细胞工程题库整理

绪论

1.细胞工程：细胞工程（cytotechnology）是应用细胞生物学和分子生物学方法，借助工程学的实验方法或技术，在细胞水平上研究改造生物遗传特性和生物学特性，以获得特定的细胞、细胞产品或新生物体的有关理论和技术方法的学科。

2.植物细胞工程：以植物细胞组织为基本单位，在离体条件下进行培养、繁殖或人为的精细操作，使细胞的某些生物学特性按人们的意愿发生改变，从而改良品种或创造新物种，或加速繁殖植物新个体，或获得有用物质的过程。

3.动物细胞工程：应用现代细胞生物学、发育生物学、遗传学和分子生物学的原理方法与技术，按照人们的需要，在细胞水平上进行遗传操作，包括细胞融合、核质移植等方法，快速繁殖和培养出人们所需要的新物种的生物工程技术。

第一章基本技术

1. 培养基基本成分:

无机盐类(大量元素、微量元素)、

有机成分（糖、维生素、肌醇、氨基酸、其他）、

植物激素（生长素、细胞分裂素）、

水、

其它附加成分（琼脂、活性炭、附加复合成分）。

2.外植体：指用于离体培养的活的植物组织、器官等材料。

3.外植体的三种来源：

生长在自然环境下的植物、在温室控制环境下生长的植物、无菌环境下培养的植物。

4.MS培养基适于培养

第二章细胞全能性与形态发生

1. 一个细胞所具有的产生完整个体的固有能力称之为细胞的全能性。

2. 培养条件下使一个已分化的细胞回复到原始无分化状态或分生细胞状态的过程就是细胞脱分化（dedifferentiation）。

3. 蛋白体的出现和细胞质密度增加被认为是细胞开始脱分化的标志。

4. 细胞分化（Differentiation），是指导致细胞形成不同结构，引起功能改变或潜在发育方式改变的过程。

5.极性（polarity）是指植物的器官、组织、甚至单个细胞在不同的轴向上存在的某种形态结构以及生理生化上的梯度差异。

6. 植物的离体器官发生是指培养条件下的组织或细胞团（愈伤组织）分化形成不定根、不定芽等器官的过程。

7.不定根、不定芽是指在一些非正常发生部位形成的根或芽，离体培养中通常是指从愈伤组织上发生的根或芽。

8.离体器官发生的方式：先芽后根，先根后芽，根芽同步发生。

9.器官发生过程（途径）：经过愈伤组织的器官发生：

不经过愈伤组织的器官发生：根尖培养中芽形成、外植体直接发生芽

10.愈伤组织（callus)的概念：指植物受到机械、动物或微生物等伤害后，创伤

部位的细胞脱分化而不断增殖形成松散排列、无特定结构和功能的非器官化组织。

11.离体培养下没有经过受精过程，但经过了胚胎发育过程所形成的胚的类似物（不管培养的细胞是体细胞还是生殖细胞），统称为体细胞胚或胚状体。

12.体细胞胚定义的3个界定：

1）体细胞胚是离体培养的产物，只限于离体培养范围使用，以区别于无融合生殖胚。

2）体细胞胚起源于非合子细胞，以区别于合子胚。

3）体细胞经过了胚胎发育过程，以区别于离体培养中器官发生形成个体的途径。

13. 体细胞胚的形成过程：体细胞胚从外植体上直接发生、

间接发生（经过愈伤组织的体细胞胚形成、经过悬浮细胞的体细胞胚形成）。

14.影响体细胞胚发生的因素：激素的调控作用、培养基及培养条件的影响、不同基因型间体细胞胚形成能力的差异。

第三章体细胞遗传变异

1. 体细胞无性系：由任何形式的细胞培养所产生的植株统称为体细胞无性系。

2. 离体培养中的遗传与变异特点: 离体培养中的遗传稳定性, 离体培养下的变异特点(普遍性、局限性、嵌合性)。

3.非遗传变异的举例

第四章植物组织细胞培养

1.植物脱毒与快繁技术意义：能够有效地保持优良品种的特性、快速繁殖新品种，使优良品种迅速应用、生产无病毒种苗，防止品种退化、节约耕地，提高农产品的商品率、便于运输。

2.植物脱毒：利用植物组织培养技术，将植物体内侵染的病毒除去，培育无病毒植株。

3.植物脱毒的基本原理：病毒在植物体内的分布具有不均匀性。

4.植物脱毒技术流程：1)母体植株的选择和预处理；

2)茎尖分生组织培养再生植株；

3)脱毒效果检测；

4)脱毒苗的保存与繁殖。

5.影响脱毒效果的因素：母体材料病毒侵染的程度、外植体的生理状态、起始培养的茎尖大小。

6.离体无性繁殖培养物增殖方式：腋芽增殖、不定芽增殖、体细胞胚增殖、愈伤组织增殖。

7.花药培养：指用植物组织培养技术将发育到一定阶段的花药剥离下来接种到培养基上进行培养，最终形成完整植株的过程。（器官培养）

8.花粉培养：指在无菌条件下，将花粉从花药中游离出来，使其成为分散或游离态，发育成单倍体植株的过程。（细胞培养）

9.花药培养取材时期：单核晚期至双核早期；

花粉培养取材时期：四分体至单核早期。

10.花粉分离方法：1）机械分离法；2）花药漂浮培养自然释放法；3）磁拌法。

11.植物胚胎培养类型：胚培养、胚乳培养、胚珠培养、子房培养。

12.幼胚培养取材时期：球形胚至鱼雷形胚。

13.幼胚离体培养的生长发育方式：胚性发育、早熟萌发、愈伤组织。

14.悬浮培养：是细胞培养的基本方法，是将单个游离细胞或小细胞团在液体培

养基中进行培养增殖的技术。

15.悬浮细胞培养体系必须满足的3个条件：

1）悬浮培养物分散性良好，细胞团较小；

2）均一性好，细胞形状和细胞团大小大致相同；

3）细胞生长迅速。

16.悬浮细胞生长的5个时期：

延滞期、对数生长期、直线生长期、减慢期、静止期。

17.悬浮培养细胞的同步化方法：分选法；饥饿法；抑制剂法；低温法。

18.单细胞培养方法（4）：平板培养、看护培养、微室培养、双层滤纸培养。

19.培养条件下的植物细胞次生产物积累特性：

1）生长偶联型：产物合成与细胞生长成正比。如长春花碱、烟碱的合成；

2）中间型：产物仅在细胞生长下降时合成，细胞处于指数生长期或停止生长产物都不合成。如蒽醌类物质合成的植物细胞；

3）非生长偶联型：产物合成在细胞生长停止以后。如紫草宁的合成。

第五章原生质体培养及杂交

1.原生质体（protoplast）：除去细胞壁的裸露细胞。

2. 核质体（nuclearplast）：由原生质膜和薄层细胞质包围细胞核形成的小原生质体。

3. 胞质体（cytoplast）：不含细胞核仅含部分细胞质的原生质体。

4. 原生质体的收集和纯化:沉降法、漂浮法、梯度离心法。

5.原生质体活力测定：荧光素双醋酸酯（FDA）染色法；酚藏花红染色法；

荧光增白剂染色法；伊凡蓝染色法。

6. 原生质体培养方法（7）

1）液体浅层培养；

2）固液双层培养；

3）固体平板培养；

4）琼脂糖珠培养；

5）悬滴培养法；

6）微滴培养法；

7）饲养层培养法。

7. 植物体细胞杂交：又称为原生质体融合，是指将植物不同种、属、甚至科间

的原生质体通过人工方法诱导融合，然后进行离体培养，使其再生杂种植株的技术。

8. 原生质体融合的种类：1）对称融合；2）非对称融合。