多肉植物组织培养
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多肉植物是指植物营养器官的某一部分,具有发达的薄壁组织用以贮藏水分,在外形上显得肥厚多汁的一类植物。常见的有仙人掌科的仙人掌、仙人球、昙花、蟹爪兰、金琥;番杏科的生石花、肉锥花;百合科的康平寿、玉露、卧牛;大戟科的虎刺梅、彩春锋;景天科的石莲花、长寿花、虹之玉;龙舌兰科的金边龙舌兰、虎尾兰;菊科的翡翠珠等。
肉植物耐干旱,净化空气,具有外观小巧玲珑,植株肥厚多汁,造型特异等特点,是近年来逐渐流行的一类观赏植物。组织培养技术,对保存多肉植物优良的种质资源、繁殖名优珍稀品种、快速繁殖出口需要和园林绿化需要的优良品种。
传统多肉植物可依靠分株、扦插繁殖,分株繁殖如芦荟、仙人球、虎尾兰;扦插繁殖如蟹爪兰、长寿花、落地生根,仙人掌则是分株和扦插繁殖都可以。值得一提的事,生石花在生长中有一个脱皮、分裂的过程。通常在冬末春初,植株中缝逐渐开裂,在开裂处有一个或两三个新的植株逐渐长大,而原有的植株逐渐枯萎,为新株所取代。这个由新植株替代老植株的过程,就是脱皮生长和分裂繁殖过程。
外植体的选择
取优良母株新萌发的幼嫩侧芽、幼嫩枝条;一些没有侧芽的珍稀名贵品种的母株则可等待植株开花期间取其较充实的花梗作为外植体。夏季休眠期,多肉植物外植体在培养基中对激素常反应迟钝,生长静止,不易培养成功。
1. 消毒灭菌
2.1选择合适的培养基的,配置好、调节适当的激素浓度。
2.2制作好的培养基须立即放入高压灭菌锅灭菌,备用。,
2.3外植体材料的消毒:切取多肉植物幼嫩的侧芽或花梗→肥皂水或洗洁精洗涤→在自来水下冲洗→超净工作台中用75%酒精浸泡数秒→0.1%升汞处理10~30min,→无菌水冲洗6 遍,→消毒滤纸吸干水分
3.接种
无菌条件下操作→手术刀切取所需的培养材料→无菌操作植入初代诱导培养基中培养。
3.培养
3.1侧芽植入培养基后培养15~21d,腋间萌发出多个腋芽芽点,至30~45d,由外植体长成一团丛芽。
3.2花梗外植体不定芽的诱导:花梗植入诱导培养基,经15~21d 培养,花梗节膨大,并萌发1~3 个不定芽,长至1cm 左右约需45d。
3.3丛生芽的增殖扩繁
侧芽外植体丛生芽的增殖:切分进行增殖培养→培养基培养周期4~6 周,扩繁倍数约3~5,长至满瓶,并可继续不断增殖。在经若干次继代增殖培养后,所建立的各个多肉植物品种无性系无一例外都不再顺利增殖丛生芽,而是出现新芽少,芽体短簇,植株僵硬,类似俗称的石头苗,有的芽或芽丛还出现玻璃化倾向,无法继续培养。这种现象说明增殖培养时添加的激素浓度已不再适宜,调节外源激素的绝对浓度及不同种类激素的相对配比,当调整后,瓶苗很快就恢复到原来良好的增殖状态,激素的调整规律基本是以高低浓度适度地交错进行,只有这样才能使增殖扩繁顺利进行,既保持一定的增殖系数,又避免产生僵苗、畸形苗、玻璃苗等。由花梗外植体诱导建立的无性系的增殖:花梗诱导出节芽后,数量同样相当有限,需继续切分增殖,芽的增殖状况及激素调整规律,同侧芽外植体诱导建立的繁殖体系基本一致。试验中发现,一些叶片带条纹俗称“锦”的多肉植物其珍贵的线条特征可在花梗诱导建立的体系中保存下来,而取带“锦”植株的侧芽进行诱导建立的无性系则难于保持该性状,这可能和外植体组织所带的遗传信息有关,有待进一步研究。
6 生根培养及组培苗移栽
生根培养:当增殖的芽体长至1~3cm,可切下转入生根培养,一般接种后20d 可顺利生根。各个多肉植物品种组培苗的生根都很容易。
瓶外生根:将增殖瓶苗中原本可切下诱根培养的壮苗,取出瓶并在苗基部切一新鲜切口直接插于苗床的基质中,大约经过25~35d,便开始长根。
组培苗移栽及管理:取出瓶苗→洗净根系附着的培养基,晾干→假植于专门的基质中,稍遮荫,并注意通风。通过试验比较,以河砂、泥炭土、珍珠岩2∶1∶1 相混合的基质最适宜组培苗的过渡栽培。移栽的季节全年均可进行,但以春、秋二季更为适宜。移栽后要注意移栽苗的水肥管理,当第一次栽下苗床后
必须浇透水,以后掌握不干不浇的原则,因为肉质植物多数叶片肥厚,体内贮水多,耐干不耐湿。施肥掌握薄肥勤施的原则。