脱落细胞基本技术
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《脱落细胞学》
台州学院医学院检验系
二、几种常用的标本采集法
（一）直视采集法 • 直视下采集标本的部位有外阴、阴道、宫颈、阴道穹窿、
鼻腔、鼻咽、眼结膜、皮肤、口腔及肛管等，可用刮片、 吸管吸取、擦拭或刷洗。此外，用带有微型尼龙刷的纤维 内窥镜在食管、胃、气管及肺内支气管部位的病灶处直接 刷取细胞涂片也属于直视采集法。
脱落细胞基本技术
《脱落细胞学》
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概述
脱落细胞学技术是本课程的重要内容。脱落细胞检验者除 要熟练掌握细胞形态学特征外，还必须掌握各项操作技术 和观察方法。包括标本的采集、制片、固定、染色、镜下 观察以及书写诊断报告等。
《脱落细胞学》
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第一节 标本采集
标本采集是脱落细胞学检验的基础，也是细胞学诊断成败的关键之一。 一、标本采集的原则 • 正确选择采集部位，尽可能自病变区直接采取细胞。 • 采集的标本必须保持新鲜，以免细胞自溶或腐败。 • 尽可能避免干扰物，如血液、粘液等混入标本内。 • 采集方法应简便，病人少受痛苫，且不致引起严重的并发症或促使肿瘤扩散
（五）穿刺针吸法
• 细针吸取细胞学又名细针吸取或针吸细胞学，是用细针穿 刺病灶，吸取少许细胞成分做涂片检查的—种诊断细胞学 。所吸取的细胞是人为的“脱落”细胞，有时可同时吸出 少许组织。此法是细胞学诊断中重要的标本采集方法之一 。
《脱落细胞学》
台州个十分重要的问题 ，实践证明，对肿块穿刺部位的选择应参考下列原则进行：
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• 第四，若液体标本内缺乏蛋白质时，在制片过程户，可先在玻片上涂上粘附 剂（如甘油血清、甘油蛋白、血清等）或直接在液体标本中加入粘附剂，以 防标本在固定及染色过程中脱落。
• 第五，应采取标本的各部分制片，特别是对于组织钳取物及较大组织的印片 ，并尽可能选取具有代表件的部位制片，以减少漏诊，提高阳性的检出率。
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（三）灌洗法 • 此法是通过向空腔器官灌注一定量生理盐水等液体，运用冲洗、振动、揉捏
等方法，使空腔器官中的某些细胞包括癌细胞脱落于其中，然后将灌洗液取 出，经适当处理后检查。 （四）摩擦法 • 此法主要采用摩擦工具，摩揉病变区的粘膜直接涂片。
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• 第二，标本采集后，应尽快做出处理、以最快的速度制片，否则标本凝固或 pH值改变，引起细胞形态变化或自溶、腐败等，影响诊断结果。
• 第三，制片时操作应轻巧，以免损伤细胞。涂片的厚薄应适宜，太厚则细胞 过多、重叠．不易染色且细胞形态不易辨别；太薄则细胞稀少，影响阳性的 检出率。一张好的涂片应是分布均匀、厚薄适宜，涂片呈舌状，分为头、体 、尾三部分，镜下各个视野均有细胞成分，红细胞无明显重叠现象。
• （1）肿块暴露较好，操作较方便。 • （2）怀疑原发性病灶的肿块。 • （3）淋巴结或肿块较大、较硬，无液化、坏死或继发感染者。 • （4）穿刺点应避开体表血管、炎症及溃疡等部位，且肿物邻近无重要神经
、血管、脏器。
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2．细针吸取细胞学的优点
• （1）穿刺抽取操作简单易行。
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• （4）吸管推片法：用吸和将标本滴在玻片一端，然后将滴管前端平行置于 标本滴上，平行向另一端均速移动滴管即可推出均匀薄膜。此法亦适用于胸 、腹水标本。 （5）喷射法：用配细针头的注射器将标本从左至右反复均匀地喷射在玻片 上，此法适用于各种吸取的液体标本。 （6）印片法：将切取的病变组织用手术切开，立即将切面平放在玻片上， 轻轻按印。此方法为活体组织检查的辅助方法。
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（二）自然分泌液的收集法 自然分泌液包括痰液、尿液、前列腺液、乳头溢液等。 • 1．痰液涂片检查 因痰液为支气管等呼吸道的分泌物，对支气管肺癌和呼
吸道的疾病诊断具有重要价值。 • 2．尿液涂片检查 泌尿道的上皮、炎症细胞及恶性肿瘤细胞等均可在腔内
脱落，随尿液排出，因此，收集尿液细胞作检查，对泌尿道肿痛及某些疾病 诊断有一定意义。 • 3．前列腺液涂片检查 采用前列腺按摩法取得分泌物作涂片，对前列腺炎 及癌的诊断有一定价值。 • 4．乳头溢液涂片检查 用于诊断乳腺病。
• 第六．标本一般应制片4张以上，并逐张固定、染色及镜检，以防遗漏。 • 第七，涂片应统一进行编号、登记，以免混淆。
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二、涂片的制备方法
（1）推片法：用于稀薄的标本，如血液，胸、腹水等。取离心后标本一小 滴滴在玻片偏右侧端，用推片用30度夹角将玻片上检液轻轻向左推。 （2）涂抹法：适用于稍稠的检液，如鼻咽部标本。用竹棉签在玻片上涂布 ，由玻片中心经顺时针方向外转圈涂抹；或从玻片一端开始平行涂抹，涂抹 要均匀，不宜重复。 （3）压拉涂片法：将标本夹于横竖交叉的两张玻片之间，然后移动两张玻 片，使之重叠，再边压边拉，获得两张涂片。该法适用于较粘稠标本，如痰 液。
• （2）操作安全，极少发生副作用或意外，病人痛苦小，不需切开，无明显 瘢痕形成。
• （3）取样迅速、制片、诊断亦较快．一般仅需1h左右．可用于手术中的快 速诊断。
• （4）应用范围，几乎适用于任何部位。穿刺检查可到达人体不同组织器官 的病灶，并可同时对多个肿块进行穿刺提高了阳性率及准确率。
• （5）可对同—肿物进行多次穿刺，重复检在，有利于动态观察肿块的生长
、发展或肿块放疗、化疗的疗效。
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第二节 涂片制作
良好、适宜的涂片是脱落细胞学能否正确诊断的重要条件之一。
一、涂片制备的原则：
• 第一，在标本制片之前，要把材料准备好，如载玻片、推片、盖玻片、滴管 等，各种用品均要求清洁、干燥，载玻片要求表面光滑，无油渍、无划痕及 破损等。
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第三节 涂片的固定
• 固定的目的是保持细胞自然形态，防止细胞自溶和细菌所 致的腐败；固定液能沉淀和凝固细胞内蛋白质和破坏细胞 内溶酶体酶，使细胞不但保持自然形态，而且结构清晰， 易于着色。因此标本愈新鲜，固定愈及时，细胞结构愈清 晰，染色效果愈好。
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二、几种常用的标本采集法
（一）直视采集法 • 直视下采集标本的部位有外阴、阴道、宫颈、阴道穹窿、
鼻腔、鼻咽、眼结膜、皮肤、口腔及肛管等，可用刮片、 吸管吸取、擦拭或刷洗。此外，用带有微型尼龙刷的纤维 内窥镜在食管、胃、气管及肺内支气管部位的病灶处直接 刷取细胞涂片也属于直视采集法。
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概述
脱落细胞学技术是本课程的重要内容。脱落细胞检验者除 要熟练掌握细胞形态学特征外，还必须掌握各项操作技术 和观察方法。包括标本的采集、制片、固定、染色、镜下 观察以及书写诊断报告等。
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第一节 标本采集
标本采集是脱落细胞学检验的基础，也是细胞学诊断成败的关键之一。 一、标本采集的原则 • 正确选择采集部位，尽可能自病变区直接采取细胞。 • 采集的标本必须保持新鲜，以免细胞自溶或腐败。 • 尽可能避免干扰物，如血液、粘液等混入标本内。 • 采集方法应简便，病人少受痛苫，且不致引起严重的并发症或促使肿瘤扩散
（五）穿刺针吸法
• 细针吸取细胞学又名细针吸取或针吸细胞学，是用细针穿 刺病灶，吸取少许细胞成分做涂片检查的—种诊断细胞学 。所吸取的细胞是人为的“脱落”细胞，有时可同时吸出 少许组织。此法是细胞学诊断中重要的标本采集方法之一 。
《脱落细胞学》
台州个十分重要的问题 ，实践证明，对肿块穿刺部位的选择应参考下列原则进行：
《脱落细胞学》
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• 第四，若液体标本内缺乏蛋白质时，在制片过程户，可先在玻片上涂上粘附 剂（如甘油血清、甘油蛋白、血清等）或直接在液体标本中加入粘附剂，以 防标本在固定及染色过程中脱落。
• 第五，应采取标本的各部分制片，特别是对于组织钳取物及较大组织的印片 ，并尽可能选取具有代表件的部位制片，以减少漏诊，提高阳性的检出率。
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（三）灌洗法 • 此法是通过向空腔器官灌注一定量生理盐水等液体，运用冲洗、振动、揉捏
等方法，使空腔器官中的某些细胞包括癌细胞脱落于其中，然后将灌洗液取 出，经适当处理后检查。 （四）摩擦法 • 此法主要采用摩擦工具，摩揉病变区的粘膜直接涂片。
《脱落细胞学》
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• 第二，标本采集后，应尽快做出处理、以最快的速度制片，否则标本凝固或 pH值改变，引起细胞形态变化或自溶、腐败等，影响诊断结果。
• 第三，制片时操作应轻巧，以免损伤细胞。涂片的厚薄应适宜，太厚则细胞 过多、重叠．不易染色且细胞形态不易辨别；太薄则细胞稀少，影响阳性的 检出率。一张好的涂片应是分布均匀、厚薄适宜，涂片呈舌状，分为头、体 、尾三部分，镜下各个视野均有细胞成分，红细胞无明显重叠现象。
• （1）肿块暴露较好，操作较方便。 • （2）怀疑原发性病灶的肿块。 • （3）淋巴结或肿块较大、较硬，无液化、坏死或继发感染者。 • （4）穿刺点应避开体表血管、炎症及溃疡等部位，且肿物邻近无重要神经
、血管、脏器。
《脱落细胞学》
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2．细针吸取细胞学的优点
• （1）穿刺抽取操作简单易行。
《脱落细胞学》
台州学院医学院检验系
• （4）吸管推片法：用吸和将标本滴在玻片一端，然后将滴管前端平行置于 标本滴上，平行向另一端均速移动滴管即可推出均匀薄膜。此法亦适用于胸 、腹水标本。 （5）喷射法：用配细针头的注射器将标本从左至右反复均匀地喷射在玻片 上，此法适用于各种吸取的液体标本。 （6）印片法：将切取的病变组织用手术切开，立即将切面平放在玻片上， 轻轻按印。此方法为活体组织检查的辅助方法。
《脱落细胞学》
台州学院医学院检验系
（二）自然分泌液的收集法 自然分泌液包括痰液、尿液、前列腺液、乳头溢液等。 • 1．痰液涂片检查 因痰液为支气管等呼吸道的分泌物，对支气管肺癌和呼
吸道的疾病诊断具有重要价值。 • 2．尿液涂片检查 泌尿道的上皮、炎症细胞及恶性肿瘤细胞等均可在腔内
脱落，随尿液排出，因此，收集尿液细胞作检查，对泌尿道肿痛及某些疾病 诊断有一定意义。 • 3．前列腺液涂片检查 采用前列腺按摩法取得分泌物作涂片，对前列腺炎 及癌的诊断有一定价值。 • 4．乳头溢液涂片检查 用于诊断乳腺病。
• 第六．标本一般应制片4张以上，并逐张固定、染色及镜检，以防遗漏。 • 第七，涂片应统一进行编号、登记，以免混淆。
《脱落细胞学》
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二、涂片的制备方法
（1）推片法：用于稀薄的标本，如血液，胸、腹水等。取离心后标本一小 滴滴在玻片偏右侧端，用推片用30度夹角将玻片上检液轻轻向左推。 （2）涂抹法：适用于稍稠的检液，如鼻咽部标本。用竹棉签在玻片上涂布 ，由玻片中心经顺时针方向外转圈涂抹；或从玻片一端开始平行涂抹，涂抹 要均匀，不宜重复。 （3）压拉涂片法：将标本夹于横竖交叉的两张玻片之间，然后移动两张玻 片，使之重叠，再边压边拉，获得两张涂片。该法适用于较粘稠标本，如痰 液。
• （2）操作安全，极少发生副作用或意外，病人痛苦小，不需切开，无明显 瘢痕形成。
• （3）取样迅速、制片、诊断亦较快．一般仅需1h左右．可用于手术中的快 速诊断。
• （4）应用范围，几乎适用于任何部位。穿刺检查可到达人体不同组织器官 的病灶，并可同时对多个肿块进行穿刺提高了阳性率及准确率。
• （5）可对同—肿物进行多次穿刺，重复检在，有利于动态观察肿块的生长
、发展或肿块放疗、化疗的疗效。
《脱落细胞学》
台州学院医学院检验系
第二节 涂片制作
良好、适宜的涂片是脱落细胞学能否正确诊断的重要条件之一。
一、涂片制备的原则：
• 第一，在标本制片之前，要把材料准备好，如载玻片、推片、盖玻片、滴管 等，各种用品均要求清洁、干燥，载玻片要求表面光滑，无油渍、无划痕及 破损等。
《脱落细胞学》
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第三节 涂片的固定
• 固定的目的是保持细胞自然形态，防止细胞自溶和细菌所 致的腐败；固定液能沉淀和凝固细胞内蛋白质和破坏细胞 内溶酶体酶，使细胞不但保持自然形态，而且结构清晰， 易于着色。因此标本愈新鲜，固定愈及时，细胞结构愈清 晰，染色效果愈好。