糖化血红蛋白(HbA1c)测定标准操作程序SOP文件
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溶血后的稳定时间：2-8℃24小时
-20℃6月
再使用前将溶血剂放入室温稳定15分钟。
3.2.2 EDTA/肝素抗凝血：
将抗凝全血混匀避免形成泡沫。取血液10ul，加入溶血剂1000ul。当血液从红色变为棕榈色后即可使用（大约1-2分钟）。
溶血后的稳定时间：15-25℃4小时
2-8℃24小时
-20℃6月
R2：打开后机上稳定28天
R4：打开后机上稳定28天
准备：直接使用。
4.2校准物
来源：ROCHE配套校准物,符合WHO标准,具体如下：
S1：0.9％的NaCl
S2－5:定标液3a-d
贮存条件：15-25℃8小时
2-8℃2天
-20℃3月
定标液复溶后，如果不再使用，应该立即进行冰冻。
准备：打开小瓶的时候要小心，避免损失干粉，准确加入2.0ml蒸馏水或者去离子水。小心混匀，避免形成泡沫，使用前稳定30分钟。
定标频率：A试剂批号更换后B由质控结果决定
4.3质控物
来源：罗氏糖化血红蛋白专用质控品
其它适合的质控品
贮存条件：置2-8℃冰箱至有效期。
准备：直接使用。
质控间隔时间及限制：应视不同地区及各自实验室情况而定。质控结果应在限定的范围之内，如果超出范围，实验室应根据情况采取措施。
5仪器
ROCHE MODULAR P或日立7060生化分析仪。
6上机操作
见仪器作业指导书，参数设置见附表。
7参考范围
公式1：2.9-4.6%
公式2：4.8-6.0%
公式参见注意事项。
8线性范围
本法线性范围为0.2g/dl～定标液的最高浓度，不准确度允许范围 ±7%，不精密度CV=4.3%，灵敏度0.2g/dl。
ABCD医院
生化实验室
文件编号：
ABCD-SOP-04-25
%HBA1C= 0.82×HbA1c(g/d)÷Hb(g/dl)×100 + 2.76
10抗干扰能力：
10.1标准：回收率在90％－110％之间。
10.2黄疸：黄胆指数达到50时不会有明显干扰。（直接和间接胆红素浓度约为50mg/dl）
10.3乳糜：乳糜指数达到800时不会有明显干扰。（血红素浓度约300mg/dl）
ABCD医院
生化实验室
文件编号：
ABCD-SOP-04-25
糖化血红蛋白（HbA1c）测定
版序：ABCD
页码：第1页，共3页
1测定方法
免疫抑制比浊法
2测定原理
标本中的HbA1c与anti- HbA1c抗体发生反应，形成可溶性的抗原-抗体复合物。因为在HBA1C分子上只有一个特异性的HbA1c抗体的结合位点，所以不能形成凝集反应。过量的抗HbA1c抗体与试剂中的多半抗原反应形成不可溶的抗体-多半抗原复合物，可以通过浊度进行检测，然后在另外一个通道中检测血红蛋白的浓度。
再使用前将溶血剂放入室温稳定15分钟。
4试剂
4.1试剂
来源：ROCHE配套试剂（详见试剂说明书）。
贮存条件及稳定性：未打开试剂盒：2－8℃储存至效期末
R1：打开后机上稳定28天
ABCD医院
生化实验室
文件编号：
ABCD-SOP-04-25
糖化血红蛋白（HbA1c）测定
版序：ABCD
页码：第2页，共3页
糖化血红蛋白（HbA1c）测定版序：Biblioteka BCD页码：第3页，共3页
9注意事项
9.1血清标本出现溶血、脂血或黄疸的干扰情况参见抗干扰能力。
9.2仅应用于体外诊断。
9.3计算公式：
公式1：糖化血红蛋白的浓度以%形式报告。
%HBA1C=HbA1c(g/dl)÷Hb(g/dl)×100
公式2：经DCCT研究与HPLC相关好。
10.4 RF<750IU/ml，Vc<50mg/dl时不会有干扰。
11临床意义
HbA1c是由Rahbar等人首先提出的，在糖尿病患者血液中发现的一种特殊的血红蛋白成份。它是由血红蛋白β链的N末端氨基酸的氨基与糖结合形成糖化血红蛋白，这种结合为非酶促反应。在红细胞的整个生命周期中，均以此种糖化血红蛋白形式存在，并且与血糖的浓度及红细胞的寿命有关。在病人的近期病程中（大约6－8周），糖化血红蛋白的浓度与病人的平均血糖浓度密切相关，且不受临时血糖浓度波动的影响，因此，对于糖尿病患者来说，较于血糖及尿糖浓度，糖化血红蛋白浓度更能提供一种可信的信息。
3标本
3.1标本收集：
毛细血管血及肝素/EDTA抗凝血浆，处理方法见标本准备。
稳定性：15－25℃3天
2-8℃7天
-20℃6月
3.2标本准备：
3.2.1毛细血管血：
使用一次性的毛细血管采取毛细血管血液，将该血液与溶血剂进行1：100倍配比（例如20ul毛细血管血液配比2000ul溶血剂）。小心混匀后使用。当血液从红色变为棕榈色后即可使用（大约1-2分钟）。
-20℃6月
再使用前将溶血剂放入室温稳定15分钟。
3.2.2 EDTA/肝素抗凝血：
将抗凝全血混匀避免形成泡沫。取血液10ul，加入溶血剂1000ul。当血液从红色变为棕榈色后即可使用（大约1-2分钟）。
溶血后的稳定时间：15-25℃4小时
2-8℃24小时
-20℃6月
R2：打开后机上稳定28天
R4：打开后机上稳定28天
准备：直接使用。
4.2校准物
来源：ROCHE配套校准物,符合WHO标准,具体如下：
S1：0.9％的NaCl
S2－5:定标液3a-d
贮存条件：15-25℃8小时
2-8℃2天
-20℃3月
定标液复溶后，如果不再使用，应该立即进行冰冻。
准备：打开小瓶的时候要小心，避免损失干粉，准确加入2.0ml蒸馏水或者去离子水。小心混匀，避免形成泡沫，使用前稳定30分钟。
定标频率：A试剂批号更换后B由质控结果决定
4.3质控物
来源：罗氏糖化血红蛋白专用质控品
其它适合的质控品
贮存条件：置2-8℃冰箱至有效期。
准备：直接使用。
质控间隔时间及限制：应视不同地区及各自实验室情况而定。质控结果应在限定的范围之内，如果超出范围，实验室应根据情况采取措施。
5仪器
ROCHE MODULAR P或日立7060生化分析仪。
6上机操作
见仪器作业指导书，参数设置见附表。
7参考范围
公式1：2.9-4.6%
公式2：4.8-6.0%
公式参见注意事项。
8线性范围
本法线性范围为0.2g/dl～定标液的最高浓度，不准确度允许范围 ±7%，不精密度CV=4.3%，灵敏度0.2g/dl。
ABCD医院
生化实验室
文件编号：
ABCD-SOP-04-25
%HBA1C= 0.82×HbA1c(g/d)÷Hb(g/dl)×100 + 2.76
10抗干扰能力：
10.1标准：回收率在90％－110％之间。
10.2黄疸：黄胆指数达到50时不会有明显干扰。（直接和间接胆红素浓度约为50mg/dl）
10.3乳糜：乳糜指数达到800时不会有明显干扰。（血红素浓度约300mg/dl）
ABCD医院
生化实验室
文件编号：
ABCD-SOP-04-25
糖化血红蛋白（HbA1c）测定
版序：ABCD
页码：第1页，共3页
1测定方法
免疫抑制比浊法
2测定原理
标本中的HbA1c与anti- HbA1c抗体发生反应，形成可溶性的抗原-抗体复合物。因为在HBA1C分子上只有一个特异性的HbA1c抗体的结合位点，所以不能形成凝集反应。过量的抗HbA1c抗体与试剂中的多半抗原反应形成不可溶的抗体-多半抗原复合物，可以通过浊度进行检测，然后在另外一个通道中检测血红蛋白的浓度。
再使用前将溶血剂放入室温稳定15分钟。
4试剂
4.1试剂
来源：ROCHE配套试剂（详见试剂说明书）。
贮存条件及稳定性：未打开试剂盒：2－8℃储存至效期末
R1：打开后机上稳定28天
ABCD医院
生化实验室
文件编号：
ABCD-SOP-04-25
糖化血红蛋白（HbA1c）测定
版序：ABCD
页码：第2页，共3页
糖化血红蛋白（HbA1c）测定版序：Biblioteka BCD页码：第3页，共3页
9注意事项
9.1血清标本出现溶血、脂血或黄疸的干扰情况参见抗干扰能力。
9.2仅应用于体外诊断。
9.3计算公式：
公式1：糖化血红蛋白的浓度以%形式报告。
%HBA1C=HbA1c(g/dl)÷Hb(g/dl)×100
公式2：经DCCT研究与HPLC相关好。
10.4 RF<750IU/ml，Vc<50mg/dl时不会有干扰。
11临床意义
HbA1c是由Rahbar等人首先提出的，在糖尿病患者血液中发现的一种特殊的血红蛋白成份。它是由血红蛋白β链的N末端氨基酸的氨基与糖结合形成糖化血红蛋白，这种结合为非酶促反应。在红细胞的整个生命周期中，均以此种糖化血红蛋白形式存在，并且与血糖的浓度及红细胞的寿命有关。在病人的近期病程中（大约6－8周），糖化血红蛋白的浓度与病人的平均血糖浓度密切相关，且不受临时血糖浓度波动的影响，因此，对于糖尿病患者来说，较于血糖及尿糖浓度，糖化血红蛋白浓度更能提供一种可信的信息。
3标本
3.1标本收集：
毛细血管血及肝素/EDTA抗凝血浆，处理方法见标本准备。
稳定性：15－25℃3天
2-8℃7天
-20℃6月
3.2标本准备：
3.2.1毛细血管血：
使用一次性的毛细血管采取毛细血管血液，将该血液与溶血剂进行1：100倍配比（例如20ul毛细血管血液配比2000ul溶血剂）。小心混匀后使用。当血液从红色变为棕榈色后即可使用（大约1-2分钟）。