结合态淀粉合成酶(GBSS)活性检测试剂盒说明书 紫外分光光度法
1-吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS)活性检测试剂盒说明书__紫外分光光度法UPLC-MS-4462
1-吡咯啉-5-羧酸合成酶（P5CS）活性检测试剂盒说明书货号:UPLC-MS-4462规格:50T/48S紫外分光光度法产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液一液体60mL×1瓶4℃保存提取液二液体0.6mL×1支-20℃保存试剂一液体40mL×1瓶4℃保存试剂二液体6mL×1瓶4℃保存试剂三粉剂×2瓶-20℃保存试剂四粉剂×2瓶-20℃保存溶液的配制：1、试剂三：临用前加入2.5mL蒸馏水溶解，现配现用，-20℃分装保存，-20℃保存一周；2、试剂四：临用前每瓶加入3mL蒸馏水溶解，现配现用，-20℃分装保存，-20℃保存一周。
产品说明：在干旱、盐渍化、重金属、紫外线等不同的胁迫条件下，均会诱导植物体内脯氨酸的积累，对植物起到保护作用。
高等植物中，脯氨酸的合成有两条途径，分别以谷氨酸和鸟氨酸为前体。
谷氨酸途径主要负责胁迫条件下脯氨酸的积累，而鸟氨酸途径主要在氮充足条件下起作用，与胁迫情况下脯氨酸的积累没有关系。
1-吡咯啉-5-羧酸合成酶（P5CS）是脯氨酸的谷氨酸合成途径中的关键酶，P5CS是一个双功能酶，在NADPH 和ATP作用下，可催化谷氨酸磷酸化及谷氨酸γ-半醛还原，通过测定NADPH在340nm处吸光度的变化，可计算出P5CS的活性高低。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅/恒温培养箱、1mL石英比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水、EP管。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）组织样本：按质量（g）︰提取液体积（mL）1︰5~10比例（建议称取0.1g样本，加入1.0mL提取液一）加入提取液一，再加入10μL提取液二，冰浴匀浆后于4℃，8000rpm，离心15min，弃沉淀，取上清液置于冰上待测。
α-淀粉酶测定试剂盒(CNPG3底物法)产品技术要求zhongshengbeikong
α-淀粉酶测定试剂盒（CNPG3底物法）适用范围：本试剂用于体外定量测定人血清中α-淀粉酶的活性。
1.1规格液体单剂型试剂(R)：60mL×2 ；试剂(R)：80mL×2。
1.2规格划分说明根据净含量划分规格。
1.3主要组成成分试剂盒由试剂（R）液体组成。
1.3.1 试剂（R）液体主要组分：2-（N-吗啉基）-乙磺酸（MES）50mmol/L2-氯-对硝基苯-α-D-麦芽三糖（CNPG3）1.8 mmol/LNaCl350 mmol/L醋酸钙 6 mmo/L 硫氰酸钾900 mmol/L 叠氮钠0.01% 2.1 外观试剂(R)应为无色或浅黄色透明溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损。
2.2净含量液体试剂净含量应不少于标示值。
2.3试剂空白吸光度在波长405nm(400nm～420nm)处（光径1cm），试剂空白吸光度（A）应≤0.350,试剂空白吸光度变化率（△A/min）应≤0.002。
2.4 准确度测定GBW(E)090593,相对偏差应不超过±10％。
2.5 分析灵敏度对应于浓度为 85U/L的淀粉酶所引起的吸光度变化率（△A/min）的绝对值应在0.006～0.040的范围内。
2.6 重复性重复测定血清样本，变异系数（CV）应≤5%。
2.7 批间差测定血清样本，批间差（R）应≤10%。
2.8 线性范围在[5，2000]U/L检测范围内，线性相关系数（r）应≥0.990。
在(50,2000]U/L范围内，线性相对偏差应不超过±10％；在[5,50]U/L范围内，线性绝对偏差应不超过± 5U/L。
2.9 稳定性2.9.1效期稳定性原包装的试剂盒在2℃～8℃避光贮存，有效期为12个月。
试剂有效期满后2个月以内，试剂性能应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8的要求。
2.9.2开盖稳定性试剂开盖后，在2℃～8℃避光保存，可稳定30天；开盖稳定期满后1天内，试剂性能应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8的要求。
淀粉分支酶(SBE)活性检测试剂盒说明书 可见分光光度法
淀粉分支酶（SBE）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号：BC1860规格：50T/24S产品内容：提取液：液体25mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体20mL×1瓶，4℃保存；试剂二：粉剂×2支，4℃保存。
临用前每支加入1mL双蒸水，缓慢加热，逐渐升温至沸腾，使其充分溶解，备用；试剂三：液体25mL×1瓶，4℃保存；试剂四：液体5mL×1瓶，4℃保存。
产品说明：SBE（EC 2.4.1.18）主要存在于植物中，是参与支链淀粉合成的关键酶，测定SBE活性在淀粉生物合成、优质农作物品种选育和品质遗传改良研究中具有重要意义。
淀粉和碘结合后在660nm有特征光吸收，SBE可切断支链淀粉侧支，从而降低了淀粉-碘复合物在660nm 吸收值，一定时间内吸光度下降的百分率可以反映SBE活性。
需自备的的仪器和用品：可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水操作步骤：一、粗酶液提取称取约0.1g组织加入1mL提取液，冰浴中匀浆。
15000g，4℃离心15min，取上清，置冰上待测。
二、测定步骤1、分光光度计预热30min以上，调节波长到660nm，蒸馏水调零。
2、加样表试剂名称（μL）对照管测定管煮沸1min后灭活的粗酶液250粗酶液250试剂一320320试剂二3030混匀，37℃准确保温20min，置沸水浴中1min终止反应（盖紧防止水分散失），冷却试剂三500500试剂四100100混匀，室温静置10min，用蒸馏水调零，660nm处读取各管吸光值。
注：若有样品浑浊，建议离心后取上清测定。
三、SBE活力单位的计算1、按照蛋白浓度计算单位的定义：以波长660nm的吸光度下降百分率表示，每mg蛋白在1mL反应体系中每分钟降低1％碘蓝值为一个酶活性单位。
SBE活性（U/mg prot）=（A对照管-A测定管）÷T A对照管×100%÷1%÷（Cpr×V样本）×V反应÷T=（A对照管-A测定管）÷T A对照管÷Cpr×242、按照样本鲜重计算单位的定义：以波长660nm的吸光度下降百分率表示，每g组织在1mL反应体系中每分钟降低1％碘蓝值为一个酶活性单位。
NADH氧化酶（NOX）活性检测试剂盒说明书
NADH氧化酶（NOX可见分光光度法货号：BC0630规格：50T/24S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件试剂一液体25 mL×1瓶4℃保存试剂二液体5 mL×1瓶4℃保存试剂三液体0.5 mL×1支-20℃保存试剂四液体70 mL×1瓶4℃保存试剂五液体10 mL×1瓶4℃保存试剂六粉剂×2瓶-20℃保存溶液的配制：试剂六：临用前加入9 mL双蒸水，用不完的试剂-20℃分装保存。
产品说明：NOX（EC 1.6.99.3）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，可在氧气存在下，直接将NADH氧化为NAD+。
该酶不仅参与NAD+的再生，而且与免疫反应密切相关。
NOX能够将NADH氧化为NAD+，NADH的氧化与2,6二氯酚靛蓝（DCPIP）的还原相偶联，蓝色的DCPIP被还原为无色的DCPIP，在600nm下测定蓝色DCPIP的还原速率计算出NADH氧化酶活性的大小。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、冰、蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离：1.准确称取0.1g组织或收集500万细胞，加入1mL试剂一和10µL试剂三，用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
2.将匀浆600g，4℃离心5min。
将上清液移至另一离心管中，11000g，4℃离心10min。
3.将上清液转移至另一EP管中，即胞浆提取物，用于线粒体中泄露NOX活性测定。
4.沉淀即为线粒体，加入200µL试剂二和2µL试剂三，反复吹打充分混匀，用于NOX活性测定，并用于蛋白浓度测定。
谷氨酸合成酶(GOGAT)活性检测试剂盒说明书__紫外分光光度法UPLC-MS-4450
谷氨酸合成酶（GOGAT）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法货号：UPLC-MS-4450规格：50T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体60mL×1瓶4℃保存试剂一液体60mL×1瓶4℃保存试剂二粉剂×2支4℃保存试剂三粉剂×2支4℃保存试剂四粉剂×2支-20℃保存溶液的配制：1、工作液的配制：取试剂二、试剂三、试剂四各一支加入30mL试剂一中溶解，现用现配，可分装后-20℃保存，避免反复冻融。
产品说明：GOGAT主要存在于原核生物、酵母菌及高等植物非绿色组织的前质体中，和谷氨酰胺合成酶（GS）共同构成GS/GOGAT循环，参与氨同化的调控。
GOGAT以NADH为电子供体，催化谷氨酰胺的氨基转移到α-酮戊二酸形成两分子的谷氨酸，NADH在340nm 吸光度的下降速率可以反映GOGAT活性大小。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20%或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；10000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。
10000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
紫外分光光度法测定单宁含量检测试剂盒说明书
单宁含量检测试剂盒说明书紫外分光光度法货号：BC1390规格：50T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体75mL×2瓶2-8℃保存试剂一粉剂×1瓶常温保存标准品粉剂×1支2-8℃保存溶液的配制：1、标准品：10mg 单宁酸。
临用前加入1.175mL 提取液溶解为5000nmol/mL 的标准液，2-8℃保存两周。
产品说明：单宁又称植物多酚，是一类广泛存在于植物体内的多元酚化合物。
单宁可作为潜在的生物标记物；与蛋白质结合的能力又称为收敛性或涩性。
其收敛性是多种生理活性的基础，如止血、抗肿瘤、抗衰老等生理活性，也是影响产品口感的因素之一。
根据光谱特性，单宁在275nm 下有较强的紫外吸收，通过利用活性炭能够特异吸附单宁的性质来检测单宁含量。
技术指标：最低检出限：0.385nmol/mL 线性范围：0.39-18nmol/mL注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：紫外分光光度计、1mL 石英比色皿、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、30-50目筛、蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）将样本烘干至恒重，粉碎，过30-50目筛之后，称取约0.1g ，加入2mL 提取液（封口膜封口防止液体溅出），于70℃水浴，准确提取30min ，期间可摇晃数次。
12000rpm，25℃，离心10min ，取上清，用提取液定容至2mL ，待测。
二、测定步骤1.紫外分光光度计预热30min ，波长调至275nm ，提取液调零。
Beijing Solarbio Science &Technology Co.,LtdTel:400-968-6088Fax:************2.标准液的稀释：将标准液用提取液稀释为25、12.5、6.25、3.125、1.5625、0.78125nmol/mL标准溶液。
Ca++Mg++-ATP 酶活性检测试剂盒说明书
BC0960 -- 第 1 页，共 4 页Ca Mg -ATP 酶活性检测试剂盒说明书可见分光光度法货号：BC0960 规格：50T/24S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称 规格 保存条件 试剂一 液体30 mL×1瓶 2-8℃保存 试剂二 液体4 mL×1 瓶 2-8℃保存 试剂三 粉剂×2支 -20℃保存 试剂四 液体2 mL×1瓶 2-8℃保存 试剂五 液体3 mL×1瓶 2-8℃保存 试剂六 粉剂×1瓶 2-8℃保存 试剂七 粉剂×1瓶 2-8℃保存 试剂八 液体15 mL×1 瓶 常温保存 标准品液体1 mL×1支2-8℃保存溶液的配制：1、 试剂三：临用前取1支加入1 mL 蒸馏水充分混匀待用；现用现配。
用不完的试剂-20℃分装保存一周。
2、 试剂六：临用前加入15 mL 蒸馏水，溶解后2-8℃保存两周。
3、 试剂七：临用前加入15 mL 蒸馏水，溶解后2-8℃保存两周。
4、 标准品：10mmol/L 标准磷贮备液。
将标准品 20倍稀释，即取0.1 mL 标准品加1.9 mL 蒸馏水充分混匀，配成0.5 μmol/mL 标准磷应用液，现用现配。
5、 定磷剂的配制：按H 2O ：试剂六：试剂七：试剂八=2:1:1:1的比例配制，配好的定磷剂应为浅黄色。
若无色则试剂失效，若是蓝色则为磷污染，定磷剂根据样本量现用现配。
注意：配试剂最好用新的烧杯、玻棒和玻璃移液器，也可以用一次性塑料器皿，避免磷污染。
产品说明：Ca ++Mg ++-ATP 酶广泛分布于植物、动物、微生物和细胞中，可催化ATP 水解生成ADP 和无机磷。
根据Ca ++Mg ++-ATP 酶分解ATP 生成ADP 及无机磷，通过测定无机磷的量来确定ATP 酶活性高低。
ATP ADP + Pi注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
紫外分光光度法测蛋白酶酶活
2013/05/13紫外分光光度法测蛋白酶酶活1、原理蛋白酶在一定的温度与pH条件下，水解酪素底物，然后加入三氯乙酸终止酶反应，并使未水解的酪素沉淀除去，滤液对紫外光有吸收，可用紫外分光光度法测定。
根据吸光度计算其酶活力。
酶活单位的定义：每1mL粗酶液，在一定温度和pH值条件下，1min水解酪素产生1ug酪氨酸为一个酶活力单位，以（u/mL）表示。
2、试剂和溶液三氯乙酸、氢氧化钠、盐酸、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、乳酸、乳酸钠、硼酸钠（硼砂）均为分析纯，酪素、酪氨酸为生化试剂。
2.1 三氯乙酸c（CCL3·COOH）=0.4mol/L称取三氯乙酸65.4g，用水溶解并定容至1000 mL。
2.2 氢氧化钠溶液c（NaOH）=0.5mol/L按GB601配制。
2.3 盐酸溶液c（HCL）＝1 mol/L及0.1 mol/L1 mol/L HＣＬ:取90mL浓盐酸溶解于去离子水中，定容至1000mL。
0.1 mol/L HＣＬ：取9mL浓盐酸溶解于去离子水中，定容至1000mL。
2.4 缓冲溶液a、磷酸缓冲液（pH＝7.5）适用于中性蛋白酶称取磷酸氢二钠（Na2HPO4·12H2O）6.02g和磷酸二氢钠（NaH2PO4·12H2O）0.5g，加水溶解并定容至1000mL。
b、乳酸缓冲液（pH＝3.0）适用于酸性蛋白酶甲液称取乳酸（80％～90％）10.6g，加水溶解并定容至1000 mL。
乙液称取乳酸钠（70％）16g，加水溶解并定容至1000 mL。
使用溶液取甲液8 mL，加乙液1 mL，混匀，稀释一倍，即成0.05moi/L乳酸缓冲溶液。
c、硼酸缓冲溶液（pH＝10.5）适用于碱性蛋白酶甲液称取硼酸钠（硼砂）19.08g，加水溶解并定容至1000 mL。
乙液称取氢氧化钠4.0g，加水溶解并定容至1000 mL。
使用溶液取甲液500 mL、乙液400 mL混匀，用水稀释至1000mL。
GBSS、SSS活性测定方法
（1）Hepes-NaOH（pH=7.5）1L的配法：50mM HEPES：11.915g Hepes；5 mM EDTA：1.4613g EDTA；1 mM DTT：0.1543g DTT；2mM KCl：0.149g KCl；1%PVP（K30）：10g PVP；0.2N NaOH：大约需要150ml用来调pH值为7.5。
尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶( UDPGPPase) ,腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶( ADPGPPase) ,可溶性淀粉合成酶( SSS) ,淀粉粒结合淀粉合成酶( GBSS)。
1、不同小麦品种籽粒淀粉组分及相关酶活性的差异赵俊晔于振文* 孙慧敏马兴华孙强*【粗酶液的提取】取10~20个小麦籽粒，记数称重后加8 mL pH 7.5的Hepes-NaOH缓冲液，冰浴研磨。
取30 u L 匀浆液, 加 1. 8 mL 缓冲液1 000×g冷冻离心3 min, 沉淀物经Hepes-NaOH缓冲液悬浮后用于GBSS 活性的测定。
其余匀浆液20000×g 4℃离心10 min, 上清液用于测定UDPGP -Pase、ADPGPPase和SSS 的活性。
【UDPGPPase、ADPGPPase 活性测定】10μL 5 mmol/ L UDPG(或ADPG)加50μL 50 mmol/ LMgCl2, 100μL缓冲液, 20μL酶提取液(ADPGPPase活性测定用50μL) ,加100μL 20mmol/L PPi起始反应, 15 min 后,沸水浴1 min 终止反应, 冷却,加100μL 6 mmol/L NADP, 1.5 IU P -gucomutase, 0.25 IUG6P -dehydrogenase, 0.3 mL 缓冲液, 30℃反应10 min后, 340 nm 波长比色, 用G-1 -P做标准曲线。
【SSS、GBSS 活性测定】0.35mL反应介质(最终浓度50mmol/ L Hepes -NaOH, 16mmol/L ADPG, 15 mmol/ L DTT, 0.7 mg Amylopectin, pH 7. 5)30℃保温5 min, 加入50μL 酶提取液, 反应20 min后,沸水浴1 min 终止反应, 冷却后加入0.35 mLADP-ATP 反应介质(含50 mmol/ L Hepes -NaOH, 4mmol/ L PEP, 200 mmol/ L KCl , 10 mmol/L MgCl2, 1.2units Pyruvate Kinase, pH 7. 5) , 30℃反应30 min, 用FG -300 型发光光度计测定ATP 生成量。
支链淀粉含量检测试剂盒说明书 可见分光光度法
支链淀粉含量检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC4270规格：50T/48S产品简介：支链淀粉又称胶淀粉，一般由几千个葡萄糖残基组成，淀粉中直链淀粉和支链淀粉的比例和含量对淀粉产品的加工、物化特性、糊化温度等有着直接的影响。
支链淀粉和碘形成红紫色络合物，利用乙醇分开样品中的可溶性糖和淀粉，再用碘与其反应得到支链淀粉含量试验中所需的仪器和试剂：可见分光光度计、天平、台式离心机、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、乙醚、无水乙醇、EP管。
产品内容：试剂一：液体60mL×1瓶，4℃保存；试剂二：乙醚50mL×1瓶，自备；试剂三：液体30mL×1瓶，4℃保存；O=9mL：91mL混匀，现用现配，4℃保存半年。
试剂四：将试剂三：H2试剂五：液体6mL×1瓶，4℃保存；粉剂一：粉剂×1瓶，4℃保存；粉剂二：粉剂×1瓶，4℃保存；试剂六的配制：将粉剂一倒入粉剂二，用蒸馏水定容至10mL，4℃避光保存一个月。
标准品：10mg支链淀粉×1支，4℃避光保存。
临用前加入0.1mL无水乙醇和0.9mL试剂三，混匀后封口膜封口，沸水浴至溶解，即10mg/mL的支链淀粉。
吸取0.1mL加入0.9mL蒸馏水配制为1mg/mL的标准溶液待用。
操作步骤：一、支链淀粉的提取：称取0.005g烘干样本（建议称取约0.01g）于研钵中研碎，加入1mL试剂一，充分匀浆后转移到EP 管中，80℃水浴提取30min，3000g，25℃离心5min，弃上清，留沉淀，加入1mL试剂二（乙醚）振荡5min，3000g，25℃离心5min，弃上清，留沉淀，加入5mL试剂四充分溶解，90℃水浴10min，冷却后3000g，25℃离心5min，取上清待测。
二、测定步骤：1、分光光度计预热30min以上，调节双波长至530nm和755nm，蒸馏水调零。
UDPG 焦磷酸化酶(UGP)活性检测试剂盒说明书__紫外分光光度法UPLC-MS-4179
UDPG 焦磷酸化酶（UGP ）活性检测试剂盒说明书:UPLC-MS-4179:50T/48S 紫外分光光度法试剂名称规格保存条件提取液液体55mL×1瓶2-8℃保存试剂一粉剂×1瓶-20℃保存试剂二粉剂×2瓶2-8℃保存试剂三粉剂×2支-20℃保存试剂四粉剂×2支-20℃保存试剂五液体5mL×1瓶2-8℃保存试剂六液体15mL×1瓶2-8℃保存溶液的配制：1.试剂一：临用前取一瓶加30mL 蒸馏水充分溶解；用不完的试剂分装后-20℃可保存4周，禁止反复冻融。
2.试剂二：临用前取一瓶加2.5mL 蒸馏水充分溶解；用不完的试剂2-8℃保存2周。
3.试剂三：临用前加1.4mL 蒸馏水充分溶解；用不完的试剂分装后-20℃可保存2周，禁止反复冻融。
4.试剂四：临用前每支加1mL 蒸馏水充分溶解；用不完的试剂分装后-20℃可保存2周，禁止反复冻融。
5.工作液的配制：将试剂一：试剂二：试剂三：试剂四：试剂五：试剂六按体积比=600：100：20：40：100：250混合，现用现配。
尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶（UDP-glucose pyrophosphosphprylase ，UGP ，EC 2.7.7.9）在自然界广泛分布。
在葡萄糖合成糖原前催化葡萄糖活化，将1-磷酸葡萄糖与UTP 分子合成为UDP-葡萄糖（UDPG ），UDPG 是高等植物和动物中主要活化酶的形式，作为葡萄糖基供体参与糖原、蔗糖、纤维素等的合成代谢。
UGP 可逆的催化生成1-磷酸葡萄糖，其在磷酸葡萄糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶作用下将NADP 转化为NADPH ，UGP 活性可以用340nm 的吸光值的变化来反应。
UDP-Glucose UGP Glucose-1-PhosphatePhosphoglucomutase Glucose 6-phosphate Glucose 6-phosphate+NADP +G6PGH 6-Phosphogluconolactone+H ++NADPH注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
支链淀粉含量检测试剂盒说明书 微量法
支链淀粉含量检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC4275规格：100T/96S产品简介：支链淀粉又称胶淀粉，一般由几千个葡萄糖残基组成，淀粉中直链淀粉和支链淀粉的比例和含量对淀粉产品的加工、物化特性、糊化温度等有着直接的影响。
支链淀粉和碘形成红紫色络合物，利用乙醇分开样品中的可溶性糖和淀粉，再用碘与其反应得到支链淀粉含量试验中所需的仪器和试剂：可见分光光度计/酶标仪、天平、台式离心机、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、乙醚、无水乙醇、EP管。
产品内容：试剂一：液体110mL×1瓶，4℃保存；试剂二：乙醚100mL×1瓶，自备；试剂三：液体55mL×1瓶，4℃保存；O=9mL：91mL混匀，现用现配，4℃保存半年。
试剂四：将试剂三：H2试剂五：液体2mL×1瓶，4℃保存；粉剂一：粉剂×1瓶，4℃保存；粉剂二：粉剂×1瓶，4℃保存；试剂六的配制：将粉剂一倒入粉剂二，用蒸馏水定容至10mL，4℃避光保存一个月。
标准品：10mg支链淀粉×1支，4℃避光保存。
临用前加入0.1mL无水乙醇和0.9mL试剂三，混匀后封口膜封口，沸水浴至溶解，即10mg/mL的支链淀粉。
吸取0.1mL加入0.9mL蒸馏水配制为1mg/mL的标准溶液待用。
操作步骤：一、支链淀粉的提取：称取0.005g烘干样本（建议称取约0.01g）于研钵中研碎，加入1mL试剂一，充分匀浆后转移到EP 管中，80℃水浴提取30min，3000g，25℃离心5min，弃上清，留沉淀，加入1mL试剂二（乙醚）振荡5min，3000g，25℃离心5min，弃上清，留沉淀，加入5mL试剂四充分溶解，90℃水浴10min，冷却后3000g，25℃离心5min，取上清待测。
二、测定步骤：1、分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节双波长至530nm和755nm，蒸馏水调零。
NADP-苹果酸酶(NADP-ME)活性检测试剂盒说明书 紫外分光光度法
NADP-苹果酸酶（NADP-ME）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号:BC1120规格:50T/48S产品内容：提取液：液体70mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体40mL×1瓶，4℃保存；试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入20mL提取液充分溶解备用；试剂三：粉剂×2支，4℃保存；用时每支加1mL双蒸水充分溶解备用；试剂四：粉剂×2支，-20℃保存；用时每支加500μL双蒸水充分溶解备用。
工作液：在15mL试剂二中加入2mL试剂三和1mL试剂四，可以根据比例现用现配。
产品说明：ME广泛存在于微生物、培养细胞、动物和植物胞浆中，尤其在植物组织中活性较高。
ME催化苹果酸氧化脱羧的可逆反应，产生丙酮酸和CO，以及伴随NAD(P)+的还原反应，是苹果酸代谢的关键酶。
ME活性与2生物合成和抗氧化密切相关。
近年来植物ME活性测定较多，已经成为抗氧化研究的热点。
根据辅酶专一性和对底物特异性的不同，可将ME分为NAD-ME(EC1.1.1.38)和NADP-ME(EC1.1.1.40)。
NADP-ME催化NADP+还原成NADPH，在340nm下测定NADPH增加速率。
试验中所需的仪器和试剂：紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调节移液器、1mL石英比色皿、匀浆器和蒸馏水操作步骤：一、粗酶液提取：细菌、细胞或组织样品的制备：细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，弃上清，按照每500万细菌或细胞加入1mL提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率20％，超声3s，间隔10s，重复30次）。
8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
组织：称取约0.1g组织，加入1mL提取液进行冰浴匀浆。
8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
血清（浆）样品：直接检测。
二、测定步骤：1、紫外分光光度计预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。
可溶性淀粉合成酶(SSS)活性检测试剂盒说明书 紫外分光光度法
可溶性淀粉合成酶（SSS）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC1850规格：50T/48S产品内容：提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体40mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：粉剂×2瓶，4℃保存。
试剂三：粉剂×2瓶，-20℃保存。
试剂四：粉剂×2瓶，-20℃保存；临用前每支加入5mL试剂一。
试剂五：粉剂×2瓶，-20℃保存；临用前每支加入8mL试剂一。
试剂六：粉剂×2支，-20℃保存；临用前每支加入416μL双蒸水，充分溶解备用，用不完的试剂4℃保存。
试剂七：液体250μL×3支，-20℃保存，可分装后-20℃保存，不可反复冻融。
试剂八：液体12.5μL×2瓶，4℃保存；每支临用前加入溶解好的4mL试剂四。
反应液Ⅰ的配制：临用前在试剂二中加入7mL试剂一，缓慢加热，逐渐升温使其溶解，冷却后加入试剂三混合溶解。
这样可以分两批配制并且测定。
产品说明：SSS（EC 2.4.1.21）通常以游离态存在于质体基质中，催化淀粉链延长，主要负责支链淀粉的合成。
SSS催化ADPG与淀粉引物(葡聚糖)反应，将葡萄糖分子转移到淀粉引物上，同时生成ADP，在反应体系中添加的丙酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化NADP+还原为NADPH，NADPH生成量与前一步反应中ADP生成量呈正比，340nm下测定NADPH增加量即可计算SSS活性。
需自备的的仪器和用品：紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、粗酶液制备称取约0.1g组织加入1mL提取液，冰浴中匀浆。
10000g，4℃离心10分钟，取上清，置冰上待测。
二、测定步骤1、紫外分光光度计预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。
β-淀粉酶(β-AL活性检测试剂盒(碘-淀粉比色法)说明书__可见分光光度法UPLC-MS-6005
β-淀粉酶（β-AL）活性检测试剂盒（碘-淀粉比色法）说明书可见分光光度法UPLC-MS-600550T/24S试剂名称规格保存条件试剂一粉剂×1瓶2-8℃保存试剂二液体20mL×1支2-8℃保存试剂三液体40mL×1瓶2-8℃保存标准品粉剂×1瓶2-8℃保存溶液的配制：1、试剂一：临用前加入20mL试剂三，置于常温水中并加热至煮沸，期间不断搅拌粉剂至溶解，用不完的试剂2-8℃保存8周；2、标准品：10mg淀粉标准品。
临用前加10mL试剂三，置沸水浴中振荡溶解，配成1mg/mL淀粉标准液。
2-8℃保存四周。
淀粉酶负责水解淀粉，主要包括α-淀粉酶和β-淀粉酶。
β-淀粉酶(EC3.2.1.2)从淀粉的非还原端切开α-1,4糖苷键，生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖。
碘可以与未被淀粉酶水解的淀粉结合，生成在570nm下有特征吸收峰的复合物，其深浅可计算出淀粉酶的活力单位。
α-AL耐酸，β-AL不耐热。
根据上述特性，钝化其中之一，就可测得另一种活性。
Unhydrolyzed Starch+Iodine Blue Complex（570nm）注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
可见分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、蒸馏水。
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、组织：称取约0.1g样本，加1mL蒸馏水匀浆；匀浆后在室温下放置提取15min，每隔5min振荡1次，使其充分提取；6000g，常温离心10min，吸取上清液即为淀粉酶原液。
2、液体：直接检测。
（若有浑浊则离心后进行测定）二、测定步骤1、分光光度计预热30min以上，调节波长至570nm，蒸馏水调零。
2、将淀粉标准液用蒸馏水稀释为0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625、0.003125、0.0015625mg/mL的标准溶液。
gbss、sss活性测定方法[新版]
![gbss、sss活性测定方法[新版]](https://img.taocdn.com/s3/m/2225cc32cdbff121dd36a32d7375a417866fc1c8.png)
（1）Hepes-NaOH（pH=7.5）1L的配法：50mM HEPES：11.915g Hepes；5 mM EDTA：1.4613g EDTA；1 mM DTT：0.1543g DTT；2mM KCl：0.149g KCl；1%PVP（K30）：10g PVP；0.2N NaOH：大约需要150ml用来调pH值为7.5。
尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶( UDPGPPase) ,腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶( ADPGPPase) ,可溶性淀粉合成酶( SSS) ,淀粉粒结合淀粉合成酶( GBSS)。
1、不同小麦品种籽粒淀粉组分及相关酶活性的差异赵俊晔于振文* 孙慧敏马兴华孙强*【粗酶液的提取】取10~20个小麦籽粒，记数称重后加8 mL pH 7.5的Hepes-NaOH缓冲液，冰浴研磨。
取30 u L 匀浆液, 加 1. 8 mL 缓冲液1 000×g冷冻离心3 min, 沉淀物经Hepes-NaOH缓冲液悬浮后用于GBSS 活性的测定。
其余匀浆液20000×g 4℃离心10 min, 上清液用于测定UDPGP -Pase、ADPGPPase和SSS 的活性。
【UDPGPPase、ADPGPPase 活性测定】10μL 5 mmol/ L UDPG(或ADPG)加50μL 50 mmol/ LMgCl2, 100μL缓冲液, 20μL酶提取液(ADPGPPase活性测定用50μL) ,加100μL 20mmol/L PPi起始反应, 15 min 后,沸水浴1 min 终止反应, 冷却,加100μL 6 mmol/L NADP, 1.5 IU P -gucomutase, 0.25 IUG6P -dehydrogenase, 0.3 mL 缓冲液, 30℃反应10 min后, 340 nm 波长比色, 用G-1 -P做标准曲线。
【SSS、GBSS 活性测定】0.35mL反应介质(最终浓度50mmol/ L Hepes -NaOH, 16mmol/L ADPG, 15 mmol/ L DTT, 0.7 mg Amylopectin, pH 7. 5)30℃保温5 min, 加入50μL 酶提取液, 反应20 min后,沸水浴 1 min 终止反应, 冷却后加入0.35 mLADP-A TP 反应介质(含50 mmol/ L Hepes -NaOH, 4mmol/ L PEP, 200 mmol/ L KCl , 10 mmol/L MgCl2, 1.2units Pyruvate Kinase, pH 7. 5) , 30℃反应30 min, 用FG -300 型发光光度计测定A TP 生成量。
植物淀粉含量试剂盒说明书
植物淀粉含量试剂盒说明书植物淀粉含量试剂盒说明书微量法100管/96样注意：正式测定前务必取23个预期差异较大的样本做预测定测定意义：淀粉是植物中糖的主要储存形式，其含量测定对于评价食品营养价值和调查植物体内糖代谢都有重要意义。
测定原理：利用80％乙醇可以把样品中可溶性糖与淀粉分开，进一步采用酸水解法分解淀粉为葡萄糖，采用蒽酮比色法测定葡萄糖含量，即可计算淀粉含量。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰、浓硫酸（不允许快递）和蒸馏水。
试剂的组成和配制：试剂一：液体100mL×1瓶，4℃保存；试剂二：液体105mL×1瓶，4℃保存；试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存；淀粉提取：1、称取0.1~0.2g新鲜样本（建议称取约0.1g新鲜样本）于研钵中研碎，加入1mL试剂一，充分匀浆后转移到EP管中，80℃水浴提取30min，3000g，25℃离心5min，弃上清，留沉淀。
2、沉淀中加入0.5mL蒸馏水，放入95℃水浴中糊化15min （盖紧，以防止水分散失）。
3、冷却后，加入0.35mL试剂二，25℃常温提取15min，振荡35次。
4、加入0.85mL蒸馏水，混匀，3000g，25℃离心10min，取上清液待测。
注意：如样本为淀粉含量较高的干样，为保证充分提取，可适当减小取样量，如称取0.01g~0.02g干样，加入1mL试剂一，其余提取步骤同上。
测定步骤：1、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至620nm，蒸馏水调零。
2、调节水浴锅至95度。
3、工作液的配制：临用前在试剂三中加入 3.75mL蒸馏水后，缓慢加入21.25mL浓硫酸，不断搅拌，充分溶解，待用；用不完的试剂4℃保存一周；4、样本测定：取50μL样本和250μL工作液至EP管中，95度水浴10 min（盖紧，防止水分散失），自然冷却至室温，取200uL至微量石英比色皿或96孔板中，在620 nm 波长下记录测定吸光度值A。
β-淀粉酶(β-AMS)检测试剂盒(硝基水杨酸法)
β-淀粉酶(β-AMS)检测试剂盒(硝基水杨酸法)产品简介：淀粉酶(Amylase ，AMS)又称1,4-α-D-葡聚糖水解酶，是水解淀粉和糖原的酶类总称，包括α-淀粉酶、β-淀粉酶、葡萄糖淀粉酶，β-淀粉酶每次从淀粉的非还原端切下一个分子的麦芽糖，因此又被称为糖化酶。
Leagene β-淀粉酶(β-AMS)检测试剂盒(硝基水杨酸法)其检测原理是上述分解出来的的还原糖能还原DNS ，形成棕红色化合物。
通过比色法检测产生的麦芽糖的量，以此表示酶的活力，可计算出淀粉酶的活力单位。
该试剂盒通过分光光度计或酶标仪检测660nm 处吸光度，可用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清、尿液等样品中内源性的淀粉酶活性。
该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：操作步骤(仅供参考)：1、 稀释标准品：按下表稀释麦芽糖标准(10μmol/ml)，分别获得0、0.3、0.6、1.2、1.8、2.4、3.0μmol/ml 的标准液。
0 12345 6 麦芽糖标准(10μmol/ml)/ml 0 0.03 0.06 0.12 0.18 0.24 0.3 蒸馏水/ml 1.0 0.97 0.94 0.88 0.82 0.76 0.7 DNS 显色液 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 麦芽糖含量(μmol) 0 0.3 0.6 1.2 1.8 2.4 3.0 相应麦芽糖浓度(μmol/ml)0.30.61.21.82.43.0充分混匀，置于水浴中煮沸。
取出后流水冷却，加蒸馏水定容至10ml 。
以0号管为空白调零，在540nm 处检测吸光度值。
以麦芽糖含量(μmol)为横坐标，以标准管(1-6号管)吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。
2、 准备样品：① 细胞或组织样品：取恰当细胞或组织，组织应取，如果有必要需用蒸馏水进行适当匀浆，清洗匀浆器，离心，取上清加入50ml 容量瓶中，用蒸馏水定容至50ml 刻度，编号 名称TE0209 100T Storage试剂(A): 麦芽糖标准(10μmol/ml) 10ml 4℃ 试剂(B): AMS Assay buffer 50ml 4℃ 避光 试剂(C): DNS 显色液 100ml4℃ 避光 使用说明书1份即为淀粉酶液Ⅰ。
土壤淀粉酶(S-AL)活性检测试剂盒说明书 可见分光光度法
土壤淀粉酶（S-AL）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC1920规格：50T/24S产品内容：试剂一：液体10mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存。
临用前加入5mL蒸馏水，置于常温水中并加热至煮沸，期间不断搅拌或震荡至粉剂溶解。
试剂三：液体65mL×1瓶，4℃保存。
标准品：粉剂×1支。
10mg麦芽糖，4℃保存。
临用前加入1.38mL蒸馏水配制成20μmol/mL的储备液。
产品说明：淀粉酶（EC3.2.1.1）是催化淀粉水解的一类酶的总称。
土壤中的淀粉酶主要来自于微生物，是一种重要的酶制剂，广泛应用于粮食加工、食品、酿造、发酵、纺织品工业和医药行业。
淀粉酶水解淀粉产生还原糖，可与3,5-二硝基水杨酸反应生成红棕色物质，在540nm处有特征吸收峰，颜色深浅在一定范围内与还原糖量成正比。
需自备的仪器和用品：天平、水浴锅、低温离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、甲苯。
操作步骤:一、样品处理：新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30~50目筛。
二、测定步骤：1.分光光度计预热30min，波长调至540nm。
蒸馏水调零。
2.将20μmol/mL的麦芽糖储备液用蒸馏水稀释为1、0.9、0.8、0.7、0.6、0.5、0.4、0.3μmol/mL的标准溶液备用。
3.测定步骤：试剂名称测定管对照管标准管空白管土样(g)0.10.1--甲苯（μL）2020--蒸馏水（μL）-200--试剂一（μL）200200--试剂二（μL）200---充分震荡混匀，37℃水浴或37℃恒温箱培养24h，之后--12000rpm，常温离心10min，取上清。
上清液（μL）300300--蒸馏水（μL）---300标准溶液（μL）--300-试剂三（μL）700700700700充分混匀，沸水浴10min，至冰上冷却，于1mL玻璃比色皿中测定540nm处的吸光值，分别记为A对照管、A测定管、A标准管和A空白管，计算ΔA测定=A测定管-A对照管，ΔA标准=A标准管-A空白管。
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结合态淀粉合成酶（GBSS）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法
注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号：BC3290
规格：50T/48S25T/24S
产品内容：
提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存；
试剂一：液体40mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×2瓶，4℃保存；临用前每支加入7mL试剂一。
试剂三：粉剂×2瓶，-20℃保存；
试剂四：粉剂×2瓶，-20℃保存；临用前每支加入5mL试剂一。
试剂五：粉剂×2瓶，-20℃保存；临用前每支加入8mL试剂一。
试剂六：粉剂×2支，-20℃保存；临用前加入416μL双蒸水，充分溶解备用，用不完的试剂4℃保存；
试剂七：液体250μL×3支，-20℃保存；
试剂八：液体12.5μL×2瓶；每支临用前加入溶解好的4mL试剂四
反应液Ⅰ的配制：临用前在试剂二中加入7mL试剂一，缓慢加热，逐渐升温使其溶解，冷却后加入试剂三混合溶解。
这样可以分两批配制并且测定。
产品说明：
GBSS（EC 2.4.1.21）以束缚态存在于淀粉体中，催化淀粉链的加长反应，主要负责直链淀粉的合成。
GBSS催化ADPG与淀粉引物(葡聚糖)反应,将葡萄糖分子转移到淀粉引物上，同时生成ADP；进一步通过反应体系中添加的丙酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化NADP+还原为NADPH，其中NADPH 生成量与前一步反应生成的ADP数量呈正比，通过340nm下测定NADPH的增加量，可以计算GBSS活性。
需自备的的仪器和用品：
紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、粗酶液制备
称取约0.1g组织加入1mL提取液，冰浴中匀浆。
10000g，4℃离心10min，弃上清，在沉淀中加入1mL 提取液充分混匀，置冰上待测。
二、测定步骤
试剂名称（μL）测定管
样本200
反应液Ⅰ270
混匀，30℃保温20min，置沸水浴中1min（盖紧，防止水分散失），冰浴冷却
试剂八150
混匀，30℃保温30min，置沸水浴中1min（盖紧，防止水分散失），冰浴冷却，10000g常
温离心10min，取上清液。
37℃预热试剂五和上清液。
上清液450
试剂五300
试剂六15
试剂七15
混匀后立即在340nm波长下记录初始吸光度A1和2min后的吸光度A2，计算ΔA=A2-A1。
注意：试剂二如有沉淀，加入之前要使之充分溶解混匀。
三、GBSS活性计算
1、按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每mg组织蛋白在反应体系中每分钟催化产生1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。
GBSS活性（U/mg prot）=[ΔA÷（ε×d）×V测]÷(Cpr×V样÷V反总×V上清)÷T
=43.2×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。
2、按照样本鲜重计算
单位的定义：每g组织在反应体系中每分钟催化产生1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。
SSS活性（U/g鲜重）=[ΔA÷（ε×d）×V测]÷(W÷V提取×V样÷V反总×V上清)÷T
=43.2×ΔA÷W。
V测：测量体积，0.78mL；
V反总：反应体积，0.62mL；
V提取：加入提取液体积，1mL；
T：反应时间，20min；
cm)；ε：NADPH消光系数，6.22×10-3mL/(nmol
˙
d：石英比色皿光径，1cm；
V样本：加入样本的量，0.2mL；
V上清：吸取上清液的量，0.45mL；
Cpr：样本蛋白浓度；
W：样本鲜重。