最新基础生物化学实验

基础生物化学实验

《基础生物化学》课程实验教学大纲

课程编号：3011010 学时：32 学分：2

一、课程的性质和任务

“基础生物化学实验”是采用生物化学的原理和方法探究植物生命现象化学本质的实验科学。它是植物生产类、环境资源类各专业重要的专业基础实验课程。本课程讲授基础生物化学实验方面的基本理论，着重进行实验技术方面的系统训练，并安排综合实验及综合实验报告写作训练。

二、教学内容和方法

教学内容分为基础生化实验理论讲授（4学时）和实验操作（28学时）两部分，以实验操作为主。实验理论讲授离心技术、电泳技术、层析技术和分光光度技术的基本原理和方法。实验操作安排多次基本实验、1-2次综合实验或设计实验。基本实验1人1组。综合实验和设计实验4-8人1组，每人独立操作。

课程安排与基础生物化学理论课程同步，在第4学期进行。

三、教学目的和要求

通过实验理论学习、实验技术训练及实验技术的综合应用，提高学生的实验技能，培养学生的实验能力和创新思维能力，为应用生物化学实验手段进行科学研究奠定基础。

实验前要求预习，检查预习报告。基本实验每人独立完成实验操作并交实验报告。以技术为主的基本实验完成后进行操作考核。综合实验每组做4-8个样品（或处理），1人做1个样品（或处理），以组统计数据，每人撰写1份综合实验报告。教学结束后，在教材的思考题范围内进行实验笔试。

四、考核方式及办法

实验成绩以预习5%，操作15%，实验报告40%，综合实验报告10%，实验笔试30%，进行综合评定。实验课指导教师可以一次考核实验或多次检察现场评定预习和操作成绩；实验报告和综合实验报告成绩以批阅分数评定，实验笔试在期末进行全校统考。

五、配套的实验教材或指导书

实验教材采用《植物生理生化实验教程》（第2版），叶尚红主编，云南科技出版社，2007、2。

六、适用专业

植物生产类和环境资源类各专业。在选择实验内容时可考虑与专业结合。七、实验项目：(28学时)

在下列实验中选做28学时，并开设2-3组综合实验或设计实验

基础生物化学实验技术基本原理：(理论课讲授4学时)

1、离心技术

离心技术的基本原理, 离心机的种类、用途，普通离心机的使用注意事项，使用普通离心机分离提取DNA或RNA。

2、电泳技术

电泳的概念、分类、用途、聚丙烯酰胺凝胶电泳分离物质的基本原理：凝胶的聚合、电泳分离过程中的三种效应，聚丙烯酰胺凝胶电泳的应用，操作与装置。

3、层析技术

层析法分离物质的原理, 层析法发展简史及层析法分类、薄层层析分离物质的原理，操作及应用实例。

4、分光光度技术

紫外及可见分光光度技术的基本原理，发射光谱与吸收光谱, 吸收光谱中的T与A，分光光度法的定义、测量方法及测定物质浓度的一般操作过程，分光光度计的工作原理、应用范围。

实验一酵母RNA的提取和鉴定(或植物DNA的提取和鉴定)

（一）实验目的：

掌握DNA或RNA提取及鉴定的基本原理及方法，学习普通离心机的使用。（二）实验项目内容：

裂解细胞，乙醇沉淀法提取DNA或RNA；酸水解，检测其组成成分。

（三）主要仪器设备：

离心机、天平、水浴锅、试管、烧杯、离心管等。

（四）实验室名称：

植物生理生化实验室

（五）实验报告撰写

按教材6-7页“实验报告”格式撰写

实验二影响酶作用的因素

（一）实验目的：

加深对酶性质的认识，并学会淀粉酶（粗酶液）的提取。

（二）实验项目内容：

利用碘溶液检测不同温度和pH下淀粉是否被淀粉酶分解；分别以淀粉和蔗糖为底物判断淀粉酶的专一性。

（三）主要仪器设备：

水浴锅、电炉、乳钵、漏斗及漏斗架、试管、烧杯、量筒、移液管、镊子等。

（四）实验室名称：

植物生理生化实验室

（五）实验报告撰写

按教材6-7页“实验报告”格式撰写

实验三聚丙烯酰胺凝胶园盘电泳分离过氧化物同工酶

（一）实验目的：

学习聚丙烯酰胺圆盘电泳的基本原理和操作技术，掌握过氧化物同功酶的分离方法，并比较不同材料过氧化物同功酶的区别。

（二）实验项目内容：

配制PAGE分离胶和浓缩胶，灌胶，上样，稳流电泳，剥胶，用H

2O

2

及联苯胺

显示胶条上的酶谱带并比较不同材料间的差异

（三）主要仪器设备：

离心机、电泳仪及花篮式电泳槽、扭力天平、微量进样器、长针头注射器、乳钵、烧杯、移液管、试管、洗耳球等。

（四）实验室名称：

植物生理生化实验室

（五）实验报告撰写

按教材6-7页“实验报告”格式撰写

实验四氨基酸的薄层层析

（一）实验目的：

练习用薄层层析法分离、鉴定植物组织中的氨基酸，并掌握该方法的一般原理和操作技术。

（二）实验项目内容：

将硅胶G于玻板上制成薄层板，在薄层板的一端点样，用有机溶剂展层，茚三酮显色，测出样点的Rf值并加以比较。

（三）主要仪器设备：

层析缸、玻板、大培养皿、小烧杯、乳钵、量筒、烘箱、电吹风、离心机、离心管、电子天平等。

（四）实验室名称：

植物生理生化实验室

（五）实验报告撰写

按教材6-7页“实验报告”格式撰写

实验五种子粗脂肪测定(索氏残余法)

（一）实验目的：

学习掌握索氏法提取种子粗脂肪的测定技术。

（二）实验项目内容：

利用索氏提取器循环抽提样品中的脂质，称量残余的样品求出粗脂肪含量。（三）主要仪器设备：

索氏提取器、干燥器、烧瓶、电热恒温水浴锅、电热鼓风干燥箱、天平等。（四）实验室名称：

植物生理生化实验室

（五）实验报告撰写

按教材6-7页“实验报告”格式撰写

实验六淀粉酶活性的测定

（一）实验目的：

学习淀粉酶活性测定原理及方法，了解种子萌发过程中的淀粉酶活性变化。（二）实验项目内容：

用水研磨样品，离心，提取淀粉酶；分光光度法测定淀粉降解生成的还原糖的量，以单位重量样品在一定时间内生成的还原糖的量表示酶活力并加以比较。（三）主要仪器设备：

分光光度计、离心机、恒温水浴、具塞刻度试管、刻度吸管、容量瓶等。（四）实验室名称：

植物生理生化实验室

（五）实验报告撰写

按教材6-7页“实验报告”格式撰写

实验七过氧化氢酶活性测定(氧量法)

（一）实验目的：