临床血液学检验 09 溶血性贫血(1)

第六章 红细胞检验的基本方法方法
第一节 有关铁代谢指标的检验 第二节 叶酸和维生素B12的检验 第三节 溶血的检验 第四节 红细胞膜缺陷的检验 第五节 红细胞酶缺陷的检验 第六节 血红蛋白异常的检验 第七节 阵发性睡眠性血红蛋白尿症的检验 第八节 免疫性溶血性贫血的检验
第三节 溶血的检验（自学）p133
红细胞寿命测定 血浆游离血红蛋白检测 血清结合珠蛋白检测 血浆高铁血红素白蛋白检测 尿含铁血黄素试验 尿卟啉检测
第四节 红细胞膜缺陷的检验 p136
红细胞渗透脆性试验 自身溶血试验及其纠正试验 酸化甘油溶血试验 高渗冷溶血试验 红细胞膜蛋白电泳分析
一、红细胞渗透脆性试验－－原理
的形成
红细胞糖代谢
戊糖旁路途径 无氧糖酵解途径 糖代谢产物及能量的作用
戊糖旁路途径
—（磷酸戊糖途径与谷胱甘肽途径）
G6PD
G
6PG
6-磷酸葡萄糖酸 磷酸核糖
NADP
NADPH
(戊糖)
GSH
GSSG
H2O2
H2O
返回G6PD
无氧糖酵解途径
－－红细胞获得能量的唯一途径－－
ADP PK ATP
红细胞的消亡
消亡机制：碎裂、渗透溶解、补体诱导的红细胞溶解、 糖代谢降低、噬红细胞作用等
红细胞的死亡途径：①正常死亡；②有时在某种病理 情况下可存在无效造血，如MA、地中海贫血等
无效造血/原位Hale Waihona Puke Baidu血（ineffective erythropoiesis）： RBC在有核细胞阶段或释放入周围循环中立刻破裂而溶 血。
葡萄糖 －－－ PEP
丙酮酸
1mol葡萄糖
NADH
LDH
2mol ATP
NAD
乳酸
返回PK
糖代谢产物及能量的作用
维持红细胞内高钾、低钠、低钙的状态 调节血红蛋白对氧的亲和力（2,3-DPG） 维持Hb中铁的二价状态 防止细胞中各种蛋白质的－SH被氧化，维持
红细胞的正常形态
红细胞的衰老
红细胞的衰老：衰老红细胞，其糖代谢中 酶活性下降；红细胞膜发生改变致膜变形 性下降；血红蛋白发生改变。红细胞老化 是多种因素影响的结果，使红细胞易在脾 窦中被破坏（脾对RBC的微小改变识别能 力较肝脏好）
（erythrocyte osmotic fragility test，EOFT）
测定红细胞对不同浓度低渗盐溶液的抵抗力 RBC置于一系列低渗盐溶液中一定时间(室温下2h)
后，观察红细胞开始溶血和完全溶血的低渗盐浓度 它取决于红细胞表面积和体积之比，比值低则红细
胞吸水能力差，脆性大；反之脆性小
NaCl浓度
2.0 2.4 2.8 3.2 3.6 4.0 4.4 4.8 5.2 5.6 6.0 6.4
新鲜血各1d,室温2h 离心观察开始溶血、完全溶血的NaCl浓度
注意事项详细在实验课讲
EOFT的参考值
开始溶血3.8—4.6 g/L NaCl溶液 完全溶血2.8—3.2 g/L NaCl溶液 与正常相差0.4（1管）即为阳性
RBC膜的功能（2）
免疫功能：清除免疫复合物(C3b受体，p113 ) 对免疫细胞的调控作用(CR2 ) 对补体活性的调节 a.衰变加速因子（DAF,CD55)
b.补体8结合蛋白 c.反应性溶血的膜抑制剂(MIRL,CD59)
RBC膜具有抗原性：400多种血型抗原， “老化抗原” 多种受体：激素类、递质类、病毒等的受体 维持凝血的平衡
溶血性贫血（1）
第三篇 红细胞检验
第六章 红细胞检验的基本方法 第七章 红细胞检验的临床应用
第六章 红细胞检验的基本方法
红细胞膜的结构与功能
补 充 血红蛋白的结构和功能
内 容
红细胞代谢与功能
红细胞的衰老与消亡
红细胞膜的结构
P173
红细胞膜蛋白的结构示意图
血型糖蛋白等
垂直连接
带3蛋白等
影响RBC膜稳定性的因素
红细胞膜蛋白有缺陷：遗传性 化学因素：如氧化损伤（包括膜蛋白，膜脂质
及HB等的氧化） 免疫因素：结合了自身抗体和/或补体；酶代
谢异常，ATP生成不足，能量代谢紊乱，水、 电解质进出障碍 生物因素：某些生物毒素可直接破坏红细胞膜
血红蛋白的组成
血红蛋白
1个珠蛋白
4个血红素
2条α链 2条非α链 4个原卟啉 4个Fe2+
（ β γ δ ε ζ)
血红蛋白的三维结构
返回IDA
正常成人血红蛋白组成
HbA HbA2 HbF
α2β2 α2δ2 α2γ2
0.96-0.98 0.02-0.03 <0.01
血红蛋白的命名
按某种特定的意义命名：如HbS、HbA 按发现顺序命名：HbC、HbD、---、HbQ 按最早发现地命名：Hb new york 科学命名法：HbA(α2β2）、HbF(α2γ2)
EOFT的临床意义
增加： HS、HE及AIHA伴球形红细胞增多、新生 儿ABO血型不合、G6PD缺乏症、uHb等
减低：地中海贫血、缺铁性贫血、脾切除后
二、自身溶血试验及纠正试验－－原理
EOFT的方法（ml）
试管号
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
10 g/L NaCl 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1.0 1.1 1.2 1.3 1.4 1.5 1.6
双蒸水
2.0 1.9 1.8 1.7 1.6 1.5 1.4 1.3 1.2 1.1 1.0 0.9
HbS（α2β26谷-- 缬）
影响血红蛋白结构和功能的因素
珠蛋白基因缺失或缺陷：某种链不能合成或合成不 足导致其他链相对过剩形成多聚体，如HbH（β4）、 HbBarts（γ4）；基因缺陷导致肽链的一级结构发 生改变，并影响到功能，如MHb的形成
酶缺陷：MHb的形成 化学药物中毒：导致MHb、HbS、HbCO（200倍）等
膜
4.1蛋白
α β
锚( 2.1)蛋 白
收缩蛋白二聚体
四聚体（水平连接）
连接复合体
RBC膜的功能（1）
维持红细胞的正常形态及变形性，脾窦的毛细血管 直径只有2～3um，正常RBC通过时由盘状变为细条状 才能通过，有核红细胞或衰老RBC变形性差，被截留
红细胞内外物质的交换、运输都是通过膜来完成的， 包括水、糖、电解质、气体等的交换。 脂质双层----O2、CO2 各种通道----水和阴离子 酶/泵----阳离子(渗透压平衡)