育种实验

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表1 花 粉 生 活 力 观 察 记 载 表
种处 类理
花粉发芽率(或染色后具有生活力的花粉百分率) 时间 重复I 重复Ⅱ 重复Ⅲ 总 计
发 发 发 发 花 未 发 花 未 发 花 未 发 芽 芽 芽 芽 播 检 粉 发 芽 粉 发 芽 粉 发 芽 种 查 率 率 率 率 数 芽 数 数 芽 数 数 芽 数 % % % % 发 芽 法 染 色 法


2.碘-碘化钾染色法

原理: 正常的花粉积累淀粉较多,而不正常的花粉则少。 据此,可用化学物质染色,根据呈色反应来间接 测定花粉的正常与否和花粉生活力的差别。

通常正常花粉用I-KI染色后呈蓝色,而发育不良 畸形花粉则不积累淀粉,当I-KI染色时呈黄褐色。
2.染色法
步骤和方法:

取花粉撒于载玻片上,加一滴蒸馏水,用镊子使 花粉散开,再加一滴I-KI溶液,盖上盖玻片置于 显微镜下观察。
三、方法
(二)花粉生活力试验 经贮存的花粉,在使用之前必须作生活力的测定以鉴 定其质量。 测定花粉生活力的方法主要有三种。


活体萌发法
离体萌发法
染色法
1、花粉发芽法

人为的创造适合于花粉发芽的环境条件,以花粉发芽的情况 来鉴定花粉生活力的强弱。

(1)培养基的制作与接种
一般采用5~20%蔗糖或葡萄糖加1~2%琼脂,溶于蒸馏水中。 加热煮沸即可,将已配制好的培养基保持在40℃温度即不凝 固,用玻璃棒点一点培养基敷在载玻片的凹坑内,然后用头 发(接种针或解剖针)沾以少量花粉。条播(轻轻振动,使 花粉均匀地撒在培养基上),将载玻片放在垫有湿润棉花培 养皿内或倒扣在培养皿上,并贴上标签写明处理、种类、播 种日期,将培养皿放于(20_25℃)的恒温箱中培养。
1、花粉发芽法

(2)观察记数 在显微镜下隔一定时间检查一次(花粉发芽快的经过 几个小时即可观察到已经发芽,慢的需24小时以上) 若发现花粉已发芽时,便按一定方向,就同一视野中 用记数器记录花粉粒总数和发芽数,观察记录3~5个 显微镜视野的数字,求其平均数,即得出花粉发芽百 分率。 花粉发芽的标准,以花粉管伸长超出花粉直径为准。
园艺植物育种学实验
2010.4
实验一
ห้องสมุดไป่ตู้
花粉生活力的测定
一、目的和要求 二、材料及用具 三、方法 四、注意事项 五、作业
一、目的和要求

花粉生活力——在正常条件下花粉在雌蕊上萌发的能力。 花粉生活力测定在杂交工作中很重要,尤其亲本花期不 相同需要从外地采集花粉作父本时,花粉要经过一段较 长时间的贮藏运输过程,因此在杂交前应检验花粉的生 活力,以免应用无生活力的花粉而造成杂交工作的失败。 本实验的主要目的是掌握花粉贮藏和花粉生活力测定的 方法。

二、材料及用具

材料:杏的花粉。 用具:显微镜、盖玻片、载玻片、 凹式载玻片、滴瓶、培养皿、 天平、烧杯、玻璃棒、微波炉

试剂:I-KI溶液、蒸馏水、蔗糖、琼脂等。
三、方法
(一)花粉贮藏 从发育良好的植株上采下将开的花朵、取出花药放 在纸上或培养皿中,放于干燥的室内阴干,令其开裂, 花药裂开后将花粉倒入小玻璃瓶或指形管中,口上塞 以棉花或橡皮塞,贴上写有品种名称的标签。再把花 粉瓶放于干燥器内,使花粉在空气相对湿度较低的条 件下(一般0~40%)保存;为了减少呼吸作用,可以 放在低温(0~4℃)黑暗的地方贮藏。

凡被染色呈蓝色表示具有生活力,呈黄褐色者为 发育不良生活力弱的花粉。
为了确定具有生活力的花粉百分率,要连续观察 3~5个视野,求其平均值,将观察结果填入表内。

四、作业

1.绘出花粉发芽前后形态图。 2.统计几种测定方法花粉发芽率。 3.将发芽法与染色法测定的结果作一比较, 分析其差异原因。
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