动物细胞培养ppt课件

培养基的类型
天然培养基： 营养价值高，成分复杂。 合成培养基：成分明确，便于控制试验条件。
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5、动物细胞培养技术的应用
（1）生产蛋白生物制品：病毒疫苗、干扰素、 单克隆抗体等； （2）获得大量自身的皮肤细胞，用于植皮； （3）作为基因工程的受体细胞。 （4）用于检测有毒物质；
（5）用于生理、病理、药理等方面的研究， 为治疗和预防疾病提供理论依据；
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动物细胞培养
概念： 原理 细胞增殖
过程
细胞株
细胞系
10
50
不
代
代
死
适宜条件
细 胞
分瓶培养 细 胞
细 胞
原代培养
特点 贴壁生长，接触抑制
传代培养
培养条件 无菌无毒，营养，温度、PH，气体环境
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1、在动物细胞培养过程中遗传物质发
生改变的细胞是（ A ）
A．细胞系
B．细胞株
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44页两个小问题的答案
用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是蛋 白质。胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，当pH大于6时，胃 蛋白酶就会失去活性。胰蛋白酶作用的适宜环境pH为 7.2～8.4。多数动物细胞培养的适宜pH为7.2～7.4，胃 蛋白酶在此环境中没有活性，而胰蛋白酶在此环境中活 性较高，因此胰蛋白酶适宜用于细胞培养时的消化。
细胞系
传到40-50代后有部分细胞遗传物质发生 了变化，具有癌细胞的特点，失去接触抑制， 可能在培养条件下无限制的传代下去。
注意
目前使用的细胞通常为10代以内，以保持
细胞正常的二倍体核型。
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培养过程：
动物胚胎或 幼龄动物的
胰蛋白酶
组织、器官 剪碎
去掉组织
间蛋白
单个细胞 加培养液
细胞 悬浮液
原代培养
传代培养
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任务：阅读教材第46页黑体字后面 时间：4分钟 问题：
动物细胞培养都需要满足什么条件？
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4、动物细胞培养条件
无菌、无毒的环境
离体培养的细胞对微生物和 有毒物质没有防御能力。
（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）保证细胞顺
营养
利的生长增
殖
（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、
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一、动物细胞培养
1、概念：
就是从动物机体中取出相关组织，将 它分散成单个细胞，然后,放在适宜的培 养基中，让这些细胞生长和繁殖。
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2、培养过程：
为什么要把动物组织分散成单 个细胞？怎样分散成单个细胞 的？完成44页两个问号
成块的组织中细胞与细胞靠在 一起，彼此限制了细胞的生长 和增殖。另外，单个细胞所需 的营养容易供应，其代谢废物 容易排出。所以分散成单个细 胞后培养。
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原代培养
通常将动物组织消化后的初次培养称为 原代培养。
传代培养
贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理 让细胞继续培养，这样的培养过程通常被称 为传代培养。（即从原培养瓶内转接到新的 培养瓶内过程。）
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细胞株
从原代培养细胞群中筛选出进行传代 培养的细胞，能传到40-50代，其遗传物质 没有发生变化。
专题2.2动物细胞工程
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动物细胞工程常用的技术手段
动物细胞培养—基础
核移植
动物细胞融合 生产单克隆抗体
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2
2.2.1动物细胞培养和核移植技术
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一、动物细胞培养
材料一：在治疗烧伤病人时，通常是取病人
的健康皮肤进行自体移植。对于大面积烧伤 的病人，自体健康皮肤为非什常么有要限进，行使动用他人 皮肤来源又不足，且会产物生细排胞斥培反养应？。怎样
动物血清、微量元素等）
温度和PH
温度36.5+0.5度，pH 7.2～7.4
气体环境
O2和CO2（95%空气和5%CO2）
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CO2培养箱
哺乳动物离体细胞培养和体内细胞一样,需 要在恒足温度下才能生存,温差变化一般不应超 过0.5度，因此培养箱对温度应具有较高灵敏度。
CO2培养箱的优点在于能恒定地供应一定量 的CO2,一般5%即可维持培养液PH值稳定。
C．原代细胞
D．传代细胞
2、动物细胞工程技术的基础是（ D ）
A.动物细胞融合 B.单克隆抗体
C.胚胎移植
D.动物细胞培养
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3、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自
胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其
主要原因是这样的组织细胞（ D）
A.容易产生各种变异 B.具有更强的全能性
C.取材十分方便
胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外，长时间的 作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤作用，因此必
须控制好胰蛋白酶的消化时间。
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3、几个重要的概念
细胞贴壁
悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上(单层)。 要求： 培养瓶（皿）内表面光滑、无 毒、易于贴附。
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接触抑制
当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞 会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑 制。
D．分裂增殖的能力强
4.动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在
于（ A ）
A.培养基不同；
B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行；
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6、植物细胞和动物细胞培养的比较
比较项目
植物组织培养 动物细胞培养
原理
细胞的全能性
细胞增殖
培养基性质
固体培养基
液体培养基
培养基特有成分
蔗糖、植物激素
葡萄糖、动物血清 促生长因子
培养结果
植物体
细胞株、细胞系
培养目的
快速繁殖、培育 无病毒植株等
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获得细胞或 细胞分泌蛋白
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分化程度低，增殖能力强
部分细胞“癌变”， 无限传代
细
原
胞
代
贴 壁
培 养
细胞
50代细胞 剥离、分瓶 10代 细胞
动物细胞培养不能最 终培养成动物体
传代培养
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随细胞增多， 出现接触抑制
细胞贴壁生长
部分细胞癌变， 失去接触抑制，
无限传代
细胞株
细胞系
细胞 悬浮液
10代 细胞
50代 细胞
无限 传代
才能获得大量的自体健康皮肤呢？
材料二：许多动物细胞能分泌蛋白质，如抗
体等。但是，单个细胞产生的蛋白质很少，
怎样才能获得大量的分泌蛋白呢？
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任务：阅读教材第44-46页第一段 时间：4分钟 问题：
１、什么是动物细胞培养？
２、具体培养过程 （1）为什么要把动物组织分散成单个细胞？ 完成44页两个问号。 （2）什么叫细胞贴壁？什么叫接触抑制？ （3）什么叫原代培养？什么叫传代培养？ （4）总结出具体的培养过程？