鸭副粘病毒与H9亚型禽流感病毒双重PGR检测方法的初步建立
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摘
要 :通过对 G n a k发表的鸭副粘病毒 ( P 和鸭 H9亚型禽流感病毒 ( I eB n D V) A V,H ) 因序列分析 ,针对 9基
保 守区分别设计并合成 2对特异性 引物 。通过对扩增条件 的优化 ,建立了检测 两种病毒 的快速双重 P R方法。结 C
果 表 明 ,该 检 测 方 法 可 同 时 扩 增 出 D V ( 6 p 和 H P 33b ) 9亚 型 AV (3 p 的 特 异 性 片 段 , 而 对 照 D I 7 2b ) HV、IV、 B
a d H9 s by e Ava nle z i sL uho,3WE X e o, , I i ・ , n u tp in if n a vr /I Yzu ̄, u u U 2, I ut 1一 L Y 1一 a 2 n
Z A G Jn fn ・(.n tueo eei r dcn , in s c d myo gi l rl c n e , H N ige g,。 1 Isit f tr ayMe i e J g uA a e fA r u ua S i c s t V n i a ct e
N ni 1 0 , hn ; . e a oao fV tr a il i l E gn ei n e h o g , aj g 2 1 C ia 2 K yL b rtr o eei r Boo c s n i r g a d T c n l y n 0 4 y ny g a e n o
ID B V及 S F鸡胚尿 囊液均未见条带。该方法具敏 感性 ,对鸡胚感染尿囊液 中两种病原核酸的检 出率均为 2n ・ 。 P g L
对保存 不同时间的两种病毒及 临床 可疑病料均可检测到阳性条带。试验证明该方法具有 良好 的特 异性 、敏 感性和 稳 定性 ,可 以用于临床样品的早期快速检测和鉴别诊 断。 关键词 :鸭副粘病毒 ;H 9亚型禽流感;双重 R — C T P R;检 测
t c nq e o upex RT- e h iu fd l PCR s e t b ih d b p i iig t e r a t on ion Th s a s s o wa sa l e y o t zn h e c i c dt . s m on i e a s y wa h wn
第 4 卷 第 l 期 2 2
21 年 1 0 1 2月
东
北
农
业
大
学
学
报
Fra Baidu bibliotek4 (2: 5 5 2115 - 8
De . 01 c2 1
J un lo rh atAgiutrlUnv ri o r a fNote s rc l a iest u y
鸭副粘病毒 与 H 9亚型禽流感病毒 双重 PR C
A i f e z i s (I) e B n , op i fh p c ipi r w r e i e . p i n sc v nI u na r AV i G n a kt a s e e i r s eed s n d Ar id g ot a n l Vu n w r o t s f me c g ad a i
t p cf al o s e ic l ampi 63 b r gmen r i y ly a 3 p fa f tf0m DPV n 2 b r m u t p V. s wel s n a d 73 p fo H9 s by e AI a la o PCR p o u t oud b r d cs c l e am pie r lid f0m f DHV ,B I V,I BDV d n malSPF c ik em by l noi ui twa an or hc ro al t c f d.I a l s s st e a d c ud b e e td 2 n P L’ en iv n o l e d t ce g- ’DPV n g・ ‘ i a d 2 n u L’H9 s b y e AI i n e t g c ike b o u t p V n a if ci hc m r n y al noi ud Th e or , h u lx RT. l t c f i. erf e t e d pe a l PCR s a v o e e e c ud b fe t e m e h d f a i a s yde elp d h r o l e ane ci to orr pd v d t c i fciia d if cig c c m b o al noi ud DPV d H9 s t e AI Th x e i ee t o l c l on n an n e t hik e n y r l t c f i a l an ubyp V. e e p rmens t
N ni 1 0 ,C ia 3 aj g 2 1 n 0 4 hn ; .Mii r o giu ue N t n lC n rfrE gn ei e e rh o nsy fA r l r ai a e t o n ie r g R s ac f t ct o e n
检测方法 的初 步建立
刘宇卓 ,魏 雪涛 3 . ,李 银 3 z l ,张敬峰 3 z . z
(. 1 江苏省农业科 学院兽 医研究所 ,南京 2 0 1 ;2 农业部兽用生物制品工程技术重点实验室 ,南京 10 4 . 2 0 4) 101 2 0 1 10 4
3 国家兽用生物制品工程技术研 究中心,南京 .
中 图分 类 号 :¥ 5 8 文 献 标 志 码 :A 文 章 编 号 : 10 — 3 9 2 1) 2 0 5 — 4 0 5 9 6 (0 1 1— 0 5 0
Esa l h n fa d pe T— t b i me to u lx R PCR o e e t g d c r my o v r s s f rd t c i u k Pa a x — i n u
V tr a i po u t, a j g2 0 4 C i ) eei r Bo rd cs N ni 1 1 , hn ny - n 0 a Ab ta tA cri ec nev dg n e u neo ukP rmyo i sD V a dH utp s rc : codn t t o sre e es q e c f c aa x v u ( P ) n 9s b e go h D r y