氧化酶试验

氧化酶试验(oxidasetest)氧化酶又名细胞色素氧化酶、细胞色素氧化酶C或呼吸酶。

试验用于检测细菌/是否有该酶存在。

原理是氧化酶在有分子氧或细胞色素C存在时，可氧化四甲基对苯撑二胺出现紫色反应。

假单胞菌属、气单胞菌属等阳性，肠杆菌科阴性，可区别。

血浆凝固酶：由金黄色葡萄球菌致病性菌株产生。

能使含有抗凝剂的人或兔血浆发生凝固。

在感染部位由于凝固酶的产生，使体液中的纤维蛋白原转变为纤维蛋白，沉积于细菌表面，可阻碍吞噬细胞对细菌的吞噬和杀灭作用。

凝固酶试验(coagulase test)原理：
致病性葡萄球菌→ 凝固酶→ 血浆中纤维蛋白原(液态) 纤维蛋白(固态) → 血浆凝固方法：
①玻片法：检测结合凝固酶
②试管法：检测游离凝固酶
应用：
作为鉴别葡萄球菌致病性的重要指标。

一、名词解释
汹涌发酵”现象——在牛乳培养基中，产气荚膜梭菌能分解乳糖产酸使酪蛋白凝固，同时产生大量气体将凝固的酪蛋白冲散形成蜂窝状，并将液面上的凡士林向上推挤，甚至冲开棉塞，气势凶猛，称为“汹涌发酵”现象，为本菌特征之一
肥达反应——用已知伤寒菌的H(鞭毛)和O(菌体)以及甲型(A)与乙型(B)副伤寒沙门氏菌的标准液与病人血清做凝集试验，用于伤寒副伤寒的辅助诊断或用于流行病学调查的免疫凝集实验。

外斐试验——变形杆菌属的X19,X2.Xk菌株的菌体O抗原与斑疹伤寒立克次体和恙虫病立克次体有共同抗原，故可用OX19，OX2，OXk代替立克次体作为抗原与相应患者血清进行交叉凝集反应，此称外斐试验，辅助诊断立克次体病。

SPA——葡萄球菌细胞壁上的一种蛋白成分，称为葡萄球菌A蛋白。

英文缩写为SPA
MRSA—是能产生β—内酰胺酶而破坏青霉素的β—内酰胺环而使青霉素失效而表现出耐药性的一类葡萄球菌。

胆汁溶菌试验——胆汁或胆盐可溶解肺炎链球菌，可能是由于胆汁降低细胞膜表面的张力，使细胞膜破损或使菌体裂解；或者是由于胆汁加速了肺炎链球菌本身自溶过程，促使细菌发生自溶。

血浆凝固酶试验——血浆凝固酶能使含有肝素等抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类物质, 葡萄球菌中致病株大多数能产生, 是一种主要致病物质，是鉴别葡萄球菌有无致病性的重要指标。

也是区别金黄色葡萄球菌与其他葡萄球菌的主要指标，该酶可分结合凝固酶与游离凝固酶，前者可用玻片法检测，后者可用试管法检测
Nagler（奈格尔）试验：产气荚膜梭菌在卵黄琼脂平板上，菌落周围出现乳白色浑浊圈，是由细菌产生的卵磷脂（α-毒素）分解卵黄中的卵磷脂所致，若在培养基中加入α毒素的抗血清，则菌落周围不出现浑浊，为本菌特征之一，可用于产气荚膜梭菌的鉴定。

L型菌¬——是细菌、真菌等微生物的细胞壁缺陷型。

大多数细菌可在某些因素的影响下失去细胞壁变为L 型
氧化酶实验——氧化酶（细胞色素氧化酶）是细胞色素呼吸酶系统的最终呼吸酶。

具有氧化酶的细菌，首先使细胞色素C氧化，再由氧化型细胞色素C使对苯二胺氧化，生成有色的醌类化合物。

常用有三种方法；细菌在与试剂接触10秒内呈深紫色，为阳性。

主要用于肠杆菌科细菌与假单胞菌的鉴别，前者为阴性，后者为阳性。

奈瑟菌属、莫拉菌属细菌也呈阳性反应。

渺茫(413417227) 21:47:37
X因子----是一种耐热的存在于血红蛋白中的一种血红素及其衍生物，含铁卟啉，是细菌合成过氧化氢酶，过氧化物酶与细胞色素氧化酶的辅基
V因子-----是一种对热不稳定的vitB类物质，存在于血液和某些植物中，是脱氢酶的辅酶，在细菌的呼吸中起传递氢的作用。

卫星现象----把金黄色葡萄球菌与流感嗜血杆菌一起培养时，可见到流感杆菌的菌落较大，而远离金葡的流感杆菌菌落较小，这种现象称“卫星现象”。

其原理：因金葡能合成v因子释放到培养基中，从而促进流感嗜血杆菌的生长
病毒性疾病实验诊断的一般原则：特异、敏感、快速和简便。

首先根据流行病学和临床特点，初步判断可能感染的病毒；然后根据可疑病毒生物学特点、机体免疫应答和临床过程，以及病人当前所处的时机，确定实验诊断的方法。

目前病毒感染的检查主要依靠经典的方法和近来发展起来的分子生物学等方法。

前者主要包括病毒分离培养、鉴定及血清学实验；后者主要是核酸杂交与PCR及现代免疫学技术。

2.病毒的鉴定
(1)初步鉴定：
①根据病毒感染组织细胞的细胞病变效应(cytopathic effect CPE)对鸡胚的敏感性、对动物的感染范围或潜伏期与症状可初步判断病毒的存在与否、是哪类病毒；
②红细胞吸附试验；
③干扰作用：一种病毒感染细胞后，可干扰另一种病毒进入同一细胞增殖。

这种干扰现象可被相应病毒的特异抗体所抑制，称之为干扰抑制现象；
④理化性状测定：电镜观察大小和形态；乙醚敏感试验;耐酸试验。

(2)最后鉴定：血清学鉴定
采急性期和恢复期双份血清，同时测抗体的效价，观察抗体的动态变化，协助病毒性疾病的诊断。

若IgM↑，表示近期感染或疾病处于活动状态；
若IgG效价呈4倍以上升高，可作为一种辅助诊断指标。

常用的血清学方法：中和试验；补体结合试验；血凝抑制试验；免疫荧光试验；ELISA；乳胶凝集试验；间接血凝试验。