分解尿素的细菌的分离和计数(答案)

课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

一、基础知识

1. 尿素是一种重要的氮肥，农作物不能（能，不能）直接吸收利用，而是首先通过土壤中的细菌将尿素分解为氨和CO2 ，这是因为细菌能合成脲酶。

2．科学家能从热泉中把耐热细菌筛选出来是因为热泉的高温条件淘汰了绝大多数微生物，这样也适用于实验室中微生物的筛选，原理是人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、PH 等），同时抑制或阻止其他微生物生长。

3. 在统计菌落数目时，常用来统计样品中活菌数目的方法是稀释涂布平板法。除此之外，显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法。

4. 采用稀释涂布平板法统计菌落数目时，培养基表面生长的一个菌落，来源于 1 个活菌。通过统计菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300 的平板进行计数。

5．统计的菌落数比活菌的实际数目低。这是因为当两个或多个细胞在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。因此，统计结果一般用菌落数来表示。

6．设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。7．对照实验是指除了被测试条件外，其他条件都相同的实验。满足该条件的称为对照组，未满足该条件的称为实验组。

二、实验设计

1. 实验设计的内容包括实验方案、材料用具、实施步骤和时间安排等。2．根据图示2－7填写以下实验流程：

3．土壤微生物主要分布在距地表3～8cm的近中性的潮湿土壤中，约70％～90％为细菌。4．分离不同的微生物采用不同的稀释度，其原因是不同微生物在土壤中含量不同。

5．培养不同微生物往往需要不同培养温度和时间。细菌一般在 30～37℃培养1～2d，放线菌一般在 25～28℃培养5～7d，霉菌一般在 25～28℃的温度下培养3～4d。6．菌落的特征包括形状、大小、隆起程度、颜色等方面。

7．实验过程

1）取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。

2）应在火焰旁称取土壤10g。将称好的土样倒入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，塞好棉塞。3）在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁进行。

4）实验时要对培养皿作好标记。注明培养基类型、培养时间、稀释度等。

5）为了提高效率，在操作时更加有条不紊，应当事先制订计划。

三、结果分析与评价

1．对分离的菌种作进一步的鉴定，还需要借助生物化学的方法。

2．在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的脲酶将尿素分解成了氨。氨会使培养基的碱性增强，PH升高。因此，我们可以通过检测培养基pH变化来判断该化学反应是否发生。3．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变红，说明该细菌能够分解尿素。

巩固练习

1．从土壤中分离能分解尿素的细菌，可以利用选择培养基，其成分中一定有（A）

①尿素②有机氮化合物③无机盐④有机碳化合物⑤水⑥无机碳化合物

A （1）（3）（4）（5） B（2）（3）（4）（5） C （1）（3）（5）（6） D（2）（3）（5）（6）

2．可用于菌落数目统计的培养基是（A ）

A 固体培养基 B液体培养基C半固体培养基D天然培养基

3．产生标准菌落的细菌的最初数目和培养基分别是（ C ）

A一个细菌液体培养基B许多细菌液体培养基

C一个细菌固体培养基D许多细菌固体培养基

4．要从多种细菌中分离某种细菌，培养基要用（B ）A加入青霉素的培养基 B 固体培养基

C液体培养基 D加入高浓度食盐的培养基

5．右表资料表明在各种培养基中细菌的生长，SCM 为简单培养，UVXYZ代表

加入培养基的不同物质，问哪一种物质细菌不能合成（C）

A. U

B.V

C.Y

D.Z

6培养基中浓度过高抑制微生物生长的原因是（B）

A含热量太多 B 会使微生物失水

C 导致微生物休眠D培养基中的碳源和氮源比例失衡

7．不同种类的细菌菌落表现为不同的特征，下列属于菌落特征的是①菌落

大小②菌落形状⑶菌落的隆起程度④菌落的颜色⑤菌落的透明度（ D ）

A（1）（2）（3） B（2）（3）（4） C（1）（3）（4） D（1）（2）（3）（4）（5）

8．某同学在１０、100、1000倍稀释液的平均菌落数为2760、295、46,则菌落总数为 ( C )

A 27600

B 29500

C 46000

D 37750

9.下列氮肥能被植物直接吸收的是 (1)硝酸盐(2)尿素(3)磷酸二氢氨 (4) 氨 ( B )

A (1)(2)(3)(4) B(1)(3)(4) C (2)(3)(4) D (1)(3)

10．将某种细菌接种到彻底灭菌的固体培养基上，经过一段时间后能得到（D）

A 无一定形态的群体

B 菌丝 C单个细菌 D菌落

11.实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应，用3种细菌在事先准备好的琼脂平板上画3条等长的平行线(3条线均与图中的链霉素带接触)，将平板置于37 ℃条件下恒温培养3天，结果如图所示。从实验结果分析，以下叙述不．正确的是( D)

A．链霉素能阻止结核菌的生长

B．链霉素对结核菌比对霍乱菌更有效

培养基生长状态

SCM __

SCM + V +Z __

SCM+U+Y +

SCM+Z+X __

SCM+v+Y +

SCM+U+X __

SCM+Y+Z +

菌落计数

---------- 配制土壤溶液系列稀释涂布平板与培养