标准曲线的绘制吸光度标准曲线绘制

标准曲线的绘制-吸光度标准曲线绘

制

生物化学实验报告ALT与其吸光度的标准曲线绘制

采集样本：广西医科大学口腔医学2016级13班四个组中7组生物化学实验数据采集时间：2016年11月15日2016~2016上学期第十一周周一下午采集人：何洁梅

一、几组ALT与其吸光度的标准曲线数据记录

ALT活力单位A520吴修团1组A520黎丁菱1组A520杨璇璇1组A520谢晓兰2组A520莫雪玲2组A520李文良3组A520文全海4组

00000000

二、各采集样本汇总图

样本1测定得待测血清ALT活力单位为50U/L

样本2测定得待测血清ALT活力单位为

97U/L

样本3测定得待测血清ALT活力单位为

135U/L

样本4测定得待测血清ALT活力单位为

70U/L

样本5测定得待测血清ALT活力单位为

148U/L

样本6测定得待测血清ALT活力单位为

45U/L

样本7测定得待测血清ALT活力单位为

98U/L

四、采集数据处理结果分析

1．数据总结

样本编号测定的ALT活力单位是否大于40U/L正常/非正常

150是非正常

297是非正常

3135是非正常

470是非正常

5148是非正常

645是非正常

798是非正常

平均值92均为“是”均为“非正常”

2.针对数据处理结果的分析

采集的7组数据经标准曲线测量后，得到的ALT活力单位值均大于40，即均为非正常值，综上，认为待测血清中ALT 含量超于正常值。

3.针对源数据的分析

采集的7组数据中样本4、5、6的数据经画图后可基本分布呈过原点的线性关系，符合理论规律，但其他的数据误差较大。另外，比较符合理想标准曲线的4、5、6样本的三个ALT活力单位值也存在较大的出入。

4.经分析，总结可能的误差来源如下

配置丙酮酸标准溶液、底物溶液、磷酸缓冲液的混合溶液时，丙酮酸标准溶液的剂量都很小，容易造成误差。

加入2,4—二硝基苯肼的时间可能有误差，保温的时间，以及加入NaOH 以停止反应的时间都有可能有偏差，容易造成较大。如何用EXCEL绘制标准曲线

Excel是Microsoft offices系统的重要组成，它是界于WORD字处理软件与ACCESS数据库软件之间的电子表格工具，功能十分强大，特别适合于日常工作使用。使用得好，完全比目前所有的检验科办公系统优秀。

现就先介绍一下如何使用Excel绘

制标准曲线。

首先，将数据整理好输入Excel，并选取完成的数据区，并点击图表向导，如下图所示。

点击图表向导后会运行图表向导如下图，先在图表类型中选“XY散点图”，并选了图表类型的“散点图”。

点击“下一步”，出现如下图界面。如是输入是如本例横向列表的就不用更改，如果是纵向列表就改选“列”。

如果发现图不理想，就要仔细察看是否数据区选择有问题，如果有误，可以点击“系列”来更改，如下图。

如果是X值错了就点击它文本框右边的小图标，结果如下图：

出现上图后，如图在表上选取正确的数据区域。然后点击“下一步”出现图表选项界面，如下图，上应调整选项，以满足自己想要的效果。

点击“下一步”，现在一张带标准值的完整散点图就已经完成，如下图。

完成了散点图，现在需要根据数据

进行回归分析，计算回归方程，绘制出标准曲线。其实这很简单，先点击图上的标准值点，然后按右键，点击“添加趋势线”。如下图。

由于本例是线性关系，在类型中选“线性”如下图

点击“确定”，标准曲线就回归并画好了。

标准曲线是画好了，可是我们怎么知道回归后的方程是什么样呢？这了简单，点击趋势线然后按右键，选趋势线格式，如下图：

在显示公式和显示R平方值前点一下，勾上。再点确定。好了，现在公式和相关系数都出来了。如图：呵R的平方达，线性相当好。

可是有时候有的项目是成指数增加的，散点图如下图，

从上图看并不值关，除了最大的一个点外其余的几乎都成了直线。这不难理解，对于而言，10与10000都差不了多少。因此我们平时常使用半对数坐标

纸画图。对于Excel也可以，先点中Y 坐标轴，再按右键，选“坐标轴格式”如下图

将左下方的对数刻度选中，确定。完整的一个半对数标准曲线就做好了。用Excel绘制标准曲线

用Excel绘制标准曲线

将数据整理好输入Excel，并选取完成的数据区，并点击图表向导，如下图：点击图表向导后会运行图表向导如下图，先在图表类型中选“XY散点图”，并选了图表类型的“散点图”。

点击“下一步”，出现如下图界面。如是输入是如本例横向列表的就不用更改，如果是纵向列表就改选“列”：

如果发现图不理想，就要仔细察看是否数据区选择有问题，如果有误，可以点击“系列”来更改，如下图：

如果是X值错了就点击它文本框右边的小图标，结果如下图：

在表上选取正确的数据区域，点击“下一步”，出现图表选项界面如下图，

调整选项，以满足自己想要的效果：点击“下一步”，一张带标准值的完整散点图完成，如下图：

现在要根据数据进行回归分析，计算回归方程，绘制出标准曲线：

先点击图上的标准值点，然后按右键，点击“添加趋势线”。如下图：

本例是线性关系，在类型中选“线性”，如下图：

点击“确定”，标准曲线回归画好：

回归后的方程是什么样呢？点击趋势线然后按右键，选趋势线格式，如下图：

在显示公式和显示R平方值前点一下，勾上。再点确定，公式和相关系数都出来了。如图：

由此标准曲线可得出浓度：切换到“选项”标签页，选择“显示公式”，确定。在图表中出现一个公式，即浓度对吸光度的关系。

在单元格中输入该公式，即可根据该公式计算出样品的浓度。