组织固定液的使用
10%标本福尔马林固定液成分要求
10%标本福尔马林固定液成分要求摘要：1.福尔马林固定液的概述2.10% 标本福尔马林固定液的成分要求3.福尔马林固定液在标本制作中的应用4.使用福尔马林固定液的注意事项正文：一、福尔马林固定液的概述福尔马林固定液是一种用于生物标本制作的化学液体，其主要成分是甲醛（Formalin），也称作福尔马林（Formalin solution）。
福尔马林固定液具有较强的杀菌、防腐作用，因此在生物学、医学等领域的标本制作过程中有着广泛的应用。
二、10% 标本福尔马林固定液的成分要求10% 标本福尔马林固定液是指福尔马林溶液中甲醛的质量分数为10%。
这种浓度的福尔马林固定液适用于大多数生物标本的制作和保存，能够有效地杀死细菌、真菌等微生物，防止标本腐烂变质。
三、福尔马林固定液在标本制作中的应用1.组织切片的固定：在制作组织切片时，需要将切下的组织立即放入10% 的福尔马林固定液中，固定24-48 小时，以充分杀死组织中的微生物，同时使组织细胞结构固定，方便后续的染色和观察。
2.尸体防腐：在法医病理学和动物实验中，10% 的福尔马林固定液可用于尸体防腐。
将尸体浸泡在福尔马林固定液中，可以防止尸体腐烂，有利于进行尸检和研究。
3.细菌、真菌标本的制作：将待观察的细菌、真菌涂抹在载玻片上，滴上10% 的福尔马林固定液，盖上盖玻片，固定一段时间，便于在显微镜下观察其形态和结构。
四、使用福尔马林固定液的注意事项1.福尔马林具有较强的刺激性和毒性，使用时应佩戴口罩、眼镜和橡胶手套，避免直接接触皮肤和眼睛。
2.福尔马林对呼吸道和皮肤有刺激作用，一旦误食或误伤，应立即就医。
3.存放福尔马林固定液的地方应保持良好通风，避免长时间吸入福尔马林气体。
4.使用过的福尔马林固定液容器要做好密封，防止福尔马林气体挥发到空气中，污染环境。
免疫组化实验的详细步骤
免疫组化实验的详细步骤1. 制备组织切片- 将组织固定在适当的固定液中(如甲醛溶液)- 通过脱水、清理和浸蜡等步骤制备石蜡包埋块- 使用切片机将包埋块切成4-6微米厚的切片- 将切片贴附到载玻片上2. 脱蜡和水化- 将载玻片浸入二甲苯或者相似的溶液中,去除石蜡- 使用梯度浓度的乙醇溶液(100%,95%,70%)逐步水化切片3. 抗原修复- 抗原修复是一个关键步骤,可以暴露被固定过程掩盖的抗原表位 - 常用的方法包括加热诱导抗原修复和酶促抗原修复4. 内源性过氧化物酶或者生物素的封闭- 使用3%的过氧化氢溶液处理切片,以封闭内源性过氧化物酶活性 - 对于利用生物素-亲和素系统的实验,需要使用生物素封闭试剂进行封闭5. 加入封闭液- 使用含有蛋白质成分的封闭液(如牛血清白蛋白)处理切片- 这一步可以阻止抗体的非特异性结合6. 加入一抗- 将特异性的一抗(如小鼠抗人蛋白单克隆抗体)稀释至适当浓度- 滴加到切片上,在湿盒中于4℃过夜或37℃温育1-2小时7. 加入二抗- 洗去未结合的一抗- 加入与一抗种属相匹配的二抗(如生物素标记的羊抗小鼠抗体)8. 加入探针- 对于酶促反应型免疫组化,加入酶标记的亲和素(如过氧化物酶-亲和素复合物)- 对于荧光免疫组化,加入荧光标记的亲和素9. 显色- 酶促反应型:加入适当的染色底物(如),产生可见的棕黄色沉淀- 荧光免疫组化:不需要此步骤10. 染色和封片- 用苏木素对细胞核进行复染- 用封片剂和覆盖玻片封闭切片,制成永久装片11. 观察结果- 使用光学显微镜或荧光显微镜观察目的蛋白的分布和表达情况以上是免疫组化实验的一般步骤,具体操作细节可能因实验目的和具体方法而有所调整。
准确无误的实验步骤需要参考相关文献和说明。
卡诺氏固定液
固定液的重要特性是能迅速穿透细胞，将其固定并维持染色体结构的完整性，还要能够增强染色体的嗜碱性，达到优良染色效果。
单纯的固定液一般难以达到这些要求，因此在实验中使用两种混和的固定液。
由于Carnoy首先使用的甲醇和冰乙酸混合液而称的卡诺氏固定液是效果良好的固定液。
Carnoy固定液（甲醇:冰乙酸=3:l）每次使用前需临时配制，长时间放置影响固定效果，固定时间15分钟至24小时，冰箱、室温均可。
必要时可改变甲醇和冰乙酸的比例，冰乙酸比例增加，利于细胞膨胀、染色体铺展，但易导致细胞破裂、染色体散失。
水稻根尖染色体标本制备作者: biozxp 发布日期: 2006-4-04 查看数: 22 出自: 1.取材：选取水稻种子，充分浸种后，将它们摆在铺有滤纸的培养皿内，在约28℃条件下发芽培养，当胚根长至1～1.5cm时，剪下备用。
2.预处理压片法：采用0.1％秋水仙素处理2h左右去壁低渗法可采用以下四种方法处理处理方法0.002mol/L8-羟基喹啉α－溴萘饱和溶液低温（－4℃）卡诺氏Ⅰ固定液处理时间（h）1 24 24 24注：卡诺氏Ⅰ固定液乙醇：冰醋酸（3：1）3.固定卡诺氏Ⅰ固定液，固定时间以不超过24h为宜。
经过固定的材料如不及时使用，可经90％酒精换到70％酒精各半小时，再换入一次70％酒精，在0～4℃冰箱内备用。
去壁低渗法a.将3固定的材料用DDW洗净后，0.075mol/LKCL溶液室温条件下处理约30min。
b.酶解去壁吸取低渗液，加入1％混合酶液（1％果胶酶与1％纤维素酶的混合液，均为Sigma公司），28℃左右，酶解4.5～5h.酶解过程中，将材料瓶轻轻摇动1～3次，使材料与酶液充分接触。
c.后低渗吸取酶液,用DDW冲洗材料2～3次，然后在DDW中停留30min。
d.重固定吸取低渗液后,加入新配制的卡诺氏Ⅰ固定液，固定时间约20min。
e.标本制备吸取固定液后，将根尖捣碎,再滴入新鲜固定液3～5滴，制成细胞悬液，充分搅匀。
10中性福尔马林
产品名称：10%中性福尔马林组织固定液简介：10%中性福尔马林组织固定剂，是由10%中性福尔马林溶液（即4%甲醛）、磷酸盐缓冲液等组成。
用作固定的浓度为10%的福尔马林，实际含甲醛4%，10%福尔马林渗透力强，固定均匀，对组织收缩少。
对脂肪、神经及髓鞘、糖等固定效果好，是最常用的固定剂。
配制方法：在病理科、手术室中运用，10%福尔马林固定液具备两个条件。
条件一：福尔马林在溶液中的含量浓度为10%（即甲醛含量为4%），甲醛在水中最高浓度为40%，即10%的中性福尔马林溶液，其中甲醛含量即是10%的40%甲醛。
10%中性福尔马林固定剂条件二：10%中性福尔马林溶液的酸碱度为PH值7.2~7.4之间。
调配标准符合国家标准，具有完善的标准体系。
配制过程中特别注意事项：原料很重要，水、甲醛、磷酸二氢钠，磷酸氢二钠。
一般厂家很不注重水，自来水，蒸馏水、去离子水都不太标准。
康乃欣公司用的水是这样一个流程：自来水经过四次中性树脂过滤，目的是去除水中杂质和离子，接着经过紫外线灭菌，经过微纳米中性树脂过滤去菌体尸体，最后经过双重蒸馏后得到的水，才用于调配10%中性福尔马林固定剂。
康乃欣用的40%浓度甲醛，磷酸二氢钠、磷酸氢二钠都是分析醇。
在配制10%中性福尔马林固定液使用车间，都是三十万级车间、机械流水线灌装。
康乃欣质量标准高于国家标准，采用国际通用标准。
产品用途：维持保存、固定细胞和组织固原有的形态和结构。
适用范围：用于人体、动物组织标本的固定。
产品成分：10%中性福尔马林溶液（即4%甲醛）、磷酸盐缓冲液等。
产品特点：渗透力强、固定均匀；对组织收缩少，尤其对神经及髓鞘、脂肪、糖等固定效果最佳。
操作步骤：1、先在组织固定剂上编号及写上相关信息；2、将离体组织及时浸入固定剂中，离体时间一般不超多5分钟，固定时间为2—12小时。
产品说明：1、组织标本的体积与液体的比例为1:4，此值效果最佳；不大于1:3.2、小块组织标本﹙小于1.2cm×1.2cm×0.6cm）及各种活检验组织标本，固定2—12小时即可，可直接进行切片、脱水、染色、镜检等操作。
组织固定液的使用
谈谈固定液的使用作者: liza3(站内联系TA)发布: 2013-01-11当前，应用于固定试剂的种类较多，它们对于固定不同的组织成分起着不同的作用，因此我们在使用时应该了解不同固定剂的效能，才能合理的固定组织。
根据Bencroft的分类法，将不同的固定剂分为四种类型：Ⅰ类：醛类，甲醛，戊二醛，多聚甲醛，丙烯醛，已二醛，丙二醛等。
Ⅱ类：氧化剂类，四氧化锇（奥酸），高锰酸钾，重铬酸钾等。
Ⅲ类：蛋白变性类，甲醇，乙醇，醋酸等。
Ⅳ类：其他，氯化汞，苦味酸等。
上述四种类型的固定剂，最常使用的是甲醛，其余的也在其它病理技术方面中用到。
下面根据使用的需要，将着重介绍几种常用的固定剂。
（1）甲醛甲醛商品名为福尔马林，一般市售的含甲醛37—40%，由甲醛气体饱和于水而成，比重为1.1 2。
它也可以稳定的固体形式存在，它的成分为高分子量的聚合体，称为多聚甲醛。
甲醛溶液较难纯化，在每批市售商品中，都含有不少的杂质如甲醇，这种在组织化学方法当中，能使酶钝化，影响其反应。
甲酸，它可使固定液变酸，在陈列标本或长时间固定的组织，由于酸的作用，往往细胞核染色欠佳。
甲醛有效固定作用的要点是，在蛋白质末端基团之间形成交联链。
参与甲醛固定蛋白质的基团，主要为氨基，亚氨基及酰氨基，肽，胍基，羟基，SH和芳香环。
甲醛与组织蛋白类的反应是多样和复杂的，因为它能和多种不同的功能基团结合，在多数情况下在其间形成桥键。
甲醛有这种交联的功能，也是它的缺点，在用甲醛固定过的组织中，需要做免疫组化的，往往提倡用酶消化或热抗原修复法来使蛋白与甲醛交联的醛键断裂开，以利于后来的染色。
甲醛可配成简单的或混合的固定液，最简单和最容易掌握的方法，就是取10ml甲醛液，加水9 0ml，这就是10%的福尔马林.当然,现在使用的固定液要求较为严格些,最好是使用缓冲福尔马林固定液,这将有利于后来的免疫组化染色的需要.从组织学的观点来说,甲醛是一种良好的固定剂,它有很多的优点:1. 组织收缩较少,损伤少,保存固有物质好.2. 固定均匀,穿透力强.3. 能使组织硬化,增进组织弹性,有利于切片.4. 能保存脂肪及脂类物质.5. 成本较低.虽然甲醛有上述的优点,但这都是相对而言,任何物质都不可能十全十美的,它也有许多缺点:1. 杂质含量较多,如甲醇,可钝化酶类,影响反应.2. 含有微量甲酸,导致固定液酸变,影响染色.3. 可产生福尔马林色素,影响观察.4. 不能固定尿酸和糖类物质.5. 容易挥发,污染环境,可导致标本干涸.6. 可长期存在于固定过的组织上.有人做过实验,组织用甲醛固定后在流水中冲洗5小时后,仍留有相当多的甲醛与蛋白质相结合,但需要经过长时间的流水冲洗(24天的冲洗)方能除去.可见存在于组织上的甲醛是不可能除去的.因为临床活检不可能有这么长的时间来冲洗组织.因此要特别指出的是,在其后的各种技术操作中,要特别注意到甲醛的存在,必须要想办法除去它,否则将会给各种染色造成影响,甚至导致失败。
Gendre固定液使用说明
Gendre固定液Gendre Fixative Solution编号名称规格单位北京华越洋WG03593Gendre固定液100ml，500ml瓶Gendre固定液用途：固定的目的在于保存细胞和组织的原有形态结构，固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、抑制细菌和霉菌的生长。
Gendre固定液(Gendre Fixative Solution)类似于Bouin's固定液，主要由PA、甲醛、乙醇、乙酸混合而成，PA可沉淀蛋白引起组织收缩，但不会使组织硬化，其与甲醛和乙酸混合后，穿透度加快，固定均匀，组织收缩轻微，对细胞的微细结构显示的很清晰，为一种良好的固定液。
该固定液主要用于保存糖原，保存的糖原呈粗大颗粒状，小块组织细胞固定数小时至过夜后直接转入95%的乙醇脱水，其缺点是易把糖原推向细胞的一端，造成人为的“极化现象”。
Gendre固定液固定时的注意事项：1、Gendre Fixative Solution对人体有一定的损害，请在通风好的环境下小心操作，避免吸入。
2、2、组织取材的厚度不同，固定时间也不同，对组织恰当的选材有利于固定液的渗透。
常规活检组织比较适合的厚度为2~4mm，一般不超过6mm。
3、固定液的容量应足够，一般固定液与组织块的体积比率应大于10：1。
如果容积不够大，可以在固定期间更换1~3次固定液。
4、温度对固定的影响很明显，提高温度可以加速固定作用，但温度不宜过高。
5、取出新鲜组织后，应及时固定，无法及时固定时，应保存于生理盐水中及时送检。
Gendre固定液固定的条件：1、一般需固定4h至整夜。
如果组织块大，可适当延长固定时间，但不宜超过24h。
2、固定后，组织可稍微流水冲洗或不冲洗直接转入70%的乙醇脱水，经乙醇脱水时可除去大部分PA，组织留有一点黄色，对染色也无影响。
Gendre固定液保存条件：RT,避光。
有效期半年。
华越洋Gendre固定液其他相关固定液：Bouin固定液,Bouin氏固定液：特别适用于睾丸活检组织的固定。
小鼠肝脏组织人cyp酶家族免疫组化染色实验步骤
小鼠肝脏组织人cyp酶家族免疫组化染色实验步骤以下是小鼠肝脏组织人CYP酶家族免疫组化染色的一般实验步骤：1.杀死小鼠并迅速取出肝脏组织。
使用适当的动物伦理规范和操作程序。
2.将肝脏组织固定在合适的组织固定液中（如4%的paraformaldehyde）进行固定。
固定时间一般为4-24小时，具体时间取决于组织大小和固定液的浓度。
3.将固定后的肝脏组织进行组织处理，包括脱水、清除脂肪、蜡包埋等步骤，以便进行免疫组化染色。
具体处理步骤和方法需根据实验室常规和使用的试剂进行操作。
4.制备切片：使用旋转式、滑微型或冷冻切片机制备肝脏组织切片。
切片厚度通常为4-10微米，具体厚度取决于实验需求和使用的切片设备。
5.抗体选择：选择与人CYP酶家族相关的抗体进行免疫组化染色。
选择的抗体应具有与目标蛋白质特异性结合的能力，并且在小鼠样本中获得良好的信号。
6.免疫组化染色：进行抗体染色步骤，具体步骤如下： a. 切片去蜡：将切片脱蜡并重新水化。
b. 抗原恢复：进行热或酶解抗原恢复步骤，以增强抗体对目标蛋白质的识别。
c.阻断非特异性结合：使用适当的阻断剂（如牛血清蛋白或小鼠血清）对切片进行阻断，以减少非特异性结合。
d. 抗体孵育：在切片上加入目标抗体，并在合适的温度和时间下进行孵育，使抗体与目标蛋白质结合。
e. 二次抗体孵育：添加适当标记的二抗（如荧光标记的二抗）与一抗结合，并形成目标蛋白质和抗体复合物。
f. 染色显现：可根据需要添加染色剂进行显现，可使用荧光显微镜观察染色结果。
7.显微镜观察和图像获取：使用适当的显微镜观察标本，并使用相应的成像系统进行图像采集。
这些步骤提供了一般性的指导，具体的实验设计和操作细节可能因研究目的、使用的试剂和实验室条件而有所差异。
病理组织处理包埋盒安全操作及保养规程
病理组织处理包埋盒安全操作及保养规程前言病理组织处理是临床医学诊断的重要环节。
在处理之后，需要对组织进行包埋，以便进行组织切片后的染色和观察。
为了保证病理组织处理包埋的质量，包埋盒的安全操作和保养是非常重要的。
本文档主要介绍病理组织处理包埋盒的安全操作和保养规程，以确保病理组织处理的过程更加安全、高效。
操作规程一、包埋盒的准备1.打开包埋盒，检查是否有损坏或缺件。
如有损坏或缺件，需更换完整的包埋盒。
2.将包埋盒放置在干燥、清洁的工作台上。
3.取出需要使用的组织标本，并将其置于已标记好编号、名称等信息的容器中。
4.切取组织后，用组织剪刀或刀片将其剪成合适大小，并用凝固剂组织固定剂进行固定。
5.将已固定的组织置于石蜡中，放入石蜡剪刀中，并将石蜡剪刀插入预处理机中。
二、包埋盒的使用1.打开包埋盒的盖子，将需要包埋的石蜡剪刀放入包埋盒中，并按照石蜡剪刀所在的位置，选择对应的包埋机夹具。
2.将包埋盒放入包埋机夹具中，并将其牢固固定在夹具上。
3.倒入固定液，使石蜡剪刀完全浸泡在液中，以固定组织并停留适当时间以充分固定。
避免固定液过量或过少，影响石蜡剪刀内组织的固定。
4.操作人员需按照设备说明书上详细的操作流程进行操作。
三、包埋盒的保养1.固定液存放在通风干燥处，避免阳光直射。
2.包埋盒需要按照通风干燥的路线进行轮换，避免长时间不使用而导致湿度过高。
3.包埋盒需要定期清洁，使用工业酒精清洁时，避免将酒精溅到包埋盒内部。
4.包埋盒在不使用时，需要将其盖子关闭，避免灰尘等污染因素进入包埋盒内部。
总结本文主要介绍了病理组织处理包埋盒的安全操作和保养规程。
在进行病理组织处理包埋的过程中，我们需要注意的安全操作和细节处理事项还有很多，以免在处理过程中产生意外和影响组织处理质量。
在今后的工作中，我们需要时刻关注安全问题，并遵守本文列出的操作规程和保养要求，以保证病理组织处理包埋的安全和质量。
组织固定原理
动物组织的固定原理及固定液在组织病理学中，不管是组织切片乃至电镜还是大体标本的保存，都必须进行及时的适当的和有效的固定。
组织只有经过固定，才能完成随后的一系列的制作，直至切片的最后完成。
（一）、固定的作用组织经一系列的处理后，就必须进行固定，当然有的组织是先固定，再进行处理，然后再固定。
固定的作用，从组织学的角度其简单的定义是，保持细胞、组织的固有形态和结构，使之尽量保持细胞、组织的固有形态和结构，而从免疫组化技术的角度，固定的作用不仅是使细胞内蛋白质凝固，尽量减少或终止外源性酶和内源性酶的反应；防止细胞的自溶，以免使抗原扩散至组织间质；以保持组织的固有形态和结构；更重要的是保持组织或细胞的抗原性，不但要使抗原不导致失活，而且不使抗原发生弥散的现象，才能在免疫组化染色时，不产生过深的背景，影响对阳性物的判断。
（二）固定的目的1、能防止细菌的腐蚀和组织的自溶。
细菌无处不存在，它们随时都可污染腐蚀未经处理的组织。
固定液可以固定任何蛋白质，凡有生命的东西，都由蛋白质组成，蛋白质被固定，生命就停止，细菌也就失去了活力。
另者，在日常生活中，人们常可碰到这样的问题，一块肉不经处理放了几天后就会变质，这是为什么呢？除了细菌参与外，其本身也是很重要的。
因为组织离体后，供应这此组织的血液随之消失，细胞缺氧，细胞内溶酶体膜的结构受到破坏，破坏后释放出溶酶体酶，日常生活中常碰到的肉变质，就是细菌污染加组织自溶的结果。
2、保存细胞固有的物质，能凝固或沉淀细胞内或组织液，糖元等，使细胞或组织基本上保持与生活时的物质一样。
细胞的固有物质，即细胞核、内质网、线粒体、高尔基器、溶酶体、过氧体，细胞骨架，组织液，抗原、糖元等。
这些物质，如果不将其及时固定，是很容易丧失的，尤其是溶酶体，很容易受到破坏，因此应特别小心。
3、使组织硬化，便于切块。
刚离体的组织，除了胃组织以外，都是柔软的组织，尤其是胃肠道的组织，如果在没有固定时就取材，效果就很差，不是取材不规整，就是厚薄不均，粘膜和肌层很容易分开，因此，要取得规整标致的材料，就必须将组织彻底固定，再行取材。
兔神经节细胞切片高尔基体的观察
兔神经节细胞切片高尔基体的观察兔神经节细胞切片高尔基体的观察引言：高尔基体是细胞内的一个重要细胞器，它在蛋白质合成、修饰和运输中起着关键作用。
通过观察兔神经节细胞切片中的高尔基体，我们可以更深入地了解高尔基体的结构和功能。
本文将详细介绍观察兔神经节细胞切片高尔基体的步骤和注意事项。
一、实验材料和设备准备1. 兔神经节组织样本：从已处死的兔子获取神经节组织样本，并迅速取出待观察部位。
2. 刀片和显微刀：用于制备兔神经节细胞切片。
3. 组织固定液：如福尔马林或乙酸乙酯等，用于固定组织样本。
4. 显微镜：配备透射光学系统，包括物镜、目镜和照明系统。
5. 染色剂：如荧光染料或金标记染料等，用于增强高尔基体的可视化效果。
6. 盖玻片和载玻片：用于将切片固定在显微镜上。
二、制备兔神经节细胞切片1. 取出兔神经节组织样本后，将其迅速置于组织固定液中，以避免组织的自溶和变性。
2. 将固定后的组织样本切成薄片，厚度通常在10-50微米之间。
可使用刀片和显微刀进行切割。
3. 将切割好的组织片转移到载玻片上，并轻轻压平以确保均匀分布。
三、染色和观察高尔基体1. 选择适当的染色剂，根据实验设计选择合适的荧光染料或金标记染料。
这些染料能够与高尔基体相关的蛋白质结合并发出荧光信号或金颗粒。
2. 将染色剂加入到载玻片上的组织切片上，根据染色剂说明书中建议的浓度和处理时间进行处理。
3. 温和地洗去多余的染色剂，使用缓冲液或生理盐水进行洗涤。
注意不要过度洗涤，以避免失去目标结构的信号。
4. 用盖玻片覆盖切片，并使用显微镜将其固定在透射光学系统上。
5. 使用适当的物镜进行观察。
建议使用高倍数物镜（如40倍或63倍）以获得更高的分辨率。
6. 在透射光学系统下观察高尔基体的形态和分布。
通过调整焦距和光源强度，可以获得清晰的图像。
四、注意事项1. 在实验过程中，必须严格遵守实验室安全规范，包括佩戴手套、护目镜和实验服。
2. 组织样本的处理时间要尽量缩短，以避免组织变性和自溶。
组织固定液的使用
谈谈固定液得使用作者: ｌiza3(站内联系TA)发布:２013-01-11当前,应用于固定试剂得种类较多,它们对于固定不同得组织成分起着不同得作用,因此我们在使用时应该了解不同固定剂得效能,才能合理得固定组织。
根据Bｅncroft得分类法,将不同得固定剂分为四种类型:ﻫⅠ类:醛类,甲醛,戊二醛,多聚甲醛,丙烯醛,已二醛,丙二醛等。
ﻫⅡ类:氧化剂类,四氧化锇(奥酸),高锰酸钾,重铬酸钾等、Ⅲ类:蛋白变性类,甲醇,乙醇,醋酸等。
Ⅳ类:其她,氯化汞,苦味酸等。
上述四种类型得固定剂,最常使用得就是甲醛,其余得也在其它病理技术方面中用到。
下面根据使用得需要,将着重介绍几种常用得固定剂。
ﻫ(1)甲醛ﻫ甲醛商品名为福尔马林,一般市售得含甲醛３7—4 0%,由甲醛气体饱与于水而成,比重为1。
12。
它也可以稳定得固体形式存在,它得成分为高分子量得聚合体,称为多聚甲醛。
ﻫ甲醛溶液较难纯化,在每批市售商品中,都含有不少得杂质如甲醇,这种在组织化学方法当中,能使酶钝化,影响其反应。
甲酸,它可使固定液变酸,在陈列标本或长时间固定得组织,由于酸得作用,往往细胞核染色欠佳。
ﻫ甲醛有效固定作用得要点就是,在蛋白质末端基团之间形成交联链。
参与甲醛固定蛋白质得基团,主要为氨基,亚氨基及酰氨基,肽,胍基,羟基,SH与芳香环。
甲醛与组织蛋白类得反应就是多样与复杂得,因为它能与多种不同得功能基团结合,在多数情况下在其间形成桥键、甲醛有这种交联得功能,也就是它得缺点,在用甲醛固定过得组织中,需要做免疫组化得,往往提倡用酶消化或热抗原修复法来使蛋白与甲醛交联得醛键断裂开,以利于后来得染色。
甲醛可配成简单得或混合得固定液,最简单与最容易掌握得方法,就就是取10ml甲醛液,加水9０ml,这就就是10％得福尔马林、当然,现在使用得固定液要求较为严格些,最好就是使用缓冲福尔马林固定液,这将有利于后来得免疫组化染色得需要。
1。
组织收缩较少,损伤少,保存从组织学得观点来说,甲醛就是一种良好得固定剂,它有很多得优点:ﻫ固有物质好、2。
组织固定液的类型
组织固定液的类型
组织固定液的类型有很多，主要包括以下几种：
1.福尔马林固定液：福尔马林是一种广泛使用的固定剂，可以固定细胞和组织的结构，同时起到杀菌的作用。
2.酒精固定液：酒精固定液是一种常用的组织固定液。
酒精具有良好的杀菌作用，可以使组织保持良好的形态结构。
3.缓冲福尔马林固定液：缓冲福尔马林固定液是在福尔马林固定液中添加缓冲剂，使其pH值接近细胞内液，更适合某些特定的实验和研究。
4.寡聚肽固定液：寡聚肽固定液是一种对蛋白质固定效果较好的固定液，可以保持细胞和组织的蛋白质结构。
5.甲醛固定液：甲醛是一种常用的固定剂，可以使细胞和组织固定并保持其形态结构。
它有很好的杀菌作用，并且可以使细胞和组织保持较好的染色性能。
以上是几种常见的组织固定液类型，不同类型的固定液具有不同的特点和适用范围，根据不同的实验目的和要求选择合适的固定液非常重要。
10%标本福尔马林固定液成分要求
10%标本福尔马林固定液成分要求福尔马林固定液是实验室、博物馆、医学院等机构常用的固定剂，主要用于对标本进行保存。
其10%的浓度在实际应用中具有较高的可操作性和实用性。
本文将对10%标本福尔马林固定液的处理要求进行详细阐述，以期为相关人员提供参考。
福尔马林的化学成分为甲醛，它具有强烈的杀菌、防腐作用，能使蛋白质变性，从而达到固定标本的目的。
在使用10%标本福尔马林固定液时，要先了解其作用与重要性。
福尔马林固定液不仅能有效杀死标本内的微生物，防止腐烂，还能保持组织形态和颜色，为后续的科学研究提供良好的观察基础。
10%标本福尔马林固定液的配制方法相对简单。
将福尔马林与水按1:9的比例混合，即可得到10%的固定液。
在配制过程中，还需添加适量的缓冲剂，以调节固定液的酸碱度，提高固定效果。
使用10%标本福尔马林固定液进行标本处理时，要注意以下步骤：1.标本的处理与准备：首先，对标本进行清洗，去除表面的污垢。
对于软组织标本，可用生理盐水清洗；对于硬组织标本，可用蒸馏水清洗。
清洗完成后，对标本进行编号，准备进入固定液处理。
2.固定液的涂抹与浸泡：将准备好的标本放入10%福尔马林固定液中，用刷子蘸取固定液涂抹标本，确保标本各个部位都能充分接触到固定液。
随后，将标本完全浸泡在固定液中，使其充分吸收。
3.固定液作用时间与更换频率：一般情况下，10%福尔马林固定液的作用时间为24-48小时。
在此期间，要密切观察标本的固定情况，如发现固定效果不佳，需及时更换固定液。
在使用10%标本福尔马林固定液时，要注意以下几点：1.安全防护措施：福尔马林具有较强的刺激性气味，长时间接触对人体有害。
因此在操作过程中，要佩戴防护口罩、手套和眼镜，避免直接接触皮肤和眼睛。
2.福尔马林挥发的控制：福尔马林挥发较快，应在通风良好的环境下操作。
操作完毕后，要关闭容器，避免福尔马林挥发对环境造成污染。
3.储存条件的讲究：10%福尔马林固定液应存放在密封容器中，避免与空气中的二氧化碳反应。
Bouin's固定液使用说明
Bouin's固定液使用说明货号：G2331规格：100mL/500mL保存：室温避光保存。
产品说明：固定的目的在于保存细胞和组织的原有形态结构，固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、抑制细菌和霉菌的生长。
固定剂通过凝固、生成添加化合物等使蛋白质内部结构发生改变，从而使酶失活。
固定液主要分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦味酸盐类固定液等，较常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。
Bouin's固定液(Bouin's Fluid)主要由PA、甲醛、乙酸混合而成，PA可沉淀蛋白引起组织收缩，但不会使组织硬化，其与甲醛和乙酸混合后，穿透速度加快，固定均匀，组织收缩轻微，对细胞的微细结构显示的很清晰，为一种良好的固定液。
尤其对Masson三色法等的结缔组织和肌纤维染色有媒染作用，经其固定后的组织着色鲜艳。
该固定液也可能软化皮肤和肌腱，以利于切片。
操作步骤(仅供参考)：1、一般仅需固定30～60min。
如果组织块大，可适当延长固定时间，但不宜超过24h。
2、用Bouin固定液固定后，组织可稍微流水冲洗或不冲洗直接转入70%的乙醇脱水，经乙醇脱水时可除去大部分PA，组织留有一点黄色，对染色也无影响。
注意事项：1、Bouin's固定液对人体有一定的损害，请在通风好的环境下小心操作，避免吸入。
2、组织取材的厚度不同，固定时间也不同，对组织恰当的选材有利于固定液的渗透。
常规活检组织比较适合的厚度为2～4mm，一般不超过6mm。
3、固定液的容量应足够，一般固定液与组织块的体积比率应大于10:1。
如果容积不够大，可以在固定期间更换1～3次固定液。
4、温度对固定的影响很明显，提高温度可以加速固定作用，但温度不宜过高。
5、取出新鲜组织后，应及时固定，无法及时固定时，应保存于生理盐水中及时送检。
组织固定液的使用方法
安徽雷根生物技术有限公司 组织固定液说明书【产品名称】组织固定液【包装规格】货号：DF0111包装规格分别为：500ml、5000ml。
【预期用途】用于新鲜组织标本的固定。
【检验原理】固定的目的在于保护细胞和组织的原有形态结构，固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、抑制细菌和霉菌的生长，通过凝固、生成添加化合物等使蛋白质内部结构发生改变，从而使酶失活。
固定液主要分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦味酸盐类固定液等，较为常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。
本组织固定液主要由甲醛、磷酸盐组成，该固定液适合于绝大多数组织的固定，属于中性福尔马林固定液，pH接近于中性。
【主要组成成分】试剂组成主要成分组织固定液甲醛、磷酸盐【储存条件及有效期】5℃～35℃保存，原包装未开封固定液的有效期为24个月，在有效期内的已开封固定液建议在开封后6个月内使用完，每次用后及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】组织尽量新鲜。
【检验方法】l、一般标本固定时间控制在1～4小时/mm，大标本应适当延长固定时间；2、固定好的组织，可在10%福尔马林固定液或70%乙醇中长期保存。
【检验方法的局限性】仅限于病理组织内容物固定。
【注意事项】l、避免过度延长固定时间，否则引起生物大分子过度交联，取材厚度不同，固定时间也不同。
2、固定液的容量应足够，一般固定液与组织块的体积比率应大于10:1。
3、温度对固定的影响很明显，提高温度可以加速固定作用，但温度不宜过高。
4、本产品仅用于体外诊断，应由专业人士使用及进行结果的判读。
5、使用前应详细阅读说明书，并做好个人卫生防护，在有效期内使用，生产日期、生产批号和失效日期见包装。
6、用后应按医院或环保部门要求处置废弃物。
【基本信息】备案人/生产企业名称：安徽雷根生物技术有限公司住所：淮北凤凰山经济开发区凤冠路三期标准化厂房三号厂房。
4%多聚甲醛固定液的配制方法
4%多聚甲醛固定液的配制方法多聚甲醛固定液是一种用于细胞、组织核固定的溶液，它可以使细胞和组织中的核酸、蛋白质和细胞结构得以保持原貌。
以下是4%多聚甲醛固定液的配制方法：材料：-37%甲醛溶液（无水）：约10.8mL-磷酸盐缓冲液（PBS）：约80mL（注：PBS的配制方法参见附件1）-水：适量步骤：1.在一个干净的容器中，量取10.8mL37%甲醛溶液。
2.将磷酸盐缓冲液（PBS）加入容器中，使总体积达到120mL。
搅拌均匀。
3.逐渐加入适量的水，使液体体积达到200mL。
继续搅拌均匀。
4.将最终溶液过滤，并分装到无菌的小容器中，避免有细菌污染。
5.标注容器上的配制日期、浓度和固定液的种类。
6.存储于4℃的冰箱中，有效期为1个月。
附注：为了保持固定液的稳定性和有效性，需要严格按照配方比例制备固定液。
此外，还需要注意以下几点：-甲醛为有毒物质，使用时要注意安全操作，并采取必要的防护措施。
-固定液需在室温下制备，防止甲醛溶液挥发。
-固定液应尽快使用，避免长时间暴露在空气中。
-制备后的固定液应避免阳光直射和高温环境，存放在阴凉干燥处。
-使用前摇匀固定液，以确保溶液中成分均匀分布。
附件1：磷酸盐缓冲液（PBS）的配制方法：-0.2M磷酸二氢钠溶液（pH7.4）：溶解13.6g磷酸二氢钠（NaH2PO4）于800mL去离子水中，调整pH至7.4、加水至总体积为1L。
-0.2M磷酸盐酸二钠溶液（pH7.4）：溶解34g磷酸盐酸二钠（Na2HPO4）于200mL去离子水中，调整pH至7.4、加水至总体积为1L。
-PBS的配制：将100mL0.2M磷酸二氢钠溶液和900mL0.2M磷酸盐酸二钠溶液混合，调整pH至7.4、加水至总体积为1L。
FAA固定液使用说明
FAA固定液编号名称北京派瑞金LB9429FAA固定液FAA固定液简介：固定液主要分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦味酸盐类固定液等，较为常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。
FAA固定液又称酒精醋酸福尔马林混合固定液或AAF、AAF固定液，主要由乙醇(A)、乙酸(A)、甲醛(F)组成，兼有脱水作用。
AAF固定液常用于快速脱水和固定以及冷冻切片的快速固定。
FAA固定液操作步骤(仅供参考)：1、取新鲜组织入AFA固定液，置于冰箱内低温固定。
2、常规石蜡切片因固定不佳导致染色效果不满意时，可在染色前再用AAF固定液固定，染色效果会有明显提高。
FAA固定液注意事项：1、AAF固定液对人体有一定的损害，请在通风好的环境下小心操作，避免吸入。
2、固定液pH最好接近用中性，pH范围6～8。
3、组织取材的厚度不同，固定时间也不同，对组织恰当的选材有利于固定液的渗透。
常规活检组织比较适合的厚度为2～4mm，一般不超过6mm。
4、温度对固定的影响很明显，提高温度可以加速固定作用，但温度不宜过高。
5、取出新鲜组织后，应及时固定，无法及时固定时，应保存于生理盐水中及时送检。
保存条件：RT避光，12个月有效。
FAA固定液相关的固定液：乙醇-甲醛固定液Altmann固定液Maximov固定液甲醛-生理盐水固定液Allen B-15固定液Lillie甲醛中性固定液铬-醋酸固定液乙醇-甲醛固定液，A-F固定液Lichent's固定液多聚甲醛-磷酸缓冲固定液Picric acid-硫酸固定液Kolmer固定液Zirkle-Erliki固定液甲醛-乙酸-乙醇固定液Kleinenberg's（克来宁堡氏）固定液Susa固定液多聚甲醛-氢氧化钠固定液Karnovsky固定液Schaudinn（绍丁）固定液对苯醌固定液Hollande固定液Marchi固定液Zetterqvist固定液Helly固定液Karnovsky改良固定液Zenker固定液Gendre固定液Houseby固定液Zamboni固定液Flemming固定液Heidenhain（海登汉）固定液Verhoeff固定液ECD-G固定液Goldsmith固定液Rossman固定液Champy固定液Gilson固定液Romeis固定液Carnoy固定液Davidson固定液PLP固定液Carnoy-LeBrun固定液Dafano固定液PLPD固定液Champy固定液，Champy’s Fluid Carl固定液，卡尔固定液PFG固定液Helly固定液，Helly SolutionCajal甲醛-溴化铵固定液（FAB）Orth固定液AAF固定液Brasil固定液Nawaschin’s固定液卡诺氏固定液，Carnoy Fluid Bouin固定液Muller固定液Bouin固定液,Bouin氏固定液B-5固定液Mirsky's固定液Zetterqvist固定液Aoyama固定液Methacarn固定液组织细胞固定液。
免疫组化组织细胞的取材、固定、切片操作方法及要点概要
从大概标本上切除适当的组织资料进行研究就是取材。
取材不单在免疫组化而且在惯例病理检查中也十分重要。
用于免疫组化的组织一般取材大小为。
取材时应剔除脂肪和钙化,不然会影响切片 ,出现假阳性或假阴性结果。
组织标本包含动物标本、手术活检标本、尸体解剖标本及细胞标本等 ,有关各样标本的取材方法分述以下。
一、动物的致死法及取材(一致死法(1 空气栓塞法向动物静脉内注入必定量的空气,使动物很快死亡。
一般合用大动物 ,比如兔、犬、猫等动物。
(2 麻醉法可将浸有乙醚或氯仿(三氯甲烷的棉球连同动物一同放人密闭容器内进行麻醉 ,也可用 4%戊巴比妥作静脉注射 ,或用 20%氨基甲酸乙酯做腹腔注射。
合用于鼠等小动物。
(3 断头法用剪刀剪去动物的头部,待血液流出后立刻取材。
合用于小动物。
(4 去头法用重物猛击头后部或将动物头后部猛撞桌沿。
(5 股动脉放血法动物麻醉后,切开股动脉放血致死。
(二取材注意事项(1 最幸亏动物心脏还在跳动时立刻取材,并快速投入环保组织固定液内。
脏器的上皮组织易变质 ,争取在死后半小时内取材完成,不然免疫组化染色时会产生背景染色。
(2 切取组织使用的刀、剪要求尖利 ,防止往返挫动组织。
因动物组织质脆 ,所以夹取组织时切勿使劲过重 ,免得挤压伤害组织。
二、尸体解剖的取材尸体解剖的取材应依据实质需要进行,一般取材部位和数目以下。
(1 心和大血管右心室一块 ,左心室一块 ,主动脉一块 ,取材部位可在距主动脉瓣5cm 处。
(2 肺右下叶一块 ,切成正方形 ;左下叶一块 ,可切成长方形。
(3 肝右叶一块 ,切成正方形 ;左叶一块 ,切成长方形。
(3 脾一块。
(4 胰一块。
(6 肾两肾各一块 ,包含皮质、髓质和肾盂。
右肾一块切成正方形,左肾一块切成长(7 膀胱一块。
(8 肾上腺左、右各取一块。
(9 消化道食管一块 ,胃窦部一块 ,小肠一块 ,淋奉承一块 ,直肠一块。
(10 骨脊椎骨一块。
(11 胸腺一块。
(12 子宫宫颈和宫体数块。
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谈谈固定液的使用作者:liza3(站内联系TA)发布: 2013-01-11当前，应用于固定试剂的种类较多，它们对于固定不同的组织成分起着不同的作用，因此我们在使用时应该了解不同固定剂的效能，才能合理的固定组织。
根据Bencroft的分类法，将不同的固定剂分为四种类型：Ⅰ类：醛类，甲醛，戊二醛，多聚甲醛，丙烯醛，已二醛，丙二醛等。
Ⅱ类：氧化剂类，四氧化锇（奥酸），高锰酸钾，重铬酸钾等。
Ⅲ类：蛋白变性类，甲醇，乙醇，醋酸等。
Ⅳ类：其他，氯化汞，苦味酸等。
上述四种类型的固定剂，最常使用的是甲醛，其余的也在其它病理技术方面中用到。
下面根据使用的需要，将着重介绍几种常用的固定剂。
（1）甲醛甲醛商品名为福尔马林，一般市售的含甲醛37—40%，由甲醛气体饱和于水而成，比重为1.12。
它也可以稳定的固体形式存在，它的成分为高分子量的聚合体，称为多聚甲醛。
甲醛溶液较难纯化，在每批市售商品中，都含有不少的杂质如甲醇，这种在组织化学方法当中，能使酶钝化，影响其反应。
甲酸，它可使固定液变酸，在陈列标本或长时间固定的组织，由于酸的作用，往往细胞核染色欠佳。
甲醛有效固定作用的要点是，在蛋白质末端基团之间形成交联链。
参与甲醛固定蛋白质的基团，主要为氨基，亚氨基及酰氨基，肽，胍基，羟基，SH和芳香环。
甲醛与组织蛋白类的反应是多样和复杂的，因为它能和多种不同的功能基团结合，在多数情况下在其间形成桥键。
甲醛有这种交联的功能，也是它的缺点，在用甲醛固定过的组织中，需要做免疫组化的，往往提倡用酶消化或热抗原修复法来使蛋白与甲醛交联的醛键断裂开，以利于后来的染色。
甲醛可配成简单的或混合的固定液，最简单和最容易掌握的方法，就是取10ml甲醛液，加水90ml，这就是10%的福尔马林.当然,现在使用的固定液要求较为严格些,最好是使用缓冲福尔马林固定液,这将有利于后来的免疫组化染色的需要.从组织学的观点来说,甲醛是一种良好的固定剂,它有很多的优点:1. 组织收缩较少,损伤少,保存固有物质好.2. 固定均匀,穿透力强.3. 能使组织硬化,增进组织弹性,有利于切片.4. 能保存脂肪及脂类物质.5. 成本较低.虽然甲醛有上述的优点,但这都是相对而言,任何物质都不可能十全十美的,它也有许多缺点:1. 杂质含量较多,如甲醇,可钝化酶类,影响反应.2. 含有微量甲酸,导致固定液酸变,影响染色.3. 可产生福尔马林色素,影响观察.4. 不能固定尿酸和糖类物质.5. 容易挥发,污染环境,可导致标本干涸.6. 可长期存在于固定过的组织上.有人做过实验,组织用甲醛固定后在流水中冲洗5小时后,仍留有相当多的甲醛与蛋白质相结合,但需要经过长时间的流水冲洗(24天的冲洗)方能除去.可见存在于组织上的甲醛是不可能除去的.因为临床活检不可能有这么长的时间来冲洗组织.因此要特别指出的是,在其后的各种技术操作中,要特别注意到甲醛的存在,必须要想办法除去它,否则将会给各种染色造成影响,甚至导致失败。
应用甲醛,可以配成许多种固定液:1. 10%缓冲福尔马林固定液甲醛100ml蒸馏水900mlNaH2PO44gNa2HPO4 6.5g该固定液是当今流行的固定液,因它对组织固定较好,损伤较少,因对其后的各方面的研究都较好,尤其是对免疫组化的染色.2、10%福尔马林固定液甲醛100 ml自来水900ml这是一种最简单的固定液，适合于边远地区携带的固定液，但由于它的单一性，因此，只要有条件的单位都不要求使用这种固定液。
3、10%福尔马林盐固定液甲醛100ml自来水900mlNacl 9克先将Nacl溶于水，再加入甲醛。
这也是一种较为简单的固定液，但由于加入Nacl，它是一种重金属盐物质，加入了它可促进和改善染色，增加染色的强度。
4、Bouin氏固定液苦味酸饱和水溶液75ml甲醛2 ml冰醋酸5 ml该固定液中的冰醋酸，对胶原纤维等组织有膨胀作用。
而甲醛对组织有收缩作用。
两种试剂的混合使用，用以抵消彼此间的副作用。
使组织固定达到优良的固定水平。
5．醛糖钙固定液甲醛100ml蔗糖300ml乙酸钙20g蒸镏水90ml先将蔗糖和乙酸钙溶于蒸镏水，后加入甲醛。
该固定液对于做酶的组织化学的研究效果较好，组织固定后，做冰冻切片，再给予显示。
当前国内外基本上都还是要用甲醛来固定组织。
从免疫组织化学的角度来说，甲醛固定的组织大部分都可以用免疫组化的手段来检测，据多人认为，它对IgA ，IgM，J链，K链和λ链的标记效果较好，且背景清晰。
但美中不足的是：经它固定的组织，可与蛋白形成醛交联蛋白，这种醛键可封闭抗原。
固此，在免疫组化实际检测中，应根据不同的要求和需要，采用酶消化或者其它抗原修复如微波、高压等的方法，以便破坏醛键重新暴露抗原。
（2）酒精：又称乙醇，为无色透明的液体，沸点是78度，工业酒精是95%。
酒精它有许多优点：1、可保存尿酸结晶和糖原等物质。
高浓度的酒精如95%，无水酒精可保存上述两种物质，因它们易溶于水，因此，要证明上述两种物质的存在，就不能用含水的固定液来固定组织。
2、能在任何比例的情况下与水混合，在病理技术中，酒精是一种十分重要的试剂，它起着关键的作用。
如果没有酒精，将会无法完成必要的工作。
如组织的脱水，切片染色前后都离不开酒精，在常规的工作中，通常都用95%的工业酒精来配成60%、70%、80%、90%等不同的浓度来使用。
3、可溶解苯类物质为染色步骤中的桥梁试剂。
常规活检等切片上的石蜡必须除去，才能进行染色，能除去石蜡的物质有苯及汽油等，常用的有苯类试剂，苯不溶于水，但能溶于酒精，酒精在这里充担着除去苯和连接水的作用，为切片入水架起了桥梁，因此称它为桥梁试剂。
4、能除去切片上的水份，使切片无水化。
切片经染色后，由于所用的试剂都为水溶液，因此在切片上含有大量的水份，这些水份经系列梯度酒精的置换吸附后，到无水酒精中已完全无水，这样处理对于切片的保存是有好处的，否则，切片将会褪色。
5、可用来保存标本。
大体标本经福尔马林固定后，如为了陈列保存，必须取出冲冼。
然后移入75%的酒精中。
如果用福尔马林作陈列标本的固定液，则因为福尔马林含有杂质较多，液体容易酸化，时间一长，会逐渐变为微黄*色或淡黄*色，影响美观，影响陈列的效果。
6、可与其它试剂配成多种的混合固定液，有时为了加快固定，常采用酒精和其它试剂来配成混合固定液，这种固定液在固定的同时，兼有对组织脱水的作用。
应用酒精配成的混合固定液有：①Carnoy氏固定液氯仿300ml冰醋酸100 ml95%酒精600 ml该固定液固定组织快速，在固定的同时兼有脱水的作用。
溶液中的氯仿和酒精，对组织的收缩较厉害，但应用了冰醋酸，这种现象便被中和去。
②AF固定液甲醛100 ml冰醋酸50 ml95%酒精850 ml这种固定液的作用与上液有相似之处，但要注意的是，凡使用含有醋酸的固定液，其脱水用具不能使用铜制的脱水盒，因冰醋酸跟铜离子起反应，生成醋酸铜，这种物质可沉淀于组织间，可破坏组织中的抗原，造成免疫组化检测的失败。
应用时应多加注意。
酒精也有许多不足之处，它的缺点是：1、可溶解脂类物质，凡要证明组织是否含有脂类和类脂物时，切不能用含有酒精的固定液去固定组织，也不能用石蜡切片，因为酒精可将它们溶解去，而石蜡切片组织中含有的脂类物质，则在组织脱水时被溶解去，只留下脂类或类脂物所占有的空间。
2、对组织收缩较大，不宜作单纯固定液。
高浓度的酒精，对组织有显著的收缩作用，造成组织发硬易脆，难以切片等现象。
因此，它不作为单纯的固定液。
3、渗透力不强。
当用酒精固定组织时，组织表面很快就被固定，并形成了一层蛋白膜，这层膜可阻挡固定液向里渗透，造成了中间组织固定不佳的现象。
4、可沉淀白蛋白、球蛋白和核蛋白，凡经酒精固定的组织，核的染色都不好。
5、可脱去切片上已着染的各种颜色，切片经染色后，一是必须洗去多余的染液，二是必须脱去切片上的水。
在用酒精洗切片时，必须仔细地掌握显微镜下观察，还要掌握酒精的浓度，低浓底的酒精脱色力强，稍不注意，便可脱去切片上大部分的颜色。
切片脱水时，要较快地通过低浓度的酒精，以免使已着染的颜色被脱去。
6、价格较贵。
从经济学的角度，应用酒精固定组织划不来，例如：一瓶500ml的甲醛，可配成500ml的固定液，按每例标本需要100ml计，可固定50例标本，而一瓶500ml 的酒精，即使配成80%酒精，也只能固定6例标本，因此，若用酒精固定组织，其价格比用甲醛固定组织的要高8倍。
（3）冰醋酸。
冰醋酸为无色透明的液体，易挥发，气味大，一打开瓶盖，整个文章都可闻其味道，纯醋酸在17℃时常为结晶状，因称为冰醋酸，在冬天使用时，可用微波炉进行解冻，再行使用，它的优点有：1、能迅速固定染色质，助于染色，用醋酸配成的固定液，其作用快，固定效果均匀，对于染色质的固定快，因此，用其作固定的切片染色好，在配其它染色液如明矾苏木素和伊红时，常常需加入一定量的醋酸，以促进染色。
2、能使组织尤其是富含纤维的组织膨胀。
各种固定液对组织都有收缩的作用，尤其是对富含纤维的组织。
而它不但不会使组织收缩，而且还会令许多组织发生膨胀的作用。
根据这个特点，用它配成许多种不同的混合固定液，以达到固定好，收缩少，易切片，效果好等目的。
用它配成的混合固定液有：（1）Zenker氏固定液：重铬酸钾25G升汞50G蒸馏水1000ml冰醋酸50ml先将重铬酸钾和升汞溶于水中，尢其是重铬酸钾，应用热水或加温的方法将其溶解，然后过滤贮存于带盖的玻璃瓶中，如暴露于空气中，该溶液将会被慢慢氧化而便颜色加深，导致失效。
临用时，取贮存液950ml，加入50ml的冰醋酸，即可使用。
应用该固定液固定的组织，一般不要超过24h，取出组织，流水冲冼12小时以上，然后保存于75%-80%的酒精中，在切片染色前，必须用碘除去汞盐的沉着。
应用该固定液的组织，细胞核及细胞浆染色十分清晰，特别是要显示骨骼肌的横纹时，应用本液可获得满意的结果，但由于其含有醋酸，故不能用于保存细胞颗粒，红细胞及含铁血黄素。
（2）Flemming氏液2%酸水溶液200ml1%铬酸水溶液700ml冰醋酸100ml该液中的奥酸对脂肪组织既有固定作用，又有染色作用，对有髓神经纤维也有固定兼染髓鞘的作用。
如果做HE的染色，该液不适合。
应用该液固定的组织，切片不能太大过厚，一般1-2毫米厚固定时间1-3天，后经水洗，保存于80%酒精中，除上述两液体外，还有Bouin 氏液和Carnoy氏液等。
冰醋酸也有许多不足之处：1、不能作为单一的固定剂。
冰醋酸在实际应用中，常被作为添加剂来使用，如许多种固定液，都加入了冰醋酸。
另外，在苏木素和伊红染液中，也常加入了冰醋酸。
2、不能凝固蛋白质，不能保存白细胞颗粒，红细胞及含血铁黄素等。