全自动凯氏定氮仪测定食品中蛋白质_蒋江虹

全自动凯氏定氮仪测定食品中蛋白质

蒋江虹、革丽亚、麦 琦

（武汉市疾病预防控制中心 武汉 430022）

摘 要：2300型全自动凯氏定氮仪测定食品中蛋白质的含量，与经典凯氏定氮方法比较，测定结果令人满意。该方法方便快速，准确度和精密度高。

关键词：消化炉全自动凯氏定氮仪蛋白质

蛋白质是生命的物质基础，是构成人体及动植物细胞组织重要成分。蛋白质在人体内有构成新生组织及制造体内氧化还原所需的酶和激素等生命基础物质的用途及作用。食品中的蛋白质含量的多少，不仅表示食品的质量，而且也关系着人体健康，因此食品中对蛋白质的含量有一定规定。食品蛋白质含量测定方法常有，凯氏定氮法、酚试剂法、双缩脲法、及紫外吸收法等。但存在操作比较繁琐、费时或费力。目前我们采用的是基尔特克（DIGESTOR.2006）消化装置,全自动凯氏定氮仪测定食品中的蛋白质。它不仅省时省力、而且数据准确可靠，便于检测和分析研究。下面谈谈我们使用该仪器的一点体会。

1.材料与方法

1.1 仪器与试剂

1.1.1 2300型全自动凯氏定氮仪(瑞典FOSS.TECATOR公司生产)。

1.1.2 样品消化炉(瑞典FOSS TECATOR.DIGESTOR.2006型)。

1.1.3 400g/L氢氧化钠溶液，称取4000g氢氧化钠溶于10L水。

1.1.4 0.1042mol/L盐酸标准液。

1.1.5含溴甲酚绿和甲基红的1%硼酸吸收液。取100g硼酸溶于10L蒸馏水添加7:10甲基红、溴甲酚绿混合指示剂约28ml（根据实际情况酌情处理）

1.1.6 基尔特催化片（每片含3.3gk2so4+0.4gCuso4.5H2O）

1.1.7 浓硫酸（GR或AR）。

1.2 样品制备称量

1.2.1 固体样品:将样品磨细均匀称取0.2-2.0g。

1.2.2 半固体样品糊状样品:摇匀称取0.5-2.0g。(*对含糖量较高、水分多样品先放入消化管在120C0消化器蒸至近干后消化。防止发泡、爬壁、粘贴现象。)

1.2.3 液体样品:摇匀取1.0-10.0ml.（*同上）

1.3样品测定.将称取样品置入消化管，加消化片两片,加12ml浓硫酸慢慢摇动将样品润湿。把消化

管放入已预热至4200C的消化器中,消化60分钟,样品消化呈透明绿色液体。取出冷却10-15分钟，将消

化管放入2300型自动凯氏定氮仪中。加水80ml、氢氧化钠50ml、吸收液30ml。关上安全门待仪器自

动蒸馏、滴定、计算并打印结果。

2. 结果与讨论：

2.1 精密度测定.各取国家实验室认可比对样品(CNAC-TO186.大豆样品A)5份,用经典方法和全自

动凯氏定氮仪做对比试验。

结果见表1

上述表1测定结果表明仪器法的相对标准偏差比经典方法小，仪器法的精密度明显比经典化方法

好。RSD<1%，即表明2300型全自动凯氏定氮仪的精密度好。

2.2 T检验：对表1的数据作t检验分析,两种分析方法总体均数无显著差异(t0.05),两种方

法测定食品中蛋白质含量不存在显著性差异。

2.3 准确度:根据2003型全自动凯氏定氮仪仪器要求,精确称取GR硫酸铵（99.9%(NH4)2SO4）若

干克置入消化管内,加75ml蒸馏水和50ml40%NaOH溶液。在FOSS2003型全自动凯仪上直接进行蒸馏、

滴定，对仪器氮的回收率进行验证。见表2

计算方法：氮%=

回收率%= x100

氮的回收率 表2

称取硫酸氨g 理论值测定实际氮量% 回收率%

0.2115 21.2 21.2018

100.01

99.40 0.1493 21.2 21.0655

100.43 0.1364 21.2 21.2918

表2表明FOSS2003型全自凯氏定氮仪回收率在99%以上,准确度良好,符合检验要求。

3. 部份食品中蛋白质含量测定结果。（见表3）

这批样品蛋白质含量达标为88%，测定结果比较满意。（表3测定结果均为平均值，不达标样品进

行复检。）

部份食品中蛋白质测定结果表3 样品名称仪器测定结果（%）标示值（%）

营养蛋白质粉 81.78 80

胶囊59.49 60

纯鲜牛奶 3.10 ≥2.9

酸奶 3.03 ≥2.5

巧克力牛奶饮料 1.38 ≥1.0

甜牛奶含乳饮料 1.51 ≥1.0

高钙牛奶 3.08 ≥2.9

草莓酸乳饮料0.81 ≥1.0

4.小结:

全自动凯氏定氮仪（仪器法）是在化学分析的基础上的改进，测定原理两者相同。相当于玻璃仪器

整合，并且机电一体化控制。具有操作简便、快速、准确度高、精密度好等特点。它与经典方法比较，

减少了人为操作误差因素的影响，测定蛋白质结果令人满意，可作为优选方法使用，具有推广价值。

参考文献

(1)于雯.吕玉琼.全自动凯氏定氮仪测定食品中蛋白.中国卫生检验杂志,2001.11(5):610。

(2)王丹红,周黎榕等采用模块式消化、全自动凯氏定氮仪测定食品中蛋白质

(3)国家标准GB/T5009.5-2003食品中蛋白质的测验定.北京中国标准出版社