多氯联苯污染土壤的微生物修复
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多氯联苯污染土壤的微生物修复
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资料查找：张三 内容选定：李四 PPT 制作：王二 PPT 讲解：王小二
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1、多氯联苯的概述 2、多氯联苯污染土壤的现状 3、多氯联苯污染土壤的微生物修复 4、土壤样品分析 5、实例透析 6、参考文献
一、多氯联苯的概述
1、定义：多氯联苯，PCBs，别名：氯化联
五、实例
--多氯联苯污染土壤好氧降解菌群的分离与鉴定
试验材料：
供试土壤 : 采自长江三角洲某典型PCBs 污染农田的表层土壤
处理方法：捡出植物根系、石砾等残留物， 自然风干，过2mm筛，调节器土壤含水 量为田间持水量的55%左右，以供盆栽试 验用。
供试植物: 紫云英，豆科黄芪属，冬季绿 肥植物。
1.1.3 供试菌株及菌剂制备
亚急性和慢性毒性
致癌性
致突变性
二、多氯联苯污染土壤的现状
多氯联苯，是一类人工合成的环境异 源有机物。近年来，在我国经济发达的长 江、珠江三角洲某些典型地区调查发现， 农田土壤中多氯联苯组分高达数百个 ppb， 其污染面积多达数千亩之多（藤应等， 2008）。由于 PCBs 在土壤中不断累积 的趋势，严重危害着土壤的生产和生态功 能、农产品质量安全和人类健康（Ren et al.，2007; Wu et al.，2011）。修复土壤 PCBs 污染已成为人们普遍关注的问题， 迫切需要寻找一种廉价、永久高效而且环 境友好的修复方法。
结论
(1）紫云英作为绿肥植物，对PCBs表现出较强的耐受性， 并且对污染土壤中PCBs的去处起到明显作用，具有较好的 修复潜力。 （2）根瘤菌对紫云英修复PCBs污染土壤具有明显的强化 作用，而且改善了紫云英根际土壤微生物群落结构和功能 多样性。可见，紫云英-根瘤菌共生体系对修复PCBs污染 土壤具有良好的应用前景。今后有待进一步从分子水平上 探讨这一共生体系对土壤中PCBs降解的机制，并验证器 田间修复效果，为研发PCBs污染土壤共生修复技术提供 科学依据。
代物、色谱分析内标物、土壤样品
四、土壤样品分析
①的转漏5入涤酸②后酸层液蒸乙胶0入 斗 上 三 调Km静 相 ， 过 发 烷 柱Ol提预中述次节，净止无弃无器洗，H/取先；分，溶沸化分色去水浓涤并乙：加再液乙液腾：层；水硫缩梨用醇称p有向漏醇水向，加相酸至形正溶H取碱斗洗1浴提弃入，钠瓶乙2液为0m5解中涤0回取去再柱数烷15微lgm0左0土残，液流液硫重脱次洗0酸ml正m右l样渣并也碱中酸复水，脱性，l乙，纯于中 将 转解加相 用 ， 定 、至沸烷转化锥加碱 入1以， 水 容 梨入中腾h和入水形入解 分，梨再 洗 至 形2性水50刻，瓶残 液10将形重 瓶25m后浴m0次m度振浓中渣 漏m碱烧复 收，回ol；；管动ll硫，用 斗/解瓶用 集纯加流L将讲中2的酸加中2上收硫 ；化m入碱0正，浓乙，i入；m集酸 再清水1n解乙以缩0后l醇振1用乙；洗 用液的μ上m烷少液静g溶动1醇也用涤 旋分清/o+提L量过置l液21十/洗旋到 转转液液mL硫取正硅分转硫 蒸in 氯水发加联 相入器苯再内浓2以缩标m5至物l0。m2六振ml正氯l摇左乙苯分右烷。液，重漏转复斗入萃1刻取0m度2i次n管后，中静正，置乙定分烷容层提至，取2对0合ml， 并于分液漏斗中待进一步净化处理。
苯，是一种环境内分泌干扰物,在自然环境中 难以降解,能够通过水、土壤、空气、生物等 载体转移,在人或动物体内积蓄,对生体具有致 畴、致癌、致突变特性,多氯联苯属于致癌物 质，容易累积在脂肪组织，造成脑部、皮肤 及内脏的疾病，并影响神经、生殖及免疫系 统。
2、结构式
3、理化性质：
• 外观与性状：流动的油状液体或白色结晶固体或非结 晶性树脂。
• 熔点(℃)：PCB3：-19～-15℃；PCB4：-8～-5℃； PCB5：8～12℃； PCB6：29～33℃。
4、用途：PCB用途很广,可作绝缘油、热载体和润滑油等,
还可作为许多种工业产品（如各种树脂、橡胶、结合剂、 涂料、复写纸、陶釉、防火剂、农药延效剂、染料分散剂） 的添加剂。
5、毒性
急性毒性
供试菌株：根瘤菌 由本课题组从长江三角洲某典型PCBs污染 农田的紫云英植物根瘤菌中经驯化富集后分 离筛选得到。
菌剂制备:现将该菌株接种与YMA固体平 板培养基上28°C活化，然后接入以PCB77 （3,3＇， 4,4＇-四氯联苯，10mg/L）为唯 一碳源的基础盐业培养基中扩大培养，之后 与灭菌泥炭（过20目尼龙筛）混合，制成固 体菌剂（2*109cfu/g菌剂）
1.2 实验方案及实施
本研究设计4个处理： 第一：不种植物，仅加灭活的根瘤菌菌剂作为对照（以 CK表示）； 第二：种植物，加灭活的根瘤菌菌剂（P）； 第三:不种植物，仅加活的根瘤菌菌剂（R）； 第四：种植物，加活的根瘤菌菌剂（PR），
每个处理4次重复，随机区组排列。在同一条件下进 行一系列的培养，然后分析土壤性质，对其土壤微生物 生物量及群落功能多样性测定和计算多氯联苯的去除率 及植物提取修复效率，最后数据分析得到结果
gna[d[[8l9noohibt5ho]]aobmaieI]ypbGe[n[tifgprd23Shercoetwhooir]]arrenua孟hb0euecbTnamotueaxntrlaieiyd-cysr庆ccuykaeKclaiaebtbselasoccrenBzi，昱iIddtomimpsri，gno—eami-ethzn3d,egulamrHrpe储Hii展5VeanrqtmpionG2ca6igazui，oooay少n0a[dy1noii(Jnual1rb0edemCJ8]llnosinP岗a.n3arSuh91eeL科mg6，dd，athoe，minr(，yH[,1airfm[dp徐a学，eieJ5mbKJ2RatJeo5，]dbg．iin]晓)gh通3Ltiiuupa-．：2ouecrdoo(c，lmhYaa60ndma白报indtJeso,dta—oaJ521)1oueanxpaoi：Mapum.,0780crlyy多2trrufntroro105，igaalso0noordalPa50ce6ptdyn氯r0Jan—ercn，—n0y．s—i，，a01iuoeol9air联n,s9ncxsleo4is—ycHB45a2ley)Yoemj5has苯bfog07(sfstMa(，ulseBy(1sBepJ611oro1fk．tn的5amoro1a58rraivaL)oac．ec8f)l：iiiaw)ya:nnt，s环tmts．Cp：R1le-ueefaecaho5aHar1ltwJ境h—r1iorele7e]t4-iyKelAofimt62d．．co7sD吸oRlP，-iaoh14lnob1rhoa1，llg[1iv附so5iCSognayn-Jeo．pc8rypdd4,]tehaitl2i行hJ3，nhvoeo7teaot0aeeaenSc5rdraue10为nadotatrt121rde7eeaycc．u．ni0i—d，研l，e．atcnada0-uprely3aDS究-sCrbo：，rioiuf进mBal [i6za]蔡t i o靖n，of n蒋o坚vel祥ca，r b郑azo平le ．cat～ab株olis硫m酸ge盐ne型s f厌rom氧氨g r氧am化—菌 的分—离po和sit鉴i v定e cal rJJba．zo中le 国de科g r学adBe[4r辑]N：oca化r 学—，—2d0i 1o0i ，de4sa0(r1)： omat i ci voram IC177[ J] ．1A-p6p．li ed a n d Envi r onment al M
பைடு நூலகம் 参考文献
[4][M7[]1Cc]aK陈i aJ来，y D国JiBa,蔡n，g信JPXr德u，c,h黄aZh玉Me妹n，g,等RP e，.废i ne弃etka电e1W容．，器Is封eotl存aat1i点o．n多aSn氯udb联st 苯 idrea的nt te含ifsi量pcea和ctiof分ni oc布iftb特yac征atne[drJ]ei.中ax—re国spp环roens境siob科nle学offo,2trh0sri0em8e,u22l8，t(a9n3)e:一o8u3s3-837
三、PCBs污染土壤的微生物修复
1、微生物修复:是利用天然存在的或人工培养的功能微生
物群,在适宜环境条件下,促进或强化微生物代谢功能,从 而降低有毒污染物活性或将污染物降解成为无毒物质 的生物修复技术
2、被污染土壤中多氯联苯的测定 (1)主要试剂、分析仪器 气象色谱仪、色谱柱、多氯联苯标准品、分析替
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1、多氯联苯的概述 2、多氯联苯污染土壤的现状 3、多氯联苯污染土壤的微生物修复 4、土壤样品分析 5、实例透析 6、参考文献
一、多氯联苯的概述
1、定义：多氯联苯，PCBs，别名：氯化联
五、实例
--多氯联苯污染土壤好氧降解菌群的分离与鉴定
试验材料：
供试土壤 : 采自长江三角洲某典型PCBs 污染农田的表层土壤
处理方法：捡出植物根系、石砾等残留物， 自然风干，过2mm筛，调节器土壤含水 量为田间持水量的55%左右，以供盆栽试 验用。
供试植物: 紫云英，豆科黄芪属，冬季绿 肥植物。
1.1.3 供试菌株及菌剂制备
亚急性和慢性毒性
致癌性
致突变性
二、多氯联苯污染土壤的现状
多氯联苯，是一类人工合成的环境异 源有机物。近年来，在我国经济发达的长 江、珠江三角洲某些典型地区调查发现， 农田土壤中多氯联苯组分高达数百个 ppb， 其污染面积多达数千亩之多（藤应等， 2008）。由于 PCBs 在土壤中不断累积 的趋势，严重危害着土壤的生产和生态功 能、农产品质量安全和人类健康（Ren et al.，2007; Wu et al.，2011）。修复土壤 PCBs 污染已成为人们普遍关注的问题， 迫切需要寻找一种廉价、永久高效而且环 境友好的修复方法。
结论
(1）紫云英作为绿肥植物，对PCBs表现出较强的耐受性， 并且对污染土壤中PCBs的去处起到明显作用，具有较好的 修复潜力。 （2）根瘤菌对紫云英修复PCBs污染土壤具有明显的强化 作用，而且改善了紫云英根际土壤微生物群落结构和功能 多样性。可见，紫云英-根瘤菌共生体系对修复PCBs污染 土壤具有良好的应用前景。今后有待进一步从分子水平上 探讨这一共生体系对土壤中PCBs降解的机制，并验证器 田间修复效果，为研发PCBs污染土壤共生修复技术提供 科学依据。
代物、色谱分析内标物、土壤样品
四、土壤样品分析
①的转漏5入涤酸②后酸层液蒸乙胶0入 斗 上 三 调Km静 相 ， 过 发 烷 柱Ol提预中述次节，净止无弃无器洗，H/取先；分，溶沸化分色去水浓涤并乙：加再液乙液腾：层；水硫缩梨用醇称p有向漏醇水向，加相酸至形正溶H取碱斗洗1浴提弃入，钠瓶乙2液为0m5解中涤0回取去再柱数烷15微lgm0左0土残，液流液硫重脱次洗0酸ml正m右l样渣并也碱中酸复水，脱性，l乙，纯于中 将 转解加相 用 ， 定 、至沸烷转化锥加碱 入1以， 水 容 梨入中腾h和入水形入解 分，梨再 洗 至 形2性水50刻，瓶残 液10将形重 瓶25m后浴m0次m度振浓中渣 漏m碱烧复 收，回ol；；管动ll硫，用 斗/解瓶用 集纯加流L将讲中2的酸加中2上收硫 ；化m入碱0正，浓乙，i入；m集酸 再清水1n解乙以缩0后l醇振1用乙；洗 用液的μ上m烷少液静g溶动1醇也用涤 旋分清/o+提L量过置l液21十/洗旋到 转转液液mL硫取正硅分转硫 蒸in 氯水发加联 相入器苯再内浓2以缩标m5至物l0。m2六振ml正氯l摇左乙苯分右烷。液，重漏转复斗入萃1刻取0m度2i次n管后，中静正，置乙定分烷容层提至，取2对0合ml， 并于分液漏斗中待进一步净化处理。
苯，是一种环境内分泌干扰物,在自然环境中 难以降解,能够通过水、土壤、空气、生物等 载体转移,在人或动物体内积蓄,对生体具有致 畴、致癌、致突变特性,多氯联苯属于致癌物 质，容易累积在脂肪组织，造成脑部、皮肤 及内脏的疾病，并影响神经、生殖及免疫系 统。
2、结构式
3、理化性质：
• 外观与性状：流动的油状液体或白色结晶固体或非结 晶性树脂。
• 熔点(℃)：PCB3：-19～-15℃；PCB4：-8～-5℃； PCB5：8～12℃； PCB6：29～33℃。
4、用途：PCB用途很广,可作绝缘油、热载体和润滑油等,
还可作为许多种工业产品（如各种树脂、橡胶、结合剂、 涂料、复写纸、陶釉、防火剂、农药延效剂、染料分散剂） 的添加剂。
5、毒性
急性毒性
供试菌株：根瘤菌 由本课题组从长江三角洲某典型PCBs污染 农田的紫云英植物根瘤菌中经驯化富集后分 离筛选得到。
菌剂制备:现将该菌株接种与YMA固体平 板培养基上28°C活化，然后接入以PCB77 （3,3＇， 4,4＇-四氯联苯，10mg/L）为唯 一碳源的基础盐业培养基中扩大培养，之后 与灭菌泥炭（过20目尼龙筛）混合，制成固 体菌剂（2*109cfu/g菌剂）
1.2 实验方案及实施
本研究设计4个处理： 第一：不种植物，仅加灭活的根瘤菌菌剂作为对照（以 CK表示）； 第二：种植物，加灭活的根瘤菌菌剂（P）； 第三:不种植物，仅加活的根瘤菌菌剂（R）； 第四：种植物，加活的根瘤菌菌剂（PR），
每个处理4次重复，随机区组排列。在同一条件下进 行一系列的培养，然后分析土壤性质，对其土壤微生物 生物量及群落功能多样性测定和计算多氯联苯的去除率 及植物提取修复效率，最后数据分析得到结果
gna[d[[8l9noohibt5ho]]aobmaieI]ypbGe[n[tifgprd23Shercoetwhooir]]arrenua孟hb0euecbTnamotueaxntrlaieiyd-cysr庆ccuykaeKclaiaebtbselasoccrenBzi，昱iIddtomimpsri，gno—eami-ethzn3d,egulamrHrpe储Hii展5VeanrqtmpionG2ca6igazui，oooay少n0a[dy1noii(Jnual1rb0edemCJ8]llnosinP岗a.n3arSuh91eeL科mg6，dd，athoe，minr(，yH[,1airfm[dp徐a学，eieJ5mbKJ2RatJeo5，]dbg．iin]晓)gh通3Ltiiuupa-．：2ouecrdoo(c，lmhYaa60ndma白报indtJeso,dta—oaJ521)1oueanxpaoi：Mapum.,0780crlyy多2trrufntroro105，igaalso0noordalPa50ce6ptdyn氯r0Jan—ercn，—n0y．s—i，，a01iuoeol9air联n,s9ncxsleo4is—ycHB45a2ley)Yoemj5has苯bfog07(sfstMa(，ulseBy(1sBepJ611oro1fk．tn的5amoro1a58rraivaL)oac．ec8f)l：iiiaw)ya:nnt，s环tmts．Cp：R1le-ueefaecaho5aHar1ltwJ境h—r1iorele7e]t4-iyKelAofimt62d．．co7sD吸oRlP，-iaoh14lnob1rhoa1，llg[1iv附so5iCSognayn-Jeo．pc8rypdd4,]tehaitl2i行hJ3，nhvoeo7teaot0aeeaenSc5rdraue10为nadotatrt121rde7eeaycc．u．ni0i—d，研l，e．atcnada0-uprely3aDS究-sCrbo：，rioiuf进mBal [i6za]蔡t i o靖n，of n蒋o坚vel祥ca，r b郑azo平le ．cat～ab株olis硫m酸ge盐ne型s f厌rom氧氨g r氧am化—菌 的分—离po和sit鉴i v定e cal rJJba．zo中le 国de科g r学adBe[4r辑]N：oca化r 学—，—2d0i 1o0i ，de4sa0(r1)： omat i ci voram IC177[ J] ．1A-p6p．li ed a n d Envi r onment al M
பைடு நூலகம் 参考文献
[4][M7[]1Cc]aK陈i aJ来，y D国JiBa,蔡n，g信JPXr德u，c,h黄aZh玉Me妹n，g,等RP e，.废i ne弃etka电e1W容．，器Is封eotl存aat1i点o．n多aSn氯udb联st 苯 idrea的nt te含ifsi量pcea和ctiof分ni oc布iftb特yac征atne[drJ]ei.中ax—re国spp环roens境siob科nle学offo,2trh0sri0em8e,u22l8，t(a9n3)e:一o8u3s3-837
三、PCBs污染土壤的微生物修复
1、微生物修复:是利用天然存在的或人工培养的功能微生
物群,在适宜环境条件下,促进或强化微生物代谢功能,从 而降低有毒污染物活性或将污染物降解成为无毒物质 的生物修复技术
2、被污染土壤中多氯联苯的测定 (1)主要试剂、分析仪器 气象色谱仪、色谱柱、多氯联苯标准品、分析替