细胞生物学实验
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实验室规则和要求
一般规定
1.上课第一天请先熟悉环境,牢记“安全”是进行任何实验最重要的事项。
2.在实验室内请穿著实验衣(最好长及膝盖下),避免穿著凉鞋、拖鞋(脚
趾不要裸露)。留有长发者,需以橡皮圈束于后,以防止引火危险或污染实验。
3.在实验室内禁止吸烟、吃东西、饮食、化妆、嚼口香糖、嬉戏奔跑,食
物饮料勿存放于实验室的冰箱中,实验桌上勿堆放书包、书籍、衣服外
套及杂物等。
4.所有实验仪器、耗材、药品等均属实验室所有,不得携出实验室外。每
组分配之仪器、耗材请在课程开始前确定清点与保管,课程结束后如数
清点缴回。公用仪器请善加爱惜使用。实验前后,请把工作区域清理擦
拭,并随时保持环境清洁。
5.实验前详阅实验内容,了解实验细节的原理及操作,注意上课所告知的
注意事项。实验进行中有任何状况或疑问,随时发问,切勿私自变更实
验程序。打翻任何药品试剂及器皿时,请随即清理。实验后,适切记下
自己的结果,严禁抄袭,确实关闭不用之电源、水、酒精灯及瓦斯等。
6.身体不适、睡眠不足、精神不济或注意力无法集中,请立即停止实验。
实验时间若延长,请注意时间的管制及自身的安全,不可自行逗留实验
室。
7.实验完毕,请清理实验室、倒垃圾、灭菌、关闭灯光及冷气,离开实验
室前记得洗手。
8.任何意外事件应立即报告教师或实验室管理人员,并应熟知相关之应变
措施。
药品
1.使用任何药品,请先看清楚标示说明、注意事项,翻阅物质安全资料,
查明是否对人体造成伤害,使用完毕请放回原位。
2.新配制的试剂请清楚注明内容物、浓度、注意事项及配制日期,为避免
污染,勿将未用完的药剂倒回容器内。
3.挥发性、腐蚀性、有毒溶剂(如甲醇、丙酮、醋酸、氯仿、盐酸、硫酸、
-巯基乙醇、甲醛、酚等)要在排烟柜中戴手套量取配制,取用完应随即盖好盖子,若不小心打翻试剂,马上处理。
4.有毒、致癌药剂例如丙稀酰胺(神经毒)、溴化乙啶(突变剂)、SDS(粉
尘)请戴手套及口罩取用,并勿到处污染,脱下手套后,养成洗手的好
习惯。
5.使用后的实验试剂和材料,应放在专用的收集桶内。固体培养基、琼脂
糖或有毒物品不得倒入水槽或下水道中。
6.使用刻度吸管取物时,切勿用嘴吸取,请用自动吸管或吸耳球。
仪器
1.使用仪器前先了解其性能、配备及正确操作方法,零件及附件严禁拆卸,
勿私自调整,并注意插座电压(110V或220V)之类别。
2.使用离心机时,离心管要两两对称、重量平衡,离心机未停下不得打开
盖子。冷冻离心机于开机状态时,务必盖紧盖子,以保持离心槽之低温并避免结霜。
3.电源供应器有高电压,切勿触摸电极或电泳槽内溶液,手湿切勿开启电
源。
4.使用微波炉加热,不可有铝箔等金属物品,瓶盖必须松开,以免爆炸。
加热后戴防热手套取出瓶子,务必轻摇晃,确认不会突沸。水浴锅、干燥器等,使用前熟悉操作手续,严防烫伤。
5.操作台上有酒精等有机溶剂及易燃物(如甲醇、乙醇、乙醚、瓦斯等)
要远离火苗,不可留置火焰燃烧,万一着火,应力持镇定,沉着处理。
酒精或乙醚等着火时,应使用泡沫灭火剂或湿毛巾覆盖,勿使用水冲泼。
6.实验完毕后需清理实验台,除需收回共用物品外,不留任何器皿。倾倒
的试剂、水渍应擦干净,保证实验台和实验前同样清洁。
7.值日组协助实验室管理人员收回共用物品,清洁仪器,清理实验台,打
扫实验室。
第一部分基础实验
实验1 显微技术概述
实验目的:
使学生了解基本的细胞生物学实验操作,熟悉常规和常用的实验方法。锻炼学生动手能力,增强学生基本科研技能和科研思路;了解目前常用细胞生物学研究方法。
任务:
细胞生物学作为高校生命科学的主干课程之一,从本质上讲是一门实验科学,因此设置实验课程十分重要,学生可以通过这一教学环节掌握细胞生物学的基本研究手段和方法,并更深入理解理论课的各方面内容。进一步讲,细胞是生物构成的基本单位,是理解一切生命现象的基础,许多细胞生物学实验方法也用于遗传学,分子生物学,生物化学等科学实验研究,在将来的各项工作中将会有广泛的实际用途。
培养目标:
使学生掌握细胞生物学实验技术,提高学生分析问题和解决问题的能力,为了今后独立进行科研工作打下坚实的基础。
实验2 细胞膜的渗透性
一、实验目的
了解细胞膜的渗透性质及各种物质跨膜进入细胞的不同速度
二、实验原理
将红细胞放入数种等渗溶液中,由于红细胞对各种溶质的渗透性不同,有的溶质可以渗入,有的溶质则不能渗入;渗入的溶质能够提高红细胞膜的渗透压,
所以水分进入细胞引起溶血。由于溶质渗入速度不同,因此溶血的时间也不相同。
三、实验器材与试剂
器材:
50ml小烧杯,10ml移液管,试管(1~10ml),试管架。
试剂:
0.17mol/L氯化钠,0.17mol/L氯化铵,0.17mol/L醋酸胺,0.17mol/L硝酸钠,0.12mol/L草酸铵,0.12mol/L硫酸钠,0.32mol/L葡萄糖,0.32mol/L甘油,0.32mol/L乙醇,0.32mol/L丙酮。
实验材料:
动物血液(如羊血)
四、实验步骤
1、羊血细胞悬浮液
取50ml小烧杯一只,加一份羊血和10份0.17mol/L氯化钠溶液,形成一种不透明的红色溶液,即稀释的羊血。
2、低渗溶液
取试管一只,加入5ml蒸馏水,再加0.5ml稀释的羊血,注意观察溶液颜色变化,由不透明的红色逐渐澄清,说明红细胞发生破裂造成溶血,全部红细胞溶血后光线比较容易透过溶液。
3、羊红细胞渗透性
(1)取试管一支,加入0.17mol/L氯化钠溶液5ml,再加入0.5ml稀释的羊血,轻轻摇动,观察颜色变化及溶血现象,说明原因。
(2)取试管一支,加入0.17mol/L氯化铵溶液5ml,再加入0.5ml稀释的羊血,轻轻摇动,观察颜色变化及溶血现象,说明原因。
(3)另外8种等渗溶液进行同上实验
记录实验结果并简单分析
表1 不同低渗溶液中红细胞溶血现象