微生物菌种选育
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主要从事农业、遗传学、应用微生物、免疫学、细胞生 物学、工业微生物学、菌种保藏方法、医学微生物学、分 子生物学、植物病理学、普通微生物学、分类学、食品科 学等的研究。该中心保藏有藻类111株，细菌和放线菌 16865株，细胞和杂合细胞4300株，丝状真菌和酵母46000株， 植物组织79株，种子600株，原生动物1800株，动物病毒、 衣原体和病原体2189株，植物病毒1563种。另外，该中心 还提供菌种的分离、鉴定及保藏服务。该中心保藏的菌种 可出售
株，苏云金杆菌模式菌株等细菌、食用菌等大型真菌、林 木病原菌、菌根菌、病虫生防菌、木腐菌、病毒和植原体 类等。 中国工业微生物菌种保藏管理中心:保藏各种工业微生物菌种 资源包括：细菌、放线菌、酵母菌、丝状真菌和大型真菌 。 中国医学细菌保藏管理中心: 兽医微生物菌种保藏管理中心:
美国典型菌种保藏中心 (American Type Culture Collection, ATCC）
三、菌种分离思路
1：新菌种的分离是要从混杂的各类微生物中依照生产的要 求、菌种的特性，采用各种筛选方法，快速、准确地把所 需要的菌种挑选出来。
2:实验室或生产用菌种若不慎污染了杂菌，也必须重新进行 分离纯化。
3：有了优良的菌种，还要有合适的工艺条件和合理先进的 设备与之配合。
8、几种微生物纯培养分离方法的比较
1）固体稀释平皿法： 即可定性,又可定量,用途广泛;
2）平皿划线分离法： 方法简便,多用于分离细菌;
3)组织分离法: 高等真菌及植物病原菌。
4）单细胞挑取法： 局限于专业化的科学研究；
5）利用选择培养基法： 适用于分离某些生理类型较特殊的微生物。
二、菌种的来源
1、根据资料直接向有科研单位、高等院校、工 厂或菌种保藏部门索取或购买；
7、其他方法
将待分离的样品进行适当处理，以消除 不希望分离到的微生物。例如，想分离得到 芽孢细菌，可在倒平皿前将样品用高温处理 一段时间，以破坏所有的或大部分的非芽孢 细菌，这样分离得到的菌落大多是芽孢细菌
有些病原菌可先将其接种至敏感动物，感染后， 宿主的某些组织可能含有该种微生物，这样较易得
对一些生理类型比较特殊的微生物，为了提高 分离的机率，往往在涂布分离前先进行富集培养， 其目的是提供一个特别设计的培养环境，以帮助所 需的特殊生理类型的微生物的生长，同时抑制其他 类型微生物生长
普通微生物菌种保藏管理中心:CGMCC收集国内外的微生物 资源，妥善保存,在保证生物安全和保护知识产权的前提下，为 第三者能够自由地利用各种微生物材料提供服务，最大限度的 实现微生物资源的保护、共享和持续利用
中国病毒资源与信息中心:从事普通病毒保藏与分 类鉴定与研究的专业机构。。 中国林业微生物菌种保藏管理中心：保藏微生物菌株10700余
2、从大自然中分离筛选新的微生物菌种。
国内外主要菌种保藏机构
中国典型培养物保藏中心(China Center for Type Culture Collection, CCTCC):保藏的微生物包括细菌、放线菌、酵母菌、 真菌、单细胞藻类、人和动物细胞系、转基因细胞、杂交瘤、 原生动物，地衣，植物组织培养、植、单细胞挑取法
从待分离的材料中挑取一个细胞来培养，从而 获得纯培养。具体方法是将显微镜挑取器装置在显 微镜上，把一滴细菌悬液置于载玻片上，用安装在 显微镜挑取器上的极细的毛细吸管，在显微镜下对 准某一个细胞后挑取，再接种于培养基上培养。此 法需要非常熟练的操作人员，多限于高度专业化的 科学研究中采用。
2、涂布分离法
将待分离的材料作Байду номын сангаас列的稀释(如1:10、 1:100、1:1000、1: 10000……)，然后分别取 不同稀释度溶液(0.1～１ml)于装有培养基的 平板上。用玻璃刮子，在培养基表面涂布，倒 置，保温培养一定时间即可出现菌落。
3、平板划线分离法
先将培养基倒入无菌平皿，冷却凝固后，制成平板，用接 种环沾取少许待分离的材料，在培养基表面划线（平行、 扇形或其他形式）。微生物将随着划线次数的增加而分散， 经保温培养形成菌落，划线开始的部分细菌分散度小，形 成的菌落往往连在一起；由于连续划线，微生物逐渐减少， 划到最后，常可形成单个孤立的菌落，这种单个菌落可能 由一个细胞繁殖而来，故可获得纯培养。
第四章 微生物菌种选育
第一节 菌种的分离和筛选 一、微生物菌种培养方法 1、固体培养法
A、平板培养法；B、斜面培养法； 2、半固体培养法 3、液体培养法
A、静置培养法； B、摇瓶培养法； C、深层培养法。
二、微生物菌种的分离方法
1、固体稀释平皿倾注法（混菌法）:先将待分离的 材料作系列的稀释(如1:10、1:100、1:1000、1: 10000……)，然后分别取不同稀释度菌液到灭过菌 的培养皿中，倒入已熔化并冷却50℃的琼脂培养基， 混合摇匀，待琼脂凝固后，保温培养一定时间即可出 现菌落。平板上所出现的分散的单个菌落，可能就是 由单个微生物个体繁殖而成的，挑取该单个菌落，或 重复以上操作数次，便可得到纯培养。
6、利用选择培养基分离法
不同微生物需要不同的营养物质，有些微生物生 长适于酸性环境，有些则适于碱性环境，各种微生 物对不同的化学试剂如消毒剂(酚)、染料(结晶紫)、 抗生素及其他物质等具有不同的抵抗能力。利用这 些特性，便可配制成适合于某种微生物生长，而限 制其他微生物生长的各种选择性培养基，以达到纯
5、组织分离法
主要用来分离高等真菌和某些植物病原菌。 取一小块植株或器官组织，用0.1%的升(HgCl2)溶 液进行表面消毒3～5min，然后用无菌水洗涤数次， 移置到培养皿中培养基表面，适温培养3～5天后， 病变组织内潜伏的微生物可向组织块周围扩散生长， 经菌落特征和细胞特征观察确认后，即可由菌落边 缘挑取部分菌种转入斜面试管进行培养。 对于能产生弹射孢子的高等真菌，可将消过毒的 菌盖剪成黄豆大的小块，悬挂在装有PDA培养基的 三角瓶内，从而能较快地获得纯培。
株，苏云金杆菌模式菌株等细菌、食用菌等大型真菌、林 木病原菌、菌根菌、病虫生防菌、木腐菌、病毒和植原体 类等。 中国工业微生物菌种保藏管理中心:保藏各种工业微生物菌种 资源包括：细菌、放线菌、酵母菌、丝状真菌和大型真菌 。 中国医学细菌保藏管理中心: 兽医微生物菌种保藏管理中心:
美国典型菌种保藏中心 (American Type Culture Collection, ATCC）
三、菌种分离思路
1：新菌种的分离是要从混杂的各类微生物中依照生产的要 求、菌种的特性，采用各种筛选方法，快速、准确地把所 需要的菌种挑选出来。
2:实验室或生产用菌种若不慎污染了杂菌，也必须重新进行 分离纯化。
3：有了优良的菌种，还要有合适的工艺条件和合理先进的 设备与之配合。
8、几种微生物纯培养分离方法的比较
1）固体稀释平皿法： 即可定性,又可定量,用途广泛;
2）平皿划线分离法： 方法简便,多用于分离细菌;
3)组织分离法: 高等真菌及植物病原菌。
4）单细胞挑取法： 局限于专业化的科学研究；
5）利用选择培养基法： 适用于分离某些生理类型较特殊的微生物。
二、菌种的来源
1、根据资料直接向有科研单位、高等院校、工 厂或菌种保藏部门索取或购买；
7、其他方法
将待分离的样品进行适当处理，以消除 不希望分离到的微生物。例如，想分离得到 芽孢细菌，可在倒平皿前将样品用高温处理 一段时间，以破坏所有的或大部分的非芽孢 细菌，这样分离得到的菌落大多是芽孢细菌
有些病原菌可先将其接种至敏感动物，感染后， 宿主的某些组织可能含有该种微生物，这样较易得
对一些生理类型比较特殊的微生物，为了提高 分离的机率，往往在涂布分离前先进行富集培养， 其目的是提供一个特别设计的培养环境，以帮助所 需的特殊生理类型的微生物的生长，同时抑制其他 类型微生物生长
普通微生物菌种保藏管理中心:CGMCC收集国内外的微生物 资源，妥善保存,在保证生物安全和保护知识产权的前提下，为 第三者能够自由地利用各种微生物材料提供服务，最大限度的 实现微生物资源的保护、共享和持续利用
中国病毒资源与信息中心:从事普通病毒保藏与分 类鉴定与研究的专业机构。。 中国林业微生物菌种保藏管理中心：保藏微生物菌株10700余
2、从大自然中分离筛选新的微生物菌种。
国内外主要菌种保藏机构
中国典型培养物保藏中心(China Center for Type Culture Collection, CCTCC):保藏的微生物包括细菌、放线菌、酵母菌、 真菌、单细胞藻类、人和动物细胞系、转基因细胞、杂交瘤、 原生动物，地衣，植物组织培养、植、单细胞挑取法
从待分离的材料中挑取一个细胞来培养，从而 获得纯培养。具体方法是将显微镜挑取器装置在显 微镜上，把一滴细菌悬液置于载玻片上，用安装在 显微镜挑取器上的极细的毛细吸管，在显微镜下对 准某一个细胞后挑取，再接种于培养基上培养。此 法需要非常熟练的操作人员，多限于高度专业化的 科学研究中采用。
2、涂布分离法
将待分离的材料作Байду номын сангаас列的稀释(如1:10、 1:100、1:1000、1: 10000……)，然后分别取 不同稀释度溶液(0.1～１ml)于装有培养基的 平板上。用玻璃刮子，在培养基表面涂布，倒 置，保温培养一定时间即可出现菌落。
3、平板划线分离法
先将培养基倒入无菌平皿，冷却凝固后，制成平板，用接 种环沾取少许待分离的材料，在培养基表面划线（平行、 扇形或其他形式）。微生物将随着划线次数的增加而分散， 经保温培养形成菌落，划线开始的部分细菌分散度小，形 成的菌落往往连在一起；由于连续划线，微生物逐渐减少， 划到最后，常可形成单个孤立的菌落，这种单个菌落可能 由一个细胞繁殖而来，故可获得纯培养。
第四章 微生物菌种选育
第一节 菌种的分离和筛选 一、微生物菌种培养方法 1、固体培养法
A、平板培养法；B、斜面培养法； 2、半固体培养法 3、液体培养法
A、静置培养法； B、摇瓶培养法； C、深层培养法。
二、微生物菌种的分离方法
1、固体稀释平皿倾注法（混菌法）:先将待分离的 材料作系列的稀释(如1:10、1:100、1:1000、1: 10000……)，然后分别取不同稀释度菌液到灭过菌 的培养皿中，倒入已熔化并冷却50℃的琼脂培养基， 混合摇匀，待琼脂凝固后，保温培养一定时间即可出 现菌落。平板上所出现的分散的单个菌落，可能就是 由单个微生物个体繁殖而成的，挑取该单个菌落，或 重复以上操作数次，便可得到纯培养。
6、利用选择培养基分离法
不同微生物需要不同的营养物质，有些微生物生 长适于酸性环境，有些则适于碱性环境，各种微生 物对不同的化学试剂如消毒剂(酚)、染料(结晶紫)、 抗生素及其他物质等具有不同的抵抗能力。利用这 些特性，便可配制成适合于某种微生物生长，而限 制其他微生物生长的各种选择性培养基，以达到纯
5、组织分离法
主要用来分离高等真菌和某些植物病原菌。 取一小块植株或器官组织，用0.1%的升(HgCl2)溶 液进行表面消毒3～5min，然后用无菌水洗涤数次， 移置到培养皿中培养基表面，适温培养3～5天后， 病变组织内潜伏的微生物可向组织块周围扩散生长， 经菌落特征和细胞特征观察确认后，即可由菌落边 缘挑取部分菌种转入斜面试管进行培养。 对于能产生弹射孢子的高等真菌，可将消过毒的 菌盖剪成黄豆大的小块，悬挂在装有PDA培养基的 三角瓶内，从而能较快地获得纯培。