第八章细胞病理学基本检验部分一

3．细胞核特征 细胞核特征是判断良性与 恶性细胞的关键。正常细胞核体积相对较小，呈 圆形或卵圆形，边界光滑，染色质呈细颗粒状。
涂片上同一类型细胞之间的差别很小，称为 单形性。细胞核变化与特征见表8-5。
4．细胞质特征 细胞质由Golgi体、核糖体、 内质网、线粒体和代谢物等组成，是影响细胞染色 性的重要因素之一。
图8-1 涂片制备方法（用于黏液性标本） 图8-2 涂片制备方法（用于非黏液性标本）
三、标本固定 1．湿固定 是通过使细胞的胞质脱水、蛋白质凝 固而达到固定的目的。 常用的固定液为乙醇类液体，常用方法有浸润法 和包被法。 湿固定可引起细胞皱缩，Carnoy固定液（乙醇-氯 仿-冰乙酸固定液）能溶解红细胞，适用于处理明显血 性的标本。聚乙二醇固定液能在涂片表面形成一层保 护性蜡质膜，适用于标本的长途转运和大规模人群筛 检。
2．空气干燥固定 是通过空气蒸发的方 法达到固定目的。最 好是逆着气流方向尽 快将涂片干燥。与湿 固定相比，空气干燥 固定有使细胞增大的 趋势（图8-3）。
图8-3 标本固定方法比较 （A. 呈圆形未固定的细胞， B. 平铺在载玻片上， C. 湿固定， D. 空气干燥固定）
四、标本浓缩技术 （一）传统技术 1．离心法和细胞离心法 ①离心法：适用于大 量液体的标本。②细胞离心法：适用于少量液体、中 等量细胞的标本。 2．滤膜过滤法 滤膜过滤法适用于大量液体、 少量细胞的标本。 3．细胞块法 适用于大多数悬液标本。制备方 法有血浆凝血酶法和琼脂法等。
第八章 细胞病理学基本检验
第一节 细胞病理学基本检验技术 一、标本采集
（一）脱落细胞标本的采集 1．自然脱落细胞 自然脱落细胞是指从上皮表 面自然脱落的细胞。其采集方法包括咳出、排泄或导 尿、挤压。前者常单个散在，后者常聚集成群。脱落 细胞常呈圆形，与细胞膜僵硬、细胞骨架、表面张力、 局部微环境和脱落时间长短有关，细胞质和细胞核会 出现一系列退化性改变。其适用范围见表8-1。
非自然脱落细胞主要特点有： ①能直接从病变器官表面采集标本，如子宫颈 和支气管。 ②能借助纤维镜直接从病变器官内部采集标本。 ③能获得上皮下病变的标本。 ④细胞成分保存良好，在解释结果时不能采用 与脱落细胞相同的标准。
（二）细针穿刺细胞标本的采集 通过穿刺吸取或非吸取法，可从充满液体的 器官或实体性器官中采集细胞标本，如肿瘤、心 包膜腔积液、胸膜腔积液、腹膜腔积液和脑脊液 等。影像学技术能对小而深、移动且难以触摸的 病变部位进行定位，有助于穿刺采集标本。
五、染色方法 Papanicolaou染色法适用于湿固定的涂片。 Romanowsky染色法适用于空气干燥固定的涂 片，在非妇科标本染色中常用。 苏木素和伊红染色法是组织切片最常用的染色 方法，也是许多细胞病理学实验室常用的染色方法。 不同染色技术均适用于妇科或非妇科标本的永 久性染色。
六、细胞病理学诊断 细胞病理学诊断是一个复杂的过程，但不能 过分强调最终结论的重要性。因为细胞学检查的 影响因素很多（表8-4），当涂片上有大量保存 良好的细胞时，会提高诊断的准确性，而缺乏背 景资料、涂片不佳、染色模糊等则会导致误诊。
（一）细胞形态学判断的基本原则 1．细胞数量和类型 细胞数量和类型提供了 靶组织或器官的重要信息，足够量的标本是提高结 果可靠性的重要因素。 2．结构特征 在细胞学涂片中常常缺乏结构特 征。正常上皮细胞常保持细胞极性和细胞间黏附性 典型的恶性上皮细胞的极性差，细胞间相互重叠， 有时三维状聚集呈圆形。分化差的癌细胞黏附性更 差，多散在分布。
二、涂片制备 直接涂片是将新来自百度文库标本直接涂在载玻片上。间 接涂片是将各种液体标本进行浓缩处理后再涂片。 涂片制备方法见图8-1，图8-2。 渗出液、灌洗液和尿液等标本不易黏附在载玻 片上，宜采用蛋白类（如牛血清清蛋白）或离子类 （如多聚赖氨酸）黏附剂，增强细胞和载玻片之间 的黏附力，最大限度的保存标本中的细胞。
自然脱落细胞的主要特点有： ①易从病变器官采集标本。 ②标本内常含有大量不同来源、不同类型的 上皮细胞，亦可含有炎性细胞、巨噬细胞、微生 物和外源性污染物。 ③细胞成分保存较差。 ④能进行多次标本采集。
2．非自然脱落细胞 非自然脱落细胞是指通 过物理刮擦作用取得的细胞。其采集方法包括：① 刷取：如气管、子宫颈。②刮取：如乳头、皮肤、 子宫颈。③灌洗：用生理盐水溶液冲洗所得的液体， 如支气管。其适用范围见表8-2。
正常细胞或分化好的肿瘤细胞常见黏液球、泡 沫状微空泡、微绒毛刷状缘和纤毛。邻近细胞会出 现细胞质铸模现象。少数细胞有吞噬现象，见于良 性或恶性疾病，后者更常见。
细胞质变性包括水肿性和空泡样变化等，质膜 完整性丧失使细胞内容物溢出，即细胞溶解。
5．涂片背景和人为因素 （1）涂片背景：包括细胞和非细胞成分，有 助于疾病的诊断，但明显的血性或炎症反应背景会 掩盖上皮细胞的细致结构，从而影响诊断。 （2）人为因素：是指人为污染或涂片制作过 程引起细胞形态学变化，与标本采集、运送和涂片 制备等因素有关。在操作过程中引入“外来成分” 是影响结果准确性的重要因素，人为因素包括内源 性、外源性。
细针穿刺细胞标本采集的主要特点有：
①通过触摸或导引法，可从体内任何实体器官采集标本。 ②方法简捷、费用低、创伤小、并发症少、禁忌证少， 经皮肤穿刺无需麻醉。 ③需要借助病理学知识解释结果。 ④良好的标本采集和制片技术可获得最佳的结果，但对 结缔组织、透明变性、血管性病变、大量坏死物、囊性变或 出血性病变等可导致标本采集不足。
（二）液基细胞学技术 液基细胞学（LBC）技术是一种半自动或全自动
标本处理技术，其优点是： ①涂片上细胞分布均匀、分布范围小、背景清晰。 ②筛检简便、快速。 ③能提高诊断的灵敏度和特异度。 ④能显著降低标本的不满意率。 ⑤可用于原位杂交和免疫细胞化学染色。
LBC技术是对传统技术的有效补充， 但对某些非妇科标本，因LBC涂片缺乏背 景成分，会影响细胞学的诊断。目前，常 用的LBC技术有ThinPrep法和SurePath Prep法。LBC技术与传统技术比较见表83。