2,4-二硝基苯肼显色剂配制方法

TLC_显色剂

碘：不饱和或芳香族化合物配制方法：在100ml广口瓶中，放入一张滤纸，少许碘粒。

或者在瓶中，加入10g碘粒，30g硅胶紫外灯：含共厄基团的化合物，芳香化合物硫酸铈：生物碱配制方法：10%硫酸铈(IV)+15%硫酸的水溶液氯化铁：苯酚类化合物配制方法：1% FeCl3 + 50% 乙醇水溶液.桑色素(羟基黄酮) ：广谱, 有荧光活性配制方法：% 桑色素+甲醇茚三酮：氨基酸配制方法：茚三酮 + 100mL of 正丁醇+ 醋酸二硝基苯肼(DNP) ：醛和酮配制方法：12g二硝基苯肼+ 60mL 浓硫酸 + 80mL 水 + 200mL 乙醇香草醛(香兰素) ：广谱配制方法：15g 香草醛 + 250mL 乙醇 + 浓硫酸高锰酸钾：含还原性基团化合物，比如羟基，氨基，醛配制方法： KMnO4 + 10g K2CO3 + 10% NaOH + 200mL 水. 使用期3个月溴甲酚绿：羧酸，pKa<=配制方法：在100ml乙醇中，加入溴甲酚绿，缓慢滴加的NaOH水溶液，刚好出现蓝色即至。

钼酸铈：广谱配制方法：235 mL 水 + 12 g 钼酸氨 + g 钼酸铈氨 + 15 mL 浓硫酸茴香醛(对甲氧基苯甲醛)1 ：广谱配制方法：135 乙醇 + 5 mL 浓硫酸 + mL of 冰醋酸 + mL 茴香醛，剧烈搅拌，使混合均匀.茴香醛(对甲氧基苯甲醛)2 ：萜烯，桉树脑(cineoles), withanolides, 出油柑碱(acronycine)配制方法：茴香醛:HClO4:丙酮:水 (1:10:20:80)磷钼酸(PMA) ：广谱配制方法： 10 g of 磷钼酸+100 mL 乙醇碘：适用于不饱和或者芳香族化合物配制方法：在100ml 广口瓶中，放入一张滤纸，少许碘粒。

或者在瓶中，加入10g 碘粒，30g 硅胶高锰酸钾适用于含还原性基团化合物，比如羟基，氨基，醛配制方法： KMnO4 + 10g K2CO3 + 10% NaOH +200mL 水. 使用期3 个月磷钼酸(PMA)广谱配制方法：10 g of 磷钼酸+100 mL 乙醇紫外灯适用于含共轭基团的化合物，芳香化合物硫酸铈：生物碱配制方法：10%硫酸铈(IV)+15%硫酸的水溶液氯化铁苯酚类化合物配制方法：1% FeCl3 + 50% 乙醇水溶液.桑色素(羟基黄酮)广谱, 有荧光活性配制方法：% 桑色素+甲醇茚三酮适用于氨基酸配制方法：茚三酮+ 100mL of 正丁醇+ 醋酸二硝基苯肼(DNP)适用于醛和酮配制方法：12g 二硝基苯肼+ 60mL 浓硫酸+ 80mL 水+ 200mL 乙醇广谱配制方法：15g 香草醛+ 250mL 乙醇+ 浓硫酸溴甲酚绿适用于羧酸，pKa<=配制方法：在100ml 乙醇中，加入溴甲酚绿，缓慢滴加的NaOH 水溶液，刚好出现蓝色即至。

TLC显色剂配比方法

TLC显色剂配比方法TLC显色剂配比方法做TLC时候，用到的显色剂：5%茴香醛硫酸乙醇溶液，硫酸乙醇，FeCl3怎么配比！显色剂可以分成两大类：一类是检查一般有机化合物的通用有机试剂显色剂；另一类是根据化合物分类或特殊官能团设计的专属性显色剂。

显色剂种类繁多，本章只能列举一些常用的显色剂。

l．通用有机试剂显色剂①硫酸常用的有四种溶液：硫酸-水(1：1)溶液；硫酸-甲醇或乙醇(1：1)溶液；1.5mol／L硫酸溶液与0.5-1.5mol／L硫酸铵溶液，喷后110oC 烤15min，不同有机化合物显不同颜色。

②0.5％碘的氯仿溶液对很多化合物显黄棕色。

③中性0.05％高锰酸钾溶液易还原性化合物在淡红背景上显黄色。

④碱性高锰酸钾试剂还原性化合物在淡红色背景上显黄色。

溶液I：1％高锰酸钾溶液；溶液Ⅱ：5％碳酸钠溶液；溶液I和溶液Ⅱ等量混合应用。

⑤酸性高锰酸钾试剂喷1.6％高锰酸钾浓硫酸溶液(溶解时注意防止爆炸)，喷后薄层于180oC加热15～20min。

⑥酸性重铬酸钾试剂喷5％重铬酸钾浓硫酸溶液，必要时150oC 烤薄层。

⑦5％磷钼酸乙醇溶液喷后120oC烘烤，还原性化合物显蓝色，再用氨气薰，则背景变为无色。

⑧铁氰化钾-三氯化铁试剂还原性物质显蓝色，再喷2mol／L盐酸溶液，则蓝色加深。

溶液I：1％铁氰化钾溶液；溶液Ⅱ：2％三氯化铁溶液；临用前将溶液I和溶液Ⅱ等量混合。

2．专属性显色剂由于化合物种类繁多，因此专属性显色剂也是很多的，现将在各类化合物中最常用的显色剂列举如下：(1)烃类①硝酸银／过氧化氢检出物：卤代烃类。

溶液：硝酸银O.1g溶于水lml，加2-苯氧基乙醇lOOml，用丙酮稀释至200ml，再加30％过氧化氢1滴。

方法：喷后置未过滤的紫外光下照射；结果：斑点呈暗黑色。

②荧光素／溴检出物：不饱和烃。

溶液：I．荧光素0.1g溶于乙醇lOOml；Ⅱ．5％溴的四氯化碳溶液。

方法：先喷(I)，然后置含溴蒸气容器内，荧光素转变为四溴荧光素(曙红)，荧光消失，不饱和烃斑点由于溴的加成，阻止生成曙红而保留荧光，多数不饱和烃在粉红色背景上呈黄色。

显色剂的配制方法[

显色剂配置方法碘：不饱和或者芳香族化合物配制方法在100ml广口瓶中，放入一张滤纸，少许碘粒。

或者在瓶中，加入10g碘粒，30g硅胶紫外灯含共厄基团的化合物，芳香化合物硫酸铈：生物碱配制方法10%硫酸铈(IV)+15%硫酸的水溶液氯化铁苯酚类化合物配制方法1% FeCl3 + 50% 乙醇水溶液.桑色素(羟基黄酮)广谱, 有荧光活性配制方法0.1% 桑色素+甲醇茚三酮氨基酸配制方法1.5g 茚三酮+ 100mL of 正丁醇+ 3.0mL 醋酸二硝基苯肼(DNP)醛和酮配制方法12g二硝基苯肼+ 60mL 浓硫酸+ 80mL 水+ 200mL 乙醇香草醛(香兰素)广谱配制方法15g 香草醛+ 250mL 乙醇+2.5mL 浓硫酸高锰酸钾含还原性基团化合物，比如羟基，氨基，醛配制方法1.5g KMnO4 + 10g K2CO3 + 1.25mL 10% NaOH + 200mL 水. 使用期3个月溴甲酚绿羧酸，pKa<=5.0配制方法在100ml乙醇中，加入0.04g溴甲酚绿，缓慢滴加0.1M的NaOH水溶液，刚好出现蓝色即至。

钼酸铈广谱配制方法235 mL 水+ 12 g 钼酸氨+ 0.5 g 钼酸铈氨+ 15 mL 浓硫酸茴香醛(对甲氧基苯甲醛)1广谱配制方法135 乙醇+ 5 mL 浓硫酸+ 1.5 mL of 冰醋酸+ 3.7 mL 茴香醛，剧烈搅拌，使混合均匀.茴香醛(对甲氧基苯甲醛)2萜烯，桉树脑(cineoles), withanolides, 出油柑碱(acronycine)配制方法茴香醛:HClO4:丙酮:水(1:10:20:80)磷钼酸(PMA)广谱配制方法10 g of 磷钼酸+100 mL 乙醇用于有机液体较强的去水剂来源:中国化工论坛整理:chemnews1有机化合物的鉴别来源:中国化工论坛整理:chemnews1在药品的生产、研究及检验等过程中，常常会遇到有机化合物的分离、提纯和鉴别等问题。

显色剂

l．通用显色剂1、碘配制方法：在100ml广口瓶中，放入一张滤纸，少许碘粒。

或者在瓶中，加入10g碘粒，30g硅胶。

3、香草醛1 (香兰素)配制方法：15g 香草醛+ 250mL 乙醇+2.5mL 浓硫酸4、香草醛2配制方法：1g 香草醛55mL 浓硫酸5、钼酸铈配制方法：235 mL 水+ 12 g 钼酸氨+ 0.5 g 钼酸铈氨+ 15 mL 浓硫酸6、茴香醛1(对甲氧基苯甲醛)配制方法：135 乙醇+ 5 mL 浓硫酸+ 1.5 mL of 冰醋酸+ 3.7 mL 茴香醛，剧烈搅拌，使混合均匀7、桑色素养（羟基黄酮）配制方法：0.1% 桑色素+甲醇适用对象：广谱, 有荧光活性8、硫酸常用的有四种溶液：硫酸-水(1：1)溶液；硫酸-甲醇或乙醇(1：1)溶液；1.5mol／L硫酸溶液与0.5-1.5mol／L硫酸铵溶液，喷后110oC烤15min，不同有机化合物显不同颜色。

9、0.5％碘的氯仿溶液对很多化合物显黄棕色。

10、中性0.05％高锰酸钾溶液易还原性化合物在淡红背景上显黄色。

11、碱性高锰酸钾试剂还原性化合物在淡红色背景上显黄色。

溶液I：1％高锰酸钾溶液；溶液Ⅱ：5％碳酸钠溶液；溶液I和溶液Ⅱ等量混合应用。

12、酸性高锰酸钾试剂喷1.6％高锰酸钾浓硫酸溶液(溶解时注意防止爆炸)，喷后薄层于180oC加热15～ 20min。

13、酸性重铬酸钾试剂喷5％重铬酸钾浓硫酸溶液，必要时150oC烤薄层。

14、5％磷钼酸乙醇溶液喷后120oC烘烤，还原性化合物显蓝色，再用氨气薰，则背景变为无色。

15、铁氰化钾-三氯化铁试剂还原性物质显蓝色，再喷2mol／L盐酸溶液，则蓝色加深。

溶液I：1％铁氰化钾溶液；溶液Ⅱ：2％三氯化铁溶液；临用前将溶液I和溶液Ⅱ等量混合。

2．专属性显色剂由于化合物种类繁多，因此专属性显色剂也是很多的，现将在各类化合物中最常用的显色剂列举如下：(1) 烃类①硝酸银／过氧化氢检出物：卤代烃类。

薄层色谱显色剂配置

薄层色谱显色剂的配置．通用显色剂①硫酸常用的有四种溶液：硫酸-水(1：1)溶液；硫酸-甲醇或乙醇(1：1)溶液；1.5mol／L硫酸溶液与0.5-1.5mol／L硫酸铵溶液，喷后110oC烤15min，不同有机化合物显不同颜色。

②0.5％碘的氯仿溶液对很多化合物显黄棕色。

③中性0.05％高锰酸钾溶液易还原性化合物在淡红背景上显黄色。

④碱性高锰酸钾试剂还原性化合物在淡红色背景上显黄色。

溶液I：1％高锰酸钾溶液；溶液Ⅱ：5％碳酸钠溶液；溶液I和溶液Ⅱ等量混合应用。

⑤酸性高锰酸钾试剂喷1.6％高锰酸钾浓硫酸溶液(溶解时注意防止爆炸)，喷后薄层于180oC加热15～20min。

⑥酸性重铬酸钾试剂喷5％重铬酸钾浓硫酸溶液，必要时150oC烤薄层。

⑦5％磷钼酸乙醇溶液喷后120o C烘烤，还原性化合物显蓝色，再用氨气薰，则背景变为无色。

⑧铁氰化钾-三氯化铁试剂还原性物质显蓝色，再喷2mol／L盐酸溶液，则蓝色加深。

溶液I：1％铁氰化钾溶液；溶液Ⅱ：2％三氯化铁溶液；临用前将溶液I和溶液Ⅱ等量混合。

2．专属性显色剂由于化合物种类繁多，因此专属性显色剂也是很多的，现将在各类化合物中最常用的显色剂列举如下：(1)烃类①硝酸银／过氧化氢检出物：卤代烃类。

溶液：硝酸银O.1g溶于水lml，加2-苯氧基乙醇lOOml，用丙酮稀释至200ml，再加30％过氧化氢1滴。

方法：喷后置未过滤的紫外光下照射；结果：斑点呈暗黑色。

②荧光素／溴检出物：不饱和烃。

溶液：I．荧光素0.1g溶于乙醇lOOml；Ⅱ．5％溴的四氯化碳溶液。

方法：先喷(I)，然后置含溴蒸气容器内，荧光素转变为四溴荧光素(曙红)，荧光消失，不饱和烃斑点由于溴的加成，阻止生成曙红而保留荧光，多数不饱和烃在粉红色背景上呈黄色。

③四氯邻苯二甲酸酐检出物：芳香烃。

溶液：2％四氯邻苯二甲酸酐的丙酮与氯代苯(10：1)的溶液。

方法：喷后置紫外光下观察。

④甲醛／硫酸检出物：多环芳烃。

赖氏法-ALT

赖氏法测定血清丙氨酸氨基转移酶【原理】L-丙氨酸 + α-酮戊二酸−−→−ALT α-丙酮酸 + L-谷氨酸 α-丙酮酸 + 2，4-二硝基苯肼−−−→−碱性条件下2，4-二硝基苯腙（红棕色，λ=505nm ）利用比色分析原理将样品显色与丙酮酸标准品配制成的系列标准液比较，求出样品中丙氨酸氨基转移酶（ALT ）活性。

【试剂】1．0.1mol/L 磷酸二氢钾溶液称取KH 2PO 4 13.61g ，溶解于蒸馏水中，加水至1 000ml ，4℃保存。

2．0.1mol/L 磷酸氢二钠溶液称取Na 2HPO 414.22g ，溶解于蒸馏水中，并稀释至1 000ml ，4℃保存。

3．0.1mol/L 磷酸盐缓冲液（pH7.4）取420ml 0.1mol/L 磷酸氢二钠溶液和80ml 0.1mol/L 磷酸二氢钾溶液，混匀，即为pH7.4的磷酸盐缓冲液。

加氯仿数滴，4℃保存。

4．基质缓冲液精确称取D-L-丙氨酸1.79g ，α-酮戊二酸29.2mg ，先溶于0.1mol/L 磷酸盐缓冲液约50ml 中，用1mol/L NaOH 调pH 至7.4，再加磷酸盐缓冲液至100ml ，4～6℃保存，该溶液可稳定2w 。

每升底物缓冲液中可加入麝香草酚0.9g 或加氯仿防腐，4℃保存。

配成200mmol/L 丙氨酸与2.0mmol/Lα-酮戊二酸基质缓冲液。

5．1.0mmol/L 2，4-二硝基苯肼溶液称取2，4-二硝基苯肼（AR ）19.8mg ，溶于1.0mol/L 盐酸100ml ，置棕色玻璃瓶中，室温中保存，若冰箱保存可稳定2个月。

若有结晶析出，应重新配制。

6．0.4mol/L NaOH 溶液称取NaOH 1.6g 溶解于蒸馏水中，并加蒸馏水至100ml ，置具塞塑料试剂瓶内，室温中可长期稳定。

7．2.0mmol/L 丙酮酸标准液准确称取丙酮酸钠（AR ）22.0mg ，置于100ml 容量瓶中，加0.05mol/L 硫酸至刻度。

常用有机试剂配制

常用试剂的配制【2,4-二硝基苯肼试剂】Ⅰ．取3g 2,4-二硝基苯肼溶于15mL浓硫酸中。

将此酸性溶液慢慢加入70mL95%乙醇中，再加蒸馏水稀释到90mL，搅动混合均匀即成橙红色溶液（若有沉淀应过滤）。

Ⅱ．将1.2g 2,4-二硝基苯肼溶于50mL30%高氯酸中。

配好后储于棕色瓶中，不易变质。

I 法配制的试剂2,4-二硝基苯肼浓度较大，反应时沉淀多便于观察。

Ⅱ法配制的试剂，由于高氯酸盐在水中溶解度很大，因此便于检验水溶液中的醛且较稳定，长期贮存不易变质。

【饱和亚硫酸氢钠溶液】先配制40%亚硫酸氢钠水溶液。

然后在每100mL的40 %亚硫酸氢钠水溶液中，加不含醛的无水乙醇25mL，溶液呈透明清亮状。

如有少量的亚硫酸氢钠结晶析出，必须滤去或倾斜上层清液。

由于亚硫酸氢钠久置后易失去二氧化硫而变质，所以上述溶液也可按下法配制：将研细的碳酸钠晶体（Na2CO3·10H2O）与水混合，水的用量使粉末上只覆盖一薄层水为宜。

然后在混合物中通入二氧化硫气体，至碳酸钠近乎完全溶解，或将二氧化硫通入1份碳酸钠与3份水的混合物中，至碳酸钠全部溶解为止。

配制好后密封放置，但不可放置太久，最好是用时新配。

【Schiff（希弗）试剂】配制方法有三种:1．将0.2g对品红盐酸盐溶于100mL新制的冷却饱和二氧化硫溶液中，放置数小时，直至溶液无色或淡黄色，再用蒸馏水稀释至200mL，存在于玻璃瓶中，塞紧瓶口，以免二氧化硫逸散。

2．溶解0.5g对品红盐酸盐于100mL热水中，冷却后通入二氧化硫达饱和，至粉红色消失，加入0.5g活性炭，震荡过滤，再用蒸馏水稀释至500mL。

3．溶解0.2g对品红盐酸盐于100mL热水中，冷却后，加入2g亚硫酸钠和2mL浓盐酸，最后用蒸馏水稀释至200mL。

品红溶液原是粉红色，被二氧化硫饱和后变成无色的Schiff试剂。

醛类与Schiff试剂作用后，反应液呈紫红色。

酮类通常不与Schiff试剂作用，但是某些酮类(如丙酮等)能与二氧化硫作用，故当它与Schiff 试剂接触后能使试剂脱去亚硫酸，此时反应液就出现品红的粉红色。

常用试剂的配制

1、2，4－二硝基苯肼溶液I．在15mL浓硫酸中，溶解3克2，4－二硝基苯肼。

另在70mL95％乙醇里加20mL水，然后把硫酸苯肼倒入稀乙醇溶液中，搅动混合均匀即成橙红色溶液（若有沉淀应过滤）。

Ⅱ．将1.2克2，4一二硝基苯肼溶于50mL30％高氯酸中，配好后储于棕色瓶中，不易变质。

I法配制的试剂，2，4－二硝基苯肼浓度较大，反应时沉淀多便于观察。

Ⅱ法配制的试剂由于高氯酸盐在水中溶解度很大，因此便于检验水中醛且较稳定，长期贮存不易变质。

2、卢卡斯（Lucas）试剂将34克无水氯化锌在蒸发皿中强热熔融，稍冷后放在干燥器中冷至室温。

取出捣碎，溶于23mL浓盐酸中（比重1.187）。

配制时须加以搅动，并把容器放在冰水浴中冷却，以防氯化氢逸出。

此试剂—般是临用时配制。

3、托伦（Tollens）试剂I．取0.5mL10％硝酸银溶液于试管里，滴加氨水，开始出现黑色沉淀，再继续滴加氨水，边滴边摇动试管，滴到沉淀刚好溶解为止，得澄清的硝酸银氨水溶液，即托伦试剂。

Ⅱ．取一支干净试管．加入1mL5％硝酸银，滴加5％氢氧化钠2滴，产生沉淀，然后滴加5％氨水，边摇边滴加，直到沉淀消失为止，此为托伦试剂。

无论I法或Ⅱ法，氨的量不宜多，否则合影响试剂的灵敏度。

I法配制的Tollens试剂较Ⅱ法的碱性弱，在进行糖类实验时，用I法配制的试剂较好。

4、谢里瓦诺夫（Seliwanoff）试剂将0.05g间苯二酚溶于50mL浓盐酸中，再用蒸馏水稀释至100mL。

5、希夫（Schiff）试剂在100mL热水中溶解0.2g品红盐酸盐，放置冷却后，加入2g亚硫酸氢钠和2mL浓盐酸，再用蒸馏水稀释至200mL。

或先配制l0mL二氧化硫的饱和水溶液，冷却后加入0.2g品红盐酸盐，溶解后放置数小时使溶液变成无色或淡黄色，用蒸馏水稀释至200mL。

此外，也可将0.5g品红盐酸盐溶于l00mL热水中，冷却后用二氧化硫气体饱和至粉红色消失，加入0.5g活性炭，振荡过滤，再用蒸馏水稀释至500mL。

TLC显色试剂及配方大全2-专属性显色剂

TLC显色试剂及配方大全22．专属性显色剂由于化合物种类繁多，因此专属性显色剂也是很多的，现将在各类化合物中最常用的显色剂列举如下：(1) 烃类①硝酸银／过氧化氢检出物：卤代烃类。

溶液：硝酸银O.1g溶于水lml，加2-苯氧基乙醇lOOml，用丙酮稀释至200ml，再加30％过氧化氢1滴。

方法：喷后置未过滤的紫外光下照射；结果：斑点呈暗黑色。

②荧光素／溴检出物：不饱和烃。

溶液：I．荧光素0.1g溶于乙醇lOOml；Ⅱ．5％溴的四氯化碳溶液。

方法：先喷(I)，然后置含溴蒸气容器内，荧光素转变为四溴荧光素(曙红)，荧光消失，不饱和烃斑点由于溴的加成，阻止生成曙红而保留荧光，多数不饱和烃在粉红色背景上呈黄色。

③四氯邻苯二甲酸酐检出物：芳香烃。

溶液：2％四氯邻苯二甲酸酐的丙酮与氯代苯(10：1)的溶液。

方法：喷后置紫外光下观察。

④甲醛／硫酸检出物：多环芳烃。

溶液：37％甲醛溶液O.2ml溶于浓硫酸l0ml。

(2)醇类①3，5一二硝基苯酰氯检出物：醇类。

溶液：I．2％本品甲苯溶液；Ⅱ．0.5％氢氧化钠溶液；Ⅲ．O.002％罗丹明溶液。

方法：先喷(I)，在空气中干燥过夜，用蒸气薰2min，将纸或薄层通过试液(Ⅱ)30s，喷水洗，趁湿通过(Ⅲ)15s，空气干燥，紫外灯下观察。

②硝酸铈铵检出物：醇类。

溶液：I．1％硝酸铈铵的0.2mol／L硝酸溶液；Ⅱ．N,N-二甲基-对苯二胺盐酸盐1.5g溶于甲醇、水与乙酸(128m1+25m1+1．5m1)混合液中，用前将(I)与(Ⅱ)等量混合。

喷板后于105oC加热5min。

③香草醛／硫酸检出物：高级醇、酚、甾类及精油。

溶液：香草醛1g溶于硫酸lOOml。

方法：喷后于120oC加热至呈色最深。

④二苯基苦基偕肼’检出物：醇类、萜烯、羰基、酯与醚类。

溶液：本品15mg溶于氯仿25ml中。

方法：喷后于110oC加热5～lOmin。

结果：紫色背景呈黄色斑点。

(3)醛酮类①品红／亚硫酸检出物：醛基化合物。

TLC显色剂配比方法

⑥硫氰酸钴(Ⅱ)．
检出物：
生物碱、伯、仲、叔胺类。
溶液：
硫氰酸铵3g与氯化钴1g溶于水20ml。
结果：
白色至粉红色背景上呈蓝色斑点，2h后颜色消退。若将薄层喷水或放入饱和水蒸气容器内，可重现色点。
⑦1，2-萘醌-4-磺酸钠
检出物：
芳香胺类。
溶液：
本品0.5g溶于95ml水，加乙酸5ml，滤去不溶物即得。
溶液：10％氢氧化钠溶液、10％硝普钠溶液、10％铁氰化钾溶液与水按1：1：1：3混合，在室温至少放置20min，冰箱保存数周，用前将混合液与丙酮等体积混合。
②Dragendorff(碘化铋钾试剂)试剂
检出物：
芳香族含氮化合物，如生物碱类、抗心律不齐药物。
溶液：
I．碱式硝酸铋0.85g溶于10ml冰醋酸及40ml水中；Ⅱ．碘化钾8g溶于水20ml中。
检出物：
醛基化合物。
溶液：
I．0.01%品红溶液，通入二氧化硫直至无色；Ⅱ．0.05mol／L氯化汞溶液；
Ⅲ．O.05mol／L硫酸溶液。
方法：
将I、Ⅱ、Ⅲ以1：1：10混合，用水稀释至l00ml。②邻联茴香胺
检出物：
醛类、酮类。
溶液：
本品乙酸饱和溶液。
③2，4-二硝基苯肼
检出物：
醛基、酮基及酮糖。
④三氯化锑／乙酸
检出物：
甾类与二萜类。
溶液：
三氯化锑20g溶于乙酸20ml与氯仿60ml混合液中。
方法：
喷后于100oC加热5min，紫外光长波下观察。
结果：
二萜类斑点呈红黄-蓝紫色。
⑤对甲苯磺酸
检出物：
甾族化合物、黄酮类与儿茶酸类。
溶液：20％本品的氯仿溶液。

显色剂配制方法

显色剂配制方法中药成分鉴别常用显色剂及其配制方法一、通用显色剂（1）硫酸①浓硫酸与甲醇等体积小心混合，冷却；②15％浓硫酸的正丁醇溶液；③5％浓硫酸的乙酸酐溶液；④5％浓硫酸的乙醇溶液；⑤浓硫酸与乙酸等体积混合。

用以上任一试液喷薄层板后，于110℃烘烤15min，不同类的成分显不同颜色。

（2）碘①0.5％碘的氯仿溶液；②碘蒸气在一密闭的玻璃缸内预先放入少许碘结晶，使缸为碘蒸气饱和。

将薄层板放入缸内数分钟即可显色，碘对很多化合物显黄棕色。

（3）高锰酸钾-硫酸高锰酸钾0.5g溶于15ml 40％硫酸中。

检测易还原性物质。

（4）铬酸-硫酸重铬酸钾5g溶于100ml 40％硫酸中。

易还原性物质显色。

（5）荧光显色液①0.25％的罗丹明B乙醇溶液；②0.01％的荧光素乙醇溶液；③0.1％的桑色素乙醇溶液。

用以上任一试液喷薄层板后，在荧光背景下可能显黑色或其他荧光斑点。

二、专属性显色剂（一）生物碱及含氮类化合物（1）改良碘化铋钾（Dragendorff）试剂①碱式硝酸铋0.85g溶于10ml冰醋酸与40ml水中；②碘化钾0.8g溶于20ml水中。

试液①与试液②等量混合置棕色瓶内保存作贮备液。

用前将1ml贮备液、2ml冰醋酸与10ml水混合。

用于生物碱与某些含氮化合物，显橙红色。

（2）碘-碘化钾（Wagner）碘1g与碘化钾10g溶于50ml水（微温），加2ml乙酸，加水至100ml。

用于生物碱，显棕褐色。

（3）碘铂酸5ml 15％氯化铂溶液加45ml 10％碘化钾溶液，用水稀释至100ml。

用于生物碱，不同生物碱显不同颜色。

（4）碘铂酸钾 10％六氯铂酸溶液3ml与97ml水混合，加100ml 6％碘化钾溶液，混匀。

新鲜配制。

用于生物碱与其他有机含氮化合物，不同生物碱显不同颜色。

（5）Ehrlich ①10％对二甲氨基苯甲醛盐酸溶液与丙酮按1:4混合。

②对二甲氨基苯甲醛1g，溶于100ml 96％乙醇中。

用于吲哚类，有时喷后要加热。

显色剂的配制方法

1.乙醇制氢氧化钾试液可取用乙醇制氢氧化钾滴定液（0.5mol/L）。

2.乙醇制氨试液取无水乙醇，加浓氨试液使100ml中含NH39～11g，即得。

本液应置橡皮塞瓶中保存。

3.乙醇制硫酸试液取硫酸57ml，加乙醇稀释至1000ml，即得。

本液含H2SO4应为9.5%～10.5%。

4.乙醇制溴化汞试液取溴化汞2.5g，加乙醇50ml，微热使溶解，即得。

本液应置玻璃塞瓶内，在暗处保存。

5.二乙基二硫代氨基甲酸银试液取二乙基二硫代氨基甲酸银0.25g，加三氯甲烷适量与三乙胺1.8ml，加三氯甲烷至100ml，搅拌使溶解，放置过夜，用脱脂棉滤过，即得。

本液应置棕色玻璃瓶内，密塞，置阴凉处保存。

6. 二硝基苯试液取间二硝基苯2g，加乙醇使溶解成100ml，即得。

7.二硝基苯甲酸试液取3，5-二硝基苯甲酸1g，加乙醇使溶解成100ml，即得。

8. 二硝基苯肼乙醇试液取2,4-二硝基苯肼1g，加乙醇1000ml使溶解，再缓缓加入盐酸10ml，摇匀，即得。

9. 二硝基苯肼试液取2,4-二硝基苯肼1.5g，加硫酸溶液(1→2)20ml，溶解后，加水使成100ml，滤过，即得。

10. 三硝基苯酚试液本液为三硝基苯酚的饱和水溶液。

11. 三氯化铁试液取三氯化铁9g，加水使溶解成100ml，即得。

12. 三氯化铝试液取三氯化铝1g，加乙醇使溶解成100ml，即得。

13. 三氯化锑试液本液为三氯化锑饱和的三氯甲烷溶液。

14. 水合氯醛试液取水合氯醛50g,加水15ml与甘油10ml使溶解，即得。

15. 甘油乙醇度液取甘油、稀乙醇各1份，混合即得。

16. 甘油醋酸试液取甘油、50％醋酸与水各1份，混合，即得。

17. 甲醛试液取用“甲醛溶液”。

18. 四苯硼钠试液取四苯硼钠0.1g，加水使溶解成100ml，即得。

19. 对二甲氨基苯甲醛试液取对二甲氨基苯甲醛0.125g，加无氮硫酸65ml与水35ml的冷混合液溶解后，加三氯化铁试液0.05ml，摇匀，即得。

有机TLC显色办法

作为学有机化学的，在平时工作实验中，最最不可缺少的就是TLC点板跟踪反应，而显色剂的种类大家都知道有多少种？好的显色剂不但能够让你工作更加效率，更多的有可能帮助你减少失误。

那么今天，这一篇，笔者罗列了几乎所有常用的显色剂，希望能够帮助到大家。

注：TLC在浸润以下显色剂后，都一般需要热烤才能显色！1. 4-甲氧基苯甲醛显色(适用于：所有有机化合物)原料1. 4-甲氧基苯甲醛(p-anisaldehyde) 13mL2. 醋酸(AcOH) 5mL3. 浓硫酸(conc. H2SO4) 18mL4. 乙醇(EtOH) 478mL调配方法：把1,2,4在冰浴条件下混合后，缓慢滴加3，冷藏保存。

2. 磷钼酸显色剂(适用于：所有有机化合物，特别是含有氢氧基的化合物)原料1. 磷钼酸(12MoO3・H3PO4) 5g2. 乙醇(EtOH) 100mL调配方法：把1,2混合成溶液即可使用。

3. 铈– 钼酸铵显色别名：Hanessian染色液(适用于：所有有机化合物)原料1. 钼酸铵((NH4)6Mo7O24・4H2O) 25g2. 硫酸铈(Ce(SO4)2) 5g3. 浓硫酸(conc. H2SO4) 50mL4. 蒸馏水(H2O) 450mL调配方法：把1,2,4混合后缓慢滴加入3，均匀搅拌，即可使用。

4. 茚三酮显色(适用于：胺基化合物)原料1. 茚三酮((ninhydrin) 0.3g2. 醋酸(AcOH) 3mL3. 正丁醇(n-BuOH) 100mL调配方法：把1,2,3混合成溶液即可小窍门(对于比较难显色的胺基化合物)把TLC蘸一下HBr溶液在加热板上加热烤一下后再蘸取茚三酮显色剂。

注意：茚三酮接触皮肤的话也会将其染成粉紫色5. 二硝基苯肼显色简称：DNP显色(适用于：醛或酮类)原料1. 2,4-二硝基苯肼12g2. 浓硫酸(conc. H2SO4) 60mL3. 蒸馏水(H2O) 80mL4. 乙醇(EtOH) 200mL调配方法：把1,3,4混合后缓慢滴加2，搅拌混合成溶液即可。

2,4-二硝基苯肼显色剂配制方法

一药典附录试液配制:1、二硝基苯肼乙醇试液取2,4-二硝基苯肼1g，加乙醇1000ml使溶解，再缓缓加入盐酸10ml，摇匀，即得。

2、二硝基苯肼试液取2,4-二硝基苯肼1.5g，加硫酸溶液(1→2)20ml，溶解后，加水使成100ml，滤过，即得。

二、其它配制方法（一）有机试剂中微量羰基化合物测定用1、0.050g2，4-二硝基苯肼溶于25mL无羰基的甲醇和2mL盐酸溶液中，用水稀释至50mL。

2周内有效。

2、0.030g2，4-二硝基苯肼溶于94mL无羰基甲醇中，加1 5mL盐酸，混匀，当日配制。

注：在酸性介质中，羰基化合物与本试剂反应，生成2，4-二硝基苯腙，在碱性溶液中呈暗红色，可用于分光光度法（445nm处测吸光度）或目视比色法测定羰基化合物。

（二）羰基化合物定性用1、在50mL30%高氯酸中溶解1 2g2，4-二硝基苯肼。

贮于棕色瓶中，长期不坏。

2、2g2，4-二硝基苯肼溶于15mL浓硫酸中，把所得溶液缓缓注入150mL95%乙醇中，用水稀释至500mL，必要时过滤。

贮于棕色瓶中。

注：醛或酮与2，4-二硝基苯肼反应生成黄色、橙色或红色的2，4-硝基苯腙沉淀。

2，4-二硝基苯腙的颜色与醛、酮的分子结构有一定的联系，不含共轭双键的醛、酮所形成的腙一般为黄色；和碳碳双键或芳环共轭的醛、酮所形成的腙一般为橙色或红色。

试剂1在水中溶解度大，可以检定稀水溶液中的醛，而试剂2差得多，用浓硫酸配成的试剂，日久会产生沉淀，影响试验的灵敏度。

（三）油脂羰基价测定用1、50mg2，4-二硝基苯肼溶于100mL精制苯中注1：油脂经氧化所生成的过氧化物会进一步分解为含羰基的化合物，羰基化合物与本试剂反应生成腙，在碱性条件下形成醌离子，呈褐红色或酒红色，在440nm处测吸光度值，可计算油品中的总羰基价。

注2：精制苯方法：取500mL苯，置1L分液漏斗中，加入50mL浓硫酸，小心振摇5min，开始振摇时注意放气，静置分层，弃去酸液，再加50mL浓硫酸，重复处理一次。