间接红细胞凝集试

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原理
将日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)吸附 于红细胞载体上,使其成为致敏红细胞。致 敏红细胞与病人血清中抗体相遇时,在适宜 的条件下,红细胞表面吸附的抗原与特异性 抗体结合形成肉眼可见的红细胞凝集现象, 即为阳性反应。
间接凝集反应的原理
试剂组成
冻干致敏红细胞(主要组成成分为SEA,人 “0”型红细胞和蔗糖)
操作方法5-4
第二至四孔血清稀释度分别为1:10 , 1: 20 ,1:40 。最后向第2至4孔每孔加入致敏 红细胞悬液25UL,震摇1-2分钟后,置37度 水浴箱水浴30分钟观察结果。
操作方法5-5
每次试验匀应设阴性,阳性对照。阴阳性对 照血清为冻干品,使用前每管加100UL稀释 液。充分溶液解后使用。
参考值
以血清稀释度1:10出现阳性反应作为阳性参 考值,被测血清阳性反应稀释度≥1:10为阳 性。
结果判断
阴性反应为红细胞全部沉入孔底,肉眼见一 边缘光滑,致密的小圆点。
结果判断
阳性反应 ++++红细胞形成薄层凝集,边缘呈现不
规则的皱褶。 +++ 红细胞形成薄层凝集,充满整个孔底。 ++ 红细胞形成薄层凝集,面积较+++者
配置致敏红细胞悬液:取冻干致敏红细胞1 支,加入致敏红细胞稀释液1ML,充分混匀 备用。
操作方法5-2
用加样枪加标本稀释液100UL于PV板第一排 第一孔,第二三四排各加入25UL。
操作方法5-3
再向第1排第1孔加待测血清25UL,充分混匀 后吸出25UL于第2孔,第2孔充分混匀后吸出 25UL于第3孔,第3孔充分混匀后吸出25UL 于第4孔,第4孔混匀后吸出25UL弃去,
结果判断的时间与温度有关,在20-30度条件下, 建议30-60分钟判断结果。
试剂盒每次取出后先平衡至室温后使用。 试验所用的一次性血凝板应头天用蒸馏水冲洗干净,
晾干备用。
谢谢大家
小。 + 红细胞大部分沉集于孔底,形成一圆点,
周围有少量凝集的红细胞,肉眼见周边模糊 (或中间出现较为明显的空白点)。
注意事项
推荐使用加样枪加样,检测不同标本一定要更换吸 嘴。使用定量吸管每人次一定要洗净,避免相互污 染。
待检血清或血浆不能混有红细胞或被细菌污染。样 本若不能及时检测可在2-8度保存2-3天,长时间保 存应放零下20度冰箱冻存。
致敏红细胞稀释液(主要成分为PH 7.2磷酸 盐缓冲液)
标本稀释液(生理盐水) 阴阳性对照 使用说明书
检验器材
加样枪及吸头(10-50UL1支,100-200UL1 支)
水浴箱 PV板(96人份) 震荡器 记号笔
加样枪、吸嘴
水浴箱
PV板、记号笔
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震荡器
操作方法5-1
间接红细胞凝集试验 (IHA)
汉川市血吸虫病诊疗专科医院
用途
日本血吸虫病是由于日本血吸虫寄生于人和 哺乳动物体内所引起的一种人兽共患寄生虫 病。人体感染血吸虫病后,其血清中可产生 相应的抗血吸虫抗体,该抗体在患者治愈后, 仍可在体内存在较长时间。本产品的预期用 途为检测人血清中日本血吸虫特异性抗体。 用于血吸虫病流行区域人群血吸虫病的初筛。
间接红细胞凝集试验(indirect haemagglutination test,IHA):粪检 血吸虫虫卵阳性者与IHA阳性符合率为 92.3%~100%,正常人假阳性率在2% 左右,与肺吸虫、华支睾吸虫、旋毛虫 感染者可出现假阳性反应。IHA操作简 便,用血量少,判读结果快,目前国内 已广泛应用。
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