急性髓细胞白血病M2亚型细胞形态学及细胞遗传学分析

急性髓细胞白血病M2亚型细胞形态学及细

胞遗传学分析

作者：谢守军，王娜，彭兴荣，郝长来

【摘要】目的：了解急性粒细胞白血病AML-M2亚型的细胞形态学及细胞遗传学特征。方法：对23例以FAB分类标准确诊的AML-M2初发患者的细胞形态学及细胞遗传学资料进行回顾性分析；应用骨髓细胞短期培养法制备染色体标本，以R显带技术进行核型分析。结果：34%M2a、92%M2b患者白血病细胞内可见Auer小体，Auer小体在M2b 患者细胞中检出率明显高于M2a患者；M2患者白血病细胞POX染色呈强阳性反应，在M2a细胞表达多为弥散细颗粒状，而在M2b呈局灶团块状。23例患者中18例有克隆性染色体异常，异常核型检出率78.3%（18/23）。16例M2a患者无一致性的染色体异常。7例M2b患者均有特异性的t(8;21)异常，其中3例伴有y染色体丢失。结论：M2白血病组内异质性较大，M2a和M2b似乎具有各自独特的细胞形态学及细胞遗传学特性。

【关键词】急性粒细胞白血病； AML-M2；细胞形态学；细胞遗传学

急性粒细胞部分分化型白血病(acute myelomonocytic leukemia, AML-M2) 是一组异质性较大的髓细胞白血病，常伴有特殊的染色体异常。其诊断标准由FAB协作组于1976年提出，在FAB分型的基础上，国内又将其分为M2a和M2b，后者由我国首先提出，1980年被列入国内急性非淋巴细胞白血病分型标准中的一种特殊亚型。

2001年WHO分型中特别提出4种有再现性遗传学异常的急性髓细胞白血病，其中t(8;21)(q22,q22)与M2b密切相关。细胞形态学和细胞遗传学对AML-M2白血病的诊断、治疗和预后判断具有重要意义。为了解AML-M2的细胞形态学及细胞遗传学特点，报告57例研究资料。

1 资料与方法

1.1 研究对象：57例均为2003年至2006年12月在我院血液室按FAB标准确诊的M2初诊治患者，其中23例进行了染色体核型分析。M2的诊断标准按文献［1］。

1.2 试剂：瑞氏-姬姆萨（Wright-Gimsa）染液：珠海贝索生物技术有限公司。α-NAE,PAS和POX试剂盒购自中国医学科学院血研所科技公司。

1.3 形态学检查：骨髓及血涂片经瑞氏-姬姆萨染色后分类计数，常规进行POX、α-NAE（NaF）和PAS组化染色。

1.4 染色体核型分析：取患者初诊治疗前的骨髓，经24～48h 培养后，收集细胞常规制片，应用R显带技术进行核型分析。分析中期细胞数16～42个，根据细胞遗传学国际命名体制（ISCN，1995）［2］对核型进行描述。至少2个细胞有同样的染色体增加或结构重排，或者3个细胞有同样的染色体丢失方可确认为一个异常可隆。

1.5 统计学处理：两均数比较应用t检验，统计数据采用SPSS10.0分析软件处理。

2 结果

2.1 临床特征：57例患者中男32例，女25例，中位年龄40

岁（3～73）。其中13例为M2b亚型，余均为M2a亚型。乏力、面色苍白为常见临床表现，肝、脾、淋巴结肿大例数分别为12、7、11例，16例有胸骨压痛，21例有皮肤紫癜、瘀斑。

2.2 血液学特征：本组57例患者白细胞中位数20.08×109/L，（0.66～450.01）×109/L，血红蛋白中位数70g/L，（36～168）g/L，血小板中位数40×1012/L，（6～658）×1012/L。其中M2a患者44例，白细胞中位数27.84×109/L，（0.66～450.01）×109/L ，血红蛋白中位数75g/L（38～168）g/L，血小板中位数44×1012/L，（6～658）×1012/L。M2b患者13例，白细胞中位数10.43×109/L（1.91～77.0）×109/L ，血红蛋白中位数60g/L（36～95）g/L，血小板中位数29×1012/L，（11～241）×1012/L。M2b患者白细胞、血红蛋白和血小板减少较M2a更为明显(p<0.05)。49例患者外周血涂片可见原粒。M2患者骨髓增生多为明显活跃或极度活跃，2例（

3.5%）M2a 患者为低增生性急性白血病。约34%（15/44）M2a、92% （12/13）M2b 患者白血病细胞内可见Auer小体。Auer小体在M2b发生频率较M2b 明显增高，有显著性差异(P<0.01)。M2b患者骨髓细胞异常中性中幼粒明显增多：胞核与胞质发育极不平衡，胞质丰富，易见空泡，内外浆明显，内浆含多量细小粉红色中性颗粒，亦常见粗大橙红色朝阳红颗粒，染色质细致疏松，核仁大而明显，该特点有助于M2a与M2b 的鉴别诊断。M2患者白血病细胞POX染色呈强阳性反应，在M2a细胞表达多呈弥散细颗粒状分布，而在M2b多表达于异常中幼粒细胞胞核凹陷处（高尔基富含区）呈局灶团块状，此点亦有助于鉴别诊断。

2.3 细胞遗传学特征：57例M2患者中23例进行了染色体核型分析，第1～16例为M2a亚型白血病，第17～23例为M2b白血病。23例M2患者异常核型检出率78.3%（18/23），18例染色体异常患者中，单纯数目异常1例，结构异常12例，5例同时伴有数目和结构异常。分别占异常核型总数的5.5%、66.7%和27.8%。9例患者为异常核型与正常核型的嵌合体。t(8;21)易位8例，占M2亚型的34.8%，其中1例为罕见的伴t(8;21)(q22,q22)的复杂易位，核型为46,xy,t(8;21;8)(q22,q22,q24)。7例M2b患者均有t(8;21)异常，其中3例伴有y染色体丢失。16例M2a患者无特异性的染色体重排，除2、10、13、16和19号染色体未见受累外，其余染色体均被累及。详细资料见表1。

3 讨论

AML-M2白血病的年发病率较高，约为0.66/10万，占急性粒细胞白血病的35.5%［3］。M2b多为全血细胞减少，血红蛋白、血小板减少较M2a更为明显，与慢性再生障碍性贫血相似。本组47.4% （27/57）M2患者骨髓白血病细胞内可见Auer小体，该小体在M2b更为易见，约占92%（12/13）。异常中性中幼粒细胞在M2b明显增多：胞核与胞质发育极不均衡，内外浆明显，内浆含细小粉红色中性颗粒，胞核凹陷折叠，呈肾形、马蹄形，染色质细致疏松，核仁大而明显。M2细胞POX呈强阳性，在M2a细胞表达多为弥散细颗粒状分布，而在M2b呈局灶团块状。从免疫表型看，胞核、胞质的多种蛋白形成紊乱远较核浆发育不平衡复杂得多，有以下特点：①代表不同发育阶段的