流式细胞仪基本原理及应用汇总.

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流式细胞仪－光路系统
激光 (Laser)是一种相干光源，它能提供
单一波长、单一方向、同步的稳定光照
激光波长: 488nm, 635nm 光收集系统是由若干组透镜,
滤波片, 小孔组成，将产生的光信号引导至检测器
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大型机——FACSVantage SE
科研型 八荧光参数
高速分选
多路分选
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免疫学教研室
流式细胞仪在临床检测和 临床科研中的应用
李 柏 青 蚌埠医学院免疫学教研室
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流式细胞仪的基本工作原理以及在基础 和临床科研中的应用
流式细胞仪和流式细胞术－概述
Injector Tip
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Injector Tip
Sheath fluid
Fluorescence signals Focused laser beam
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台式机——FACSCalibur
双激光
488nm 635nm
四荧光参数 分选、浓缩系统
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一、流式细胞仪和流式细胞术的基本概念
流式细胞仪(Flow Cytometer， FCM):
是集合光电子物理，光电测量技术，
液流技术，计算机技术等现代高科技 技术为一体的细胞测量和分析仪器。
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一、流式细胞仪和流式细胞术－特点
多参数测量和分析（散射光和荧光） ；
快速测量和分析 每秒可达1000-10000个细胞 分选纯度可达99%以上。 获取的数据分析结果更具有统计学意义； 通常测量的对象如各种细胞细胞必须处在单
个细胞悬液中。此外，也可测量微生物等生 物颗粒，或者工合成微球非生物颗粒，
激光光源，光路系统（透镜、滤光片）
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电子系统：光电倍增管（PMT），补偿电路
液流系统： 鞘液系统，样品流动系统
数据系统：计算机，数据测量和分析软件。
细胞分选系统
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光路系统
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光学检测信号
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流式细胞仪的光学系统 FACSCalibur
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流式细胞仪的工作原理和测量参数
流式细胞仪在临床检测和科研中的应用
免疫学检测和科研应用 血液病检测和科研应用 肿瘤学检测和科研应用
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一、流式细胞仪和流式细胞术的基本概念
流式细胞术(Flow Cytometry，FCM):
是应用流式细胞仪，对处于快速流动
液体中的细胞或生物颗粒进行多参数、 快速测量和定量分析，以及分选的技 术。
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流式细胞仪与荧光显微镜比较
流式细胞仪 流动的细胞 荧光显微镜 静止的细胞样本
数量大
高速分选
数量少
样本难以再利用
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细胞群体特征量分布
可揭示细胞内部结构信息
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二、流式细胞仪的工作原理和测量参数
（一） 流式细胞仪的结构
光路系统：
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流式细胞仪－液流系统
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液流系统：鞘液系统＋样品流动系统
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流式细胞仪－光学系统
激发光源与荧光标记物
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