点印迹法中的金纳米粒子探针
以金纳米粒子为探针比色法检测顺铂
收稿 日期 ： ０６０ １ ２０ －５ｌ． 基 金 项 日 ：囤 家 自然 科 学 基 金 （ 准 号 ： ０ ７ ００） 助 ． 批 ２６ ５ ８ 资
联 系人简介 ： 王振新 （９ １ １７ 年出生） 男 ， Ｌ 研究员 ， ， 博 ， 博士生导 师，主要从事 高通量分析和生物纳米技 术研究
心纯化 ， 得表 面修饰 多肽／ 获 多肽一 Ｎ Ｄ Ａ的金纳 米粒 子．
１３ 表 面 修 饰 双 链 Ｄ Ａ 的 金 纳 米 粒 子 的 合 成 将 １０ Ｉ ． Ｎ ０ Ｌ Ｌ的 １ ｘ ｏ／ Ｎ 溶 液 、 ０ Ｌ ２ ｉ ＬＬ Ｄ Ａ ｍ ４０ Ｉ Ｌ的 ２４ｎ ｌＬ ． ｍｏ 多肽／ ／ 多肽．Ｎ Ｄ Ａ修 饰金纳 米 粒 子溶 液 与 ５０ Ｉ ０ Ｌ Ｌ的 ０ １ｍ ｌＬ磷 酸 盐 缓 冲溶 液 （ Ｈ ＝ ． ， 、 ｏ ／ ｐ ７ ０ １０ｍ ＬＬＮ Ｃ） 合 ， ． ｏ／ ａ １混 加热 至 ９ Ｏ℃反应 ５ｍｎ后 ， ｉ 于室 温下再 反应 ｌｈ 通 过 ３次 离心纯 化 ， 得表 面 ， 获 修饰双 链 Ｄ Ａ的金纳 米粒 子．并通过 琼脂糖 凝胶 电泳 法表 征不 同组分修 饰 的纳米 粒子 ． Ｎ １４ ｃ ．ｔ ． ｉＰ 与表 面修 饰 双链 Ｄ Ａ 的金纳 米粒 子反 应 将 不 同量 的 ｃ —ｔ ｓ Ｎ Ｐ 加入 到 ５ ０Ｉ ． ｍｏ Ｌ表 ｓ ０ Ｌ ４ ０ｎ ｌ Ｌ ／ 面修饰 双链 Ｄ Ａ金纳 米粒 子的 ０ １ｍ ｌＬ的磷酸盐 缓 冲溶液 （ Ｈ＝ ． ０２ｍ ｌＬＮ Ｃ） Ｎ ． ｏ ／ ｐ ７０， ． ｏ ａ １ 中，反应 ２ｈ ／ 后 ，经 ３次 离心纯 化 ，进行 紫外． 可见光 谱 、 核磁 共振谱 和 ＩＰ质 谱表征 ． Ｃ
14.1 DNA功能化的金纳米粒子及其应用
DNA功能化的金纳米粒子1 DNA功能化的金纳米粒子及其应用用DNA分子修饰无机纳米粒子为其在传感，药物和基因传输，光学和能源领域的应用带来了新的机遇。
同时利用DNA对纳米颗粒间相互作用的控制，基于DNA的平台也能为构建复杂纳米粒子组装结构提供灵活性和多样性。
DNA金纳米粒子复合物(DNA-AuNPs)是一种纳米生物复合物，由内层的纳米粒子和外层的DNA组成，起到了连接生物体系和纳米材料的作用。
上世纪九十年代中期，Mirkin研究组和Alivisatos研究组在他们的开创性工作中，首次报道了DNA功能化的金纳米粒子体系。
Mirkin等人合成了13 nm的金纳米粒子(在溶液中呈现均一的红色，紫外吸收峰波长为520 nm)，然后将末端为巯基修饰的DNA通过S-Au化学键相互作用固定到金纳米粒子表面得到DNA．金纳米粒子复合物(图1．9)，后来他们将这种复合物重新命名为球形核酸(spherical nucleic acid，SNA)。
由于这种DNA修饰的金纳米粒子复合物既具有金纳米粒子的光学和物理化学特性，又具有DNA分子的可编程特性和生物特性，自从Mirkin等人的开创性工作发表以来，DNA功能化的金纳米粒子发展应用迅速，已经被广泛应用于生物传感，离子检测，核酸比色检测，金纳米粒子结晶组装，生物成像等领域。
图1．9 Spherical nucleic acid(SNA) conjugates.1.1 DNA功能化的金纳米粒子在核酸检测中的应用基因突变的检测可以为诊断提供重要的目树，使人们对用于包括癌症在内的许多疾病早期诊断的核酸检测越来越感兴趣。
荧光和放射性检测读出方法(如PCR，PT-PCR，分子印迹法，以及高密度微阵列法等)是传统的核酸检测方法。
金纳米粒子比色法已经被证明是核酸目标链检测方面的一种极具竞争力的检测技术。
在金纳米粒子比色法中，待检测目标物直接或者间接的引发金纳米粒子聚集，并且导致金纳米粒子的吸收波长在可见光区域内发生红移。
3.8 基于金纳米颗粒的荧光核酸探针用于细胞内传感分析
基于金纳米颗粒的荧光核酸探针用于细胞内传感分析DNA本是生命体中的重要物质之一，它在各种生命活动中起着重要的作用。
近年来，由于DNA分子具有独特的碱基配对特性、容易体外合成且保持性质稳定、设计灵活等优势，借助于现代化学技术，科学家们开始将DNA引入到各种检测方法的设计中来。
随着研究的发展，一系列基于DNA的检测方法被相继报道：如比色法，电化学检测法和荧光检测法等，并已经逐步在生物分析、环境监测、药物筛选、疾病诊断与治疗等领域得到广泛应用。
在这些分析技术中，荧光分析因其检测快速、操作简单、灵敏度高等优点，常被科学家们用作检测手段。
同时，DNA能够很容易地修饰上荧光基团，且荧光信号稳定，因此科学家们研制出了许多类型的DNA荧光探针，如TaqMan探针、阴阳探针、分子信标等。
DNA荧光探针通常是在DNA上分别标记荧光基团和淬灭基团，在没有目标物存在时，荧光基团与淬灭基团互相靠近，荧光被淬灭，当有目标物存在时，荧光基团远离淬灭基团，荧光得以恢复。
而金颗粒具有很好的荧光淬灭特性，因此它能替代淬灭基团使用，同时金纳米颗粒的比表面积大、表面功能化易于控制，使得巯基化的DNA很容易的通过Au-S键修饰到金颗粒上。
因此，利用DNA和金纳米颗粒可以构建各种具有特定功能的荧光探针。
基于金纳米颗粒的荧光核酸探针在体外已经被广泛应用于离子、蛋白质、核酸等的检测中。
同时，金纳米颗粒的直径在1-100 nm之间，是一种理想的介导材料，可以实现探针的细胞内输送。
因此，基于金纳米颗粒的荧光核酸探针可以进入生物组织内部，探测各种生物分子的生理功能，在分子水平上揭示生命奥秘。
1 基于金纳米颗粒的荧光核酸探针用于细胞内传感的基础当我们要实现活细胞内目标分子检测之前，有两个重要的问题必须得到解决：第一、如何克服细胞膜的屏障，将探针输送至细胞内并保持细胞与探针的活性；第二、如何在活细胞内这样复杂的生物系统中保持探针的稳定性。
基于金纳米颗粒的荧光核酸探针在上述两个方面展现了独特的优越性，如易于进入细胞、保护DNA抗酶切、生物相容性好等，而这些优势也成为其能够被用于复杂的细胞内环境中对各种生命物质进行检测与成像的重要基础。
一种可视化金纳米粒子探针的制备方法和应用[发明专利]
![一种可视化金纳米粒子探针的制备方法和应用[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/347dc7b13c1ec5da51e2705a.png)
专利名称：一种可视化金纳米粒子探针的制备方法和应用专利类型：发明专利
发明人：朱瑞琦,周影,宋金萍,双少敏,董川
申请号：CN201710147335.X
申请日：20170313
公开号：CN106970032A
公开日：
20170721
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明提供一种可视化金纳米粒子探针的制备方法和应用，本发明是以腺苷适配体和MUA 共同组装在金纳米粒子表面上，组装后的金纳米粒子呈网状结构，溶液呈蓝色。
腺苷的加入会导致核酸适配体结构的变化，使腺苷适配体从金纳米粒子表面解离下来，同时金纳米粒子由网状结构变为自由分散结构，溶液由蓝色变为红色。
向溶液中加入Cr，利用Cr与MUA中‑COOH的络合作用，可将分散后的粒子重新聚集，溶液颜色又从红色变为蓝色。
本发明具有双重顺序检测腺苷和Cr的功能，且灵敏度高，选择性好，不需大型仪器，可实现原位快速检测，检测结果直观，可裸眼观察。
可应用于实际生物样品中腺苷和Cr的检测。
申请人：山西大学
地址：030006 山西省太原市小店区坞城路92号
国籍：CN
代理机构：山西五维专利事务所(有限公司)
代理人：张福增
更多信息请下载全文后查看。
金纳米颗粒聚集以及金纳米探针 微阵列技术研究进展
金纳米颗粒聚集以及金纳米探针-微阵列技术研究进展逄键涛 文思远 王升启#（军事医学科学院放射与辐射医学研究所，北京100850）摘 要 金纳米颗粒（GNP ）探针正引起科学家们越来越多的兴趣。
本文主要综述了基于GNP 自组装聚集反应的生物检测和微阵列-金标银染检测的最新进展，对GNP 在电化学等其他领域的研究前沿也进行了探讨。
引用文献41篇。
关键词 金纳米颗粒，微阵列，生物检测，评述2005-08-10收稿；2005-12-03接受本文系国家863资助项目（No.2004BA519A46）1 引 言金纳米颗粒（GNP ）是直径为0.8～250nm ［1］的缔合胶体，具有纳米表面效应、量子效应、宏观量子隧道效应。
按粒子尺寸和聚集情况，GNP 可显示不同的颜色，已被广泛用于光学、电学、电子显微镜检测的生物分子标记［2］。
单个纳米颗粒的尺寸和颗粒间的组装形式，使胶体Au 溶液表现出不同的整体特征。
生物分子可参与到GNP 的聚集和组装过程中，从而干扰GNP 的原始组装方式。
通过胶体Au 溶液最终的物理状态（如颜色、吸光度等）可得到参与组装的生物分子的“质、量”特征，达到检测的目的。
另外，GNP 逐渐在生物芯片检测中显现出应用前景。
生物芯片技术本身是纳米尺度的分子操作和组装技术，芯片诊断、纳米检测等技术可以在此得到良好的融合。
本文着重就GNP 自组装以及GNP 探针-微阵列技术进展作一综述。
2 生物分子辅助的GNP 聚集和组装2.1 DNA-GNP 探针灵敏度高、特异性强、快速简单、低成本是生物检测的重要指标。
基于GNP 聚集反应的分子诊断方法能满足这些要求。
Mirkin 发现DNA 特异杂交可使DNA-Au 颗粒自组装为复合结构，开创了GNP 用于生物检测的新领域［3］。
GNP 经巯基修饰的短链DNA 修饰成为编码探针［4］，溶液中加入目标互补DNA 后，纳米颗粒发生有序、可逆的聚集反应［5］。
聚集后溶液颜色发生红7桃红7紫色变化，几小时出现桃灰色沉淀（DNA-胶体金沉淀）。
金纳米探针——精选推荐
【摘要】 由于金纳米粒子（AuNPs ）具有与大小、形状和聚集程度相关的物理和化学特性，被广泛应用于各种生物分析和生物医学检测技术中，并技术中，并发展发展成具有高选择性、高灵敏度的生物分析检测手段。
以AuNPs 为探针的分析方法通常具有简单、快速、灵敏度高的优点，并能应用于实际样品检测. 【关键词】 金纳米粒子；探针；合成与修饰； 1 引言 纳米技术与化学、生物学、纳米技术与化学、生物学、物物理学和医学等领域的结合，对分析和医学等领域的结合，对分析科学科学和生命科学领域的超灵敏检测和成像方法的发展起着越来越重要的作用。
由于AuNPs 具有独特的光学性质（表面等离子体吸收和共振光散射）、易进行表面修饰以及良好的生物相容性（通常认为裸AuNPs是无生物毒性的，而修饰后的AuNPs 的生物毒性由其配体决定），因此功能化AuNPs 的应用领域不断被拓宽，特别是其在生物分析和生物医药等领域的应用引起了人们广泛关注[2，3]。
本文综述了生物分子修饰的AuNPs 探针的合成及其在检测金属离子、小分子、DNA 、蛋白质和细胞内分析等方面的新进展，以若干应用实例突显一些技术突破及发展趋势。
2 金纳米粒子的合成、稳定性和功能化2.1 金纳米粒子的合成方法 金纳米粒子的制备方法可分为化学法和物理法。
化学法是以金的化合物为原料，在还原反应生成金纳米粒子时控制粒子的生长，使其维持纳米尺度。
化学合成法包括氧化还原法、电化学法、晶种法、模板法、微乳液法、微波合成法和光化学法等，其中最具代表性并被广泛应用的有：（1）Turkevich-Frens法，即在100 ℃下，通过改变还原剂（柠檬酸钠）和三价金的化合物（氯金酸或氯金酸钠）的比例来控制AuNPs 粒径的大小，从而获得粒径在10~60 nm范围内且分散性较好的AuNPs。
该方法制备程序简单，且包裹在AuNPs表面的柠檬酸根容易被其它配体置换（如巯基修饰的DNA等）；（2）Brust-Schiffrin 法，即在两相（液/液）体系或单相体系中，以四正辛基溴化铵（TOAB）为相转移剂，将三价金的化合物（氯金酸或氯金酸钠）转移到有机相中，以烷基硫醇为稳定剂，NaBH4为还原剂，制备粒径为1~8 nm的AuNPs；硫醇/金盐的比例越大、加入还原剂速度越快，冷却溶液可以制得尺寸更小和单分散性更好的粒子，进一步通过配体交换反应改变AuNPs表面的配体而实现其功能化；（3）聚合物保护法：通常以含有聚乙二醇、硫醇或硫醚基团的聚合物为配体，以NaBH4为还原剂，制备水溶性或具有疏水性的粒径小于10 nm的AuNPs。
金纳米探针检测DNA序列
金纳米探针检测DNA序列2016-06-21 13:34来源：内江洛伯尔材料科技有限公司作者：研发部金电极放大电化学检测示意图DNA作为一种生命基本遗传物质,现在已经广泛应用于生物传感中,电化学的DNA生物传感器是尤其有发展前途的传感器. 文献报道了寡核苷酸上连接有纳米金属微粒能够提高方法本身的灵敏度和序列的选择性,纳米粒子嵌入的DNA生物传感器研究已经日益深入. 二茂铁具有特殊的夹心结构,这种结构使其具备了芳香性、氧化还原可逆性以及稳定、低毒等特性,它的氧化还原电化学活性被广泛应用于DNA传感体系中,因此,近年来二茂铁及其衍生物仍是化学家研究的热点.电化学方法与传统方法(例如荧光、化学发光和生物素标记、放射性同位素标记)相比,具有仪器简单、价格低廉、测定快速准确和方法灵敏度高,无需复杂仪器及操作等优点,并且避免了放射性污染等弊端,无毒害作用. 有关DNA杂交的电化学测定一般基于以下条件:靶点DNA或者核苷酸上的氧化还原性标记物的电化学反应;双螺旋蛋白酶等结构上的标记物产生的电活性产物;指示剂分子如金属阳离子配合物等. 不过,基于纳米金属微粒的DNA双链结构的直接、放大的伏安检测,文献报道很少或者不够深入.北京师范大学化学系胡劲波等人用冠以大量二茂铁的纳米金微粒/抗生蛋白链菌素结合物为标记物,将其标记于生物素修饰的寡聚核苷酸片段上,制成了具有电化学活性和纳米金放大作用的DNA电化学生物传感器. 首先采用巯基DNA和巯基烷烃混合自组装膜制备了金修饰电极,将探针DNA分子固定在了电极表面,运用杂交原则结合靶点分子在电极表面形成了双螺旋的DNA链,然后借助抗生蛋白链菌素和生物素之间的强亲和作用,引入了功能化的纳米金. 通过伏安法测定了修饰在纳米金上的二茂铁的氧化还原电流,可以识别和测定溶液中互补的靶点DNA , 172mer 靶点DNA 的浓度在0.001～10nmol/L范围内有线性关系,检测限可达0.75×10-12mol/L.。
纳米金粒子的制备及其在生物传感器中的应用
纳米金粒子的制备及其在生物传感器中的应用纳米金粒子是指金属黄金在100纳米以下的微小颗粒，因其独特的光学、电学、磁学和化学等性质而引起研究者的极大兴趣。
在近年来的科学研究中，纳米金粒子被广泛应用于医学、电子、光电、生物传感、光学传感、热传感等领域。
其中，纳米金粒子在生物传感器中的应用具有广阔的应用前景。
一、纳米金粒子的制备纳米金粒子的制备方法有多种，如物理气相沉积、化学气相沉积、溶液法、微反应系统等。
其中，溶液法是制备纳米金粒子最为常用的方法之一。
通过选择不同的还原剂、保护剂、模板等条件，可以制备出晶体形貌不同的纳米金粒子，如球形、棒形、八面体形等。
此外，纳米金粒子亦可通过激光蚀刻法等方法制备。
二、纳米金粒子在生物传感器中的应用在生物传感器中，纳米金粒子作为生物反应器、识别元素和信号放大器等重要角色。
其具有以下应用：1. 生物传感器纳米金粒子在生物传感器中可以作为载体搭载生物分子，例如抗体、DNA探针、酶等，来检测特定物质。
当前，基于纳米金粒子的免疫传感技术被广泛应用于免疫识别、抗菌药物检测、酶活性测定等领域。
2. 生物成像利用纳米金粒子的高度表面增强拉曼散射效应，可以普及成像领域，例如在细胞成像、分子成像等方面有广泛应用。
3. 传感器信号放大器纳米金粒子在生物传感器中作为信号放大器，可以增强传感器的灵敏度和快速响应。
近年来，许多人体检测设备和检测仪器中采用了这一技术。
4. 气体传感器纳米金粒子在气体传感器中可以自身吸附气体，如H2，CO和NO2等。
当吸附的气体只有实际质量的0.01%时，其性质发生了明显改变，可以用作气体传感器探测吸附的气体。
三、纳米金粒子存在的问题尽管纳米金粒子在生物传感器中有着广泛的应用前景，但同时也存在一些问题。
首先，纳米金粒子人工制备过程中可能存在产生有害化合物的风险，例如使用还原剂亚硫酸钠和棕榈酸钠等。
其次，纳米金粒子的使用需考虑是否对人类健康有副作用，例如纳米金粒子可能被身体吸收进入人体，对人体器官造成损伤。
DNA——金纳米粒子复合探针制备新方法问世
DNA——金纳米粒子复合探针制备新方法问世
无
【期刊名称】《功能材料信息》
【年(卷),期】2012(9)5
【摘要】最近，中国科学院上海应用物理研究所物理生物学实验室的研究人员发展出一种制备高性能DNA——金纳米粒子复合探针的新方法。
这种探针不仅避免了使用修饰DNA分子，而且能够精确调控金纳米粒子表面DNA分子的密度、取向和构型，显著提高了该探针的识别能力。
【总页数】1页(P42-42)
【作者】无
【作者单位】不详
【正文语种】中文
【中图分类】TB383
【相关文献】
1.含寡聚腺嘌呤序列DNA探针在金纳米粒子上的固定及杂交性能 [J], 张茜;王宋蒙;褚立强
2.从YAC DNA制备荧光原位杂交探针的新方法 [J], 韩顺生;余龙
3.基于磁珠分离和DNA标记金纳米粒子探针检测小鼠心肌ATP含量的研究 [J], 宗迎夏;危冲;混旭
4.基于金纳米粒子的DNA探针和ExoⅢ辅助信号放大平台用于HIV-DNA的检测
[J], 田建袅;李晴;梁雪花;谭莉;陆江南;王鑫
5.我国研制出DNA-金纳米粒子复合探针制备新方法 [J],
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
金纳米探针直接用于活体细胞的生理活动检测
金纳米探针直接用于活体细胞的生理活动检测2016-06-25 12:25来源：内江洛伯尔材料科技有限公司作者：研发部4MBA诱导聚集的金纳米粒子随时间变化的消光谱近年来, 利用多功能光学探针来探测生物样品已经引起了人们越来越多的重视. 表面增强拉曼散射(SERS)作为一种高灵敏的探测技术, 已经被广泛地用于生物分子的检测, 例如葡萄糖传感、核酸检测和蛋白质检测等, 甚至成功应用于检测活细胞的生理活动以及癌症肿瘤诊断等领域. 相对于荧光探测技术, 表面增强拉曼散射的谱线更窄, 且不会被光漂白, 因此可以作为分子指认和多通道探测. 金纳米粒子不仅是优良的SERS基底, 而且具有良好的化学稳定性和生物兼容性, 因此金纳米粒子被广泛用于生物检测的研究. 然而, 金纳米粒子的SERS增强效果不如银纳米粒子显著, 尤其是单个的金纳米粒子, 由于缺少粒子与粒子之间耦合的局域场共振增强, 因此在实验中需要相对较强的激发场才能获得较为理想的SERS 增强信号.近年来, 研究表明通过将金属纳米粒子进行聚集, 可以使金属纳米粒子之间产生大量“热点”, SERS效应明显增强. 具体来说, 金属纳米粒子的聚集是通过使用氯离子和硫酸根离子等离子来破坏金属纳米粒子表面的静电平衡来实现, 然而这种聚集通常会随着时间的增加最终变成巨大尺寸的不可逆转的沉淀, 使得SERS探针的稳定性逐渐变差. 应用于生物体检测的SERS探针, 不仅要求探针具有较高的SERS的灵敏度, 而且需要探针具有适合的尺寸和形貌以及良好的稳定性和生物兼容性. 要获得具有良好稳定性及生物兼容性的SERS探针,可以通过在金属纳米粒子表面包裹聚合物或者二氧化硅的方法来实现. 聚合物可以“淬灭”金属纳米粒子的聚集状态, 并且长时间保持探针的SERS灵敏度. Nie等报道了利用带巯基的PEG聚合物包裹的金纳米颗粒作为SERS增强基底, 并将其成功用于活体小鼠的肿瘤组织探测. 包裹二氧化硅外壳具有很多优点,例如较好的稳定性、良好的水溶性、低特异性结合能力以及较低的自荧光等. Brown等提出利用二氧化硅包裹的聚集银钠米粒子以及聚集金纳米粒子, 在一定的条件下, 可以使得SERS信号得到优化, 同时保证SERS探针的化学稳定性. Li等将金纳米粒子表面包裹薄层二氧化硅, 该结构具有很高的SERS灵敏度并且成功用于农药残留检测以及酵母菌的结构检测等.尽管高效的SERS增强基底的报道层出不穷, 但是由于基底的尺寸形貌、表面亲和性以及生物兼容性的限制, SERS探针在生物上, 尤其是活细胞中的应用仍然相对较少.东南大学先进光子学中心崔一平等人利用金纳米粒子的聚集体作为表面增强拉曼散射 (Surface enhanced Raman scattering, SERS)的增强基底, 合成了一种二氧化硅包裹的核壳型SERS探针, 并成功将该探针应用于活细胞的SERS光谱探测. 实验中利用4-巯基苯甲酸(4-mercaptobenzoicacid, 4MBA)作为拉曼标记物, 并讨论了其在诱导金纳米粒子的聚集过程中的作用. 通过包二氧化硅外壳来实现对金纳米颗粒聚集程度的控制, 保持并优化了该探针的SERS活性. 同时, 通过在金纳米颗粒外包裹一层二氧化硅外壳, 该SERS探针的化学稳定性和生物兼容性得到了很大的提高. 利用紫外-可见吸收光谱仪以及透射电子显微镜研究了该探针中金纳米颗粒的聚集程度以及核壳结构的形貌. 实验结果表明该探针在活细胞内具有很好的SERS灵敏度, 并且生物兼容性好, 可以进一步用于细胞内生理活动监测.。
纳米金粒子在生物传感器中的使用方法
纳米金粒子在生物传感器中的使用方法纳米技术的发展为生物传感器的制备与应用提供了全新的可能性。
纳米金粒子作为一种重要的纳米材料，在生物传感领域发挥了重要作用。
其独特的物理和化学性质使其成为一种理想的生物传感器平台材料。
本文将介绍纳米金粒子在生物传感器中的使用方法及其优势。
首先，纳米金粒子的制备方法多样且灵活。
常见的制备方法包括溶剂热法、化学还原法、电化学法等。
这些方法可以根据需求调控金粒子的尺寸、形状和表面性质。
利用这些制备方法可以制备出具有高度可控性的纳米金粒子，为后续的生物传感器应用奠定基础。
其次，纳米金粒子在生物传感器中可以用作信号转换体。
纳米金粒子可以利用其表面增强拉曼散射（Surface Enhanced Raman Scattering, SERS）效应，增强目标分子的光信号，从而提高生物传感器的灵敏度。
此外，纳米金粒子还可以通过其表面等离子共振（Surface Plasmon Resonance, SPR）效应作为光学信号转换体，实现对生物分子的检测。
这些特性使得纳米金粒子成为一种理想的信号放大和转换体，提高了生物传感器的检测灵敏度和选择性。
此外，纳米金粒子还可以用作生物传感器的载体。
将纳米金粒子修饰到传感器表面或固定在固体载体上，可以提供更大的活性表面积和更好的分子固定能力。
这样，待测分子可以更有效地与纳米金粒子相互作用，从而提高了生物分子的检测灵敏度和稳定性。
在实际应用中，纳米金粒子在生物传感器中的使用方法也各具特色。
例如，生物分子的固定化可以通过化学修饰纳米金粒子表面实现。
通过选择不同的功能化分子，可以实现对不同生物分子的检测。
此外，纳米金粒子还可以通过生物识别分子的选择性识别，实现对特定生物分子的检测和定量。
对于传统的生物传感器，纳米金粒子的应用也可以带来很多进展。
例如，纳米金粒子的引入可以提高传统电化学传感器的灵敏度和稳定性。
纳米金粒子的应用还可以提供新的检测机制，使得生物分子的分析更加快速和准确。
金纳米粒子探针的合成及应用
金纳米粒子探针的合成及应用什么是金纳米粒子探针？金纳米粒子探针是一种基于纳米技术的生物医学探针，它是由金纳米粒子构成的，具有很强的生物相容性和生物活性，可以被用作生物标记物、药物传递、生物成像、光热治疗等领域的研究和应用。
近年来，金纳米粒子探针受到学术界和工业界的广泛关注，被认为是一种将纳米技术应用到生物医学领域的重要手段。
金纳米粒子探针的合成方法1. 化学还原法化学还原法是制备金纳米粒子探针的一种常用方法。
该方法首先将金盐在水中还原成金离子，然后使用还原剂将金离子还原成金粒子。
具体步骤如下：•加入还原剂：将还原剂溶液缓慢滴入金离子溶液中，加速金离子还原成金粒子的过程。
•调节pH值：通过调节pH值可以控制金纳米粒子的形态和尺寸大小。
通常采用pH控制还原剂的 pH 值，使其在不同的 pH 值下形成不同尺寸的金纳米粒子。
•分离纯化：使用离心机或超滤膜将反应溶液中的残留物去除，得到纯净的金纳米粒子溶液。
2. 光化学法光化学法是利用光化学反应制备金纳米粒子探针的一种方法。
该方法将紫外光照射在金离子溶液中，使得金离子受到光激发，发生自还原反应形成金纳米粒子。
具体步骤如下：•加入还原剂：将还原剂溶液中加入金离子溶液。
•光照射：将紫外光照射在溶液中，使得金离子发生自还原反应形成金纳米粒子。
•分离纯化：使用离心机或超滤膜将反应溶液中的残留物去除，得到纯净的金纳米粒子溶液。
金纳米粒子探针的应用1. 生物成像金纳米粒子探针可以作为成像剂用于生物成像，以便于观察、诊断和治疗疾病。
例如，通过在金纳米粒子表面修饰生物活性分子，可以实现特定细胞或组织的选择性成像。
2. 药物传递金纳米粒子探针可以被用作药物载体，可以有效地将药物输送到病变组织部位。
金纳米粒子具有很强的药物负载能力和生物相容性，可以进一步提高药物的生物利用度和治疗效果。
3. 光热治疗金纳米粒子探针可以被用作光热治疗剂，其主要作用是通过激光照射，将光能转化为热能，使得金纳米粒子产生高温，从而导致细胞热凝固坏死，达到治疗肿瘤等疾病的效果。
(仅供参考)金纳米探针用于宫颈癌细胞成像
金纳米探针用于宫颈癌细胞成像2016-06-14 12:55来源：内江洛伯尔材料科技有限公司作者：研发部金纳米探针用于宫颈癌细胞成像受体介导的肿瘤靶向检测与治疗是以肿瘤细胞表面特异性或过度表达的受体为靶点, 以受体对应的配体或配体结合物为载体, 利用受体和配体的特异性反应,将检测探针或者药物递送至受体表达阳性肿瘤细胞的一种诊断和治疗系统. 叶酸受体分布在正常组织及肿瘤组织中, 不同之处在于多数肿瘤细胞叶酸受体的数量和活性远远超过正常细胞, 如卵巢癌、子宫内膜癌、宫颈癌、乳腺癌、结肠癌及鼻咽癌等, 而且叶酸受体在正常细胞呈极性分布, 细胞恶变后失去极性, 使血液循环中的探针或者药物可接触到该受体, 使叶酸介导的探针或抗肿瘤药物可以靶向性地作用于叶酸受体呈阳性的肿瘤细胞,减少传统抗癌药物对正常细胞的毒副作用, 提高药物和探针的选择性.目前,肿瘤细胞表面的叶酸受体受到广泛关注, 已成为肿瘤诊断和治疗研究的新靶点.研究证实, 细胞摄入叶酸有2种不同的功能系统: (1)细胞膜连接的叶酸受体(FR), 通过受体介导的内吞作用来吸收叶酸; (2)还原叶酸载体(RFC), 它采用一种双向阴离子交换机制将叶酸转运到细胞浆中. 两种系统对于叶酸和抗叶酸的转运动力及亲和性存在明显的不同, 前者被认为具有高亲和性, 且在介导叶酸进入细胞中起重要作用. 金属纳米粒子进入细胞的途径大致可分为液体流动带动的内流、受体鄄配体介导的内吞作用以及细胞自身的吞噬作用, 其中受体鄄配体介导的内吞作用的效率最高. 若对金属纳米粒子表面进行叶酸修饰, 就可通过靶细胞上相应的叶酸受体介导的细胞通道, 从而提高金属纳米粒子进入细胞的效率.近年来, 大量文献报道利用荧光标记技术研究纳米粒子与细胞的相互作用, 但是对于多波长荧光标记, 由于多数荧光染料的发射波长出现部分重叠, 给细胞多组分染色成像带来了困难, 同时荧光染料的光致漂白使其无法应用于长时间的成像观察. 纳米金是一种应用广泛的纳米材料, 已应用于生物医学领域. 当荧光染料分子接触到纳米金后, 会被纳米金颗粒猝灭, 使荧光标记技术在类似纳米金等猝灭基体上的应用受到局限. 目前, 研究纳米金颗粒与细胞的相互作用主要利用透射电镜技术, 或者是将纳米金颗粒首先进行包裹, 使荧光染料分子与纳米金表面形成一定空间距离, 减弱其猝灭效应. 利用透射电镜观察纳米金是较为直接的方式, 但不够快速, 且对仪器设备要求较高. 将染料分子与纳米金表面进行隔离, 在实验制备上较难把握, 因此寻求一种新型的纳米金成像方式具有重要意义. 纳米金特殊的光学特性使其在受到单一波长的激发光激发后, 将入射光以散射的形式发射出去. 当用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)某一特定波长的激光器激发纳米金粒子后,它可将激发光散射发出而被接收器接收, 且显微镜接收到的发射光波长与激发光波长基本一致. 纳米金散射成像不会出现光漂白现象, 因其独特的光学性质可弥补荧光染料光猝灭的缺点.苏州大学放射医学与防护学院涂彧等人制备了粒径均一的纳米金颗粒, 再对其表面进行叶酸修饰, 制得具有靶向性的纳米金探针. 利用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM), 对靶向性纳米金的细胞特异性散射成像进行研究. 实验结果表明, 人宫颈癌细胞(Hela)对纳米金-叶酸的摄取作用强于对纳米金的摄取, 但随着时间的延长, 两者的差别逐渐减小. 表明在适当的时间内纳米金-叶酸探针对宫颈癌细胞具有良好靶向性.。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
点印迹法中的金纳米粒子探针
2016-09-04 12:17来源：内江洛伯尔材料科技有限公司作者：研发部
金纳米粒子探针
这种分析方法主要利用金纳米粒子本身具有颜色，对白色基底（如硝化纤维膜）上点样点处的待检测物，进行染色定量分析。
金纳米粒子表面需要修饰上，特定可以和待检测物结合的探针分子；待检测物通过吸附或其他方法附着固定在基底上，形成含有不同量待检测物的点样点。
基底上样品点之外部分进行了封闭，尽量减少金纳米粒子在表面的非特异性吸附造成的干扰。
将点样点在分散有修饰探针分子的金纳米粒子溶液中进行孵育，充分结合后取出，此时依据点样点上所固定的待检测物的量多少，结合了相应数量的金纳米粒子。
再将点样点浸泡在银离子溶液中，银离子会在金纳米粒子表面沉积，使原有的颜色进一步加深，而结合的金纳米粒子越多，银沉积的也越多，有利于进一步增加信号灵敏度。
台湾国立台北大学Chun－Yen Huang等人利用点印迹法进行了免疫检测。
他们合成了表面修饰有可以结合待检测分子的抗体（即探针分子）的金纳米粒子。
检测时，将一定体积含有待检测分子的溶液滴在白色硝化纤维膜上，待检测分子可以吸附固定于膜表面；然后将膜在含有修饰了探针分子的金纳米粒子溶液中孵育，通过待检测分子－抗体的结合将金纳米粒子连接固定到膜表面。
膜上金纳米粒子颜色越深，则该点样点处待检测分子越多，由此可以实现定量检测。
为了进一步增加检测灵敏度，他们在金纳米粒子表面沉积银，放大检测信号。
实验比较表明，通过银沉积放大，可以将检测灵敏度提高1000倍（从100 amol 到100 zmol）。
这个方法可以扩展到很多免疫检测上，只要在金纳米粒子表面修饰合适的抗体作为探针分子。
长春应用化学研究所汪尔康小组通过点印记阵列的方法，实现了对蛋白质凝血酶的简便、快速和灵敏的检测。
该工作的一个特点是使用点印记法，另一个特点为采用适配子作为蛋白质检测探针。
适配子一般是指具有特定序列，能特异性结合生物分子，如蛋白质或者小分子的单链DNA。
蛋白质与对应适配子的结合，具有可以比拟“抗原-抗体结合”的特异性和结合常数，而适配子的合成、纯化非常简单，因此近年来适配子被普遍应用于蛋白质的检测。
Wang等首先合成了粒径约13nm的金纳米粒子，再将其表面修饰上凝血酶的适配子。
检测时，将含有待检测物凝血酶的溶液滴在硝化纤维膜（nitrocellulose membrane）上。
凝血酶通过静电、疏水作用而固定在硝化纤维膜表面，再将膜上空余部分用10%牛血清白蛋白（BSA）封闭，减少其后金纳米粒子的非特异性吸附。
然后，将硝化纤维膜浸泡在含有适配子修饰的金纳米粒子溶液中孵育。
此时金纳米粒子便会和硝化纤维膜表面的凝血酶结合，凝血酶越多，结合的金纳米粒子越多，则该处颜色越深。
经过银沉积到金纳米粒子上，可以进一步增加检测灵敏度。
他们还检测了模拟实际样品的凝血酶含量，发现含有低于8%的血浆不会明显降低检测效果，但是10%以上的血浆会干扰检测。
以上点印迹法的检测灵敏度有了很大提高，但是仍需要训练有素的专业人员进行检测操作。
为了进一步提高方法的实用性，有必要简化操作过程，降低复杂程度，以便日常家庭中的使用。