第十六课 维生素类药物分析(三)
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第十六课维生素类药物分析三演示文稿
E11c%m = 41.0～45.5
第31页，共72页。
维生素EUV图
第32页，共72页。
（四） TLC法
薄层板 展开剂
显色剂
硅胶G
环己烷 -乙醚（4 ：1） 硫酸（105℃ 5′）
VitE Rf = 0.7
第33页，共72页。
三、特殊杂质 1. 酸度
检查制备过程中引入的游离羧酸，酸碱 滴定法
R2 CH3 H
CH3 H
相对活性 1.0 0.5 0.2 0.1
第22页，共72页。
生物效价 右旋体 ： 消旋体 = 1.4 ：10
（天然品） （合成品）
dl－α－生育酚醋酸酯
第23页，共72页。
一、 结构与性质
苯环 + 二氢吡喃环 + 饱和烃链
1、易溶于有机溶剂，不溶于水
2、UV
3、酯键 易水解
是
A. 维生素A B. 维生素B1
C. 维生素C
D. 维生素E
E. 烟酸
第61页，共72页。
97：81．使用碘量法测定维生素C的
含量,已知维生素C的分子量
为176.13，每1ml碘滴定液
(0.1mol/L) 相当于维生素C
的量为
A. 17.61mg
B. 8.806mg
C. 176.1mg
D. 88.06mg
V（ml） 0.01 1.0 0.98（ml） 0.01020
第39页，共72页。
四、含量测定
（一）GC法 1、 GC特点
选择性好 灵敏度高 速度快
分离效能好
挥发性低、不 稳定、极性强 →衍生化易受 样品蒸气压限 制
第40页，共72页。
2、 VitE测定的色谱条件
第31页，共72页。
维生素EUV图
第32页，共72页。
（四） TLC法
薄层板 展开剂
显色剂
硅胶G
环己烷 -乙醚（4 ：1） 硫酸（105℃ 5′）
VitE Rf = 0.7
第33页，共72页。
三、特殊杂质 1. 酸度
检查制备过程中引入的游离羧酸，酸碱 滴定法
R2 CH3 H
CH3 H
相对活性 1.0 0.5 0.2 0.1
第22页，共72页。
生物效价 右旋体 ： 消旋体 = 1.4 ：10
（天然品） （合成品）
dl－α－生育酚醋酸酯
第23页，共72页。
一、 结构与性质
苯环 + 二氢吡喃环 + 饱和烃链
1、易溶于有机溶剂，不溶于水
2、UV
3、酯键 易水解
是
A. 维生素A B. 维生素B1
C. 维生素C
D. 维生素E
E. 烟酸
第61页，共72页。
97：81．使用碘量法测定维生素C的
含量,已知维生素C的分子量
为176.13，每1ml碘滴定液
(0.1mol/L) 相当于维生素C
的量为
A. 17.61mg
B. 8.806mg
C. 176.1mg
D. 88.06mg
V（ml） 0.01 1.0 0.98（ml） 0.01020
第39页，共72页。
四、含量测定
（一）GC法 1、 GC特点
选择性好 灵敏度高 速度快
分离效能好
挥发性低、不 稳定、极性强 →衍生化易受 样品蒸气压限 制
第40页，共72页。
2、 VitE测定的色谱条件
药物分析维生素类药物的分析
在方法验证的基础上，可构建维生素类药物分析的评价指 标体系，包括定量限、检测限、回收率、重复性、稳定性 等指标，以全面评价分析方法的性能。
持续改进方向和目标设定
持续改进方向
针对维生素类药物分析过程中存在的问题和 不足，可进一步改进样品前处理方法、优化 分析条件、提高检测灵敏度等，以不断提高 分析结果的准确性和可靠性。
数据处理和结果表达技巧分享
数据处理
对HPLC和UV-Vis法得到的数据进行整理、归纳和统计 分析，包括峰面积、保留时间、浓度等参数的计算和 处理。
结果表达
将分析结果以图表形式呈现，如色谱图、标准曲线图、 含量分布图等，使结果更加直观、易于理解。同时，对 分析结果进行解释和说明，提出改进意见和建议。
在选择维生素类药物的标准品时，应确保其 纯度高、稳定性好，且具有代表性。同时， 应关注标准品的来源和溯源性。
使用注意事项
在使用标准品时，需按照规定的条件进行保 存和使用，避免污染和降解。此外，应定期 对标准品进行复验和更新。
检测方法验证及评价指标体系构建
要点一
检测方法验证
要点二
评价指标体系构建
为确保维生素类药物分析方法的准确性和可靠性，需进行 方法学验证，包括专属性、线性、范围、准确度、精密度 等指标的考察。
质量控制体系建立及实施情况介绍
质量控制体系
为确保维生素类药物分析结果的准确性和可靠性，需建立全面的质量控制体系，包括样 品采集、前处理、分析测试、数据处理等各个环节。
实施情况
目前，质量控制体系已在多个实验室得到广泛应用，有效提高了维生素类药物分析的准 确性和一致性。
标准品选择与使用注意事项
标准品选择
通过对该维生素类药物的定性、定量分析，评估其质量 稳定性和一致性，为药物研发、生产和监管提供科学依 据。
《药物分析》维生素类药物的分析 ppt课件
ppt课件 31
Vit D2 骨化醇 Ergocalciferol
22
Vit D3 胆骨化醇 Cholecalciferol 胆钙化醇
CH2
10 7 HO 3 H 5 6 HO 4 H 9,10-开链胆甾-5,7,10(19)9,10-开链麦角甾三烯-3β-醇 5,7,10(19),22-四烯-3β-醇 胆甾醇，胆固醇 Δ4,6 Cholestadienol Cholesteral
ppt课件 29
校正因子测定 取正三十二烷适量，加正已烷溶解并稀释 成每1ml中含1.0g的溶液，摇匀，作为内标 溶液。另取Vit E对照品约20mg，精密称定， 置棕色具塞锥形瓶中，精密加入内标溶液 10ml，密塞，振摇使溶解；取1~3µ l注入气 相色谱仪，计算校正因子 测定法 取本品约20mg，精密称定，置棕色具塞锥 形瓶中，精密加入内标溶液10ml，密塞， 振摇使溶解；取1~3µ l注入气相色谱仪，测 定，计算，即得
滤过 用热的稀HCl洗 洗涤* 干燥恒重*80℃
ppt课件 20
⊙第三节 维生素C( Vit C)
6
CH2OH O OH O
1 3
H
5
C
4
HO
2
OH
ppt课件
21
COONa(H) CH2OH H C O OH O -2H H CH2OH C O OH O OH-(H+) H C C O O OH H
ppt课件
328
340
360
13
A
0.330 0.508 0.570 0.477 0.190
⊙第二节 维生素B1( Vit B1)
CH3 N N NH2 CH2 N S CH2CH2OH Cl- HCl CH3
Vit D2 骨化醇 Ergocalciferol
22
Vit D3 胆骨化醇 Cholecalciferol 胆钙化醇
CH2
10 7 HO 3 H 5 6 HO 4 H 9,10-开链胆甾-5,7,10(19)9,10-开链麦角甾三烯-3β-醇 5,7,10(19),22-四烯-3β-醇 胆甾醇，胆固醇 Δ4,6 Cholestadienol Cholesteral
ppt课件 29
校正因子测定 取正三十二烷适量，加正已烷溶解并稀释 成每1ml中含1.0g的溶液，摇匀，作为内标 溶液。另取Vit E对照品约20mg，精密称定， 置棕色具塞锥形瓶中，精密加入内标溶液 10ml，密塞，振摇使溶解；取1~3µ l注入气 相色谱仪，计算校正因子 测定法 取本品约20mg，精密称定，置棕色具塞锥 形瓶中，精密加入内标溶液10ml，密塞， 振摇使溶解；取1~3µ l注入气相色谱仪，测 定，计算，即得
滤过 用热的稀HCl洗 洗涤* 干燥恒重*80℃
ppt课件 20
⊙第三节 维生素C( Vit C)
6
CH2OH O OH O
1 3
H
5
C
4
HO
2
OH
ppt课件
21
COONa(H) CH2OH H C O OH O -2H H CH2OH C O OH O OH-(H+) H C C O O OH H
ppt课件
328
340
360
13
A
0.330 0.508 0.570 0.477 0.190
⊙第二节 维生素B1( Vit B1)
CH3 N N NH2 CH2 N S CH2CH2OH Cl- HCl CH3
维生素类药物分析医学课件
维生素类药物分析医学课件维生素是人体必需的一类有机化合物，对于人体各种生理功能和健康保健都有不可或缺的作用。
维生素类药物是以维生素为主要成分的药物。
本文就维生素类药物进行分析，介绍其药理作用、适应症、副作用等相关知识。
一、维生素A类药物维生素A类药物主要成分是维生素A，具有多种生物学作用，如维持视网膜视力、保护上皮组织、维持正常成长及免疫功能等。
常用维生素A类药物包括维生素A软胶囊、维生素A注射液等。
维生素A类药物适应症包括夜盲症、角膜软化症等。
但长期大量摄入维生素A可引起中毒，表现为头痛、皮肤瘙痒、运动不便等症状。
因此，应注意维生素A类药物的正确用法。
维生素B类药物包括维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12等多种成分。
维生素B类药物在人体内起到辅酶的作用，参与糖、脂肪、蛋白质等物质代谢。
常用维生素B类药物包括维生素B1片、硫胺素注射液、维生素B6注射液、维生素B12注射液等。
维生素B类药物适应症包括神经炎、急慢性肝炎、贫血等。
与其他药物混合使用时，可能会发生过敏、头晕、恶心呕吐等不良反应。
维生素D类药物主要成分是维生素D3，具有增加钙吸收、促进骨骼成长等生物作用。
常用维生素D类药物包括维生素D3溶液、维生素D3软胶囊等。
维生素D类药物适应症包括佝偻病、骨质疏松等。
剂量过大时，可能引起高钙血症、软组织钙化等不良反应。
维生素类药物是一类广泛应用的药物，对于人体健康保健有着不可或缺的作用。
然而，使用维生素类药物时应注意药物的正确用法，避免过度、长期使用，避免不良反应的发生。
同时，不应将维生素类药物作为万能药，采取正确的饮食和生活方式才是维持健康的最佳方式。
维生素类药物的分析演示课件
➢ 测定VA acetate →环己烷为溶剂
⊕如果
λmax为326～329nm;
A ( ) 测 -规定值≤±0.02 A328 nm
则不需要校正
⊕如果
λmax为326～329nm;
A ( ) 测 -规定值＞0.02
A328 nm
则需校正
2020/10/10
8
第二法 皂化法--适用于VA醇
第一法未通过，包括：
➢ 薄层色谱法：喷三氯化锑，呈蓝色斑点。
2020/10/10
5
含量测定
VA含量表示
➢ I.U.(international Unit) 国际单位 ➢ 效价(I.U./g) ➢ 按WHO规定:
VA acetate VA alcohol 效价(I.U./g) 2.907×106 3.33×106 ➢ 1g pure VA acetate≈ 2.907×106I.U.
2020/10/10
6
紫外分光光度法：三点校正法 换算因 效 数价 (I.U./g)
E1% 1cmmax
单位百分吸收系数数值相当的效价
I.U./g (V A酯 )(E1 1c% m )测 1900 I.U./g (V A醇 ) (E1 1c% m )测 1830
2020/10/10
7
第一法 直接测定法—VA醋酸酯
2020/10/10
3
性质
➢ 溶解性：氯仿、乙醚、环己烷中任意混合，乙醇中微溶。 ➢ 不稳定性：有多个不饱和键。易氧化，被紫外光裂解。 ➢ 紫外吸收：325～328nm，可鉴别和含量测定中应用。 ➢ 与三氯化锑呈色：产生不稳定的蓝色。
2020/10/10
4
鉴别试验
➢ 三氯化锑反应：
⊕如果
λmax为326～329nm;
A ( ) 测 -规定值≤±0.02 A328 nm
则不需要校正
⊕如果
λmax为326～329nm;
A ( ) 测 -规定值＞0.02
A328 nm
则需校正
2020/10/10
8
第二法 皂化法--适用于VA醇
第一法未通过，包括：
➢ 薄层色谱法：喷三氯化锑，呈蓝色斑点。
2020/10/10
5
含量测定
VA含量表示
➢ I.U.(international Unit) 国际单位 ➢ 效价(I.U./g) ➢ 按WHO规定:
VA acetate VA alcohol 效价(I.U./g) 2.907×106 3.33×106 ➢ 1g pure VA acetate≈ 2.907×106I.U.
2020/10/10
6
紫外分光光度法：三点校正法 换算因 效 数价 (I.U./g)
E1% 1cmmax
单位百分吸收系数数值相当的效价
I.U./g (V A酯 )(E1 1c% m )测 1900 I.U./g (V A醇 ) (E1 1c% m )测 1830
2020/10/10
7
第一法 直接测定法—VA醋酸酯
2020/10/10
3
性质
➢ 溶解性：氯仿、乙醚、环己烷中任意混合，乙醇中微溶。 ➢ 不稳定性：有多个不饱和键。易氧化，被紫外光裂解。 ➢ 紫外吸收：325～328nm，可鉴别和含量测定中应用。 ➢ 与三氯化锑呈色：产生不稳定的蓝色。
2020/10/10
4
鉴别试验
➢ 三氯化锑反应：
维生素类药物的分析讲课文档
40 现在四十页，总共八十页。
4. TLC法
薄层板 硅胶G
展开剂 环己烷 -乙醚（4 ：1）
显色剂 硫酸（105℃ 5′） VitE Rf = 0.7
41
现在四十一页，总共八十页。源自三、检查：游离生育酚1. 原理：利用游离生育酚的还原性，将硫酸铈还原 成硫酸亚铈
生育 2 C4 酚 e 2 C3 e对 生育
脱水
现在八页，总共八十页。
鲸醇
8
2、 不稳定性：共轭多烯侧链易被 氧化，△或有金属离子存在时氧化↑
VitA紫 外 线 、 O2 、 氧 化剂
环氧化物[ O]VViittAA酸 醛
环氧化物
VitA醛
VitA酸
9 现在九页，总共八十页。
3. 与三氯化锑发生呈色反应（鉴别、含量测定）
Vi tS A b 3C 蓝 l 色 紫红
2.三氯化铁－联吡啶反应
VitE KO H 生育酚 Fe 3
△
[O]
对 生育醌
Fe 2 联 吡啶 红色
红色
38
现在三十八页，总共八十页。
H3C HO
CH3 O
CH3 C16H33
CH3
生育酚
3+
Fe
[O]
弱氧化剂
现在三十九页，总共八十页。
对-生育醌
39
3. UV法
284nm
254nm
固定相→十八烷基硅烷键合硅胶
色
谱
条
流动相→甲醇-水（49 ：1） 检测波长→292nm
=0
= + 0.02
= + 0.04
A32校 8 正 3.52 2A328A316A340 3.52 20.628 0.561 0.523
4. TLC法
薄层板 硅胶G
展开剂 环己烷 -乙醚（4 ：1）
显色剂 硫酸（105℃ 5′） VitE Rf = 0.7
41
现在四十一页，总共八十页。源自三、检查：游离生育酚1. 原理：利用游离生育酚的还原性，将硫酸铈还原 成硫酸亚铈
生育 2 C4 酚 e 2 C3 e对 生育
脱水
现在八页，总共八十页。
鲸醇
8
2、 不稳定性：共轭多烯侧链易被 氧化，△或有金属离子存在时氧化↑
VitA紫 外 线 、 O2 、 氧 化剂
环氧化物[ O]VViittAA酸 醛
环氧化物
VitA醛
VitA酸
9 现在九页，总共八十页。
3. 与三氯化锑发生呈色反应（鉴别、含量测定）
Vi tS A b 3C 蓝 l 色 紫红
2.三氯化铁－联吡啶反应
VitE KO H 生育酚 Fe 3
△
[O]
对 生育醌
Fe 2 联 吡啶 红色
红色
38
现在三十八页，总共八十页。
H3C HO
CH3 O
CH3 C16H33
CH3
生育酚
3+
Fe
[O]
弱氧化剂
现在三十九页，总共八十页。
对-生育醌
39
3. UV法
284nm
254nm
固定相→十八烷基硅烷键合硅胶
色
谱
条
流动相→甲醇-水（49 ：1） 检测波长→292nm
=0
= + 0.02
= + 0.04
A32校 8 正 3.52 2A328A316A340 3.52 20.628 0.561 0.523
维生素类药物的分析-药物分析课件
❖ 具有UV吸收
❖ 存在多种立体异构化合物
维生素A 新维生素Aa 新维生素Ab 异维生素Aa
异维生素Ab
m ax
325.5 328 320.5 323
324
相对生物效价
100% 75% 24% 21%
24%
VitA2 VitA3
鲸醇
二、 性质 （一） 共轭多烯侧链 易被氧化
VitA 紫外线、O2、氧化剂
BP 杂质对照品法 显色剂 三氯化锑
USP 显色剂 磷钼酸 规定斑点颜色和Rf值
三、 含量测定
（一） UV法
立体异构体 氧化产物及光照产物 合成中间体 去氢维生素A（ VitA2） 去水维生素A（ VitA3）
三点校正法 1. 条件： （1）杂质的吸收在310~340nm波
长范围内呈一条直线，且随波 长的增大吸收度减小； （2）物质对光的吸收具有加和性。
必需的 一种活性物质。 人体不能合成维生素。
脂溶性 VitA、D2、D3、 E、K1 等
水溶性 VitB族(B1、B2、B6、B12) VitC、叶酸、烟酸、烟酰胺
VitM
VitPP
一、
维生素A 结构
R : -H -COCH3 -COC15H31
维生素A醇 维生素A醋酸酯 维生素A棕榈酸酯
（一） 为一个具有共轭多烯侧链的 环己烯
f A325(校正) A325 100% A325
A3 2 5校 正
A325
－3%
0
A3 2 5校 正
3%
第一法与第二法的区别
第一法
第二法
测定对象 维生素A醋酸酯 维生素A醇
方法 直接取样，测定 皂化提取，测定
溶剂 环己烷
❖ 存在多种立体异构化合物
维生素A 新维生素Aa 新维生素Ab 异维生素Aa
异维生素Ab
m ax
325.5 328 320.5 323
324
相对生物效价
100% 75% 24% 21%
24%
VitA2 VitA3
鲸醇
二、 性质 （一） 共轭多烯侧链 易被氧化
VitA 紫外线、O2、氧化剂
BP 杂质对照品法 显色剂 三氯化锑
USP 显色剂 磷钼酸 规定斑点颜色和Rf值
三、 含量测定
（一） UV法
立体异构体 氧化产物及光照产物 合成中间体 去氢维生素A（ VitA2） 去水维生素A（ VitA3）
三点校正法 1. 条件： （1）杂质的吸收在310~340nm波
长范围内呈一条直线，且随波 长的增大吸收度减小； （2）物质对光的吸收具有加和性。
必需的 一种活性物质。 人体不能合成维生素。
脂溶性 VitA、D2、D3、 E、K1 等
水溶性 VitB族(B1、B2、B6、B12) VitC、叶酸、烟酸、烟酰胺
VitM
VitPP
一、
维生素A 结构
R : -H -COCH3 -COC15H31
维生素A醇 维生素A醋酸酯 维生素A棕榈酸酯
（一） 为一个具有共轭多烯侧链的 环己烯
f A325(校正) A325 100% A325
A3 2 5校 正
A325
－3%
0
A3 2 5校 正
3%
第一法与第二法的区别
第一法
第二法
测定对象 维生素A醋酸酯 维生素A醇
方法 直接取样，测定 皂化提取，测定
溶剂 环己烷
维生素类药物的分析 new演示精品PPT课件
前维生素D
第三步：按第一法进行含量测定（内标法）
C. 第三法
用第二法时，前 VD峰受杂质干扰
第一步：皂化提取 同第二法得供试品溶液A
第二步：
前维生素D
供 试 品 RP-HPLC 溶 液 A
维生素D 叠 维生素D
前维生素D 峰 分 收集 异辛烷溶解
维生素A及
离 维D 90℃、1.5h
挥干
其他杂质
挥干 正己烷
2. 方法
样 空
品 白
H P O3 HAc
二 氯靛酚 液V样 V空
自身指示终点法
3. 讨论 （1）酸性环境
（2）快速滴定
HPO3-HAc 稳定VitC 2min内
防止其他还原性物质干扰
（3）剩余比色测定
二氯靛酚 Vi tC 测A
（定量过量）
（测剩余染料）
（4）缺点
不稳定 （5）优点
需经常标定 贮存≤一周
HO
H
HO
1
2
10
3
5
4
H
CH2
H
维生素 D2(麦角骨化醇)
19 CH2
H
H
CH3 11 12 13 18 17
20
21 CH3
23
22
24
16
9 14
15
27 CH3 25 CH3
26
8 H
7
维生素D3(胆骨化醇)
6
（二）性质
1.性状 无色针状结晶或白色结晶性粉 末；无臭，无味。
2.溶解性 宜溶于有机溶剂，在植物油中 略溶，在水中不溶。
B. 第二法
有VA及其他杂质干扰
第一步：皂化提取
供试品
加热回流 OH-
第三步：按第一法进行含量测定（内标法）
C. 第三法
用第二法时，前 VD峰受杂质干扰
第一步：皂化提取 同第二法得供试品溶液A
第二步：
前维生素D
供 试 品 RP-HPLC 溶 液 A
维生素D 叠 维生素D
前维生素D 峰 分 收集 异辛烷溶解
维生素A及
离 维D 90℃、1.5h
挥干
其他杂质
挥干 正己烷
2. 方法
样 空
品 白
H P O3 HAc
二 氯靛酚 液V样 V空
自身指示终点法
3. 讨论 （1）酸性环境
（2）快速滴定
HPO3-HAc 稳定VitC 2min内
防止其他还原性物质干扰
（3）剩余比色测定
二氯靛酚 Vi tC 测A
（定量过量）
（测剩余染料）
（4）缺点
不稳定 （5）优点
需经常标定 贮存≤一周
HO
H
HO
1
2
10
3
5
4
H
CH2
H
维生素 D2(麦角骨化醇)
19 CH2
H
H
CH3 11 12 13 18 17
20
21 CH3
23
22
24
16
9 14
15
27 CH3 25 CH3
26
8 H
7
维生素D3(胆骨化醇)
6
（二）性质
1.性状 无色针状结晶或白色结晶性粉 末；无臭，无味。
2.溶解性 宜溶于有机溶剂，在植物油中 略溶，在水中不溶。
B. 第二法
有VA及其他杂质干扰
第一步：皂化提取
供试品
加热回流 OH-
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生育红 （橙红色）
取本品约30mg，加无水
乙醇10ml溶解后，加硝酸2ml， 摇匀，在75℃加热15分钟，溶
液应显橙红色。
（二） 三氯化铁－联吡啶反应
VitE 生 育 酚 [O] △ 对生育醌 Fe
2
KOH
Fe
3
红 色
联吡啶
CH 3 H 3C HO CH 3 O
内标物
As mr f1 ms Ar1 f2 Ar 2 ms
4. 计算含量
维生素D及前维生素D折算成维生
素D的总量（mi）
mi ( f1 Ai1 f2 Ai 2 )ms / As
单位 = 0.025 µg
第二法
适用于有维生素A醇及其它杂
质干扰时
皂化提取 分离净化
对照液 精密称取VitE对照品0.2011g 置棕色具塞锥形瓶中，精密加入内 标液10ml，密塞，振摇使溶解，取 1~3ul注入GC仪，测定，计算 供试液 精密称取供试品0.1998g置棕 色具塞锥形瓶中，精密加入内标液 10ml，密塞，振摇使溶解，取1~3ul 注入GC仪，测定，计算
对照液 A对 0.373 A内 供试液 A样 296513
99m：84. 测定维生素C注射液的含量 时，在操作过程中要加入 丙酮，这是为了 A. 保持维生素C的稳定 B. 增加维生素C的溶解度 C. 使反应完全 D. 加快反应速度 E. 消除注射液中抗氧剂的干扰
98：85. 能发生硫色素特征反应的药物 是 A. 维生素A B. 维生素B1 C. 维生素C D. 维生素E E. 烟酸
正相色谱、内标法
杂质干扰时 1. 色谱条件 色谱柱
硅胶
流动相
内 标
正己烷 –正戊醇（997:3）
邻苯二甲酸二甲酯
2. 系统适应性试验
维生素D3
维生素D3 对照品
光照
△
前维生素D3
反式维生素D3
速甾醇D3
目的 获得待测成分及各种干扰成分色谱峰，
检查分离度是否符合规定
3. 计算校正因子（对照品为维生素D3）
液各5ml，置50ml棕色量瓶中，加正己烷至 刻度，摇匀，作为供试品溶液。照维生素D 测定法（附录Ⅶ K 第一法）测定，即得。
第五节 维生素E
O HO
苯并－二氢吡喃醇
CH3 R2 HO R1 O
*
*
*
名
称
R1
α-生育酚 β-生育酚 γ-生育酚 δ-生育酚
CH3 CH3 H H
R2 CH3 H
相对活性 1.0 0.5
A内 805741
0.368
. . VitE % % .% . .
本品含C31H52O3应为96.0 ~ 102.0%
BP
GC 内标 正三十二烷 R≥1.4
USP GC 内标 十六酸十六醇酯 R≥1.0
JP
4
2Ce
3
对 生育醌
（二） 试剂
硫酸铈滴定液（0.01mol/L） 二苯胺（亮黄→灰紫）
CM （M生育酚= 430.8） T n 0.01 430.8 T 2.154 （m g / m l） 2
例
取本品0.10g，加无水乙醇 5ml溶解后，加二苯胺试液1滴， 用硫酸铈液（0.01mol/L）滴定， 消耗硫酸铈液（0.01mol/L）不 得过 1.0ml。
பைடு நூலகம்
CH3 H
0.2 0.1
生物效价 右旋体
： 消旋体 = 1.4 ：10
（天然品） （合成品）
CH 3 H3C H 3 C CO O CH 3 O CH 3 CH 3 CH 3 CH 3 CH 3
dl－α－生育酚醋酸酯
一、结构与性质 苯环 + 二氢吡喃环 + 饱和烃链
1、易溶于有机溶剂，不溶于水
2、UV 3、酯键
（1）维生素D校正因子（f1）
内标 进样 f1 对照
As / m s f1 Ar / mr
（2）前维生素D折算成维生素D的校
正因子（f2）
N 2，排空气、密塞 对照品 2， 6 二叔丁基对甲酚 通
冷至室温 进样
90 ℃、1.5 h
99：77. 下列药物的碱性溶液，加入 铁氰化钾后，再加正丁醇， 显蓝色荧光的是 A. 维生素A B. 维生素B1 C. 维生素C D. 维生素D E. 维生素E
97：77．既具有酸性又具有还原性的 药物是 A. 维生素A B. 咖啡因 C. 苯巴比妥 D. 氯丙嗪 E. 维生素C
99m：132.维生素C的鉴别反应，常采 用的试剂有 A. 碱性酒石酸铜 B. 硝酸银 C. 碘化铋钾 D. 乙酰丙酮 E. 三氯醋酸和吡咯
易水解
△
VitE 生育酚 醌型化合物
[O]
H orOH
二、 鉴别
（一）硝酸反应
VitE 生 育 酚
75℃15′
HNO3
生 育 红
橙红色
[O ]
CH 3 H 3C O
CH 3 C 16 H 33
强氧化剂
HO CH 3
生育酚
HNO3
CH 3 H 3C O O O CH 3 C 16 H 33
（四） RP - HPLC法（外标法） 测定对象→血清中VitA和VitE 固定相→十八烷基硅烷键合硅胶 流动相→甲醇-水（96 ：4） 检测波长→ 8′前330nm 8′后292nm
W对 稀 释 度 W样 A对 稀释度 样 A样
108．在三氯醋酸或盐酸存在下，经 水解、脱羧、失水后，加入吡 咯即产生蓝色产物的药物应是 A. 氯氮卓 B. 维生素A C. 普鲁卡因 D. 盐酸吗啡 E. 维生素C
维生素EUV图
（四） TLC法
薄层板 展开剂 硅胶G 环己烷 -乙醚（4 ：1）
显色剂
VitE
硫酸（105℃ 5′）
Rf = 0.7
三、特殊杂质
1. 酸度 检查制备过程中引入的游离羧酸，
酸碱滴定法
2. 游离生育酚的检查
（一）原理
利用游离生育酚的还原性， 将硫酸铈还原成硫酸亚铈
生 育 酚 2Ce
（三） 限量 ≤2.15％
VT 限 量% 100% W
1.0 0.002154 限量% 100 % 0.1 2.15%
药典规定 消耗硫酸铈液（0.01mol/L）≤1.0ml
若硫酸铈液浓度不是0.01000mol/L， 应重新计算硫酸铈的消耗量
设：应消耗硫酸铈液≤ V ml 0.01×1.0 ＝实际浓度× V
灵敏度法 维生素D2 Ch.P（2005） 取本品10mg，加90% 【检查】麦角甾醇
乙醇2ml溶解后，加洋地黄皂苷溶液（取
洋地黄皂苷20mg，加90%乙醇2ml，加
热溶解制成）2ml，混合，放置18小时，
不得发生浑浊或沉淀。
四、含量测定
HPLC 药典附录 维生素D测定法 共有三法
第一法
适用于无维生素A醇及其它
迅即变为紫色，最后成绿色。
维生素D3
Ch.P（2005）
【鉴别】（1）取本品约0.5mg，加三氯
甲烷5ml溶解后，加醋酐0.3ml与硫酸
0.1ml振摇，初显黄色，渐变红色，迅
即变为紫色、蓝绿色，最后变为绿色。
2. 与三氯化锑反应 BP
维生素D + 三氯化锑 →橙红色→粉红色 3. 其他显色反应
（二）IR
反相色谱系统
按第一法
第三法
适用于按第二法处理后前维
生素D仍被干扰的样品 第二法净化后样品
对照
维生素D
外标法计算维生素D含量
维生素D2
Ch.P（2005）
【含量测定】 精密称取本品25mg，置100ml
棕色量瓶中，加三甲基戊烷80ml，避免加热
，用超声处理1分钟使溶解，加三甲基戊烷
至刻度，摇匀；精密量取上述溶液与内标溶
第十章 维生素类药物的分析 （三）
第四节 维生素D的分析
CH3 H H CH3 CH3 CH3 H CH3 CH2 HO H H
维生素D2（骨化醇、麦角骨化醇）
CH3
H H CH3
CH3 CH3
CH2 HO H
H
维生素D3（胆骨化醇）
一、结构与性质
1. 溶解性 2. 不稳定性 脂溶性 含多个双健易被氧化，
对酸不稳定
3. 旋光性 4. 显色反应 性状项下比旋度
5. 紫外吸收特征 性状项下吸收系数
二、鉴别试验
（一）显色反应
1. 与醋酐-浓硫酸反应 Ch.P（2005）
维生素D2
Ch.P（2005）
【鉴别】（1）取本品约0.5mg，加三 氯甲烷5ml溶解后，加醋酐0.3ml与硫
酸0.1ml，振摇，初显黄色，渐变红色，
校正因子：
A内 f相 对 A对 W内 W对
A内 A样
W内 W样
A样 A对
A内 A内
W样 W对
实际工作中的计算方法
A对 A内
K1
A样 A内
K2
K 2 W对 稀 释 度 VitE % 100% K 1 W样 稀 释 度
例 内标液
取正三十二烷加正己烷溶解 并稀释成1.0mg/ml溶液
0.01 1.0 V（ml） 硫酸铈实际浓度
例 Ce(SO4)2 = 0.01020mol/L
0.01 1.0 V（ml） 0.98 （ml） 0.01020
四、 含量测定
（一） GC法 1、GC特点 选择性好 灵敏度高 速度快 分离效能好
挥发性低、不 稳定、极性强 →衍生化易受 样品蒸气压限 制