光合仪使用说明及注意事项
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LI-6400便携式光合仪的使用说明
1. 仪器使用功能
LI-6400并非单一用于研究植物光合作用,他同时包括光合、呼吸(分为植物呼吸和土壤呼吸)、蒸腾、荧光等多项测量功能,多项功能的完全集成使得LI-6400成为生态学研究领域上重要的必不可少的基础研究设备。
其测量参数包括:净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、蒸腾速率(Ts)、细胞间隙CO2浓度(Ci)、大气CO2浓度(Ca)、光量子通量密度(PFD)、叶温(TL)、相对空气湿度(RH)。
如果配备6400-40叶绿素荧光叶室,可测试以下参数:最大荧光(Fm)、初始荧光(Fo)、可变荧光(Fv)、光化学猝灭(qP)、非化学猝灭(qN)。
此外,进行自动测量的基础上还可以进一步计算饱和点、补偿点等多项重要生理生态指标。
表1 LI-6400参数表
(主机显示屏测量菜单显示的参数说明,A-L是行号)
2. 硬件组成与存放
正确的硬件连接与存放对于使用和维护来说是至关重要的。
关于仪器的连接请与培训人员联系学习。
图1 仪器在主机箱内的安放位置与名称(请注意安放的方式)
关闭叶室,确定叶室关闭紧密,接上电池插头,开主机
3. 仪器使用流程
仪器安装连接,并连接好进气管缓冲瓶。
打开位于主机右侧的电源开关。
仪器在启动后将显示
“Is the IRGA connected?(Y/N)” 选择Y 叶室配置选择:
选择目前安装的叶室配置,如已经安装了标准叶室,请选择Factory default ,然后回车。
如果安装了荧光叶室,请选择6400-40 Default Flurometer ,然后回车。
如果安装了土壤叶室,请选择6400-09 soil Chamber ,然后回车。
其他叶室方法相同,只需要选择不同的叶室就可以了。
6400-02B 红蓝光源
6400-03充电电池
主机
分析仪与叶室
主机与分析仪的连线
CO 2注入系统
野外支架(4根)
调零
向SCRUB方向拧紧碱石灰管和干燥管上端的螺母。
关闭叶室,即压下黑色手柄,并旋紧固定螺丝即可。
在主菜单按F3按钮选“Calib Menu”项
①选“Flow Meter Zero”项(调气流量为零),回车
等待流速的电压读数基本稳定,用F1、F2上下调节,至读数基本稳定,且在—范围内,按EXIT按钮退出。
②选“IRGA Zero”(红外线气体分析仪探头调零),回车
等待CO2浓度和H2O浓度的下降,至读数基本稳定(一般在20分钟左右),按F3“Auto All ”进行自动调节,结束后“Exit ”退出。
③选“View Store Zeros Spans”,回车后按F1“Store”来保存,按“Y”来确定后按F5“Exit ”退出。
按“escape”,回到主菜单。
手动测量
按F4“New Measurements”菜单进入测量菜单。
设定文件:按F1“Open Logfile”建立新文件。
回车后输入自己设定的文件名。
当显示屏出现提示“Enter Remark”时,输入需要的标记(英文,用于标记样地、植物种类、样品号等)。
继续回车,文件设置结束。
在夹入叶片之前如果光合值大于或小于,那么应该按F5“Match”进行匹配。
测量:选取需要测量的植物叶片(3-5次重复)。
测量时间请尽量选择晴朗的天气条件,上午10:00-11:30左右最好,如果您的植物叶片是处于温室内、室内或生长箱内,由于其叶片气孔没有完全开放,需要先用饱和光强来进行气孔诱导,方法可以是采用大瓦数的灯泡来照射(大致需要20分钟的时间),或者在室外有光条件下活化(会小于20分钟),也可采用6400-02B或6400-40荧光叶室来进行气孔的诱导开放(这种方法有其缺点,因为我们往往需要很多次重复和样地,这样会多花很多时间。
)。
向Bypass方向拧紧碱石灰管和干燥管上端的螺母。
夹上叶片(尽量让叶片充满整个叶室空间,此时测量的植物叶片面积为6cm2,如果无法充满,需要用叶面积仪来确定叶面积,并在测量菜单状态下按数字“3”并按F1来修改叶片面积),关闭叶室(即压下黑色手柄),并旋紧固定螺丝即可(切记不要过紧)。
等待C行PHOTO读数稳定后即可记录(大约在30秒-1分钟左右,判断标准是小数点后最后一位数字的波动在左右,注意,如果是室内测量,波动会大一些)。
记录方法是按F1“LOG”按钮或者按分析仪手柄上的黑色按钮2秒即可记录一组数据。
换叶片进行下一次测量。
重复。
自动测量与环境条件控制
LI-6400可以控制的环境条件包括温度、CO2浓度、光强等。
一般而言,需要控制环境条件的实验有两种情况。
一种是环境变化剧烈,无法准确进行同等环境条件的测量。
另一种情况是进行光曲线和ACI曲线测量。
第一、简单环境控制。
只需要在手动测量时,按数字来切换菜单。
具体各菜单情况如下图所示。
图2 测量菜单下功能键分布图
温度控制:按数字2,按F4菜单控制温度(输入需要的温度回车即可,注意温度控制范围是环境温度的上下6度)。
光强控制:本功能在标准叶室配置下无法完成,此时需要连接6400-02B红蓝光源。
并重新启动机器选择6400-02B CHAMBER配置。
启动后其他同标准叶室。
在测量菜单下按数字“2”,按F5按钮选择“Quantum Flux”回车,输入您需要的光强值即可。
CO2控制:需要连接上CO2注入系统,并在主菜单下选择F3“Calib”按钮进入校准菜单。
此时应该把叶室关闭拧紧,把CO2过滤管的螺丝拧到“SCRUB”状态。
利用上下箭头选择“CO2 Mixer Calibrate”,回车后,等待系统自动进行校准后,回到测量菜单,按数字2,按F3设置REF CO2浓度即
可进行测量。
测定完成后,关闭气流、温度、光强控制,退到主菜单。
第二、自动测量。
光曲线:夹上叶片气孔开放后的叶片,建立新文件后,匹配。
测量菜单下按数字5,按F1,选择LIGHT CURVE,回车,并输入光强梯度(例如2000 1500 1200 1000 800 600 400 200 100 50 20 0)。
进一步输入最小等待时间(例如120秒)和最大等待时间(240秒)。
输入匹配值(例如20PPM),回车,
机器即进入自动测量,测量后关闭文件。
退出。
(注意此测量要求CO2浓度变化不大,否则应该控制其浓度)。
ACI曲线:同于光曲线,不同点是选择“ACI CURVE”,设置浓度梯度举例(380 300 200 100 50 380 380 400 600 800)。
其他相同。
.数据输出
将计算机与仪器连接,把仪器状态调整(主菜单下按F5“UTILITY”进入应用菜单,选择“FILE EXCHANGE”,回车即可。
)
取出随机带的软件光盘,在计算机上安装WINFX软件。
安装完毕后启动此软件。
并选择CONNECT。
后把LI-6400内的“USER”文件夹下的数据文件拖到计算机中的某个文件夹下即可。
使用此文件时只需要打开EXCEL软件,文件扩展名选择所有文件,选择分隔符为逗号,并打开文件,即可使用数据。
关闭仪器
按“ESCAPE”按钮退回到主菜单下,叶室留一点缝隙,关闭主机。
取出电池充电(注:如使用中电不足,仪器会出现声音提示和文字提示,需更换电池。
更换电池时,应先将一只电池换好,然后再换另一只电池。
)
注意事项
1. 一旦部分干燥剂颜色发红需要立即更换;
3. 阳光下需将荧光屏遮盖,否则会影响其寿命;
4. 注意仪器保养,轻拿轻放,信号线尽量保持伸展,勿扭曲,否则易使接口不牢,线头从接口处滑出;
5. 测量时显示“IRGA not ready”,此时需检查探头各处是否接牢;。