单细胞藻轮虫培养技术要点

单细胞藻、轮虫培养技术要点 陈世杰 （福建省水产研究所，厦门361012） 福建省水产技术推广总站 福建省水产饲料研究会 二OO 四年三月·厦门 目录 1、单细胞藻培养实用技术要点 1.1单细胞藻选用对象 1.2培养单细胞藻器具的清毒 1.3小球藻的分级培养 1.4营养及接种 1.5管理工作要点

1.6PVC 透明塑袋培养 1.7敌害生物防控 1.8防治三例 1.9单细胞藻的浓缩与冷藏 2、轮虫培养实用技术要点

2.1轮虫个体的大小 2.2生态习性 2.3繁殖特点 2.4食性与食料 2.5培养方式 2.6投饵密度 2.7营养强化 2.8轮虫的收获 2.9“饥饿轮虫”问题 单细胞藻、轮虫培养技术要点 陈世杰

（福建省水产研究所，厦门361012）

“兵马未动，粮草先行”，“手中有粮，心里不慌”。在饵料浮游动物（轮虫、卤虫、桡足类、枝角类等）的培养中，单细胞藻类作为最重要的基础性生物饵料来讲，在很大程度上是最优质而又不可或缺的；同时，单细胞藻在水产养殖中的作用日益凸显，其大量培养和生产不仅为鱼、虾、贝类等各种水产经济动物福建饵料动物培育技术

讲习班讲稿

的苗种生产提供饵料，而且有些还可作为鱼虾配合饲料的重要添加物，起到营养平衡与强化效果，利于培育健壮的苗种。单细胞藻作为培养轮虫的优质饵料，其关系更加密切，最重要的一点，是可以使轮虫摄食后，富有高度不饱和脂肪酸（HUFA）,大大提高轮虫的营养价值。

1、单细胞藻培养实用技术要点

1.1单细胞藻选用对象

有句俗话——“绿水养鱼、褐水养虾”，就是说，养鱼池水中以适量绿藻、养虾池水中以适量硅藻为宜，而贝类幼体在浮游期以金藻和绿藻为宜，在匍匐期则以底栖硅藻为宜。

常用的绿藻类如小球藻(Chlorella)、微绿球藻(Nanno-chloropsisoculata)、盐藻(Dunaliella)、亚心形扁藻(Platymo-nassubcordif ormis)、青岛大扁藻(P.helgolandica var.tsing-

taoensis)、四肩突四鞭藻(Tetraselmistetrathele)；常用的硅藻如牟氏角毛

藻(Chaetocerosmuelleri)、简单角毛藻(Chaet.

simplex)、新月菱形藻(Nitschiaclosterium)、三角褐指藻(Phaeodactylumtricornutum)、中肋骨条藻(Skeletonema

costatum)。

常用的金藻类如绿光等鞭金藻(Isochrysisgarbana)、湛江叉鞭金藻(Dicrateriazhanjiangensis)、绿色巴夫藻(Pavlovaviridis)、鲁兹帕夫藻(P.lutheri)；常用的底栖硅藻如舟形藻(Navicula)、卵形藻(Cocconeis)、双

眉藻(Amphora)、弯杆藻(Achnanthes)。

目前，在应用中，微绿球藻、骨条藻和金藻类巴夫藻更显现优点。

单细胞藻作为饵料培养轮虫及水产动物幼体苗种饵料，有以下特点：

①个体小(苗种、幼体之口径约为其体长的1/10)，而细胞藻又应是其口径的√2/2或<4/5。

②运动速度、分布情况与幼体活动习性一致，便于摄食即摄食的机会更多。

③营养丰富，尽量选取无坚硬外壁的，适于消化吸收。

④本身及其代谢产物无毒，不影响幼体、苗种的正常生长。

⑤繁殖快，对环境的适应性强，容易大量培养和生产。

1.2培养单细胞藻器具的消毒

①在水中煮沸，5～15分钟；或在高压蒸气灭菌锅中，以1kg/cm2压力、121℃高温蒸煮15～20分钟，此法是加温80℃以上使敌害微小生物的蛋白质凝固而死。

②用70%酒精擦洗玻璃器具、工具的表面，此法是使敌害微小生物的蛋白质脱水变性。

③用300mg/L高锰酸钾浸泡5分钟以上，或泼洒水槽、水池，之后应用洁净海水冲洗，此法是因为高锰酸钾是强氧化剂，杀灭敌害生物。

④用1～5%漂白粉浸泼，方法与功能同③。

⑤用10%盐酸(1份盐酸：9份水)浸擦玻璃工具，但金属器物和水泥池不宜用。

⑥用紫外线照射，在20℃、以250～260nm照射20分钟，杀菌效果较佳，但也应注意照射距离和时间的调整。照射量较低时即能使病毒失活力，较高时使细菌失活力；杀灭酶菌丝需更高、杀灭原生动物还要高。

1.3小球藻的分级培养

一级培养(小型)目的为提供二级培养用，因此要求较严格：一定选不混杂藻的单种(最好是无菌的纯种)，密度高、不老化，没原生动物污染，培养中的用水经严格过滤与消毒，培养器具(主要是玻璃瓶)煮水待凉或用10%稀盐酸擦拭消毒；

二级培养(中型)是未来大量培养的基础，依然是需要比较严格的要求，但藻种密度及操作管理中的严密程度较弱，时有老化或极少量的原生动物污染；

三级培养(大量培养)是最终产品，基本上是单种，或混有少量杂藻，藻种密度不可能太浓，用水、器具均用次氯酸钠液或漂白粉(精)消毒，杀灭原生动物，8或4小时后用硫代硫酸钠中和。

1.4营养及接种

一、二级培养时，用营养盐母液调节，大面积培养则先溶解再泼洒。如以

1ml，各种营养元素肥只用其中一种试剂即可；除硅藻外，其他绿藻、金藻类不必施用硅酸钠。

接种量：一级(1:1)；二、三级(1:10～20倍)

在每天上午接种好，阴天也应接种，尽量争取扩大采光及增加光照；藻密度小时，接种量宜小不宜大(1:1～2)，而藻密度大时，接种量宜大不宜小；同一天接时，先接不耐污种，后接耐污种，接种操作中的两个公式，公式A是指仔鱼基本摄食完了轮虫时，应加的藻量(L)

公式A：加藻量(L)=×1000 Array

公式B：水泵运行时间

1.5管理工作要点

②保持单细胞藻的种群优势，有利于抑制原生动物的繁生，以保持较高的藻类现存量。

藻类现存量=(接种量+净生长量)-收获量

③满负荷运转培养中，采收一半，又加一半，即加大接种量、加大光照和充气(充气量及增加池底面的充气气石)；另外，采用指数生长期的藻液，应重

(5%)的混合空气，待藻类密度上升稳定后再视光照强度、添加营养和充入含CO

2

取用。

1.6PVC透明塑袋培养

①PVC透明塑袋或较厚的农用聚乙烯薄膜袋，优点是透光、韧性、无毒、价廉，以插入一根气石的充气管与另一根在袋中离开水面的出气管即可。亦可当作营养盐导入及藻种输出用。

②塑袋培养的优点是：(1)受光率可达99%，而水泥池受光率才28.6%(受光率=受光面积/表面积×100%)；(2)藻类质量可保持在一、二级培养水平；(3)框架式设置可充分利用空间，水泥池则为平面布局，占用地面，很受限制；(4)设备简单、成本低；(5)一次性培养，防止原生动物污染。

科威特以直径30cm的容量200L的半透明直管培养藻类，光周期为

12:12，pH为6.5，可培养藻类密度达8700×104细胞/ml，产量达136g/m3·d。

1.7敌害生物防控

①常见单胞藻培养中的敌害生物有：原生动物的游仆虫、急游虫、尖鼻虫、变形虫、鞭毛虫、小白虫等，还有颤藻、纤毛虫、钟形虫等，后者的出现，表现水质已相当不好了。

②敌害生物的危害机制与途径是，与单胞藻处于相同环境条件，且对环境变化的适应力更强，其危害途径是捕食、竞争饵料藻类及分泌有害物质的有毒虫种、藻种的毒害作用，单一或两者兼有的危害作用。

1.8防治三例

当藻液混入少量原生动物及轮虫该怎么办？

①利用原生动物比单胞藻耐受含氯氧化剂能力差的特点，在培养四肩突四鞭藻时，充分充气，10L藻液以8L/min充气量；在氯浓度分别是4.4～4.5、5.9～9、10.4～10.5mg/L以下的情况下，对藻类的繁殖分别是无影响、弱和不增长，但是当氯浓度为0.75-1mg/L时，轮虫就已先死亡了。(冈内正典，1991)

②在藻类小型培养中，提高藻液盐度，如培养亚心形扁藻时，加盐使其比重升至1.056-1.060，然后再稀释一、二次，使之复原，使敌害生物因盐度改变而死去。(陈明耀，1995)

③改变藻液的pH值，也是藻类小型培养中消除敌害生物的一种方法。即每升藻液加1mol/L盐酸3～4ml，搅拌使其pH值接近3，经0.5～1小时后用1mol/L的氢氧化钠中和并复原pH值。(李庆彪等，1999)

1.9单细胞藻的浓缩与冷藏

藻液浓缩或至膏状，于运输和储存均较方便。