狭基线纹香茶菜的化学成分

收稿日期:20051221

基金项目:广州市2004年中药现代化研究重大项目(2004Z 2E5021)

作者简介:张龙(1980),男(汉族),安徽利辛人,硕士研究生;姚新生(1934),男(汉族),上海人,中国工程院院士,博士,教授,博士生导师,主要从事中药及天然药物活性成分的研究与开发,T el .0755********,E m ail yaoxinsheng @ 。

文章编号:10062858(2006)12076803

狭基线纹香茶菜的化学成分

张　龙1,周光雄2,李　茜3,戴　毅1,叶文才2,姚新生1

(1.沈阳药科大学中药学院,辽宁沈阳110016;　2.暨南大学中药及天然药物研究所,广东广州510632;

3.中国药科大学中药学院,江苏南京210009)

摘要:目的对唇形科香茶菜属植物狭基线纹香茶菜(Isodon lophanthoides (Buch.Ham.ex D.Don )

Hara var.gerandianus (Benth.)Hara )即中药溪黄草的化学成分进行研究。方法体积分数为95%乙醇提取物的水混悬液经环己烷、乙酸乙酯、正丁醇分步萃取,再对乙酸乙酯层运用硅胶、D101大孔树脂、Sephadex L H 20、ODS 等柱层析手段并配合HPLC 进行分离、纯化;通过化学方法及波谱分析鉴定其结构。结果分离得到并鉴定了6个化合物:既6去羟基迷迭香酸甲酯(methyl 6dehy 2droxyl rosmarinate ,1)、迷迭香酸甲酯(methyl rosmarinate ,2)、咖啡酸(caffeic acid ,3)、6,7二羟基香豆素(6,7dihydroxycoumarin ,4)、槲皮素(quercetin ,5)、蓟黄素(cirsimaritin ,6)。结论化合物1为新天然产物,化合物4为首次从该属中分离得到,化合物3、6为首次从该植物中分离得到。

关键词:狭基线纹香茶菜;6-去羟基迷迭香酸甲酯;迷迭香酸甲酯;6,7二羟基香豆素;蓟黄素中图分类号:R 917;R 284 文献标识码:A

唇形科植物狭基线纹香茶菜(Isodon lophan 2

thoi des (Buch.Ham.ex D.Don )Hara var.geran 2dianaus (Benth.)Hara )为中药溪黄草的主要资源[1],味苦甘微涩、性平、无毒,具清热、利尿、退黄、去积、止痛、消炎等功效,华南地区民间组方较多,市场应用较广,出现了许多以其为主要原料的保健品、茶饮料等。为进一步阐明其药效作用的物质基础,以利进行二次开发,作者对该植物的化学成分进行了研究,从其体积分数为95%乙醇提取物中分离并鉴定了6个化合物,分别为:6去羟基迷迭香酸甲酯(methyl

6dehydroxyl rosmari 2nate ,1)、迷迭香酸甲酯(methyl rosmarinate ,2)、咖啡酸(caffeic acid ,3)、6,7二羟基香豆素(6,7di 2hydroxycoumarin ,4)、槲皮素(quercetin ,5)、蓟黄素(cirsimaritin ,6)。其中,化合物1为一新天然产物,化合物4为首次从该属中分离得到,化合物3、6为首次从该植物中分离得到。化合物1、2的结构式见图1。

1　仪器与材料

X 5型显微熔点测定仪(未校正,北京泰克仪器公司),FI/IR 480Plus Fourier Transform 红外

Fig.1　The structures of compounds 1and 2

光谱仪(IR )(K Br 压片,日本Jasco 公司),Po 2larmeter1020旋光仪(日本Jasco 公司),AV 400核磁共振仪(瑞士Bruker 公司),Finnigan LCQ Advantage MAX 质谱仪(美国热电公司),中低压液相色谱仪(东京理化株式会社),LC 8A 半制备型高效液相色谱仪(日本岛津公司),SPD 10Avp 紫外检测器(日本岛津公司),Aqusail SS4251(120)色谱柱(10mm ×250mm ,10μm ,日本岛津公司)。

柱层析用硅胶(青岛海洋化工厂),硅胶GF254薄层预制板(烟台化学工业研究所),RP 18F254薄层预制板和ODS 柱层析材料(美国Merck 公司),Sephadex L H 20柱层析材料(瑞典Pharmacia 公司),色谱纯甲醇(江苏汉邦公司),其他试剂均为化学纯或分析纯。

第23卷第12期

2006年12月

沈　阳　药　科　大　学　学　报

Journal of Shenyang Pharmaceutical University

Vol 123　No 112

Dec.2006p 1768

所用药材由白云山中药厂提供,由广州中医药大学赖小平教授鉴定。

2　提取与分离

狭基线纹香茶菜干燥全草5kg,用体积分数为95%乙醇室温浸泡24h,回流提取215h,减压回收溶剂得总浸膏(46710g)。将浸膏用3L蒸馏水混悬,分别用环己烷、乙酸乙酯、正丁醇等量萃取3次,减压回收得4个部分。其中乙酸乙酯层浸膏(3611g)经常压硅胶柱层析、中低压ODS 柱层析,反复Sephadex L H20排阻层析处理并配合HPLC进行纯化,分离得到化合物1～6。经NMR、MS等光谱数据分析鉴定了1～6的结构。

3　结构鉴定

化合物1:深黄色油状物,浓硫酸香草醛显紫红色,[α]21D=1214(c=0132,MeOH),ESI MS(neg2 ative)m/z:357[M-H]-,ESI MS(positive)m/z: 381[M+Na]+离子峰,因此确定其相对分子质量为358。结合核磁共振氢谱和碳谱数据,推测其分子式为C19H18O7。IR光谱(K Br压片)νmax:3300、1500～1600及1690cm-1吸收带提示OH、羰基及芳香环的存在。该化合物1H NMR(400MHz, CD3OD)谱中δ:7154(1H,d,J=1610Hz)、6125 (1H,d,J=1610Hz)提示有反式烯键存在。7107 (2H,d,J=815Hz)、6173(2H,d,J=815Hz)等信号提示存在1个对位取代苯环。碳谱和DEPT 135中,相应两芳香碳信号δ:13115(=CH)、11613(=CH)的高度是其他芳碳(=CH)的2倍以上,也进一步证明存在1,4位取代苯环,δ:7104 (1H,d,J=116Hz)、6194(1H,dd,J1=810Hz,J2= 116Hz)、6178(1H,d,J=810Hz)为另一苯环的ABX系统氢信号。H H COSY相关谱中5121 (1H,q)与δ3108(2H,m)相关峰的存在,推测存在—OCH—CH2—结构片断。3168(3H,s)对应碳信号为δ5217,可知存在OCH3片断。此外,碳谱和DEPT135表明有2个羰基δ17212、16814。至此,已经获得了C19H15O4部分信息,从分子式C19H18O7中扣除上述碎片信息,可知结构中还存在3个OH。HMBC:H10/C1相关信号提示10位OCH3与1位羰基相连;H2/C1,3,4,1′、H

3/C1,2,4,5,9和H5,9/C3,4,6,7,8等相关信号提示2位通过氧与1′位相连,3位与1,4取代苯相连;H2′/C1′,3′,4′、H3′/C1′,2′,4′,5′,9′、H5′/C3′,4′,6′,7′,9′和H9′/C3′,4′, 5′,7′,8′等相关信号提示反式烯链一端与1′位羰基相连,另一端与ABX系统的苯环相连。

综合以上分析,通过片断连接,可将该化合物结构确定如图1所示,系统命名法命名为(S,E)

3(4hydroxyphenyl)1methoxy1oxopropan2

yl3(3,4dihydroxyphenyl)acrylate,该化合物与文献[2,3]报道的迷迭香酸甲酯有相似的结构及正性旋光度,故命名为6去羟基迷迭香酸甲酯(methyl6dehydroxyl rosmarinate)。由于H2(δ5121)与同类H比较化学位移向低场偏移很大,推测其同时处于2个羰基的去屏蔽区,从而可推出α,β不饱和双键应为S反式。该化合物为新天然产物,其核磁共振数据具体指认如下:17212 (C1)、7417(C2)/5121(H2)、3717(C3)/3108 (H3)、12811(C4)、13115(C5,9)/7107 (H5,9)、11613(C6,8)/6173(H6,8)、15715 (C7)、16814(C1′)、11410(C2′)/6125(H2′)、14810(C3′)/7155(H3′)、12716(C4′)、11514 (C5′)/7104(H5′)、14618(C6′)、14918(C7′)、11616(C8′)/6178(H8′)、12313(C9′)/6194 (H9′)。

化合物2:淡黄色粉末,mp198～199℃。与三氯化铁试剂反应显蓝色。ESI MS(positive and negative)m/z:397[M+Na]+,373[M-H]-,因此得出相对分子质量为374。该化合物1H NMR (400MHz,CD3OD)和13C NMR(100MHz,CD3OD)与化合物1类似,差别只是少了1个1,4取代苯系统,而多了1个ABX苯环系统。而其ESI-MS提供的伪分子离子峰质量数比化合物1多了16,推测其是在化合物1的对位取代苯结构片断上多了一个羟基。通过与文献[2,3]比较并进行归属,确定其结构为迷迭香酸甲酯(methyl rosmari2 nate,2)。具体归属如下:1H NMR(400MHz, CD3OD)δ:7155(1H,d,J=1610Hz,H3′)、7105 (1H,d,J=118Hz,H5′)、6196(1H,d,J=810Hz, H8′)、6182(1H,d,J=210Hz,H5)、6178(1H, dd,J1=810Hz,J2=118Hz,H9′)、6162(1H,d, J=810Hz,H8)、6160(1H,dd,J1=810Hz,J2= 210Hz,H9)、6125(1H,d,J=1610Hz,H2′)、5119(1H,q,H2)、3169(3H,s,OCH3)、3105(2H, m,H3);13C NMR(100MHz,CD3OD)δ:17215 (C1)、16817(C1′)、14917(C7′)、14811(C3′)、14617(C6)、14611(C6′)、14513(C7)、12910

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第12期张　龙等:狭基线纹香茶菜的化学成分