步免疫组化技术;2、用于定位来自外源样本的表达的蛋白质或分子;3、用于定量检测和精确剂量化指定的疾病相关的介质;4、用于分析某种疾病时基因表达的特点,为实现对这些疾病的准确诊断和治疗提供有力支持。

四、结论芯片免疫组化是一种重要的生物学技术,其特点是灵敏度高、操作简单、能够同时检测数千个不同蛋白质和基因片段,在定位特定分子及分析表达水平方面具有显著优势;主要应用于实现多组分同步免疫组化,定量检测疾病相关的介质,分析疾病时基因表达的特点等等,为相关疾病的准确诊断和治疗提供了有力支持。

组织芯片做免疫组化

组织芯片做免疫组化

组织芯片做免疫组化
免疫组化技术是一种可用于研究细胞分子生物学、分子病理学等领域的重要方法。

在免疫组化实验中,常常使用抗体来特异性地识别所研究的分子,然后通过染色等手段来检测其存在和定位。

传统的免疫组化实验需要在载玻片上制备切片后进行,但这种方法存在样本数量有限、实验周期长、手工操作难度大等问题。

近年来,随着微纳技术的快速发展,以及对高通量和高灵敏度分析的需求,研究人员开始尝试将芯片技术应用于免疫组化实验中。

组织芯片是一种将组织切片等化处理后制成的高通量检测平台,可以在同一芯片上同时检测多个组织样本,具有样本处理量大、实验周期短、自动化程度高等优点。

组织芯片技术主要分为两种类型:DNA芯片和蛋白芯片。

其中,蛋白芯片主要应用于免疫组化实验中。

在制备组织芯片时,首先需要从组织样本中制备出蛋白质样本,再将其固定在芯片上。

然后,使用抗体进行特异性检测,最后通过染色等手段来检测免疫信号。

组织芯片技术的应用可以大大提高免疫组化实验的效率和准确性,有望在癌症诊断、药物筛选、分子病理学研究等领域发挥重要作用。

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免疫组化组织芯片制作及质量控制

免疫组化组织芯片制作及质量控制

免疫组化组织芯片制作及质量控制刘红伟【期刊名称】《现代医学与健康研究》【年(卷),期】2017(000)002【摘要】目的探究免疫组化组织芯片在质量控制中的应用。

方法根据测试抗体的不同选择23例中性甲醛固定、石蜡包埋的组织标本,采集直径2mm的组织芯,常规切片,制作组织芯片。

将制成的组织芯片发放给参加本次研究免疫组化质量控制的52家单位进行PR、EMA、CD20的免疫组化染色。

结果免疫组化染色后,共收到52家单位寄回的156张组织芯片,载玻片上组织芯排列整齐,无移位、脱失现象。

显微镜下观察均为有效组织,可代表原组织;PR染色优良率为59.62%,EMA染色优良率为80.77%,CD20染色优良率为78.85%,免疫组化染色质量较好,优良率较高,其中EMA染色结果最好,PR染色结果稳定性最差。

结论组织芯片信息含量大、可比性强、省事省力,极大方便了免疫组化质量控制。

目前免疫组化染色过程中存在的主要问题是抗原修复不足,需进一步改进。

【总页数】2页(P10-11)【作者】刘红伟【作者单位】郑州人民医院病理科【正文语种】中文【中图分类】R392-33【相关文献】1.免疫组化病理技术质量控制管理在制作病理组织切片中的应用效果 [J], 李楣2.高通量组织芯片制作及其免疫组化结果可靠性研究 [J], 陈骏;吴鸿雁;孟凡青;孙喜太;丁义涛3.组织芯片和常规免疫组化法检测软组织肉瘤标志物的比较 [J], 张学军;丛琦;郝彦勇;王志生;王帅;闫光志4.石蜡包埋组织芯片制作的质量控制研究 [J], 陈莹;邓昊;周红艳;官静;刘丽江5.组织芯片简易制作方法及免疫组化有效性分析 [J], 漆楚波;朱润庆;夏和顺;王明伟因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

组织芯片技术的应用及质量控制

组织芯片技术的应用及质量控制
不仅仅是一种重要 的研究手段 , 还被广泛 地应 用到临床医学 的实践 中 , 成为推测肿瘤患者的预后及分子靶 向治疗标记物
的重要依据 。此外 , 组织芯 片技术作 为一种 技术 工具 , 还被
应用到临床 医学 实验 室诊 断的内部质量控制 、 感染性疾病 的 确定等方 面 j 。
指标 : 保存是否完好 , 织厚度 是否 足够 (>0 5m , 变 组 . m) 病 是否典型 、 明确及集 中、 无或少有坏死组织等 。
数百个小组织提取后 , 整齐地排列在一起 。按照组织芯数 目 的多少可分 为低 密度 芯 片 (< 0 20点) 中制是提 高质量 的关键所在 。 合 关键词 : 组织芯片技 术 ; 石蜡包埋 ; 质量 控制
中图分类号 : 3— R7 3 文献标志码 : A
为近 1 0年来新兴 的一项重要 的生物芯片技术 , 是将数 十个 、 数百个小 的组织样本 整齐地排 列在载玻 片上而 形成 的微缩 阵列组织片 , 通过各种染色 , 包括 常规的 H E染 色 、 组织 化学 染色 、 免疫组化染色 、 原位杂交显色等 , 在组织 切片上真正实
现 了高 通 量 获 取 基 于 形 态 学 的基 因组 学 和 蛋 白 组 学 的 多 种
分 子 形 态 学 进 入 一 个 全 新 的时 期 。 1 构 建 芯 片 的 目 的
信 号通路研究等 , 胃癌组织芯片 、 如 乳腺癌组织芯片等 ’ 。 组 织芯片的构建应按 照研究 目的不 同和 临床应 用 的要 求 进行 构建 。因此 , 在构建组 织芯片 之前 , 需要 有 明确的 目
自 K nnn等 首 次 提 出组 织 芯 片 的概 念 以来 , 织 芯 o oe 组
片技术便得到迅速发展 , 应用 的领域越来 越广泛 , 仅在人 不 类 基因组的研究 、 临床病 理 的研 究与诊 断 、 人类 疾病 的基础 研究、 药物 的筛选 、 基因的寻找 、 癌 肿瘤发生发展及预后相关 的生物分子标记物的确定 , 且在整个生命科 学的基础与应 用研究领域 也得到广泛 的应用 , 解决 了许多疑难 问题 , 使

免疫组织化学室内质控对照组织的新型保存设置方法

免疫组织化学室内质控对照组织的新型保存设置方法

免疫组织化学室内质控对照组织的新型保存设置方法白思施;王璐【期刊名称】《实用医技杂志》【年(卷),期】2024(31)4【摘要】目的研究一种新型免疫组织化学阳性对照组织保存和设置方法,将目前在用的免疫组织化学阳性对照设置方法化繁为简。

方法以胸腔积液为例,将新鲜胸腔积液离心固定破除红细胞,制成细胞悬液,然后将细胞悬液进行脱水处理,保存在按比例混合的石蜡和液体石蜡制成的膏状物中,灌注在唇膏管中,旋出膏体,涂抹在黏附玻片上,膏体中保存的细胞即可被黏附于玻片上,进行后续的免疫组织化学染色。

结果显微镜下观察涂抹的细胞分布均匀,细胞密度适宜,细胞形态完整,在苏木精-伊红(HE)染色中,细胞核与细胞质染色对比清晰,细胞核着苏木精的紫色,细胞质着伊红的淡粉红色,组织细胞,淋巴细胞,间皮细胞等清晰可辨。

在免疫组织化学CD68染色中,组织细胞细胞质棕黄色着色。

在免疫组织化学Ki-67染色中,增殖期的细胞细胞核棕黄色着色。

免疫组织化学染色结果表达清晰,定位准确。

结论免疫组织化学阳性组织对照棒涂抹的阳性对照细胞可以代替蜡块切成蜡片制备的阳性对照,免疫组织化学阳性组织对照棒可以应用于免疫组织化学制片过程中阳性对照设置这一步骤中。

【总页数】5页(P283-286)【作者】白思施;王璐【作者单位】浙江大学医学院附属第四医院病理科【正文语种】中文【中图分类】R73【相关文献】1.两种方法设置室内质控限值时室内质控的结果分析2.ELISA法检测HIV抗体弱阳性外部对照室内质控血清的制备和保存3.组织悬液HER2阳性标本在免疫组化室内质控中作为阳性对照的作用和价值4.组织悬液HER-2阳性标本在免疫组化室内质控中作为阳性对照的作用和价值因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

组织芯片 免疫组化

组织芯片 免疫组化

组织芯片免疫组化组织芯片什么是组织芯片?组织芯片(tissue microarray,TMA)是一种高通量生物技术,它将数千个组织样本压缩到一块玻璃基板上。

这种技术可以在单个玻璃基板上同时测试多个患者的组织样本,从而提高了实验效率和减少了实验成本。

组织芯片的制备过程1. 选择合适的组织标本:选择具有代表性的标本,并且要保证标本质量良好。

2. 制作蜡块:将选择好的组织标本放入蜡块中,用刀片切割成薄片,并在玻璃基板上排列好。

3. 制作切片:将制作好的蜡块放入切片机中,制作出厚度为4-5μm的切片。

4. 制作TMA:将制作好的切片取出并放入TMA针头中,再将针头插入到玻璃基板上预先打好的小孔中。

这样就可以制作出具有多个不同患者样品的TMA。

5. 烘干和固定:将制作好的TMA进行烘干并进行固定处理,使其可以长期保存。

组织芯片的应用1. 疾病诊断:组织芯片可以同时测试多个患者的组织样本,从而可以更加准确地进行疾病诊断。

2. 药物筛选:组织芯片可以用于药物筛选,从而可以更加快速和准确地找到适合的治疗方案。

3. 分子生物学研究:组织芯片可以用于分子生物学研究,例如蛋白质表达、基因表达等方面的研究。

免疫组化什么是免疫组化?免疫组化是一种利用抗体与特定抗原结合来检测蛋白质在细胞或组织中分布和表达情况的技术。

它是一种广泛应用于生命科学领域的技术,尤其在肿瘤学、免疫学、神经科学等领域得到了广泛应用。

免疫组化的步骤1. 取样品:取需要检测的样品,例如肿瘤标本或细胞培养物等。

2. 制备切片:将取得的样品制备成切片,厚度一般为4-5μm。

3. 脱蜡和抗原修复:将制备好的切片进行脱蜡处理,并进行抗原修复,使得蛋白质更容易被抗体识别。

4. 抗体处理:将选择好的一种或多种抗体加入到样品中,让其与目标分子结合。

5. 二级抗体处理:如果需要检测的分子是小分子或者是磷酸化等修饰状态,则需要使用特异性二级抗体进行检测。

6. 显色和染色:将样品进行显色或者染色,并在显微镜下观察结果。

组织芯片技术在临床病理研究中的运用

组织芯片技术在临床病理研究中的运用

组织芯片技术在临床病理研究中的运用【摘要】目的:传统的分子病理技术的低效率已难以满足临床肿瘤学上的诊断,而能进行大规模组织研究的方面就显得极为重要。

方法:收集大肠癌标本87例(淋巴结转移45例),腺瘤26例,癌手术断缘正常组织34例,共147例。

所有诊断及分级根据2003年大肠肿瘤WHO组织学分类标准作出。

应用组织芯片技术,将147例标本自制成组织芯片。

免疫组织化学技术检测大肠癌、腺瘤及正常组织中LIMK1和u PAR的表达。

结果:5×10芯片3张,组织位点形态可观测率在97.21%。

HE染色均匀、无脱片、异位和皱折;免疫组化染色阳性定位清楚,背景干净。

结论:LIMK1、u PAR 表达与大肠癌的分化程度、肿瘤大小、临床分期、淋巴结转移密切相关。

【关键词】组织芯片;免疫组织化学;大肠癌Application of Tissue Chip Technology in Clinical Pathology ResearchABSTRACT:Objective:The inefficiency of traditional molecular pathology techniques has been difficult to meet the needs of clinical oncology diagnosis,and large-scale tissue research is extremely important. Methods:87 cases of colorectal cancer(45 cases of lymph node metastasis),26 cases of adenoma,34 cases of normal surgical margin tissue,a total of 147 cases. All diagnoses and grades were made according to WHO histological classification criteria for colorectal tumors in 2003. Using tissue chip technology,147 specimens were made into tissue microarrays. Immunohistochemical method was used to detect the expression of LIMK1 and u PARin colorectal cancer,adenoma and normal tissues. Results:3 of 5 x 10 chips,and the observational rate of tissue locus was 97.21%. HE staining was uniform,no exfoliation,ectopic and wrinkle;immunohistochemical staining positioning clear,clean background. Conclusion:The expression of LIMK1 and u PAR is closely related to the differentiation degree,tumor size,clinical stage and lymph node metastasis of colorectal cancer.Key words:tissue microarray;immunohistochemistry;colorectal cancer随着人类在分子生物水平研究的进一步深入,基因芯片、蛋白芯片的广泛应用,大盘新的基因和蛋白被不断的发展,在组织学水平研究它们的生物特殊和功能就显得尤为重要,传统的分子病理技术的低效率已难以满足临床肿瘤学上的诊断,,本文就近年来组织芯片技术在临床病理研究中的应用作以下综述[1]。

免疫组化病理技术质量控制管理的应用效果观察

免疫组化病理技术质量控制管理的应用效果观察

免疫组化病理技术质量控制管理的应用效果观察林雪松【期刊名称】《《中国医药指南》》【年(卷),期】2019(017)029【总页数】2页(P101-102)【关键词】免疫组化病理技术; 质量控制; 制片【作者】林雪松【作者单位】辽宁省锦州市中心医院放疗科辽宁锦州121001【正文语种】中文【中图分类】R446.6免疫组化病理技术在医院检验科中极其常见,其是对病理组织进行检查的一项重要技术。

其能够为临床诊断以及治疗提供准确的参考依据,对提高临床诊断的准确率以及临床治疗效果等均有着非常重要的意义[1]。

本次选取了160例2018年2月至2019年1月在我院治疗的患者,取其胃肠组织病理化分析的样本,对其中80例患者的病理组织样本采用质量控制管理后制作病理切片,对免疫组化病理技术质量控制中存在的问题,并提出相应的对策。

具体如下。

1 资料与方法1.1 一般资料:选取160例2018年2月至2019年1月在我院治疗的患者,取其胃肠组织病理化分析的样本,本次选取的所有病理组织样本均来自于我院病理活检室,按照制片质量控制的情况将其分成了观察组和对照组,每组均有病理组织样本80份。

对两组病理组织的状态进行比较后发现其没有明显差异(P>0.05),有可比性。

1.2 试剂及仪器:本次研究中所使用的甲醛、苏木精、二甲苯、无水乙醇、硫酸铝、碘酸钠、石蜡以及与本次免疫组化试验相关的试剂均为市场上常见的试剂,本次研究的仪器包括转轮式组织切片机【型号:徕卡RM2235】、全自动组织脱水机、生物组织摊烤片机、包埋机、干燥箱【生产企业:天津市泰斯特仪器生产公司;型号:202-1AB型恒温干燥箱】、图像分析仪【型号:日本OLYMPUSBX41+Imagepro plus】等。

1.3 方法:对照组给对照组组织样本采用常规方法制作病理组织切片。

具体如下:①固定标本。

在组织标本采集后的30 min内将其放置在固定液中保存,再取体积是此固定液体积4~10倍的浓度为10%的甲醛溶液,将组织标本放入其中固定8~24 h。

手工制作组织芯片的方法

手工制作组织芯片的方法

手工制作组织芯片的方法朱伟峰;彭凤英;翁秀琴;蔡晓雯【摘要】目的介绍一种手工制作组织芯片的方法.方法收集福建省肿瘤医院病理科60例肺癌患者病例制作组织标本,将标本常规处理后利用不同熔点的蜡,用包埋盒和手工芯片仪制作组织芯片,用锋利的一次性刀片做3μm厚的连续切片,评价组织芯片组织形态学情况.结果制备的组织芯片各个组织为所要组织形态学区域,蜡块完整,组织排列整齐,蜡块未见开裂及组织丢失,组织与蜡块结合紧密,组织芯片能被完整切出.结论利用不同熔点的蜡进行组织芯片手工制作,此方法简便易行,无需其他费用,切片染色效果满意,适用性广泛.【期刊名称】《中国卫生标准管理》【年(卷),期】2019(010)001【总页数】2页(P127-128)【关键词】组织芯片;手工制作;简易方法;蜡块;病理;标本【作者】朱伟峰;彭凤英;翁秀琴;蔡晓雯【作者单位】福建省肿瘤医院病理科,福建福州350014;福建省肿瘤医院病理科,福建福州350014;福建省肿瘤医院病理科,福建福州350014;福建省肿瘤医院病理科,福建福州350014【正文语种】中文【中图分类】R361组织芯片(Tissue Chips)是把数十个至数百个患者的组织整齐有序的排列到同一个蜡块上,进而制成组织切片用于HE、组化染色、DNA和RNA检测分析等[1]。

1998年Kononen等首次提出组织芯片的概念并证实组织芯片的实用价值[2]。

从此组织芯片得到飞速发展,它最大的作用是将基因、蛋白水平的研究与组织形态学相结合,应用同一实验条件同时研究大量不同患者组织样本(高通量),减少实验误差,使实验结果更可靠,极大地提高实验效率,并节约实验成本和人力[3-5]。

但组织芯片技术一般采用进口的组织微阵列仪或组织芯片制作仪,价格高,不适于基层[6]。

本文通过临床经验及设计,介绍一种建议组织芯片制作方法,操作简单,效果满意,适用性广泛,以供临床参考。

1 材料与方法1.1 标本来源收集2015年12月—2017年12月福建省肿瘤医院病理科60例肺癌患者病例制作组织标本。

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3 讨论
“套餐式”芯片,使得染色结果更加可靠,并且组织芯片 规整排列,方便阅片和查对; 组织芯片的面积小,与被测组织 在同一张载玻片上,染色条件相同,且不影响被测组织的染 色,因而更具有可比性,同时节约了试剂的使用量,与全自动 免疫组化仪的控制效果相当; “套餐式”组织芯片制作过程 简单,花费时间少,与多组织芯片阳性对照片[2]相比,其制作 无繁琐的组织处理过程,且大大节约了材料和准备时间; 当 被测组织和弱 阳 性 的 对 照 点 均 出 现 阴 性 时,应 重 复 染 色 过 程,避免假阴性结果的产生。
免疫组化染色是病理工作中不可或缺的项目,要获得一 致的、准确的免疫组化结果,室内质控尤为重要。要做到病 理质控的标准化,高端产品全自动免疫组化仪完全可以达到 要求,但因其价格昂贵,在短缺资金的医院存在困难。我们 在工作过程中摸索出了以“套餐式”组织芯片法[1]作为室内 质控的标准化方法,便于室内质控,现介绍如下。
2 结果
2. 1 芯片效果 我们观察了几十种抗体染色结果,未发现 阳性对照芯片中抗原丢失现象。每张芯片中至少能观察到
收稿日期: 2011 - 11 - 17 作者单位: 山西省人民医院病理科,太原 030012 作者简介: 赵丽平,女,主管技师。E-mail: zhaolipingdede@ 163. com
[3] Chan J K,Wang C S,Ku W T,Kwan M Y. Reflection on the use of controls in immunohistochemistry and proposal for application of a multitissue spring-roll control block[J]. Ann Diagn Pathol, 2001,5( 5) : 320.
1 材料与方法
1. 1 “套餐式”组织芯片的设计 选出我科免疫组化结果 为阳性的切片,找出原免疫切片和对应蜡块,在显微镜下找 出阳性部位并标记。阳性部位着色应有强弱,从标记出来的 阳性部位在蜡块上找出相应组织位置,用 0. 2 mm 的空心针 取出组织,放入空白芯片蜡块中。把相关联的抗体作为“套 餐式”芯片,通常四种抗体为一套餐单位,如标记乳腺癌的抗 体 ER、PR、c-erb-B2、E-cad 为一套 ( 或一组) ,组织芯片中 4 块小组织分别代表 4 种抗体等。按照我科常规的鉴别诊断, 把它分别做成“套餐式”芯片,这样其中一个为阳性对照,其 余为阴性对照。把制好的蜡块放入烤箱,烘烤至软,取出后 稍加揉捏,反复此过程做成“套餐式”芯片蜡块,再把它包埋 于包埋盒中,然后将组织芯片蜡块连续切片,2 ~ 3 μm 厚,裱 贴于经 APES 丙酮液处理过的载玻片的一端,然后储藏于干 燥的切片盒内备用。我 科 现 除 去 有 内 对 照 的 抗 体 无“套 餐 式”芯片以外,已有几十种抗体都做成相应的“套餐式”组织 芯片便于室内质控。 1. 2 免疫组化染色 当常规病例做免疫组化染色时,从备 用盒中取出 1 张相应的“套餐式”芯片,将常规病例组织切 片后,裱在阳性对照芯片旁,同时进行烤片、脱蜡、高压抗原 修复以及非生物素两步法免疫组化染色。
苏宏昌,男,主管技师,通讯作者。E-mail: shc2006@ sohu. com
一个阳性点位,其余点位为阴性对照,使旁边的被测组织有 明确的对照,所用抗体的“套餐式”芯片阳性信号均清楚,而 且强弱不同。 2. 2 优点 组织芯片整齐排列,阅片者很容易看到阳性对 照芯片,也不影响被测组织的染色。采用不同的抗体染色, 选择不同的“套餐式”芯片作对照,确保染色结果的可靠性。 同时减少重复工作,节省材料,给病理医师提供了准确而可 靠的切片,也给患者争取更多治疗的时间。
按传统方法阳性对照组织与待测组织不在同一张载玻 片上,试 验 条 件 未 必 完 全 一 样。Battifora 等[1] 报 道 了 一 种 “香肠”组织包埋方法,费时、费力且耗材; 随后经过多次改 良,也制成多 组 织 阳 性 对 照 片[2],用 于 免 疫 组 化 染 色[3],但 其面积大,造成抗体浪费。因此,选择以“套餐式”组织芯片 法作为室内质控的标准化方法,用于每张免疫组化切片的染 色过程控制,因芯片面积小、组织少与被测组织在同一张载 玻片上,界限清 楚,不 影 响 被 测 组 织 的 染 色,使 观 察 更 为 方 便,染色结果更为可靠。
·106·
临床与实验病理学杂志 J Clin Exp Pathol 2012 Jan; 28( 1)
“套餐式”组 织 芯 片 法 在 免 疫 组 化 室 内 质 控 中 的应用
赵丽平,苏宏昌
关键词: 室内质控; 免疫组化; 套餐式; 组织芯片 中图分类号: R 446. 8 文献标识码: B 文章编号: 1001 - 7399( 2012) 01 - 0106 - 01
总之,“套餐式”组织芯片法作为室内质பைடு நூலகம்的新方法,科 学简便易行,值得应用与推广。
参考文献:
[1] 王翠芝,周小鸽,黄受方,张彦宁. 组织芯片在免疫组化染色阳 性对照中的应用[J]. 临床与实验医学杂志,2006,22( 4) : 481 - 4.
[2] Joshi A,Varma M,Wozniak S,Jasani B. Potential unreliability of normal tissue as positive control in diagnostic immunohistochemistry of poorly differentiated carcinoma[J]. Histopathology,2010, 57( 5) : 760 - 2.
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