实验十四 土壤微生物区系的埋片观察法

实验十四土壤微生物区系的埋片观察法

土壤微生物区系的埋片观察法

•目的要求

•实验材料

•实验程序

•思考题

目的要求

•学习观察和鉴别土壤环境中微生物的一种方法。

•了解土壤环境中某些微生物的排列和空间分布状态，微生物之间以及微生物与土粒之间的相互关系。

实验材料

•供试土壤。

•直径为10cm高为8—10cm左右的瓷钵2个。•洁净的载玻片，4片。

•加入土壤的有机质（如蛋白胨、豆饼粉或其他）。

•剖面刀

•孟加拉红酚染色液：称取1.0g孟加拉红和0.3g CaCl2加入100mL5%酚水溶液内。•显微镜、镜头油、二甲苯等。

•电炉、水浴锅、载玻片支架。

实验程序•埋片制备

•取出埋片并染色

•显微镜观察

实验程序Ⅰ

（埋片制备）

•制备土样

称取待测土壤100g，每组2份，其中1份加入

有机质1g，充分混匀后装入瓷钵，另一份作对照，并调节湿度。

•用剖面刀在土壤中划一缝，将清洁的载玻片垂直地插入土内，露出土面2cm左右。每钵插2片，贴好标签，用塑料布覆盖，以防土壤干燥，放入280C恒温室培养。

实验程序Ⅱ

（取出埋片并观察）

•上述材料培养1星期后取出载玻片。

•用水浸洗载玻片，以去除大的土粒，将载玻片风干。

•将风干载玻片置于沸水浴上，用孟加拉红染液热染10min，边蒸边染，以防染液蒸干。•水洗、晾干载片，待镜检。

实验程序Ⅲ

（显微镜观察）

•在油镜下，检出细菌和其它微生物，凡是深红色和红色的为微生物菌体；呈黄色、浅粉红色的或褐色的为惰性有机物；而矿物颗粒不着色，

•在油镜下仔细观察微生物细胞的密度，特有的群体，微生物间相互关系，微生物和土壤间的关系。

•比较加与不加有机质土壤，埋片观察微生物外貌的差异。

思考题

•进行埋片观察土壤生物区系应注意哪些问题？

实验十四结束