膜片钳技术的原理
膜片钳技术及其发展概况烟台绿叶
(3)使用的标本种类繁多 从最早的肌细胞(心肌、平滑肌、骨骼肌)、神经元和
内分泌细胞发展到血细胞、肝细胞、耳窝毛细胞、胃壁细胞、 上皮细胞、内皮细胞、免疫细胞、精母细胞等多种细胞;从 急性分散细胞和培养细胞(包括细胞株)发展到组织片(如 脑片、脊髓片)乃至整体动物;从蜗牛、青蛙、蝾螈、爪蟾 卵母细胞发展到昆虫细胞、鸡细胞、大鼠细胞、人细胞等等; 从动物细胞发展到细菌、真菌以及植物细胞。此外,膜片钳 技术还广泛地应用到平面双分子层(Planar bilayer)、脂质 体(Liposome)等人工标本上。
数模/模数转换器 高速、低噪音的Digidata 1440A
pClamp 10数据采集分析软件
PatchMaster采样软件
正置显微镜
组织薄片 盲法膜片钳- 普通解剖显微镜 可视膜片钳- DIC显微镜
IR-DIC显微镜 (Olympus BX51, Nikon FN-1)
显微镜X-Y移动台与支撑平台
(4)研究对象已经不局限于离子通道 从对离子通道(配体门控性、电压门控性、第二信使介导的
离子通道、机械敏感性离子通道以及缝隙连接通道等等)的研究 发展到对离子泵、交换体以及可兴奋细胞的胞吞、胞吐机制的研 究等。
(5)膜片钳电极已经不单单是传统意义上的电信号记录电极 它还作为其它研究方法的工具使用,如用于进行单细胞
1983 年 10 月 , Sakmann 和 Neher 主 编 的 《Single-Channel Recording》一书问世,对当时的膜片钳技术进行了全面、 系统的总结,从此奠定了膜片钳技术的里程碑。
1995年,《Single-Channel Recording》一书再版,增添了 大量膜片钳技术的新内容,几乎当时国际上所有的知名膜 片钳专家都参与了编写,成为目前膜片钳技术研究领域的 最经典著作。
膜片钳技术的基本原理
(一)膜片钳技术的基本原理:膜片钳技术是用尖端直径1~2μm的玻璃微电极吸管与经蛋白酶处理干净的细胞膜接触,通过20~30cm H2O的负压吸引造成电极尖端与细胞膜形成高阻封接(10~100GΩ),使电极尖端下的小块膜片与膜的其它部分在电学上绝缘,并在此基础上固定膜片电位,监测几个μm2膜片上1~3个离子通道活动的方法。
高阻封接的形成:高阻封接形成与否是记录细胞离子通道电流能否成功的前提,是进行膜片钳实验的关键一步。
微电极尖端与细胞膜形成封接的过程,可以采用软件或刺激器发出一个脉冲电压作用于微电极,造成膜两侧电位差发生变化,产生电极电流,再通过示波器或显示屏,观察电极电流幅度的变化来确定封接程度。
在电极未入溶液之前,在显示器或示波器上可见一直线。
当电极入液后,软件或刺激器发出的电脉冲经记录微电极、浴液及参考电极形成回路,1mV的封接电压流径5MΩ的电极阻抗,则会产生0.2nA的电流浮动,随着微电极尖端接近、接触细胞膜,电极电阻则进一步增加,而电流幅度则随之减小,当在显示器或示波器上看到电流方波变为直线时,则形成低阻封接(50MΩ),然后经微电极给予负压(-10~-30cm H2O),即可形成高阻封接。
再将电脉冲调为10mV,调节快、慢电容电流补偿,消除电容电流,就可进行细胞贴附式膜片钳实验,如果在此基础上再次给予负压或电脉冲,使微电极尖端下膜片破裂,则形成全细胞式。
进行高阻封接时,需注意的是:①在微电极未入液之前常施以正压,使电极内有液体从电极尖端流出,防止浴液表面灰尘或溶液中粒子附着于电极尖端,影响高阻封接。
②如果微电极尖端与细胞膜接触后,仍不能形成高阻封接,则电极即不能再用,需重新换一根微电极继续封接。
③电极尖端与细胞膜接触,稍加负压后电流波形变得平坦,此时,如使电极超极化,则有助于加速形成高阻封接。
④电极入液后封接的成功率与入浴液后的时间呈反比,电极内液中的肽类或蛋白质成分也会有碍于封接形成。
上海细胞生物学膜片钳原理
上海细胞生物学膜片钳原理
上海细胞生物学膜片钳是一种用于研究细胞膜的工具。
它的原理是利用微型玻璃针将细胞膜穿过,形成一个微小的孔洞,然后通过电生理技术来研究细胞膜的性质和功能。
膜片钳的制备需要一定的技术和经验。
首先需要制备一根微型玻璃针,然后将其加热并拉伸成一根细长的管状结构。
接着,将这个管状结构用火焰加热,使其尖端变得非常细小,形成一个微型针头。
最后,将这个微型针头与一个真空管连接起来,形成一个膜片钳。
使用膜片钳进行实验时,首先需要将细胞放置在一个含有离子的溶液中,然后将膜片钳放置在细胞膜上。
通过微调膜片钳的位置,可以将细胞膜穿过,形成一个微小的孔洞。
这个孔洞非常小,只有几个纳米大小,但足以让离子通过。
通过电生理技术,可以测量这个孔洞中的离子流动情况。
这样就可以研究细胞膜的性质和功能,比如细胞膜的通透性、离子通道的特性等等。
此外,膜片钳还可以用于研究药物对细胞膜的影响,以及研究细胞膜与其他细胞结构之间的相互作用。
上海细胞生物学膜片钳是一种非常重要的实验工具,它可以帮助科学家们更深入地研究细胞膜的性质和功能,为生物学研究提供了重要的支持。
膜片钳技术的基本原理
膜片钳技术的基本原理膜片钳技术运用微玻管电极(膜片电极或膜片吸管)接触细胞膜,以千兆欧姆[gigaohm seal,1010欧姆(GΩ)]以上的阻抗使之对接,使与电极尖开口处相接的细胞膜小片区域(膜片)与其周围在电学上分隔,在此基础上固定电位,对此膜片上的离子通道的离子电流(pA 级)进行检测记录。
膜片钳技术的原理及应用(综述)Intro:细胞是构成生物体的基本单位。
细胞内和细胞之间的信号传导的重要途径是通过镶嵌在细胞膜上的离子通道蛋白进行的。
1976年,德国的两位细胞生物学家埃尔温. 内尔(Erwin Neher)和贝尔特. 萨克曼(Bert Sakmann)建立了一种以记录通过离子通道的离子电流来反映细胞膜上单一或多数离子通道分子活动的技术,成为膜片钳技术(Patch Clamp)。
这一技术使对细胞电活动的研究精度提高到1pA的电流分辨率,1μm的空间分辨率和10μs的时间分辨率水平,是细胞和分子水平的生理学研究领域的一次革命性突破。
它与基因克隆技术(Gene Cloning)并驾齐驱,推动了生命科学研究的迅速发展。
为此,1991年的诺贝尔医学与生理学奖授予了这两位学者,以表彰他们的突出贡献。
这一能精确描述细胞通道特征的实验方法在问世后的短短十几年时间里,已经在生物学研究领域显示出了非常重要的意义和广阔的应用前景。
一. 膜片钳技术的基本原理膜片钳技术运用微玻管电极(膜片电极或膜片吸管)接触细胞膜,以千兆欧姆[gigaohm seal,1010欧姆(GΩ)]以上的阻抗使之对接,使与电极尖开口处相接的细胞膜小片区域(膜片)与其周围在电学上分隔,在此基础上固定电位,对此膜片上的离子通道的离子电流(pA级)进行检测记录。
(如图1)图1 膜片钳技术原理图Rs是与膜片阻扰相串联的局部串联电阻(或称入路阻扰),Rseal是封接阻抗。
Rs通常为1-5MΩ,若Rseal高达10GΩ以上时成为Ip/I=Rseal/(Rs+Rseal)-1,此Ip可作为在I-V转换器(点线)内的高阻扰反馈电阻(Rf)的电压下降而被检出。
膜片钳技术及其应用
膜片钳技术可以用于研究细胞信号转导过程中离子通道和受体的变 化,了解信号转导的机制。
细胞功能调控的研究
膜片钳技术可以用于研究细胞功能调控的机制,例如细胞兴奋性的 调节和细胞内离子浓度的变化。
04 膜片钳技术的优势与局限 性
膜片钳技术的优势
高灵敏度
细胞无损
膜片钳技术具有高灵敏度,能够检测单 个离子通道的活动,从而提供关于细胞 膜电位和离子通道功能的重要信息。
膜片钳技术可以在保持细胞完整性的 情况下进行实验,不会对细胞造成严 重损伤或干扰细胞的正常功能。
实时监测
膜片钳技术可以对细胞膜电位进行实时 监测,从而了解离子通道的动态变化, 有助于深入理解细胞生理和病理过程。
膜片钳技术的局限性
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实验条件要求高
膜片钳技术需要高精度的实验设备和条件,包括 低温、低噪声和低阻抗等,这增加了实验的难度 和成本。
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膜片钳放大器
微操纵器
细胞培养皿或显 微镜载玻片
电极溶液
细胞内和细胞外 灌流液
用于放大细胞膜电信号, 提高信号的检测灵敏度。
用于精确控制电极的移动 ,以便在细胞膜上定位和 进行膜片钳实验。
用于培养和固定细胞,以 便进行膜片钳实验。
用于填充电极,以保持电 极的湿润和导电性。
用于维持细胞内外环境的 稳定,并排除干扰实验的 物质。
03
在单细胞水平上研究细胞信号转导和离子通道功能,深入了 解细胞生理和病理过程。
膜片钳技术与其他技术的联合应用
结合光学成像技术,利用膜片钳技术对神经元电生理特性进行同时监测和成像,实现多参数的同时测 量。
与基因编辑技术结合,利用膜片钳技术对特定基因表达的离子通道进行功能研究,深入了解基因与离子 通道的关系。
膜片钳技术原理
膜片钳技术原理膜片钳技术是一种常见的实验技术,广泛应用于生物学、药理学、细胞生物学等领域。
它是利用一种特殊的仪器,通过对细胞膜的控制和操作,实现对细胞内外环境的调控和研究。
膜片钳技术的原理主要涉及到膜片形成、膜片钳的构造和工作原理等方面,下面将对这些内容进行详细介绍。
首先,膜片的形成是膜片钳技术的基础。
膜片是由玻璃或石英毛细管制成的,其内外涂有一层导电性金属。
在形成膜片的过程中,需要将毛细管和细胞膜接触,利用毛细管的吸附作用将细胞膜抽附到毛细管上,形成一个微小的膜片。
这一步骤的关键是要保持膜片的完整性和稳定性,以确保后续实验的准确性和可靠性。
其次,膜片钳的构造是实现膜片钳技术的重要工具。
膜片钳通常由微操作系统、压力控制系统、电压控制系统等组成。
微操作系统用于控制膜片的形成和定位,压力控制系统用于控制膜片与细胞膜的接触压力,电压控制系统用于记录和调节膜片与细胞膜之间的电压变化。
这些系统的协同工作,使得膜片钳能够对细胞膜进行高度精准的操作和控制。
最后,膜片钳技术的工作原理是通过对膜片与细胞膜之间的接触和电学特性的测量,实现对细胞内外环境的调控和研究。
在实验中,可以通过改变膜片与细胞膜的接触压力和电压,观察细胞膜的电学特性和通透性的变化,从而研究细胞的离子通道、受体通道等功能。
同时,也可以利用膜片钳技术对细胞内外环境的离子浓度、pH值等进行精准调控,以研究细胞的生理和病理过程。
总之,膜片钳技术是一种重要的细胞生物学实验技术,其原理涉及膜片的形成、膜片钳的构造和工作原理等方面。
通过对这些原理的深入理解和掌握,可以更好地应用膜片钳技术进行细胞内外环境的调控和研究,为生物学、药理学等领域的研究工作提供重要的技术支持。
膜片钳的原理和应用
膜片钳的原理和应用膜片钳的原理膜片钳是一种常见的机械制动器,它的工作原理基于膜片的弹性变形和钳片的夹持作用。
膜片钳由膜片和钳片组成,通过外部力的作用,使膜片产生变形,进而通过钳片的夹持实现制动功能。
膜片钳的主要部件是膜片,膜片通常由弹簧钢或不锈钢材料制成,具有良好的弹性。
当膜片钳受到外部力的作用时,膜片会发生弹性变形,从而产生一定的弹性力,通过这种弹性力的作用,将制动器与被制动器之间产生接触,并通过膜片的变形实现制动。
膜片钳的应用膜片钳由于其结构简单、可靠性高、使用寿命长等特点,被广泛应用于各个领域。
1. 汽车制动系统膜片钳在汽车制动系统中起到至关重要的作用。
汽车制动系统中的制动器通常由膜片钳和摩擦材料组成。
当驾驶员踩下制动踏板时,膜片钳受到踏板力的作用,膜片钳的膜片发生弹性变形,钳片夹持摩擦材料与制动器之间的摩擦面,实现制动效果。
2. 工业机械膜片钳在工业机械中也有广泛的应用。
例如,膜片钳可以用于制动装置,通过膜片的变形实现机械的制动。
此外,膜片钳还可以用于离合器,通过膜片的弹性变形实现传动效果。
3. 制动防抱死系统膜片钳还可以应用于汽车的制动防抱死系统中。
制动防抱死系统通过利用膜片钳的快速反应和可靠的制动效果,实现对车轮的减速和控制,防止车轮抱死,提高行车安全性。
4. 其他领域膜片钳还可以应用于其他领域,如航空航天、医疗设备等。
在航空航天领域,膜片钳可以用于飞机的刹车系统,通过膜片钳的制动作用实现飞机的停止。
在医疗设备中,膜片钳可以用于手术器械的夹持,实现准确和可靠的操作。
总结膜片钳是一种常见的机械制动器,通过膜片的弹性变形和钳片的夹持作用实现制动功能。
膜片钳由于其结构简单、可靠性高、使用寿命长等特点,在汽车制动系统、工业机械、制动防抱死系统以及其他领域都有广泛的应用。
膜片钳的应用使得各个领域的设备和机械能够实现安全、可靠的操作。
膜片钳技术
膜片钳技术1、膜片钳技术原理膜片钳技术是用玻璃微电极吸管把只含1-3个离子通道、面积为几个平方微米的细胞膜通过负压吸引封接起来,由于电极尖端与细胞膜的高阻封接,在电极尖端笼罩下的那片膜事实上与膜的其他部分从电学上隔离,因此,此片膜内开放所产生的电流流进玻璃吸管,用一个极为敏感的电流监视器(膜片钳放大器)测量此电流强度,就代表单一离子通道电流。
膜片钳的基本原理则是利用负反馈电子线路,将微电极尖端所吸附的一个至几个平方微米的细胞膜的电位固定在一定水平上,对通过通道的微小离子电流作动态或静态观察,从而研究其功能。
膜片钳技术实现膜电流固定的关键步骤是在玻璃微电极尖端边缘与细胞膜之间形成高阻密封,其阻抗数值可达10~100 GΩ(此密封电阻是指微电极内与细胞外液之间的电阻)。
由于此阻值如此之高,故基本上可看成绝缘,其上之电流可看成零,形成高阻密封的力主要有氢健、范德华力、盐键等。
此密封不仅电学上近乎绝缘,在机械上也是较牢固的。
又由于玻璃微电极尖端管径很小,其下膜面积仅约1 μm2,在这么小的面积上离子通道数量很少,一般只有一个或几个通道,经这一个或几个通道流出的离子数量相对于整个细胞来讲很少,可以忽略,也就是说电极下的离子电流对整个细胞的静息电位的影响可以忽略,那么,只要保持电极内电位不变,则电极下的一小片细胞膜两侧的电位差就不变,从而实现电位固定。
膜片钳技术的原理图[51]Rs是与膜片抗阻串联的局部串联电阻(或称入路阻抗),Rseal是封接阻抗。
RS通常为1~5MΩ,如果Rseal高达10GΩ以上是成为Ip/I=Rseal/(Rs+Rseal)-1。
此Ip可作为I~V转换器(点线)内的高阻抗负反馈电阻(Rf)的电压下降而被检测出。
实际上这是场效应管运算放大器(A1)的输出中包括着膜电阻成分,这部分将在通过第二级场效应管运算放大器(A2)时被减掉。
本实验采用的是全细胞记录模式。
全细胞记录构型(whole-cell recording)高阻封接形成后,继续以负压抽吸使电极管内细胞膜破裂,电极胞内液直接相通,而与浴槽液绝缘,这种形式称为“全细胞”记录。
广州细胞生物学膜片钳电生理技术原理
广州细胞生物学膜片钳电生理技术原理
膜片钳电生理技术是一种记录单个细胞或亚细胞电生理活动的方法。
其原理是利用玻璃膜片将电极与细胞膜间隔开,形成一个微型细胞质突起,称为膜片钳。
在膜片钳的控制下,能够在缺氧水剂下保存细胞,使得电极能够记录到细胞的电活动信号。
膜片钳技术是通过将精细的电子测量技术应用于生物膜的研究来揭示细胞的电生理活动。
底部的电极通过玻璃杆和吸盘进入细胞,并形成一个不透明的,含有许多离子通道的孔,称为膜片。
这种技术可以通过放置离子通道调节剂在膜片上,从而控制细胞内离子通道的打开或关闭,以观察和解析细胞膜电势以及离子流动的变化和机制。
膜片管电生理技术常用于研究包括细胞膜静息膜电势、兴奋性质和传感器响应等生理过程,还用于研究神经元膜上参与神经递质释放或细胞内导致细胞凋亡的离子通道等多个研究领域。
膜片钳实验与技术
汇报人:
通过施加电压或 药物刺激可以观 察到离子通道的 开放或关闭状态 从而了解离子通 道的电学特性和 药理学特性。
膜片钳实验原理的 应用广泛可用于研 究药物对特定离子 通道的作用机制和 效果以及研究细胞 生理和病理过程中 的离子通道变化。
准备实验器材:包括膜片钳放大器、微电极、细胞、溶液等
制作细胞膜片:使用微操纵器将微电极置于细胞膜表面形成封 接
膜片钳技术的未 来发展方向
神经科学:研究神经元电活动与行为之间的关系 药理学:筛选和验证药物作用靶点及效果 生理学:研究细胞生理功能及信号转导机制 病理学:探究疾病发生发展过程中细胞电生理变化
PRT THREE
膜片钳技术是通 过玻璃微电极记 录细胞膜单一离 子通道活动的技 术。
膜片钳实验原理 基于膜片钳夹持 技术能够将细胞 膜的某一离子通 道单独夹持在玻 璃微电极之间。
膜片钳技术将进一 步应用于研究神经 元功能和药物作用 机制
膜片钳技术有望在 基因治疗和细胞疗 法等领域发挥重要 作用
膜片钳技术将与新 型技术相结合提高 实验效率和精确度
膜片钳技术将为研 究生物电信号和离 子通道提供更深入 的见解
挑战:高精度的测量和控制技术 挑战:细胞类型特异性标记和分离技术 展望:结合新技术实现更高效和准确的膜片钳实验 展望:拓展膜片钳技术在生物医学领域的应用范围
膜片钳技术用于筛 选潜在药物候选物
膜片钳技术用于研 究药物对神经元信 号转导的影响
膜片钳技术用于研 究药物对心血管系动化与智能化:提高实验效率和准确度 新型材料的应用:提高膜片钳技术的稳定性和可靠性 跨学科融合:与其他领域的技术相结合拓展应用范围 标准化与规范化:推动膜片钳技术的普及和推广
PRT FIVE
上海神经生物学脑定位膜片钳原理
上海神经生物学脑定位膜片钳原理膜片钳技术是神经生物学研究中常用的一种电生理技术。
它是通过在神经元膜上形成一个极高电阻的小孔来测量神经元内膜电位变化的技术。
上海神经生物学研究所通过研究和发展,已经发展出了一种高效的脑定位膜片钳技术,可以在研究过程中定位到与特定行为有关的神经元。
一、膜片钳技术的原理神经元膜上存在着大量的离子通道,这些离子通道会使神经元膜的离子流动发生变化,进而产生微弱的电位变化。
膜片钳技术正是利用这种微弱电位变化来测量神经元内膜电位变化的。
通过在神经元膜上形成一个与膜内环境相连的小孔,可以将玻璃电极的窄管放入小孔内,形成一个电容,从而可以进行电位测量。
1. 针头更加精准:上海神经生物学研究所的研究团队精心设计了一种新型的玻璃针头,可以精准地进入脑组织中。
这种新型针头的直径只有几微米,可以准确穿过神经元膜,将玻璃电极放入小孔中,从而实现对神经元膜电位变化的测量。
2. 仪器更加灵敏:上海神经生物学研究所的脑定位膜片钳技术仪器采用了高灵敏度的电子元件,可以提高信号传输的精度和灵敏度,从而更加准确地测量神经元膜电位变化。
3. 测量更加稳定:在进行膜片钳技术测量时,许多因素都可能对电位测量造成干扰,如细胞外离子浓度、温度和机械振动等。
上海神经生物学研究所的脑定位膜片钳技术仪器在设计时考虑了这些干扰因素,并加入了改善稳定性的技术手段,从而能够更加稳定地测量神经元膜电位变化。
上海神经生物学研究所的脑定位膜片钳技术已经被广泛应用于神经生物学研究领域。
膜片钳技术结合了光遗传学技术,在对神经元进行定位的可以改变其内部电位或者激活或抑制其兴奋性,从而探究神经元在不同条件下的活动模式。
这项技术被用于研究神经元与行为的相关性,同时也被用于研究神经元扰动与病理性神经功能障碍等方面的研究。
四、结语上海神经生物学脑定位膜片钳技术具有高精度、高灵敏度和高稳定性的特点,并被广泛应用于神经生物学研究领域。
展望未来,这项技术将会成为神经精神疾病等领域的研究热点,推动神经生物学的发展。
膜片钳技术
膜片钳技术膜片钳技术是一种用于夹持和夹持薄膜材料的高精度工具。
它被广泛应用于各种领域,包括医疗、电子、航空航天、光学等。
本文将介绍膜片钳技术的原理、应用、优势和未来发展方向。
膜片钳技术的原理是利用薄膜的柔性和弹性特性,将其夹持在两个夹持片之间,通过施加适当的压力来固定和控制膜片。
它的结构简单,通常由两个平行的金属夹持片组成,夹持片之间有一层薄膜,可以是金属、塑料或橡胶材料。
膜片钳技术在医疗领域中广泛应用于微创手术。
它可以用于夹持和处理各种组织样本,如血管、肾脏、肺部等。
膜片钳可以通过精确控制夹持力来保护脆弱的组织,减少手术风险和创伤。
此外,膜片钳还可以用于制作微小的缝线和缝合器,用于手术缝合和内脏重建。
在电子领域,膜片钳技术用于处理和夹持微小的电子元件。
由于膜片钳的夹持力可调节且均匀,它可以用于精确地定位和安装电子组件,确保元件之间的准确对齐和联系。
此外,膜片钳还可以用于处理柔性电路板和柔性显示屏等薄膜电子产品,保证其完整性和性能。
在航空航天领域,膜片钳技术用于夹持和固定航天器表面的绝热膜。
夹持膜片的合适压力可以确保膜片与表面的紧密贴合,提供良好的隔热性能,减少航天器受到的热能损失。
此外,膜片钳还可以用于夹持航天器的其他部件和设备,确保它们在运行过程中的稳定性和可靠性。
在光学领域,膜片钳技术用于夹持和夹持光学元件,如透镜、棱镜和滤光片。
膜片钳的夹持力和表面平整度可以确保光学元件的精确定位和对准度,从而提供高质量的光学性能和成像效果。
此外,膜片钳还可以用于夹持光学材料的样本,如光学薄膜和光学纤维,用于实验和测试。
膜片钳技术具有许多优势。
首先,它具有高精度和可调节的夹持力,可以适应不同材料和应用的要求。
其次,膜片钳结构简单,易于制造和操作。
此外,膜片钳具有快速响应和高灵敏度的特性,可以快速调整和控制夹持力。
最重要的是,膜片钳技术可以保护薄膜材料的完整性,减少损伤和污染的风险。
未来,膜片钳技术有许多发展方向。
膜片钳技术及其在神经科学研究中的应用
膜片钳技术及其在神经科学研究中的应用膜片钳技术是一种在神经科学研究中广泛应用的技术,它可以用来记录和操纵神经元的电活动,为研究神经系统的功能和疾病提供重要的工具。
本文将介绍膜片钳技术的原理和应用,并探讨其在神经科学研究中的重要性。
膜片钳技术是一种通过在神经元的细胞膜上形成一个微小的孔洞,并利用微电极记录神经元内外的电位差的方法。
这种技术可以精确地记录神经元的动作电位,从而了解神经元的兴奋性和抑制性。
膜片钳技术的原理基于电生理学的基本原理,即神经元的电活动是由离子通道的开关控制的。
通过在神经元膜上形成一个微小的孔洞,可以通过微电极记录到神经元内外的电位差,从而了解离子通道的开关状态和神经元的电活动。
膜片钳技术在神经科学研究中有广泛的应用。
首先,它可以用来研究神经元的膜电位和动作电位。
研究人员可以通过在神经元膜上形成一个微小的孔洞,并利用膜片钳记录到神经元内外的电位差,从而了解神经元的电活动。
这对于研究神经元的兴奋性和抑制性非常重要,有助于理解神经元的工作原理和信息传递过程。
膜片钳技术还可以用来研究离子通道的功能。
离子通道是神经元膜上的蛋白质通道,它们控制着离子在神经元膜上的通透性,从而调节神经元的电活动。
通过利用膜片钳技术,研究人员可以记录到离子通道的电流,并分析离子通道的开关状态和功能特性。
这对于研究离子通道的结构和功能非常重要,有助于揭示离子通道与神经系统功能和疾病之间的关系。
膜片钳技术还可以用来研究突触传递和突触可塑性。
突触是神经元之间的连接点,通过突触传递神经信号。
膜片钳技术可以用来记录到突触传递的电位变化,并研究突触的功能特性和可塑性。
这对于理解神经系统的信息传递和学习记忆等高级功能非常重要。
在神经科学研究中,膜片钳技术的应用还包括单细胞蛋白质表达、药物筛选和基因编辑等方面。
通过将膜片钳技术与其他技术结合,研究人员可以进一步探索神经系统的功能和疾病机制,为神经科学研究提供更加全面和深入的理解。
膜片钳技术及应用
膜片钳技术及应用膜片钳技术及应用是一种常见的力学装置,由薄膜片、夹持手柄和支撑结构组成。
膜片钳可用于夹持和固定物体,并且在广泛的领域中有着重要的应用。
下面将对膜片钳的技术原理和应用领域进行详细介绍。
膜片钳的技术原理主要基于材料的力学性质。
一般情况下,膜片钳采用弹性薄膜片作为夹持物体的夹持部分。
当施加外力使薄膜片发生形变时,薄膜片会产生力与形变量成正比的特性,这种力被称为弹性力。
通过调整薄膜片的形变程度和位置,可以达到对不同物体的夹持和固定的目的。
膜片钳的应用领域非常广泛。
以下是一些常见的应用领域:1. 医疗行业:膜片钳被广泛用于医疗器械的设计和制造。
例如,在手术中,膜片钳可以用于夹持和固定组织、血管和器官,以便医生进行手术操作。
膜片钳的特点是夹持力均匀,不会损伤组织和血管。
2. 实验室研究:膜片钳在实验室研究中也有广泛的应用。
例如,在细胞学研究中,膜片钳可以用于夹持、拉伸和操纵细胞,以研究细胞的力学特性和细胞间的相互作用。
此外,膜片钳还可以用于微流体实验中的液滴操纵和胶体粒子的固定。
3. 微机电系统(MEMS):膜片钳是制作微机电系统中常用的工具。
在MEMS 器件制造过程中,需要对微米级物体进行精确操纵和固定。
膜片钳结构简单,加工工艺成熟,可以实现对微米级物体的夹持和固定。
4. 机械制造:膜片钳在机械制造过程中也有重要的应用。
例如,在精密加工中,膜片钳可以用于夹持和固定零件,以确保加工精度。
另外,膜片钳还可以用于装配过程中的夹持和定位。
总的来说,膜片钳技术及其应用在医疗、实验室研究、微机电系统和机械制造等领域起到了重要的作用。
膜片钳具有结构简单、操作方便、夹持力均匀等特点,使其成为一种广泛使用的力学装置。
随着科技的不断发展,膜片钳的应用领域还将不断扩大,为各个领域的科研和应用带来更多的便利和可能性。
膜片钳技术原理及相关基本知识
膜片钳技术可以用于研究内分泌系统的电生理特性,了解激素分泌的 调节机制。
其他领域的应用
肿瘤学研究
膜片钳技术可以用于研究肿瘤细胞的 电生理特性,了解肿瘤的发生和发展 机制。
免疫学研究
膜片钳技术可以用于研究免疫细胞的 电生理特性,了解免疫反应的调节机 制。
THANKS
感谢观看
膜片钳技术可以用于药物筛选, 快速筛选出具有潜在治疗作用的 药物。
膜片钳技术可以用于研究药物对 离子通道的影响,了解药物的副 作用和不良反应。
生理学领域的应用
心血管系统研究
膜片钳技术可以用于研究心血管系统的电生理特性,了解心脏和血 管的电活动和功能。
呼吸系统研究
膜片钳技术可以用于研究呼吸系统的电生理特性,了解呼吸肌的电 活动和功能。
膜片钳技术的应用领域
生理学研究
研究细胞膜离子通道的电生理 特征和功能,揭示生理状态下
细胞膜电活动的规律。
药理学研究
研究药物对离子通道的作用机 制和效果,为新药研发提供实 验依据。
神经科学研究
研究神经元和神经网络的电活 动和信息传递机制,揭示神经 系统的工作原理。
疾病机制研究
研究疾病状态下细胞膜离子通 道的异常变化,为疾病诊断和
数据采集
使用膜片钳系统记录细胞膜 电位变化,通过放大器和记 录器获取数据。
数据筛选
排除异常或噪声数据,确保 数据质量。
数据转换
将原始数据转换为适合分析 的格式,如电压值或电流值 。
数据分析方法
统计分析
对数据进行统计分析,如平均值、标准差、相 关性等。
频谱分析
对数据进行频谱分析,以了解信号的频率成分。
膜片钳技术适用于多种细胞 类型,包括神经元、肌肉细 胞、上皮细胞等,具有广泛 的应用范围。
膜片钳重点技术原理与基本操作
膜片钳技术原理与基本操作1976 年Neher 和Sakmann 建立了膜片钳技术(Patch clamp technique),这是一种以记录通过离子通道旳离子电流来反映细胞膜上单一旳或多数旳离子通道分子活动旳技术。
1981 年Hamill, Neher 等人又对膜片钳实验措施和电子线路进行了改善,形成了当今广泛应用旳膜片钳实验技术。
该技术可应用于许多细胞系旳研究,也是目前唯一可记录一种蛋白分子电活动旳措施,膜片钳技术和克隆技术并驾齐驱给生命科学研究带来了巨大旳迈进动力,这一伟大旳奉献,使Neher 和Sakmann 获得1991 年诺贝尔医学与生理学奖。
一、膜片钳技术旳基本原理用一种尖端直径在1.5~3.0μm 旳玻璃微电极接触细胞膜表面,通过负压吸引使电极尖端与细胞膜之间形成千兆欧姆以上旳阻抗封接,此时电极尖端下旳细胞膜社区域(膜片,patch)与其周边在电学上分隔,在此基本上固定(钳制,Clamp)电位,对此膜片上旳离子通道旳离子电流进行监测及记录。
基本旳仪器设备有膜片钳放大器、计算机、倒置显微镜、示波器、双步电极拉制器、三轴液压显微操纵器、屏蔽防震实验台、恒温标本灌流槽、玻璃微电极研磨器。
膜片钳放大器是离子单通道测定和全细胞记录旳核心设备,具有高敏捷度、高增益、低噪音及高输入阻抗。
膜片钳放大器是通过单根电极对细胞或膜片进行钳制旳同步记录离子流经通道所产生旳电流。
膜片钳放大器旳核心部分是以运算放大器和反馈电阻构成旳电流-电压(I-V)转换器,运算放大器作为电压控制器自动控制,使钳制电位稳定在一定旳水平上。
二、操作环节1.膜片钳微电极制作(1) 玻璃毛细管旳选择:有二种玻璃类型,一是软质旳苏打玻璃,另一是硬质旳硼硅酸盐玻璃。
软质玻璃在拉制和抛光成弹头形尖端时锥度陡直,可减少电极旳串联电阻,对膜片钳旳全细胞记录模式很有利;硬质玻璃旳噪声低,在单通道记录时多选用。
玻璃毛细管旳直径应符合电极支架旳规格,一般外部直径在1.1~1.2mm。
膜片钳技术及应用
膜片钳技术的应用领域
神经科学
研究神经元离子通道与动作电 位的产生和传播,以及药物对
神经元功能影响。
心血管
研究心脏离子通道与心律失常 的关系,以及抗心律失常药物 的作用机制。
药理学
研究药物对离子通道的作用机 制和效果,以及新药的开发和 筛选。
其他领域
膜片钳技术还可应用于内分泌 、免疫等领域,研究相关细胞
利用膜片钳技术,可以研究神经元在长期和短期内的电生理变化,了 解学习、记忆等认知过程的神经机制。
药物筛选与开发中的应用
药物作用机制的研究
膜片钳技术可以用于研究药物对离子通道或受体电流的影响,从 而揭示药物的作用机制。
药物筛选
通过膜片钳技术,可以在细胞或组织水平上快速筛选出具有特定 药理作用的药物候选物。
物或其他因素对细胞膜功能的影响。
03 膜片钳技术的应用实例
神经科学研究中的应用
神经元电活动的记录
膜片钳技术可以用来记录单个神经元在静息状态和刺激下的膜电位 变化,从而研究神经元的兴奋性和电生理特性。
突触传递的研究
通过膜片钳技术,可以记录突触后电位,研究神经递质释放、受体 激活和信号转导等过程。
神经可塑性的研究
在医学诊断与治疗中的应用
疾病诊断
膜片钳技术可用于检测细胞膜离子通道的异常变化,从而对某些 疾病进行早期诊断,如癌症、神经退行性疾病等。
药物研发
通过膜片钳技术可以研究药物对离子通道的作用机制,为新药研发 提供有力支持。
个体化治疗
根据患者的离子通道基因变异情况,膜片钳技术可以为个体化治疗 提供精准的用药建议。
高通量与高灵敏度
通过改进膜片钳技术的设计和材料,有望实现高通量和高灵敏度的检测, 从而能够同时记录多个细胞或同一细胞的不同活动,提高实验的效率和 精度。
连云港细胞生物学膜片钳电生理技术原理
连云港细胞生物学膜片钳电生理技术原理
一、连云港细胞生物学膜片钳电生理技术原理
1、细胞膜片钳技术是什么?
细胞膜片钳技术是一种把细胞活化的电化学过程与精细的测量技术结合在一起的研究手段。
它通过将一个正确安装的细胞膜片放入钳子口中,形成一个细胞膜片钳电极,结合试剂盒控制系统,使用电压调节器控制可以实现对细胞的膜片上的电流的测量、检测,从而验证细胞是否处于正常状态,或受到外部刺激发挥出活性,从而实现对细胞分子因子药物机理及介导过程的研究,为药物研究提供决定性的技术支持。
2、连云港细胞生物学膜片钳电生理技术原理
细胞膜片钳技术的实验过程主要包括以下几个步骤:
(1)细胞收集行为,从细胞悬液中筛选细胞,收集足够数量的细胞。
(2)细胞移植技术,将收集到的细胞悬液样本移植到已经准备好的试管或培养皿中,使其均匀地排列出来,以便进行后续的细胞膜片钳实验。
(3)细胞膜片钳测定。
具体过程包括将细胞悬液中的细胞膜片夹入电流源、控制器和放大器中,并用测量仪测量膜片固定状态下的电流,从而获得细胞动态变化期间的电流值,从而确定细胞是否受到外部刺激的影响。
(4)细胞数据分析,膜片钳测得的电流值,需要由相应的统计
软件分析出结论。
3、连云港细胞生物学膜片钳电生理技术的应用
细胞膜片钳技术主要应用于药物研究领域:可以用来研究药物机制,可以通过测定药物刺激不同的细胞膜电流,以判断药物作用于细胞的体外机制;可以用来测定细胞的膜片电位,从而判断细胞的状态及受到刺激后的电位变化;可以用来研究药物在体内的机制,可以测定药物对细胞内外条件有影响时的电位变化。
此外,细胞膜片钳技术还可以用于生物传感器的研发,在药物筛选、水质分析等方面也有重要应用。
上海细胞生物学膜片钳原理
上海细胞生物学膜片钳原理
1. 细胞生物学膜片钳原理
细胞生物学膜片钳是一种用于分子生物学实验的工具,可以将细胞和细胞内的物质隔离开来,以便进行细胞物理和分子生物学研究。
这种工具有助于科学家们探索细胞内分子的结构和功能。
膜片钳是一种特殊的工具,可以使用紫外线或电流来剥离细胞内的分子物质。
它由一个有两个牙齿的夹头、一个柔软的膜片和一个螺丝调节器组成。
一般情况下,膜片被放置在阳极上,紫外线或电流被照射到细胞上,使膜片中的分子物质被剥离。
然后,夹头被用来将细胞样品拉到导轨上,膜片被分离,并将细胞内的物质提取到容器中。
细胞生物学膜片钳是一种非常有用的分子生物学工具,可以用于研究细胞内分子的结构和功能。
它不仅可以提取细胞内的物质,而且可以进行定量分析,以便研究员们更好地了解细胞内分子的结构和功能。
同时,它还可以用于制备染色质模板,以便进行更详细的细胞生物学研究。
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嘉兴全自动膜片钳电生理技术原理
嘉兴全自动膜片钳电生理技术原理嘉兴全自动膜片钳电生理技术原理一、前言嘉兴全自动膜片钳电生理技术是一种用于研究神经元细胞膜离子通道的方法,通过在细胞膜上形成一个微小的孔洞(称为“膜片”),可以记录细胞内外离子流动的情况,从而研究离子通道的特性和功能。
本文将详细介绍嘉兴全自动膜片钳电生理技术的原理。
二、什么是膜片钳技术膜片钳技术是一种用于记录单个神经元细胞内外离子流动情况的方法。
这种方法首先需要将一个玻璃微管与一个微量注射器连接起来,然后将玻璃微管插入到神经元表面,然后使用微量注射器向玻璃微管中注入一定量的盐水溶液,使得神经元表面形成一个小孔洞(称为“膜片”)。
接下来,使用电极对这个小孔进行刺激,并记录刺激引起的电压变化。
这样就可以了解神经元内外离子流动的情况,从而研究离子通道的特性和功能。
三、嘉兴全自动膜片钳电生理技术的原理嘉兴全自动膜片钳电生理技术是一种自动化的膜片钳技术,可以大大提高实验效率和减少误差。
其主要原理如下:1. 整个系统由多个部分组成嘉兴全自动膜片钳电生理技术系统由多个部分组成,包括微量注射器、玻璃微管、电极、放大器、数据采集卡等。
这些部分协同工作,完成对神经元细胞内外离子流动情况的记录和分析。
2. 玻璃微管制备玻璃微管是制备膜片的关键部件。
首先需要选择适当的玻璃毛细管,并使用火焰加热将其拉长成一根细丝。
然后使用微操纵仪将细丝切割成适当长度,并在一端形成一个小孔洞(称为“火磨孔”)。
最后使用吸管将溶液注入玻璃微管中。
3. 细胞培养在进行实验之前,需要对神经元进行培养。
首先需要将神经元分离出来,并在含有适当营养物质的培养基中进行培养。
在培养过程中,需要控制温度、湿度和CO2浓度等因素,以保证细胞的正常生长。
4. 形成膜片形成膜片是嘉兴全自动膜片钳电生理技术的关键步骤。
首先需要将玻璃微管插入到神经元表面,并使用微量注射器向其中注入一定量的盐水溶液。
然后使用微操纵仪将玻璃微管移动,使其与神经元表面相接触,并将玻璃微管从神经元表面上快速拔出,形成一个小孔洞(称为“膜片”)。
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膜片钳技术的原理及应用(综述)
Intro:
细胞是构成生物体的基本单位。
细胞内和细胞之间的信号传导的重要途径是通过镶嵌在细胞膜上的离子通道蛋白进行的。
1976年,德国的两位细胞生物学家埃尔温. 内尔(Er win Neher)和贝尔特. 萨克曼(Bert Sakmann)建立了一种以记录通过离子通道的离子电流来反映细胞膜上单一或多数离子通道分子活动的技术,成为膜片钳技术(Patch Clamp)。
这一技术使对细胞电活动的研究精度提高到1pA的电流分辨率,1μm的空间分辨率和10μs的时间分辨率水平,是细胞和分子水平的生理学研究领域的一次革命性突破。
它与基因克隆技术(Gene Cloning)并驾齐驱,推动了生命科学研究的迅速发展。
为此,1991年的诺贝尔医学与生理学奖授予了这两位学者,以表彰他们的突出贡献。
这一能精确描述细胞通道特征的实验方法在问世后的短短十几年时间里,已经在生物学研究领域显示出了非常重要的意义和广阔的应用前景。
一. 膜片钳技术的基本原理
膜片钳技术运用微玻管电极(膜片电极或膜片吸管)接触细胞膜,以千兆欧姆[gigaoh m seal,1010欧姆(GΩ)]以上的阻抗使之对接,使与电极尖开口处相接的细胞膜小片区域(膜片)与其周围在电学上分隔,在此基础上固定电位,对此膜片上的离子通道的离子电流(pA级)进行检测记录。
(如图1)
图1 膜片钳技术原理图
Rs是与膜片阻扰相串联的局部串联电阻(或称入路阻扰),Rseal是封接阻抗。
Rs通常为1-5MΩ,若Rseal高达1 0GΩ以上时成为Ip/I=Rseal/(Rs+Rseal)-1,此Ip可作为在I-V转换器(点线)内的高阻扰反馈电阻(Rf)的电压下降而被检出。
实际上这时场效应管运算放大器(A1)的输出中包括着膜电阻成分,这部分将在通过第二级场管效应运算放大器(A2)时被减掉。
用场效应管运算放大器(图1-A1)构成的I-V转换器[converter,即膜片钳放大器的前级探头(Head stage)]是整个测量回路的核心部分。
在场效应运算放大器的正负输入端子为等电位。
向正输入端子施加指令电位(Command Voltage,V CMD)时,由于短路负端子和膜片都可等电位地达到钳制的目的,当膜片微电极尖端与膜片之间形成10 GΩ以上封接时,其间的分流电流达到最小,横跨膜片的电流(I)可全部作为来自膜片电极的记录电流(Ip)而被测量出来。
(如图1)
二. 膜片钳技术的各种模式
图2是表示膜片钳技术各种模式(mode)的示意图。
首先建立的单通道记录法(Singl e Channel Recording)是细胞吸附模式(Cell-attached Mode),其后又建立了膜内面向外(Inside-out)和膜外面向外(Outside-out)的模式。
后来又建立了开放的细胞吸附式膜内面向外(Open cell-attached inside-out mode)和穿孔囊泡膜外面向外(Perforated vesicle out side-out mode)模式。
全细胞记录法是在常规方法的基础上附加穿孔膜片(perforated patc h mode)的模式。
图2 膜片钳技术的各种模式
1. 单通道记录法-细胞吸附模式(Cell-attached Mode)
微电极在显微镜下贴近细胞后,给微电极施加一负压,形成高阻抗封接。
此时可看到背景噪音明显减少,通常选取电极下仅有一个通道的膜片进行分析,即单通道记录,以利于不失真的观察一个通道的活动状态。
该方法的优点是对细胞膜结构和调制系统干扰最小,能准确反映通道的活动状态并对此进行客观分析。
但缺点是电流小,分辨率地,对技术要求高,难度较大,且工作量大而成功率又较低。
2. 全细胞记录法
在高阻抗封接做好后,再给一个很小的负压,将电极覆盖的膜吸破,使电极内与整个细胞内相通,用这个方法可记录进出整个细胞的电流。
该方法的优点是电流大,信噪比好,既可以做电流钳制又可以做电压钳制,且可以改变细胞内容物。
但此法只能用于直径小于3μ的细胞,且仅能观察膜电流的变化,不能分析变化的产生机制。
3. 外面向外(Outside-out),内面向外(Inside-out)模式
这两种技术分别是在细胞吸附式和全细胞记录的基础上改进而成,优点是可以分别观察化学因素对细胞膜内侧面和外侧面结构的影响。
三. 膜片钳技术在植物生理方面的应用
1. 用膜片钳技术测定植物原生质体膜电位
原生质体是研究植物细胞膜特性的适宜材料。
由于对原生质体不必考虑细胞比的自由空间等因素,故更便于定量分析膜调节的各种细胞代谢活动。
如H+,矿质离子,物质流及植物激素的运输和作用方式等。
这类研究的一个重要参数就是膜电位。
常规的植物细胞膜电位测量方法是插入法。
该方法是将微电极插入细胞进行测量,故容易使细胞造成较大的损伤,尤其是没有细胞壁保护的原生质体更是如此。
而且微电极边缘与伤口不能严密封接,导致较大的漏电流产生,易使膜电位去极化,影响测量结果。
所以为了提高可靠性,此法只能用于直径达的植物细胞。
而高等植物细胞直径都较小,故很难获得可靠的结果。
用膜片钳技术的全细胞法就可以解决这一难题。
如前文中的原理所述,该方法与插入法相比对细胞的伤害小,只限于管口范围内(管口直径为1-2μm)。
而且由于高阻封接,漏电流很小,所以测得的结果要可靠得多。
例如,用膜片钳技术测定烟草或小麦的原生质体膜电位时,将直径为1.5-1.8mm,中央带有纤维的玻璃毛细管拉制成2-3cm长,尖端直径1-2μm的玻璃微吸管,并作热抛光。
用时注入充灌液(140mmol/L KCl,2mmol/LMgCl2,1mmol/LCaCl2,10mmol/L HEPES-KOH,11 mmol/L EGTA-KOH, pH5.2),微吸管电阻4.3MΩ(0.03MΩ,n=100),封接电阻(0.06M Ω,n=100)。
微吸管和压力调节装置固定在显微操纵器上,吸管中Ag/AgCl2电极与BMA -7101双路微电极放大器连接。
测量时,先加一负压,使微吸管吸牢原生质体,再加一脉动负压吸破质膜随即读数。
以拟南芥A rabidopsis thaliana Columbia根为材料,利用膜片钳技术测定其根细胞原生质体质膜内向K+电流,并对N a+对其K+电流的影响进行的研究发现,N a+可明显抑制拟南芥根细胞原生质体的内向K+电流;外施Ca2+可缓解N a+对内向K+电流的抑制。
说明Ca2+参与了质膜上K+通道对K+,Na+的选择性吸收的调节,从而使植物适应盐胁迫。
2. 用膜片钳技术研究植物细胞质膜的离子通道
离子通道是生物膜上由蛋白质大分子组成的孔道,它属于膜蛋白分类中的B 型蛋白质,通常由几个跨膜的大亲水区构成,可为化学或电学方式激活或抑制,从而控制离子通过膜的
顺势流动,在跨膜离子梯度的形成和维持以及信号转导等生理过程中起着非常重要的作用。
自从在蚕豆保卫细胞膜上发现植物离子通道以来,人们对植物细胞乃至作为细胞器的液泡膜上离子通道的认识迅速深入。
用膜片钳技术研究蚕豆保卫细胞质膜上的钾离子通道时发现,在一部分细胞的质膜上存在有高通导性的阳离子通道。
无论在全细胞记录法还是但离子通道记录水平都得到了类似结果。
全细胞记录法表明这些高通导性的阳离子通道为钾离子通道。
在膜电位为-180mV 时,通过具有高通道性阳离子通道的保卫细胞整个质膜的内向钾电流约为1.5-2.5nA,而通过一般保卫细胞整个质膜的内向钾电流约为0.3-0.5nA。
但离子通道记录显示,一些分离膜片上存在高通导性的内向阳离子通道。
当膜电位为-118mV时,该内向阳离子通道的通导性约为一般内向钾离子通道的通导性的5倍。
这些具有高通导性阳离子通道的特殊保卫细胞的存在可能与逆境条件下气孔的快速效应机制有关。
3. 用膜片钳技术研究高等植物液泡离子通道
液泡是成熟植物细胞和许多真菌、藻类(原核细胞除外) 的重要组成部分。
中央大液泡是植物的贮存库,占细胞总体积的90 % 以上。
膜片钳技术的研究表明,许多离子和代谢物通过离子通道和离子泵跨液泡膜运送。
Pantoja 等应用膜片钳技术在景天科酸代谢植物和甜菜液泡上发现了苹果酸渗透的液
泡阴离子通道, 此后,在拟南芥液泡上也发现了该通道。
它具有强烈的内向整流性质,是一种慢激活的通道;只有在负的生理膜电位时才能被激活;内液中的Cl -可以降低开放几率,从而抑制通道电流,但这并不影响单通道的电导;值得注意的是, 外液中Ca2 + 的浓度和ATP 都不影响VMAL 通道。
通道对于MAL -具有极高的选择性, 此外,拟南芥中,其它二价有机阴离子如琥珀酸离子和延胡索酸离子也具有与MAL -相当的通透能力,而草酸乙酰离子的通透能力相对较弱;在甜菜液泡上,也有文献报道称NO -、Ac -和H2PO 4-能够部分通过该通道。
VMAL 通道是使MAL -被吸收而进入液泡内的一种途径,但它却不能通过此通道从液泡中流出, 后者采取的途径还有待于进一步研究。
随着膜片钳及其它相关技术地发展,。