荧光分光光度法在药物分析中的应用

荧光分光光度法在药物分析中的应用
【摘要】荧光分光光度法属于药物分析法中光化学分析法其中的可见分光光度法，它是利用物质所产生的荧光特性来定性或者定量分析物质样品的分析方法，其具有选择高、灵敏度高、检测限低以及信息量丰富等优点。

由于许多有机药物（如芳香化合物等）都具有特征性的荧光吸收光谱，因此荧光分光光度法在药物分析中得到了极广泛的应用。

【关键词】荧光分光光度法荧光分光光度计药物分析定量分析
一、荧光分光光度法的原理及荧光分光光度计简介
荧光是指物质分子接受紫外-可见光光子的能量被激发之后，从激发态返回基态时所发
射出来的光，任何荧光物质分子均具有两个特征光谱，分别是激发光谱和发射光谱，根据斯托克斯位移可知，荧光发射波长永远大于激发光波长。

荧光强弱用荧光效率来表示，即发射荧光的光子数与基态吸收激发光的光子数之比。

由上述可知，物质能发射荧光所必须具备的条件是：1、有较强的紫外-可见吸收；2、
有一定的荧光效率。

所以，物质能否发射荧光以及荧光强度与以下几个方面有关：1、有π-π跃迁的长共轭结构（较强的紫外-可见吸收）；2、具有刚性平面结构（具有较高的荧光效率）；3、具有给电子取代基（助色团，增加紫外吸收，提高荧光效率）。

而大多数的化学合成药物均具有以上结构，因此具有发射荧光特性，所以可以利用荧光分析法进行药物分析。

目前广泛使用的荧光分光光度计是由激发光源（常采用氙灯，发射谱线强度较大且连续），激发单色器（置于样品池前，与光源成90°），发射单色器（置于样品池后），样品池和检
测系统组成，使用前需进行包括灵敏度、波长、激发光谱和发射光谱的校正。

二、利用荧光分光光度法进行药物分析实例
1.应用定量分析法测定样品含量
1.1工作曲线法
以系列中某一对照品溶液为基准以荧光强度为纵坐标，对照品溶液浓度为横坐标绘制标准工作曲线，将空白溶液荧光强度读数调为0，将对照品溶液荧
光强度读数调至100%或50%，之后测定待测样品的荧光强度。

在测定中药巴戟
天中蒽醌含量时，以，1, 8-二羟基蒽醌为对照品（丙酮做溶剂，在最大激发波
长425nm，最大发射波长513nm处测定）[1]。

1.2比例法
当标准工作曲线通过原点时，可以任选两个浓度用比例法测定，例如《中国药典》中对利血平含量的测定就采用了比例法进行荧光定量分析
1.3联立方程式
用于分析多组分的混合物。

2.应用其他荧光分析技术提高灵敏度和选择性
2.1激光诱导荧光分析
采用单色性极好、强度更大的激光作为光源，灵敏度提高，可进行单分子检测。

2.2同步荧光分析
同步荧光光谱法中恒定波长法使用较为广泛，指的是在扫描过程中保持发射波长和激发波长固定间距的分析方法，具有灵敏度高、干扰少等优点，用来
测定多环芳烃[2]并可以同时对氨基酸以及蛋白质等进行测定。

2.3胶束增敏荧光分析
胶束增敏荧光分析法能让荧光分子和表面活性剂在溶液中缔合，然后利用专属性荧光基团以及溶液化学等方法来改进荧光法专属性以及检测精度，具有
操作简便、灵敏度高以及选择性好等优点，主要用来测定药物中氟罗沙星的含
量。

三、荧光分析法的发展
荧光分析法具有简便、灵敏度高以及经济等优点，是一种应用非常广泛的光谱分析手段。

但是随着新型药物的不断出现，常规的荧光分析法已经无法满足当今时代不断升高的药物检测要求，激光诱导荧光分析，同步荧光光谱法以及胶束增敏荧光法等新型荧光分析法的出现为更高要求的分析检测提供了可能，但同时也是具有一定局限性的。

今后荧光分析法的发展方向是需要投入更大的力度研究新型的荧光分析法并将其更好地应用于药物分析中。

【参考文献】
[1]. Nakano T, Ikawa N, Ozimek L. An economical method to extrac tchondroitin sulphate-peptide from bovine nasal cartilage[J]. Can Agric Eng, 2000, 42(4) : 205-208．
[2]. Welschmeyer, N.A. Flurometric analysis of chlorophyll a in the presence of chlorophyll b and phaeopigments [J] . Limnology and Oceanography. 1994, 39: 1985-1992.。