志贺菌属检验

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1．概述

志贺菌属分为4个群（种）：A群为痢疾志贺菌，B群为福氏志贺菌，C群为鲍氏志贺菌，D群为宋内志贺菌。

2. 标本类型

粪便、肛拭子标本。

3. 鉴定

3.1 形态与染色革兰阴性杆菌。

3.2 培养特性在麦康凯琼脂平板上35℃培养18～24小时，形成无色透明的小菌落。在SS琼脂平板上呈无色透明或半透明的较小菌落。

3.3 生化反应氧化酶试验阴性，发酵葡萄糖、甘露醇，不发酵乳糖、蔗糖，三糖铁琼脂（TSI）为K/A，甲基红和硝酸盐还原试验阳性，动力、VP、枸橼酸盐、脲酶、H2S和醋酸盐试验均阴性。

3.4 鉴别要点

3.4.1 本菌属特征在SS平板上无色透明或半透明的小菌落，TSI为K/A，发酵葡萄糖，不发酵乳糖，无动力，脲酶、H2S试验均阴性。符合上述特征者，可通过血清凝集试验作出诊断。如血清不凝集，应进一步鉴别。

3.4.2志贺菌属种间鉴别见表1

表1 志贺菌属种间鉴别的关键性试验（阳性%）

菌名半乳糖苷酶鸟氨酸甘露醇乳糖

福氏志贺菌 1 0 95 1

痢疾志贺菌30 0 0 0

鲍氏志贺菌10 2 97 1

宋内志贺菌90 98 99 2*

注：*为迟发反应。

3.5 操作步骤

3.5.1 观察菌落特征，挑取可疑菌落，做TSI试验。参见《三糖铁试验标准操作规程》。

3.5.2 血清学鉴定参见《志贺菌血清学检测标准操作规程》。

3.5.3 鉴定从SS琼脂平板上挑取纯菌落，用微生物鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。

4. 药敏

参见《药物敏感性试验标准操作规程》。

5. 质量控制

参见《质量管理程序》。

6. 检验结果解释与分析

一般志贺菌不进入血液，所以只取粪便和肛拭子标本作培养。本菌大多数菌株对氯霉素、链霉素、氨苄西林耐药，多数菌株对卡那霉素、庆大霉素敏感。

7. 临床意义

志贺菌属引起细菌性痢疾，表现为腹痛、发热、大量水样便，1-2日后转为少量腹泻（有里急后重现象），便中含有多量的血、黏液和白细胞。临床主要有两种类型：急性细菌性痢疾，又分典型和不典型两种，后者症状不典型，容易造成误诊和漏诊；慢性细菌性痢疾，常因急性菌痢治疗不彻底，造成反复发作、迁延不愈，病程超过2个月以上视为慢性菌痢。

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8. 鉴定流程

参考文献

[1] 中国合格评定国家认可委员会.CNAS-GL23:2008医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领域的指南.2008

[2] 周庭银编著.临床微生物学诊断与图解.第二版.上海：上海科学技术出版社，2007

[3] 叶应妩，王毓三，申子瑜主编.全国临床检验操作规程.第3版.南京：东南大学出版社，2006

[4] Murray PR. Manual of Cinical Microbilogy. 9th ed.Washington:ASM Press,2007 [5] ISO 15189：2007医学实验室-质量和能力认可准则. 2007

分离培养（SS 、MAC ） 初步鉴定：TSI ，KIA/MIU

菌落观察：SS 平板上呈无色透明或半透明较小菌落 血清鉴定

粪便、尿、残余食物

增菌培养（GN 肉汤） 志贺菌属 仪器或手工细菌鉴定