人参皂苷Re的提取
实验六人参中人参皂苷的提取分离及鉴定
实验六人参中人参皂苷的提取分离及鉴定人参为五加科植物人参(Panax ginseng C.A.Mey.)的干燥根,是传统名贵中药,始载于我国第一部本草专著《神农本草经》。
其栽培者称为“园参”,野生者称为“山参".人参具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津、安神之功能,用于体虚欲脱、肢冷脉微、脾虚食少、肺虚喘咳、津伤口渴、内热消渴、久病虚羸、惊悸失眠、阳痿宫冷、心力衰竭、心源性休克等的治疗。
人参的化学成分很复杂,有皂苷、挥发油、糖类及维生素等。
经现代医学和药理研究证明,人参皂苷为人参的主要有效成分,它具有人参的主要生理活性。
人参的根、茎、叶、花及果实中均含有多种人参皂苷(ginsenosides).到目前为止,文献报道从人参根及其它部位已分离确定化学结构的人参皂苷有人参皂苷-Ro、—Ra1、-Ra2 、—Rb1、—Rb2、—Rb3、-Rc、-Rd、—Re、—Rf、—Rg1、—Rg2、-Rg3、—Rh1、-Rh2及—Rh3 等50余种人参皂苷。
根据皂苷元的结构可分为A、B、C三种类型:①人参二醇型—A型,②人参三醇型-B型,③齐墩果酸型-C型。
A型和B型皂苷均属四环三萜皂苷,其皂苷元为达马烷型四环三萜,A型皂甙元称为20(S)—原人参二醇[20(S)-protopanaxadiol]。
B型皂甙元称为20(S)—原人参三醇[20(S)—protopanaxatriol]。
C型皂苷则是齐墩果烷型五环三萜的衍生物,其皂苷元是齐墩果酸(oleanolic acid)。
[目的要求]1。
通过实验进一步掌握三萜类化合物的理化性质及提取、分离和检识方法。
2。
学习和掌握简单回流提取法、两相溶剂萃取法、旋转蒸发器、大孔树脂柱色谱等基本实验操作技能.[实验原理]人参的主要成分为人参皂苷,总皂苷含量约4%,人参皂苷大多数是白色无定形粉末或无色结晶,味微甘苦,具有吸湿性.人参皂苷易溶于水,甲醇、乙醇,可溶于正丁醇、乙酸、乙酸乙酯,不溶于乙醚、苯等亲脂性有机溶剂。
人参皂苷Re的提取分离与鉴定
天然药物化学教研室
1
要求提取分离人参皂苷Re;
一、实验目的
2
掌握大孔树脂法提取人参皂苷的操作程序;
3
学习薄层层析在皂苷检识中的应用。
二、实验原理
果汁中含脂溶性杂质,用乙醚脱脂后,利于水溶 性皂苷在树脂上的吸附,籍此提取皂苷,且利用Re 溶于热乙醇,在冷乙醇溶解度小的特点析出 Re,与 其它成分分离。Biblioteka 四、鉴定1.泡沫实验
2.显色反应
3.薄层层析
取果汁1~2ml于试 管内,激烈振摇, 如产生多量蜂窝状 泡沫,放置10分钟 以上,泡沫不明显 减少,示有皂苷成 分。
LiebermannBurchard反应: 取果汁1ml,加等 量乙酸酐,滴加1 滴浓硫酸,变成紫红 色。
1)展开剂:1°氯仿:甲醇:乙酸 乙酯:水(2:2:4:1,下层) 2°氯仿:甲醇:水(65:35: 10,下层) 2)显色剂:5%硫酸乙醇溶液 (110℃以上加热5分钟)显红色、 紫红色斑点 。
2.人参皂苷Re的制备
取4/5量的乙醇提取物
少量展开剂2°溶解; 上样于硅胶H(40g)柱 展开剂1洗脱,每30ml为一流份收集
Fr3 ……
Fr1
Fr2
Fr13
TLC检测,合并Re单一斑点的流份 回收洗脱液至小体积(约20—30ml) 放置、析晶 Re粗晶B 95%乙醇重结晶 Re纯品C
注:①树脂柱用前需经无水乙醇处理; ②可用α—萘酚糖反应检测,实际中可目测,至 水洗液颜色变浅至清即可; ③洗脱时,自紫色带即将流出时,开始收集洗脱 液。收集1200~1500ml ④需半周时间; ⑤可用回流装置中脱色半小时。
五、思考题
1
1. 层析结果如何? 若想进一步得到 Re纯品应怎样程 序处理?
酸碱度对人参皂苷提取率及其稳定性影响分析
酸碱度对人参皂苷提取率及其稳定性影响分析【摘要】目的考察酸碱度对人参皂苷浸渍提取及其稳定性的影响。
方法采用高效液相色谱法测定人参皂苷总含量,以人参皂苷Rg1、人参皂苷Re的含量为考察指标,选用不同酸碱度的乙醇浸渍提取法提取人参皂苷,在加速与常温条件下考察人参皂苷稳定性。
结果乙醇pH值为8.7时,人参皂苷提取率最高;人参制剂最稳定的pH值为5.8。
结论调节提取溶剂及制剂的酸碱度,可有效提高人参皂苷的稳定性。
【关键词】人参皂苷;酸碱度;糖浆剂;浸渍提取人参为五加科植物人参(Panax ginsenC.A.Mey)的干燥根,具有大补元气,固脱生津,安神的功效。
近代医学研究表明[1,2],人参可促进大脑对能量物质的利用,可以提高学习记忆能力,增强机体的免疫功能,且具有抗肿瘤,抗氧化等多种功能。
人参的有效成份是人参皂苷,药理研究证明某些人参皂苷具有抗癌、抗心律失常等活性。
目前中药材提取方法多为水煎法[3]。
但人参皂苷具有热不稳定,在高温中极易被破坏的性质,水煎法提取效率最低[4],在乙醇溶液中有较好的溶解性,因此,采用乙醇溶液作为提取溶剂,能提高人参皂苷的提取率、确保药效。
因为人参皂苷Rb1在强酸和强碱条件下水解,人参总皂苷有明显减少。
因此本试验着重考察浸渍法中溶剂酸碱度以及人参液体制剂的酸碱度,对人参皂苷提取率及稳定性的影响。
1 仪器与试药粉碎机(贝利);U3000高效液相色谱仪(美国戴安);人参(电白县明康医药有限公司,ZG100601),经众生药业检验室检验为Panax ginseng C. A. Mey.;人参皂苷Rg1对照品与人参皂苷Re对照品(中国药品生物制品检定所);D101型大孔吸附树脂(安徽三星树脂科技有限公司);乙腈为色谱纯,乙醇、甲醇、磷酸均为分析纯,水为纯化水。
2 方法与结果2.1 不同酸碱度溶剂浸渍提取人参皂苷根据提取预试验结果,以浸渍乙醇溶液酸碱为试验因素(A),选pH值为6.7、7.7、8.7、9.7的乙醇溶液进行浸渍提取试验。
人参茎叶中提取分离人参皂苷等有效成分研究
人参茎叶中提取分离人参皂苷等有效成分研究人参为五加科属植物人参的根,为我国名贵的中药材。
作为我国东北三宝之一,它与鹿茸、貂皮齐名,具有十分重要的药用活性价值,人参中最重要的药用活性成分为人参皂苷其次为人参多糖。
由于人参价格昂贵、产量有限且人参茎叶中具有人参根部相同的药用活性成分,本实验采用人参茎叶作为原材料提取人参皂苷及人参多糖。
实验内容如下:1.利用多种单因素及正交试验确定人参茎叶中人参皂苷的最佳提取工艺,根据实验结果得到30%醇提80℃C热回流提取2次共4.5小时为人参皂苷最佳提取工艺。
2.利用静态、动态试验筛选若干种大孔吸附树脂选取最佳吸附树脂XDA-7
作为人参皂苷分离材料再从多种不同性能脱色树脂中筛选出人参皂苷最佳脱色树脂D762,得到人参皂苷最佳精制产物。
3.利用树脂多柱法结合硅胶柱层析法用于人参皂苷单体Rgl和Re的精制分离,通过实验确定硅胶柱层析法中洗脱剂计配比为氯仿:甲醇:乙酸乙酯=8.5.1:0.5,可以将人参皂苷单体Rgl和Re实时精确的分离出来。
4.利用适当的薄层层析色谱法进行人参皂苷单体Rgl和Re定性分析及高效液相色谱法进行人参皂苷单体Rgl和Re定性及定量分析。
5.利用多种单因素及正交试验确定人参茎叶中人参多糖的最佳提取工艺,并对最佳工艺提取的多糖进行精制,得到人参多糖精制产物。
人参皂苷Re改善脂代谢的作用机制研究的开题报告
人参皂苷Re改善脂代谢的作用机制研究的开题报告一、研究背景及意义随着人民生活水平的提高和生活方式的改变,肥胖和代谢性疾病的发病率不断上升,如脂肪肝、高血压、糖尿病等。
其中脂代谢异常是肥胖和代谢性疾病的主要表现之一,包括脂肪代谢与脂蛋白代谢两方面。
因此,研究调控脂代谢和改善脂代谢异常的药物成为当前重要的研究方向。
人参是中国传统中药之一,具有滋补健脾、益气养血、提高免疫力等功效。
人参皂苷Re是人参中一种主要有效成分,具有抗氧化、降血糖、降血脂等多种生物活性,被用作治疗脂代谢异常等相关疾病。
目前,已有研究表明人参皂苷Re可以改善脂代谢异常,但其具体作用机制尚不明确。
因此,本研究旨在通过对人参皂苷Re的作用机制的研究,进一步探索其改善脂代谢异常的作用机理,为临床预防和治疗相关疾病提供理论和实践依据。
二、研究内容1. 提取人参皂苷Re并对其进行纯化;2. 构建脂代谢异常小鼠模型,将小鼠随机分为对照组、模型组和人参皂苷Re治疗组,并观察其体重变化及代谢指标变化;3. 采用Western Blot检测人参皂苷Re对相关蛋白(如AMPK、ACC 等)的表达的影响;4. 采用荧光染色和免疫组化分析人参皂苷Re对肝脏组织中脂质含量和脂蛋白代谢的影响。
三、研究方法1. 采用超声波法提取人参皂苷Re,并进行高效液相色谱柱分离纯化;2. 小鼠脂代谢异常模型的制备:将一般饮食供应的小鼠给予高脂饮食(60%的能量来源于脂肪)喂养4周,然后给予小鼠茶多酚/维生素E 混合物(1%)治疗以诱导肝脏脂质沉积;3. 给予小鼠不同剂量的人参皂苷Re治疗,以观察其对体重和代谢指标的影响;4. 采用Western Blot检测人参皂苷Re对AMPK和ACC的表达的影响;5. 采用荧光染色和免疫组化技术观察人参皂苷Re对肝脏组织中脂质含量和脂蛋白代谢的影响。
四、研究预期成果本研究预期通过对人参皂苷Re的作用机制的研究,进一步探索其改善脂代谢异常的作用机理,有望为临床预防和治疗相关疾病提供理论和实践依据。
人参皂苷的成分
人参皂苷的成分
嘿,你问人参皂苷的成分啊?那咱就来唠唠。
人参皂苷呢,可是个挺复杂的东西。
它主要是从人参里面提取出来的一些活性成分。
这里面有好多不同的种类呢。
比如说人参皂苷 Rg1、人参皂苷 Re、人参皂苷 Rb1 等等。
这些成分都有各自的特点和作用。
人参皂苷 Rg1 呢,据说对神经系统有好处。
能让人更有精神,脑子更清楚。
就像给你的大脑加了一把劲,让你活力满满。
人参皂苷 Re 呢,对心血管系统有帮助。
能让你的心脏更有力,血管更通畅。
就像给你的心脏和血管做了个保养。
人参皂苷 Rb1 呢,对免疫系统有作用。
能让你的身体更能抵抗疾病,不容易生病。
就像给你的身体穿上了一层铠甲。
除了这些主要的成分,人参皂苷里面还有一些其他的物质,也都有各自的功效。
总之呢,人参皂苷是个很厉害的东西,里面有好多对人体有益的成分。
我记得有一次,我爷爷身体不太好。
医生就建议他吃点含有人参皂苷的保健品。
爷爷吃了一段时间后,感觉身体好多了。
还有一次,我在电视上看到一个关于人参皂苷
的节目。
里面介绍了人参皂苷的各种成分和作用,让我对它有了更深入的了解。
总之呢,人参皂苷的成分很复杂,有很多不同的种类,都对人体有不同的好处。
你要是对人参皂苷感兴趣,可以去问问医生或者专业人士,看看适不适合自己吃。
但也不能随便乱吃哦,得听医生的话。
人参皂苷国标19506-2009检测方法
人参皂苷国标19506-2009检测方法
本方法人参皂苷Re的低检出量为2μg/mL
一、方法提要
样品中总皂苷经提取、PT—大孔吸附树脂柱预分离后,在酸性条件下,香草醛与人参皂苷生成有色化合物,以人参皂苷Re为对照品,于560nm处比色测定。
二、仪器
1.722分光光度计。
2.PT—大孔吸附树脂柱(河北省津杨滤材厂)。
3.超声波振荡器。
三、试剂
1.甲醇(分析纯)
2.乙醇(分析纯)
3.人参皂苷Re标准品(中国药品生物制品检定所)
4.5%香草醛溶液:称取5g香草醛,加冰乙酸溶解并定容至l00mL
5.高氯酸(分析纯)
6.冰乙酸(分析纯)
7.人参皂苷Re标准溶液:称取人参皂苷Re标准品20.0mg,用甲醇溶解并定容至10mL,即每1mL含人参皂苷Re2.0mg
8.重蒸水
四、测定步骤
1.样品处理:
(1)固体样品
称取1.0g左右样品于100mL烧杯中,加入20~40mL 85%乙醇,超声波
振荡30min,再定容至50mL,摇匀,放置,吸取上清液1.0mL挥干后以水溶解残渣,进行柱分离
(2)液体样品
含乙醇的酒类样品:准确吸取1.0mL样品放于蒸发皿中,蒸干,用水溶解残渣,用此液进行柱层析;非乙醇类液体样品:准确吸取1.0mL样品(如浓度高或颜色深,需稀释一定体积后再取1.0mL)直接进行柱分离
2.柱层析
以PT—大孔吸附树脂柱进行层析分离,准确吸取上述已处理好的样品溶液1.0mL上柱,用15mL水洗柱,以洗去糖分等水溶性杂质,弃去洗脱液,再用20mL85%乙醇洗脱总皂苷,收集洗脱液于蒸发皿中,于水浴上蒸干,以此作显色用。
人参皂苷的提取
第一章综述人参皂苷的简介人参为五加科植物人参(Panax ginseng)的干燥根,是传统名贵中药,始载于我国第一部本草专著《神农本草经》。
其栽培者称为“园参”,野生者称为“山参”。
人参具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津、安神之功能,用于体虚欲脱、肢冷脉微、脾虚食少、肺虚喘咳、津伤口渴、内热消渴、久病虚羸、惊悸失眠、阳痿宫冷、心力衰竭、心源性休克等的治疗。
人参的化学成分很复杂,有皂苷、挥发油、糖类及维生素等。
经现代医学和药理研究证明,人参皂苷为人参的主要有效成分,它具有人参的主要生理活性。
人参皂苷(ginsenoside,GS)是人参的主要有效成分,现已明确结果的GS单体约有40余种;在人参中的含量在4%左右。
其中研究最多且与肿瘤细胞凋亡最为相关的为Rg3与Rh2。
众多研究表明,它具有较高的抗肿瘤活性,对正常细胞无毒副作用,与其他化疗药物(如顺铂)联合应用有协同作用。
人参皂苷通过调控肿瘤细胞增殖周期、诱导细胞分化和凋亡来发挥抗肿瘤作用。
将肿瘤细胞诱导分化成正常细胞有利于控制肿瘤发展,诱导肿瘤细胞凋亡使细胞解体后形成凋亡小体,不引起周围组织炎症反应。
Popovich等研究认为,人参皂苷可以促进人白血病细胞的凋亡,其途径与地塞米松相识,均为受体依赖性。
目前我国对人参皂苷的提取分离方法、制剂工艺、抗肿瘤作用机制以及临床应用等方面做了大量研究,而且已经有人参皂苷的新产品推向市场。
人参皂苷成分人参的根、茎、叶、花及果实中均含有多种人参皂苷(ginsenosides)。
到目前为止,文献报道从人参根及其它部位已分离确定化学结构的人参皂苷有人参皂苷-Ro、-Ra1、-Ra2 、-Rb1、-Rb2、-Rb3、-Rc、-Rd、-Re、-Rf、-Rg1、-Rg2、-Rg3、-Rh1、-Rh2及-Rh3 等50余种人参皂苷。
Rh2:具有抑制癌细胞向其它器官转移,增强机体免疫力,快速恢复体质的作用。
对癌细胞具有明显的抗转移作用,可配合手术服用增强手术后伤口的愈合及体力的恢复.Rg:具有兴奋中枢神经,抗疲劳、改善记忆与学习能力、促进DNA、RNA合成的作用。
高效液相色谱法-重结晶法分离人参皂苷单体Re
Pe f r a c q i r m a o r p y Re r s a l a i n r o m n eLi u di
Z HANG We L N ig c a g L a  ̄ i, I B n - h n , I n Qi
以上 。
关键词: 高效液相色谱法 ; 重结晶; 人参皂昔 R e
中图分 类号 : 6 77 R 8 . 0 5 .2; 2 4 ' 2 文献标识码: A
S p r to f n e o i e Reb eM eh do g e a a in o s n sd _ yt t o f Hih Gi h
高效液相色谱法 一重结晶法分离人参皂苷单体 R e
张伟 ,林炳 昌 ,李芊 z
(. 1 辽宁科技大学 分离技术中心, 辽宁 鞍山 145 ; 101
2 . 辽宁科技大学 化学工程学院应化 20 , 00辽宁 鞍 山 14 5 ) 10 1
摘要: 利用高效液相色谱法 , 以甲醇和水的混合溶液作为流动相进行梯度洗脱, 经过制备柱从原料中分离出 人参皂昔 R 和 R e g 的混合物。确定利用重结晶的方法进行人参皂苷 R 和 R e g 的分离 , 确定了结晶溶剂为 Vz : =08 的混合溶液 ; V水 2: j 0 结晶温度 为 2  ̄、 02结晶时间为 5、 ( h混合物与重结晶溶剂的固液比为 l (:L 的结晶条件。 :g ) 6 m 在上述重结晶条件下 , 可得到R 纯度达 9% e 1 以上的白色粉末, 其收率可达 9 %。对得到的白色粉末进行了结构分析 , 2 确定白色粉末就是 入 参皂苷单体 R , e并且纯度在 9% 1
人参皂苷的提取
第一章综述1.1 人参皂苷的简介人参为五加科植物人参(Panax ginseng C.A.Mey.)的干燥根,是传统名贵中药,始载于我国第一部本草专著《神农本草经》。
其栽培者称为“园参”,野生者称为“山参”。
人参具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津、安神之功能,用于体虚欲脱、肢冷脉微、脾虚食少、肺虚喘咳、津伤口渴、内热消渴、久病虚羸、惊悸失眠、阳痿宫冷、心力衰竭、心源性休克等的治疗。
人参的化学成分很复杂,有皂苷、挥发油、糖类及维生素等。
经现代医学和药理研究证明,人参皂苷为人参的主要有效成分,它具有人参的主要生理活性。
人参皂苷(ginsenoside,GS)是人参的主要有效成分,现已明确结果的GS单体约有40余种;在人参中的含量在4%左右。
其中研究最多且与肿瘤细胞凋亡最为相关的为Rg3与Rh2。
众多研究表明,它具有较高的抗肿瘤活性,对正常细胞无毒副作用,与其他化疗药物(如顺铂)联合应用有协同作用。
人参皂苷通过调控肿瘤细胞增殖周期、诱导细胞分化和凋亡来发挥抗肿瘤作用。
将肿瘤细胞诱导分化成正常细胞有利于控制肿瘤发展,诱导肿瘤细胞凋亡使细胞解体后形成凋亡小体,不引起周围组织炎症反应。
Popovich等研究认为,人参皂苷可以促进人白血病细胞的凋亡,其途径与地塞米松相识,均为受体依赖性。
目前我国对人参皂苷的提取分离方法、制剂工艺、抗肿瘤作用机制以及临床应用等方面做了大量研究,而且已经有人参皂苷的新产品推向市场。
1.2 人参皂苷成分人参的根、茎、叶、花及果实中均含有多种人参皂苷(ginsenosides)。
到目前为止,文献报道从人参根及其它部位已分离确定化学结构的人参皂苷有人参皂苷-Ro、-Ra1、-Ra2 、-Rb1、-Rb2、-Rb3、-Rc、-Rd、-Re、-Rf、-Rg1、-Rg2、-Rg3、-Rh1、-Rh2及-Rh3 等50余种人参皂苷。
Rh2:具有抑制癌细胞向其它器官转移,增强机体免疫力,快速恢复体质的作用。
红参成分实验报告
一、实验目的本研究旨在通过高效液相色谱法(HPLC)对红参中的主要活性成分进行定量分析,验证所采用色谱柱的分离性能,为红参的质量控制和活性成分提取提供科学依据。
二、实验材料与仪器1. 实验材料(1)样品:红参粉末(2)对照品:人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1(3)试剂:甲醇、乙腈、超纯水、正丁醇、三氯甲烷2. 实验仪器(1)RIGOL L-3000液相色谱仪(2)电子天平(3)超声波清洗仪(4)Rigol Compass C18、Rigol Compass C18(2)、Agilent Poroshell 120 EC C18色谱柱三、实验方法1. 样品前处理取红参粉末1.001g,置索氏提取器中,加三氯甲烷100ml,加热回流3h。
药渣挥干溶剂,移入锥形瓶中,精密量取水饱和正丁醇50ml,密塞,超声提取30min。
滤过,弃初滤液,精密量取续滤液25ml蒸干,残渣加甲醇溶解并转移至5ml量瓶,加甲醇稀释至刻度,用0.22m滤膜过滤。
2. 色谱条件(1)流动相:乙腈-水(梯度洗脱)(2)流速:1.0ml/min(3)柱温:30℃(4)检测波长:203nm分别使用Rigol Compass C18、Rigol Compass C18(2)、Agilent Poroshell 120 EC C18三种色谱柱进行分离。
四、实验结果1. 色谱图以Rigol Compass C18色谱柱为例,见图1。
图1 Rigol Compass C18色谱图2. 定量分析根据峰面积计算人参皂苷Rg1、Re和Rb1的含量,结果见表1。
表1 红参中人参皂苷Rg1、Re和Rb1含量(n=3)样品编号人参皂苷Rg1(%)人参皂苷Re(%)人参皂苷Rb1(%)1 0.45 0.82 0.762 0.47 0.84 0.783 0.46 0.81 0.753. 重复性试验采用同一色谱柱对同一批次红参样品进行重复性试验,结果见表2。
应用白腐菌漆酶提取人参皂苷Re的工艺研究
teot u x at nt h iu f isn s eR s oo s 1 (50 0D Ug l cs u t 1 aa isn h pi m et ci c nqeo ne oi e s lw : . g 2 0 L / a aei p tn gP nxgneg m r o e g d ia fl 5 ) c s io
第 6期 ( 总第 2 3 ) 8期 21 0 2年 6月
农产 品加工 ・ 学刊
Ac d mi e i d c l fF r P o u t Pr c s i g a e c P ro ia a m r d c s o e s n o
ห้องสมุดไป่ตู้
No 6 .
J n u.
文章 编 号 : 17 — 6 6 (0 2 0 - 0 5 0 6 19 4 2 1) 6 0 0 — 3
0 引言
本 文 将 漆 酶用 于人 参 皂 苷 的 提取 ,以期 达 到 提 高 提
取率和有效保存活性成分生物活性的 目的。 漆 酶 的 主要 成 分 为 含 铜 多 酚 氧化 酶 。 由于 漆 酶 1 材 料 与方法 对降解木质素类物质的效果显著 ,近年来 ,有关漆 酶 的研究 越 来 越 受 到 国 际上 重 视 ,对 漆 酶 及 其 产 生 11 材料 . 菌 ( 白腐菌)应用的研究主要侧重 于对木质素类物 二 年 生人 参 ,产 自长 白山抚 松县 ;人 参皂 苷 R e 质 ,以及 对 自然 环境 产 生 重 大影 响 的二 恶 英 等 污 染 标 准 品 ,中 国药 品 生 物 制 品检 定 所 提 供 ;漆 酶 ,上 物 的降解【 。由于木质素结构复杂 、难 以降解 ,植 海丹尼悦生物制品有限公司提供。 物 中的有 效 成 分 往往 被 包 裹 在其 中 ,从 而 影 响 了活 1 试: . 2 剂 性成分 的提取利 用 ,而漆酶可 以有效 降解 木质素 , 乙腈 ,色 谱 纯 ,天 津市 科 密 欧 化 学 试 剂 有 限 公
人参中人参皂苷检测的固相萃取方法
人参中人参皂苷检测的固相萃取方法(Copure®D101大孔树脂净化柱)人参皂苷(Ginsenoside)是一类固醇类化合物,又称三萜皂苷。
主要存在于人参属药材中。
人参皂苷被视为是人参中的活性成分,具有增加白细胞数量、提高人体免疫力、促进物质代谢、抗疲劳、抗衰老等作用,因而成为研究的目标。
本方法可用于检测人参、西洋参、花旗参等参类及其制品中的人参皂苷,方法简单,易于操作。
一、样品提取称取经Copure®旋风磨粉碎后的1 g人参样品,加水50 mL,超声20 min,取出,离心后取上清液于另一干净试管,重复提取一遍,合并提取液,摇匀,取10 mL,待净化。
备注:加标样品为经预处理不含本底的空白样品。
二、样品净化(Copure®D101大孔树脂净化柱)活化:向大孔树脂净化柱中加入10 mL甲醇活化,10 mL水平衡大孔树脂净化柱。
上样和洗脱:将待净化液的样品加入已经活化好的大孔树脂净化柱中,用加入10 mL 水淋洗大孔树脂净化柱,弃去淋洗液。
用25 mL 70%甲醇水溶液洗脱大孔树脂净化柱,收集洗脱液,水浴蒸干,残渣以甲醇溶液定容至1mL,过PTFE滤膜,上机。
三、仪器条件仪器:液相色谱仪,ThermoFisher U3000色谱柱:Agilent ZORBAX SB-C18 (4.6 mm×250 mm,5 μm)流动相:A:水B:乙腈洗脱方式:梯度洗脱,见表1流速:1.0 mL/min柱温:35℃进样量:20 μL检测器:紫外检测器检测波长:203 nm表1 梯度洗脱程序四、实验结果(1)加标回收实验结果表2 三种人参皂苷的加标回收结果(2)三种人参皂苷色谱图图1 三种人参皂苷的色谱图五、订购信息货号描述包装COD101124000Copure®D101大孔树脂净化柱,4g/12mL 50支/盒BN24biocomma® 智能水浴氮吹仪1台/箱TWM160BIOCOMMA®旋风磨1台/箱SF130-22-PTFE PTFE针式过滤器,直径13 mm,孔径0.22 μm,有机系100个/盒SC2-1 2 mL蓝色聚丙烯盖,白色PTFE/红色硅胶垫,9-425100个/盒V2-AL 2 mL螺纹棕色样品瓶,带书写处11.6*32 mm,9-425100个/盒。
人参皂苷Re对心血管系统的药理作用概述
人参皂苷Re对心血管系统的药理作用概述
人参皂苷Re是从人参中提取出来的一种有效成分,具有很多
药理作用,其中最为突出的是对心血管系统的保护和治疗作用。
下面我们来具体了解一下。
一、降低血压
人参皂苷Re能够通过抑制血管紧张素转化酶,降低血管紧张
素Ⅰ的生成,从而减少血管收缩而达到降低血压的作用。
同时还能通过调节交感神经和去甲肾上腺素释放影响血管扩张,有效降低血压。
二、改善心脏病变
人参皂苷Re能够调节心肌的代谢、改善心肌供血,加强心肌
抗氧化能力,减少心肌细胞的损伤和坏死,对心脏病变具有较好的治疗和保护作用。
三、减少血脂
人参皂苷Re能够抑制肝细胞内胆固醇的合成,促进胆固醇的
代谢和降解,并能增加高密度蛋白胆固醇、减少低密度蛋白胆固醇的含量,从而有效地降低血脂,保护心血管系统。
四、促进血液循环
人参皂苷Re可以通过扩张血管、改善微循环等多种方式促进
血液循环,加速血液中氧气和养分的输送,降低血液黏稠度,减小血栓的形成,从而预防和治疗冠心病、心绞痛等心血管系统疾病。
总之,人参皂苷Re是一种非常有价值的药理成分,对于心血管系统的保护和治疗作用非常突出。
因此,适当的使用人参皂苷Re对于预防和治疗心血管疾病具有重要意义。
值得提醒的是,在使用人参皂苷Re时要按照医嘱正确用药,避免出现不良反应。
人参总皂苷含量标准
人参总皂苷含量标准一、皂苷种类本标准所指的人参总皂苷,主要由以下几种皂苷组成:1.人参皂苷Rg12.人参皂苷Re3.人参皂苷Rb14.人参皂苷Rb25.人参皂苷Rc6.人参皂苷Rd二、含量要求人参总皂苷的含量要求如下:1.最低含量:每克人参总皂苷应至少包含上述六种皂苷中的任何一种,且其含量不得低于0.2%。
2.含量比例:在满足最低含量的前提下,各种皂苷的含量比例应符合以下要求:o人参皂苷Rg1:0.5%-15%o人参皂苷Re:0.5%-15%o人参皂苷Rb1:0.5%-20%o人参皂苷Rb2:0.5%-10%o人参皂苷Rc:0.5%-10%o人参皂苷Rd:0.5%-10%三、质量标准1.外观:人参总皂苷应为淡黄色或类白色粉末。
2.纯度:通过HPLC(高效液相色谱法)检测,应显示单一的皂苷峰,纯度不低于90%。
3.溶解度:在常温下,人参总皂苷应能完全溶解在水中。
4.含水量:含水量应不超过5%。
5.重金属含量:重金属含量应不超过0.001%。
6.微生物限度:应符合相关卫生标准。
四、安全性评估1.无毒性:在规定的使用剂量下,人参总皂苷应无急性毒性反应。
2.长期毒性:在长期使用的情况下,应无慢性毒性反应。
3.致畸、致突变性:应无致畸、致突变性。
4.过敏性:应无过敏性反应。
五、生产工艺控制1.提取工艺:应采用安全、环保的提取工艺,如水提、醇提等。
在提取过程中,应尽量避免使用化学试剂。
2.分离纯化工艺:应采用高效的分离纯化工艺,如高速离心、膜过滤等,以确保产品质量。
3.干燥工艺:应采用适当的干燥工艺,如真空干燥、喷雾干燥等,以防止产品质量下降。
4.生产环境:生产环境应符合相关卫生标准,防止产品受到污染。
5.批次管理:应对每批产品进行批次管理,以确保产品质量的一致性。
6.生产记录:应对每批产品的生产过程进行详细记录,以便于追踪和查找问题。
六、储存运输要求1.储存条件:人参总皂苷应储存在阴凉、干燥、通风、避光的地方,储存温度应保持在25℃以下。
医学论文-人参皂苷Rg1与人参皂苷Re含量测定方法的研究
人参皂苷Rg1与人参皂苷Re含量测定方法的研究【关键词】人参皂苷摘要:目的:建立人参皂苷Rg1、Re的含量测定方法。
方法:采用HPLC 色谱法,流动相为乙腈0.05%磷酸(199∶801),检测波长为203 nm,Echrom C18柱。
结果:人参皂苷Rg1在0.032~0.192 mg/ml范围内线性良好;人参皂苷Re在0.024~0.144 mg/ml 范围内线性良好。
平均回收率为97.59%,RSD为1.64%。
结论:该方法简便稳定,准确,重现性好,可用于控制人参药材的质量。
关键词:人参;人参皂苷Rg1;人参皂苷Re;高效液相色谱法人参作为贵重药材,含有人参皂苷和多糖等成分。
具有大补元气、复脉固脱、补脾益气,生津,安神的功效。
用于体虚欲脱,肢冷脉微,脾虚食少,肺虚喘咳,津伤口渴,内热消渴,惊悸失眠,阳痿宫冷;心力衰竭,心原性休克等。
本文参考《中国药典》2000年版Ⅰ部人参项下含量测定方法[1],建立了人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的含量测定方法。
结果表明,本实验所建立的方法含量重现性良好,专属性强,数据比较稳定。
1仪器与试药 1.1仪器Agilent 1100型高效液相色谱仪;色谱柱:Echrom C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)Echrom工作站;AE240型双量程电子分析天平(十万分之一)。
1.2试剂高效液相用试剂为色谱纯,其余均为分析纯。
1.3对照品为中国药品生物制品检定所提供(人参皂苷Rg1,批号0703-200221,供含量测定用;人参皂苷Re,批号110754-200218,供含量测定用)。
1.4药材人参购自安徽亳州市场,经鉴定符合《中国药典》要求。
2方法学考察 2.1色谱条件流动相为乙腈0.05%磷酸(199∶801),检测波长为203 nm,Echrom C18柱,理论塔板数按人参皂苷Re峰计算不得低于2 500。
2.2对照品溶液的制备精密称取人参皂苷Rg1对照品8.00 mg,人参皂苷Re对照品6.00 mg,置10 ml量瓶中,加甲醇使溶解,并稀释至刻度,摇匀;精密量取1 ml,置5 ml量瓶中,加甲醇使溶解,并稀释至刻度,摇匀,即得(每1 ml含人参皂苷Rg1 0.160 mg,人参皂苷Re 0.120 mg)。
人参皂苷提取工艺的研究
人参皂苷提取工艺的研究【摘要】为提高人参皂苷的提取率和纯度,本文以人参皂苷re和rb1为指标,比较了回流提取法、超声水提法、湿法粉碎提取法3种不同方法提取人参皂苷的优劣。
结果表明:回流提取法、超声水提法湿法、湿法粉碎提取法人参皂苷re提取率分别为83.38%、90.23%、96.78%;人参皂苷rb1提取率分别为73.34%、80.11%、90.71%。
综合分析,说明湿法粉碎提取法艺效果最佳,超声水提法次之,回流提取法效果最差。
本研究为工业化提取人参皂苷提供了新途径。
【关键词】人参皂苷re、rb1;回流提取法;超声水提法;湿法粉碎提取法人参为五加科植物人参(panaxginsengc.a.mey)的干燥根,别名山参、鬼盖、棒槌、土精、神草、棒槌等。
是多年生草本植物,喜阴凉、湿润的气候。
人参被人们称为“百草之王”,是闻名遐迩的“东北三宝”之一,历来是我国中医的名贵药材。
味甘、微苦、微温,可补气、生津安神、增强免疫力。
其主要活性成分为人参皂苷,目前为止共分离出30余种,其中主要为人参皂苷ra1、ra2、ra3、rb1、rb2、rb3、rc、rd、re、rf、rgl、rg2、rg3、rhl等。
人参皂苷提取方法较多,如浸渍法[1]、回流提取法[2]、超声波提取法[3-4]、醇-吸附树脂法[5]和微波法[6]等。
本文对回流提取法、超声水提法、湿法粉碎提取法进行了比较。
1实验材料与仪器日本岛津lc-2010aht型高效液相色谱仪;天孚牌电子计数天平由金羊天平仪器公司生产;3l超声波提取器(上海超声波仪器厂);高速组织捣碎机(上海标本模型厂);101-3c型烘箱(上海实验仪器厂);人参购于吉林市药材站;人参皂苷re和人参皂苷rb1标准对照由中国药品生物制品检定所提供;甲醇为色谱纯;乙腈为色谱纯,其余试剂为分析纯。
2实验方法2.1人参皂苷的提取方法2.1.1超声水提法参照文献[7]的方法,称取人参粉末40g,加定量水浸泡过夜,常温超声提取3次,超声时间每次40min,抽滤,合并滤液,上d101大孔吸附树脂柱,去除杂质,水洗脱至流出液为无色,再用80%乙醇洗脱至洗脱液tlc检查无皂苷反应为止,乙醇洗脱液减压回收至干,残渣即为人参皂苷粗品,定容至200ml量瓶中,摇匀备用。
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人参皂苷Re的提取研究方法综述康乐摘要:人参作为我国传统的中药广泛被人们开发,然而并未完全分析透彻其内的全部活性物质。
因此,文章从人参皂苷Re的提取方法进行综述,并根据当前开发的情况进行了总结并提出今后的研究方向。
关键词:人参皂苷Re;提取方法;展望Review about Ginseng saponins of extration methods ReKangleAbstract As the traditional Chinese medicine ginseng widely developed, however, not fully analyzed thoroughly all of its active substances. Therefore, this article from the ginseng saponins Re were reviewed in this article, and according to the current development of the paper and put forward the direction of future research.Keyword Ginseng saponins Re Extraction method Research direction 人参是一味被广泛用于养身治病的传统中药,与貂皮、鹿茸并称为中国东北三宝。
人参皂苷是人参的主要有效成分。
根据皂苷元的不同,人参皂苷被分为原人参二醇类皂苷、原人参三醇类皂苷及齐墩果酸类皂苷。
人参皂苷在人参中的含量很低,在人参的各个组织器官中的含量都有所不同,这无形中又增加了我们对人参皂苷的分离提取的难度。
在实际生产中,我们一方面要保证皂苷的产率,另一方面又要保证它的生物活性。
1.人参皂苷单体Re的提取方法人们对人参的提取多以人参皂苷Re的含量作为其质量指标,且常用的提取方法有醇回流法、超声提取法、微波处理、紫外可见分光光度法、层析法(硅胶柱层析法、薄层层析法)、高速逆流色谱法(HSCCC)、湿法粉碎提取法、煎煮法、薄层扫描法、HPLC法等。
1.1层析法在层析法中,采用硅胶柱层析法对人参叶三醇皂苷进行分离,TLC点板后收集单点Re 产品,通过结晶法精制,从而得到较纯的人参皂苷Re。
硅胶层析法制胶简单,操作过程容易,但人参总皂苷经硅胶柱分离后,各组分间并没有完全分离,还存在互相混合的部分。
薄层层析法,是快速分离和定性分析少量物质的一种重要实验技术,属固—液吸附色谱,兼备了柱色谱和纸色谱的优点。
用其进行分离,操作简便,同时薄层层析设备简单,除光密度计外,不需特殊设备,分离效果较好,时间较短,一块板上可同时分离许多样品。
除低沸点物质外,各种无机和有机化合物都可进行分离。
1.2紫外分光光度法用紫外分光光度法测定颗粒剂中人参皂苷Re 的含量,方法准确,重现性好,可作为倍生颗粒的含量测定方法。
倍生颗粒为南通市中医院复方制剂,由人参、炙黄芪、丹参等八味药组成,其功效为益气养阴、补肾通瘀、振元抗衰[1]。
1.3煎煮法随着煎煮时间的延长,人参皂苷Re 的含量显著下降,煎煮7小时后将不能再检出,因此确定人参皂苷Re 在煎煮过程中会被破坏,所以现在人参皂苷Re 不适宜采用传统的煎煮法提取了[2]。
1.4高效液相色谱法(HPLC )HPLC 法的重现性很好、灵敏度也高,简便、快速、稳定、可靠,为进一步研究提取人参皂苷Re 新工艺奠定了基础。
同时,高效液相层析法(HPLC )是近二十年来发展起来的一项新颖快速的分离技术。
它是在经典液相层析法基础上,引进了气相层析的理论具有气相层析的全部优点。
无论是极性还是非极性,小分子还是大分子,热稳定还是不稳定的化合物均可用此法测定。
对蛋白质、核酸、氨基酸、生物碱、类固醇和类脂等尤为有利。
高效液相层析法的基本概念和分离理论与经典的液相色谱法及气相色谱法一致,因而其塔板理论及动力学理论等都可用于高效液相层析。
文献报道对于人参皂苷Re 的测定, 多采用HPLC-UV 方法, 但是由于人参皂苷Re 较弱的紫外吸收, 只能选择末端吸收作为检测波长, 势必带来较大的测定误差[3~6]。
本实验结果表明, 采用HPLC-ELSD 方法测定人参茎叶总皂苷中人参皂苷Re 的含量, 简便、准确、可靠, 可用于人参茎叶总皂苷的质量控制[7]。
1.5醇回流法醇回流法就是以乙醇为介质,以乙醇沸点为反应温度。
优点在于可以提供稳定可控的反应温度。
1.6超声提取法超声提取法是利用超声波的空化作用、机械效应和热效应等加速胞内有效物质的释放、扩散和溶解,显著提高提取效率的一种提取方法。
其主要理论依据是超声的空化效应、热效应和机械作用。
当大能量的超声波作用于介质时,介质被撕裂成许多小空穴,这些小空穴瞬时闭合,并产生高达几千个大气压的瞬间压力。
超声空化中微小气泡的爆裂会产生极大的压力,使植物细胞壁及整个生物体的破裂在瞬间完成,缩短了破碎时间,同时超声波产生的振动作用加强了胞内物质的释放、扩散和溶解,从而显著提高提取效率。
超声提取法具有操作[8]。
简单,提取率高,出膏率较多的优点1.7高速逆流色谱法(HSCCC)高速逆流色谱法(HSCCC)能避免固相载体表面与样品发生反应而导致样品的污染、失活、变性和不可逆吸附等不良影响。
同时它也具有适用范围广、快速、进样量大、费用低、回收率高等优点。
由于高速逆流色谱是近几十年来刚刚发展起来的一种新型液-液分配色谱技术,由于不需要任何的固体载体和支撑物,相对于其他色谱技术(如柱色谱、高效液相色谱等)来说,它克服了固体难活化、样品峰拖尾及样品易受污染、不易回收等缺陷。
由于它还有着可与HPLC相媲美的分离效率与分离速度,以及可从样品粗提取或直接从生物体液中抽提有效成分的优点,广泛用于天然药物有效成分的分离纯化。
实验结果得到的纯品人参皂苷Re纯度较好且重现性好,方法简单易行,分析时间短。
其Re在溶剂体系的保留时间为(175±10)min。
另外值得提及的是此溶剂系统对于人参皂苷Re以上的样品分离纯化效果好,特别适[9~13]。
应于人参皂苷Re的分离纯化1.8微波提取法微波提取人参皂苷是利用其穿透人参细胞组织内部使之吸收微波能量,并转化为热能,在一段时间内,内部分子极化迅速升温,达到提取效果。
但在提取过程中,因乙醇沸点较低,加之人参皂苷具有表面活性作用,在加热时易产生大量泡沫。
故应控制好加热温度和时间,避免浸提溶媒沸腾逸出和有效成分随乙醇蒸气带出,从而影响人参皂苷的得率。
所以应选择微波低火力作为热源。
微波提取法具有省时省力,提取效率高的特点。
因此,该法可在质检[14]。
与医院制剂生产中推广使用2.人参皂苷研究展望经过认真研究分析当前人们对人参Re皂苷的研究结果表明,人参Re皂苷具有很大的优势应用于临床,包括其临床效果显著、具有很小的毒副作用等。
但是根据当前研究结果显示R系列的人参皂苷研究的相对来说还是比较多,但是人参的活性成分丰富,据不完全报道就有将近40种之多。
因此,加大人参活性皂苷成分的分离、提纯、临床试验等具有很大的作用。
人参皂苷Re具有对雌激素活性、抗心律失常、帕金森病症、抗运动性疲劳等方面具有积极的作用。
因此,对人参皂苷Re的开发,具有广阔的市场前景和药理作用,从而为人参的深加工指明了新的方向。
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