诊断酶学ppt
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(二)酶从损伤细胞中释放增加 疾病时大多数血清酶增高的主要机理。 主要原因: 缺氧
能量供应缺乏 酶的分子量越小,从细胞内释出的速度越快。
(三)缺血 (四)炎症 (五)坏死 (六)肿瘤
七、血清酶的选择原则:
可靠、可行的测定方法 特异性、灵敏度高——明确诊断和早期诊 断
八、血清酶测定在临床诊断中应用
1、固定时间法(两点法) 测定反应开始后某一时间内(t1到t2)产
物或底物浓度的总变化量来求取酶反应初 速度的方法。
特点:需加终止剂;
应做预试验确定线性时间;
比色计或分光光度计无需保温装置。
2、连续监测法(动力学法或速率法) 连续测定(每15s-20min监测一次)酶反
应过程中某一反应产物或底物的浓度随时 间的变化来求出酶反应初速度的方法。
③CK同工酶 (1). 类型
肌酸激酶(CK)亚基及其同工酶
CK亚基 CK同工酶 主要的组织部位
M
MM
骨骼肌
B
MB
心肌
BB
脑和结肠
Mt
MtMt 肌肉、脑和结肠
(2). CK-MB对诊断心梗的特异性高
⒊急性心梗后三者变化情况
升高时间 达峰时间 持续时间
CK- 发病后4-8h 发病后24h 48h MB
(一)细胞酶的释放 Ⅰ. 细胞内外酶浓度的差异 Ⅱ.酶在细胞内定位与存在形式 Ⅲ.酶蛋白分子量的大小
(二)酶在细胞外间隙的分布和运送 细胞中的酶经过三种途径进入血液: ❖直接进入血液; ❖既和组织间隙也和血液直接相接触; ❖大部分进入组织液,经淋巴系统入血。
(三)血中酶的清除
一般以血中酶的半寿期代表酶从血中 清除快慢。
二、血清酶的分类
(一)血清(浆)特异酶:在血清(浆)中 发挥催化作用的酶类,有明确的生理功能, 含量高于其他组织。
(二)非特异的血浆酶:在血中不起任何生 理作用,浓度明显低于组织和细胞中含量。
Ⅰ. 外分泌酶:血清中来源于外分泌腺的酶。 Ⅱ.细胞酶:存在于机体各种组织细胞中进行
物质代谢的酶类。
三、血清酶变化的病理生理机制
AST
肝硬化: ALT轻度增高,
AST增高程度常超过ALT
2. 谷氨酸脱氢酶(GLDH) 分布:肝细胞含量最丰富 临床意义:肝小叶中央区坏死指标(四氯 化 碳中毒,转氨酶/GLDH ) 酒精性肝损伤诊断
3. 山梨醇脱氢酶(SDH) 含量 主要反映肝胆系统的病变 特异性好,灵敏度和阳性率较差
4. 胆碱酯酶(ChE) 由肝脏合成分泌入血,是肝脏合成蛋白质 功能的指标
底物的酶量为1个国际单位。 ❖Katal单位:在确定的最适反应条件下每秒
钟催化一个摩尔底物变化所需要的酶量。
(二)标本的采集、处理与贮存 1. 体外溶血 2. 一般采用血清标本 3. 酶蛋白不稳定,易失活
六、疾病时血清酶活力改变的机制
(一)酶合成异常 1. 合成减少:肝功能损伤 2. 合成增多:恶性肿瘤
诊断酶学
目的与要求
▪ 掌握:血清酶变化的病理生理机制;
▪
临床诊断中常用的血清酶类及其同工酶。
▪ 熟悉:缺血性冠状动脉和肝胆疾病的酶学诊断。
▪ 了解:血清酶的分类。
一、概述
什么是酶?
一类由活细胞产生,催化效率高、特 异性强的生物催化剂。
为什么学习有关酶的知识?
(一)诊断酶学的发展简史
❖20世纪初临床就开始测定体液中的酶 ❖1908年测尿AMY活力——诊断急性胰腺炎 ❖30年代ALP用于诊断骨骼疾病 ❖诊断酶学的真正发展从50年代用分光光度
(四)酶合成异常
对于血浆特异酶,细胞内酶合成下降 是引起血中酶变化的重要因素。
(五)其它
抑制剂和活化剂
四、血清酶的生理变异
(一)性别 (二)年龄 (三)进食 (四)运动 (五)妊娠与分娩
五、测定方法、标本处理等对测定结果 的影响
(一)酶测定方法及条件 ❖固定时间法 ❖连续监测法 ❖平衡法 ❖免疫学方法
Ⅰ.肝细胞损伤的酶类
1.转氨酶——丙氨酸氨基转移酶(ALT)、Biblioteka Baidu天冬氨酸氨基转移酶(AST)
(1)分布特点 AST含量多少顺序:心脏、肝、骨骼肌、肾 ALT含量多少顺序:肝、肾、心、骨骼肌
(2)在各类肝细胞疾病中的变化
ALT主要存在于细胞质中;
AST主要存在于线粒体中;
病毒性肝炎:ALT
AST
重症肝炎: ALT
Ⅳ. 心肌梗死的血清酶
⒈ AST、LDH和CK的比较
分布
特异性
AST
分布广泛,
心肌含量最高
不高
CK 存在于骨骼肌、心 肌、脑中
较高
LDH
分布广泛
不高
⒉ AST、LDH、CK同工酶
① AST同工酶 c-AST——细胞质 m-AST——线粒体
② LDH同工酶
(1)类型
(2)正常与疾病时的特点
正常血清:LDH2>LDH1>LDH3>LDH4> LDH5 心 梗 : LDH1>LDH2>LDH3>LDH4> LDH5
AST
其次
其次
LDH
最晚
较晚
5-6天
Ⅴ. 胰腺疾病的血清酶
——-淀粉酶(AMY) 急性胰腺炎:2-12小时 AMY明显
12-72小时 达到高峰 持续3-4天,一周内恢复
Ⅵ. 骨骼疾病的血清酶
肝病时,ChE合成下降,血清ChE
Ⅱ.胆道梗阻的酶类
1.碱性磷酸酶(ALP) 阻塞性黄疸病人血清ALP活性升高 完全梗阻》不完全梗阻 肝外阻塞》肝内阻塞 癌性梗阻》良性梗阻
2. -谷氨酰转肽酶(-GT) 胆管梗阻的指标,灵敏度及阳性率优于ALP
3. 5'-核苷酸酶(5'-NT)
Ⅲ. 肝纤维化的酶——单氨氧化酶(MAO)
特点:结果准确;
无需终止反应;
仪器必须有保温装置;
产物或底物应是可直接测定的化合物。
3、平衡法(终点法) 通过测定酶反应开始至反应达到平衡时产
物或底物浓度总变化量来求出酶活力的方 法。
特点:无需终止反应;
反应时间长,影响因素多;
适合零级反应期很短的酶促反应。
酶单位:反映在某一特定条件下使酶促反应 达到某一速度所需要的酶量。 ❖惯用单位 ❖国际单位(IU):每分钟能催化1微摩尔
法建立了连续监测酶活性方法开始 ❖70年代开始起,逐步将注意力集中到同工
酶测定上,又随免疫学和技术方法的开展, 用抗原抗体反应有可能直接测定微量的酶 蛋白。
(二)广泛利用酶诊断的原因
1. 测定酶活力的方法灵敏度、准确性较好; 2. 酶活力的变化早于临床体征或其他诊断指
标
(三)诊断酶学的作用:
各种疾病的诊断、预后和随访观察