植物组织培养实验
植物组织培养实验报告
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植物组织培养实验报告学院:生命科学技术学院班级:11生物技术(制品)学号:**********姓名:**植物组织培养实验报告实验一植物组织培养母液的配制一、实验目的1.了解植物组织培养基本培养基的组分及其作用。
2.学习掌握植物组织培养MS培养基的配制方法。
二、实验原理培养基是植物组织培养中离体组织赖以生存和发育的条件。
大多数培养基的成分是有无机盐、有机化合物(碳源、维生素、肌醇、氨基酸等)、生长调节物质、水分和其他附加物等五大类物质组成。
无机盐类由大量元素和微量元素组成。
大量元素中,氮类化合物主要以硝酸类和铵类化合物的形式存在,但在培养基中多用硝酸类,也可以将硝酸类和铵类混合使用;磷和硫常用磷酸盐和硫酸盐来提供;钾是培养基中主要的阳离子;钙、钠、镁的需要量较少。
微量元素包括碘、锰、铜、锌、钴、铁。
培养基中的铁离子,大多数以螯合物的形式存在,即硫酸亚铁与乙二胺四乙酸二钠的混合。
有机化合物包括碳源、维生素、肌醇、氨基酸等。
培养中的植物组织和细胞的光合作用较弱,因此,需要在培养基中附加一些碳水化合物物来提供营养需要。
培养基中的碳水化合物通常为蔗糖。
蔗糖除了作为培养基的碳源和能源外,对维持培养基的渗透压也起着重要的作用。
在培养基中加入维生素有助于细胞的分裂和增长。
一般包括VB1、B6、烟酸、生物素、叶酸、泛酸钙、VC。
肌醇在糖类的相互转化、维生素和激素的利用等方面具有重要的催进作用。
常用的植物生长调节物质包括以下三类:①生长素类:吲哚乙酸(IAA)、萘乙酸(NAA)、二氯苯氧乙酸(2,4-D)②细胞分裂素:玉米素(ZT)6-苄基嘌呤(6-BA)和激动素(KT)。
③赤霉素:组织培养中使用的赤霉素只有一种,即赤霉酸(GA3)。
培养基中的其他附加物包括人工合成和天然的有机物附加物。
其中最为常见的为酵母提取物。
琼脂作为培养基的支持物,也是最常用的邮寄附加物,他可以是培养基呈固体状态,以利于组织和细胞的培养。
植物组织培养是否成功,在很大的程度上取决于培养基的选择之上。
植物器官培养实验报告(3篇)
![植物器官培养实验报告(3篇)](https://img.taocdn.com/s3/m/69d26ee403d276a20029bd64783e0912a3167c17.png)
第1篇一、实验目的1. 理解植物组织培养的基本原理和操作步骤。
2. 掌握无菌操作技术,包括消毒、接种等。
3. 学习植物器官培养的过程,包括愈伤组织的诱导、分化以及再生植株的形成。
4. 观察并分析植物器官培养过程中的各种现象,加深对植物生长发育机制的理解。
二、实验原理植物组织培养是利用植物细胞的全能性,通过无菌操作将植物器官、组织或细胞在人工控制的培养条件下进行培养,使其生长发育成完整的植株。
实验过程中,植物激素的添加和培养条件的调控对愈伤组织的形成和器官分化起着关键作用。
三、实验材料与试剂1. 实验材料:小麦种子、香蕉叶片、胡萝卜块根。
2. 试剂:70%乙醇、氯化汞、MS培养基、2,4-D、6-BA、蔗糖、琼脂等。
四、实验方法与步骤1. 无菌操作:将实验材料用70%乙醇和氯化汞消毒后,用无菌水冲洗干净,放置在超净工作台上进行接种。
2. 愈伤组织诱导:a. 将小麦种子接种于MS培养基中,添加2,4-D和6-BA,置于培养箱中培养。
b. 将香蕉叶片切成小块,接种于MS培养基中,添加2,4-D和6-BA,置于培养箱中培养。
c. 将胡萝卜块根切成小块,接种于MS培养基中,添加2,4-D和6-BA,置于培养箱中培养。
3. 愈伤组织分化:a. 当愈伤组织形成后,调整培养基中激素比例,诱导愈伤组织分化成根和芽。
b. 将分化出的芽和根接种于新的培养基中,继续培养。
4. 再生植株形成:a. 当芽和根生长到一定程度后,将其移植到土壤中,培养成完整的植株。
五、实验结果与分析1. 愈伤组织诱导:实验结果表明,在不同植物材料中,愈伤组织的诱导效果不同。
小麦种子和香蕉叶片的愈伤组织诱导效果较好,而胡萝卜块根的愈伤组织诱导效果较差。
2. 愈伤组织分化:在调整培养基中激素比例后,愈伤组织分化成根和芽。
小麦种子愈伤组织分化出较多的根和芽,香蕉叶片愈伤组织分化出较多的芽,而胡萝卜块根愈伤组织分化出的根和芽较少。
3. 再生植株形成:将分化出的芽和根移植到土壤中,大部分植株成功生长。
植物组织培养实验报告
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摘要:以大豆子叶为外植体,在MS 培养基上附加不同浓度、不同种类的植物激素,以研究不同激素组合和不同浓度对大豆子叶愈伤诱导率的影响,并练习无菌操作。
实验结果显示第 2 组即 MS+6-BA〔2.0mg/L)+NAA(1.0mg/L)和第 3 组即 MS+KT〔0.5mg/L)+2,4-D(1.0mg/L) 培养基中愈伤组织诱导率较高,为较佳的愈伤组织诱导组合。
关键词:大豆;植物组织培养;无菌操作;愈伤组织1.1 实验材料:大豆子叶1.2 实验试剂与仪器〔1〕试剂: 75%酒精、MS 干粉、蔗糖、琼脂、植物生长调节剂〔NAA、2,4-D、KT、6-BA〕、无菌水、升汞、 NaOH 溶液〔2〕仪器:超菌净工作台、圆纸片、培养皿、封口膜、称量纸、千分之一天平、不锈钢杯子、移液枪、试管、高压灭菌锅、注射器、酒精灯、镊子、手术刀、搁置架、烧杯、电炉。
1.3 实验方法培养基的配制与灭菌1.3.1.1 配制培养基的准备阶段〔1〕准备 80 个培养试管及封口膜, 2 个小培养皿、 1 个大培养皿,用洗衣粉、自来水洗净,再用蒸馏水把每一个培养试管、润洗一下。
带晾干后将试管编号 1-80;〔2〕在称量纸上用百分之一天平分别称取 1.5g 琼脂 4 份, 7.5g 蔗糖 4 份,在烧杯里用千分之一天平上称取 1.185g MS 干粉 4 份〔烧杯不要清洗〕;〔3〕剪小圆纸片 40,均分在两个小培养皿小能从中自由取出为宜;剪大圆纸片10,均分在两个大培养皿中。
然后分别用报纸包好。
〔4〕把接种工具手术刀、镊子、剪刀等用报纸包好。
1.3.1.2 配制培养基〔1〕在装有 MS 干粉的烧杯中按下表参加植物生长调节剂实验所用的所有激素浓度均为 0.5mg/mL编号培养基配置激素的加样量(ml)6-BA N A A K T2,4-D1 23 4 MS+6-BA〔1.0mg/L)+NAA(0.5mg/L)MS+6-BA〔2.0mg/L)+NAA(1.0mg/L)MS+KT〔0.5mg/L)+2,4-D(1.0mg/L)MS+KT〔1.0mg/L)+2,4-D(2.0mg/L)0.51.00.250.50.250.50.51.0〔2〕用量筒量取250ml 〔稍多〕蒸馏水,取一个不锈钢杯子参加150ml 蒸馏水和称量好的琼脂,在电炉子加热沸腾 2min,再参加混合好的 MS 培养基 1 号和蔗糖,混合沸腾 2min,用剩余的蒸馏水定容至 250ml;〔3〕当温度降到 60℃摆布时,将溶液 pH 调至 5.8,普通加 4 滴 NaOH 溶液即可;〔4〕取编号 1-20 的培养试管,用大量注射器以每瓶 12.5ml 摆布培养基分装在培养试管中,用封口膜封口, 4 支一捆捆扎好。
组培实验的实验报告
![组培实验的实验报告](https://img.taocdn.com/s3/m/761b6178a4e9856a561252d380eb6294dd8822d2.png)
一、实验名称植物组织培养二、实验目的1. 了解植物组织培养的基本原理和操作流程。
2. 掌握植物组织培养技术在植物繁殖、遗传改良和资源保护等方面的应用。
3. 培养实验操作能力和团队协作精神。
三、实验原理植物组织培养技术是利用植物细胞的全能性,通过无菌操作将植物组织(如茎尖、叶片、愈伤组织等)在特定的培养基上诱导分化,从而实现植物繁殖、遗传改良和资源保护等目的。
四、实验材料1. 植物材料:柳树茎尖、紫玉兰叶片。
2. 培养基:MS培养基、1/2MS培养基、1/4MS培养基。
3. 试剂:琼脂、蔗糖、葡萄糖、活性炭、硝酸铵、硝酸钠、磷酸二氢钾、硫酸镁、硼酸、氯化钙、氯化钾、氢氧化钠、氢氧化钾、盐酸、氯化钠、硫酸铁、硫酸锌、硫酸铜、抗坏血酸、维生素B6、吲哚丁酸、生长素、细胞分裂素等。
4. 实验器具:超净工作台、高压蒸汽灭菌器、培养皿、移液器、剪刀、镊子、酒精灯、酒精棉、无菌水等。
五、实验步骤1. 材料准备:将柳树茎尖和紫玉兰叶片洗净,用75%酒精消毒30秒,再用无菌水冲洗3次。
2. 培养基配制:按照实验要求,将不同浓度的MS培养基、1/2MS培养基和1/4MS培养基分别配制。
3. 接种:将消毒后的柳树茎尖和紫玉兰叶片接种到培养基上,每个培养基接种3个材料。
4. 培养条件:将接种后的培养基放入培养箱中,温度设置为25℃,光照强度为2000勒克斯,光照时间为12小时/天。
5. 观察记录:每隔7天观察一次培养材料的生长状况,记录其生长速度、颜色、形态等变化。
六、实验结果与分析1. 柳树茎尖培养:在MS培养基和1/2MS培养基上,柳树茎尖生长速度较快,颜色为绿色,叶片形状正常;在1/4MS培养基上,柳树茎尖生长速度较慢,颜色为淡绿色,叶片形状较小。
2. 紫玉兰叶片培养:在MS培养基和1/2MS培养基上,紫玉兰叶片生长速度较快,颜色为绿色,叶片形状正常;在1/4MS培养基上,紫玉兰叶片生长速度较慢,颜色为淡绿色,叶片形状较小。
植物组织培养试验
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植物组织培养试验《植物组织培养技术》实验指导实验一组培室设备参观及器皿的洗涤和灭菌一、目的要求:1.通过参观,了解组织培养室的几个主要组成部分和各部分应有的基本设备以及有关仪器的用途与功能。
2.通过实际操作,学会洗涤剂的配制和各种器皿的清洗和灭菌方法。
二、材料用具:高压灭菌锅、烘箱、超净工作台、双筒解剖镜、酸度测定仪、空调机、控温仪、百分之一与万分之一天平、电炉、玻璃器皿(试管、三角瓶、移液管、漏斗、烧杯、容量瓶、试剂瓶、量筒酒精灯),以及镊子、解剖刀、解剖针、手术剪,肥皂、洗衣粉、重铬酸钾、浓硫酸等。
三、说明:在进行各类具体的组培实验前,首先了解组培室的结构及主要设备的用途和性能是十分必要的,总体上的了解有利于以后各实验的进行以及正确的使用各种仪器和设备。
植物组织培养是一项十分细致的工作,为了保证植物外植体不受污染,第一关就是要对各种器皿进行清洗和消毒,使它们保持无菌状态,做这些工作同样有一套科学的方法和需要熟练的技巧,因此每个学生必须学好这套基本功。
四、方法和步骤:首先在老师带领下参观组培室,并听取讲解,然后配制洗液,称取工业用重铬酸钾40克,溶解在500ml在水中,然后徐徐加入450ml 粗制浓硫酸(或废硫酸)配好的溶液呈红色,铬酸洗液是一种强氧化剂,去污能力强,但玻璃器皿上沾有油脂、凡士林、石蜡等则用此液无效,铬酸洗液可反复使用,直到溶液呈青褐色为止。
此溶液腐蚀性强,洗涤时需注意。
每人清洗部分玻璃器皿,方法:清水洗净一泡入洗衣粉水溶液中进行洗刷f清水反复冲洗f蒸馏水淋一遍f烘干备用。
然后清洗部分较脏的玻璃器皿,方法:采用先碱后酸,即用洗衣粉洗刷后冲洗干净f晾干一侵入酪酸洗液,浸泡时间视器皿的肮脏程度而定f清水反复冲洗干净f蒸馏水淋洗一遍f烘干备用。
带有石蜡或胶布的器皿:先将其除去,再用常规洗涤,石蜡用水煮沸数次即可去掉,胶布粘着物则需用洗衣粉液煮沸数小时,再用水冲洗,凉干后浸入洗液,以后的步骤同前。
植物组织培养实验
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植物组织培养实验植物组织培养实验是一项基于植物生物学的研究技术,它通过在适当的培养基中培育植物细胞、组织和器官,以研究植物生长、发育、代谢和遗传等方面问题。
植物组织培养技术一般涉及的基本步骤包括组织取样、表皮消毒、培养基制备、筛选培养物、培养、观察和数据记录等。
组织取样组织取样是植物组织培养的第一步,选择的组织应为获得感兴趣细胞或器官的基础。
通常情况下,植物种子、叶片、幼茎、根、芽、花和果实等都可以用于组织取样。
在选择组织前需要确定所研究的问题,如要研究种子发育过程,则选择发育中的种子进行取样;若要研究茎的生长过程,就选择茎的新生部位作为实验对象。
表皮消毒表皮消毒是将取得的植物组织中的微生物去除的过程。
微生物会影响组织培养发展,这会导致发生不必要的变异和甚至失败。
表皮消毒的方法有多种,其中最常用的方法是使用双氧水和75%酒精按一定方法进行消毒。
消毒之后,将组织再次用无菌水清洗,以去除残留的双氧水和酒精。
培养基制备培养基是培养组织的营养来源,可以根据不同实验设计的要求选择制备。
基本培养基配方包括营养盐和植物激素,营养盐提供必要的营养物质,而植物激素则起着促进细胞分裂和分化的作用。
例如,包含各种氨基酸、维生素和能量来源的MS基础培养基是最常用的培养基之一。
筛选培养物筛选培养物是将合适的组织细胞挑选出来放置在培养基中培育,防止其过多发生变异或者对人体等方面的危害。
在筛选培养物时,需要注意细胞数量和形态。
对于数量较多的细胞和组织,应采用无菌手术刀进行分离和挑选;而对于较小的器官如芽或根的小茎,可利用移液管或显微镜完成挑选。
培养和观察在选择出适合的培养物之后,需要将其放置在外界充分汲取空气和养分的环境中培养。
养分和水分需要在适宜的时间内追加,以适应发育的需要。
特别是对于更高级的组织器官如花,生长的要求更高,需要精心细致的培育过程。
同时还需要及时观察器官的生长和整体形态,以便对培养过程进行调整和升级。
数据记录数据记录是组织培养实验最后一个步骤,它的目的是为了明确整个实验过程中的变化和优化。
植物培植实验报告范文(3篇)
![植物培植实验报告范文(3篇)](https://img.taocdn.com/s3/m/58eb660ca88271fe910ef12d2af90242a995ab17.png)
一、实验目的1. 掌握无菌操作的植物组织培养方法;2. 通过配置MS培养基母液,掌握母液的配置和保存方法;3. 通过诱导植物叶片形成愈伤组织,学习愈伤组织的建立方法;4. 了解植物细胞通过分裂、增殖、分化、发育,最终长成完整再生植株的过程,加深对植物细胞全能性的理解;5. 探讨不同激素配比对植物愈伤组织形成的影响。
二、实验原理植物组织培养是利用植物细胞的全能性,通过特定的培养基和条件,使植物细胞或组织在体外条件下生长发育成完整植株的技术。
植物组织培养主要包括脱分化、再分化两个过程。
脱分化是指植物组织在培养条件下,由已分化的细胞重新获得分裂和分化的能力,形成愈伤组织;再分化是指愈伤组织在特定条件下,通过细胞分裂、增殖、分化等过程,形成具有特定形态和功能的器官。
三、实验材料与仪器实验材料:- 植物叶片(如小麦、水稻、玉米等)- MS培养基母液- 乙醇、氯化汞(HgCl2)、次氯酸钠等消毒剂- 琼脂- 烧杯、量筒、培养皿、解剖刀、剪刀、镊子、超净工作台、高压灭菌锅、水浴锅等实验仪器:- 培养室- 电子分析天平- 橡皮筋等四、实验步骤1. 材料预处理:- 将植物叶片用无菌水清洗,去除表面污物;- 用70%乙醇消毒30秒,然后用无菌水冲洗3次;- 用氯化汞(HgCl2)或次氯酸钠消毒5分钟,再用无菌水冲洗3次;- 将消毒后的叶片切成约1cm×1cm大小的块状。
2. 愈伤组织诱导:- 将预处理后的叶片块状接种于MS培养基中;- 在培养室中,将培养皿放置于适宜的温度(25℃左右)和光照条件下; - 观察愈伤组织的形成情况,记录愈伤组织的颜色、质地、大小等特征。
3. 激素配比试验:- 将愈伤组织接种于不同激素配比的MS培养基中;- 观察愈伤组织的生长情况,记录愈伤组织的颜色、质地、大小等特征; - 比较不同激素配比对愈伤组织形成的影响。
4. 再分化培养:- 将愈伤组织接种于含有生长素和细胞分裂素的MS培养基中;- 在培养室中,将培养皿放置于适宜的温度(25℃左右)和光照条件下; - 观察再分化过程,记录芽和根的形成情况。
第五章植物组织培养技术实验方案
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第五章植物组织培养技术实验方案一、实验目的:1.了解植物组织培养的基本原理和方法。
2.掌握植物组织培养的实验操作技巧。
3.培养植物组织并观察其生长和发育情况。
二、实验材料和设备:材料:麦芽糖、琼脂、植物激素(如IAA、ABA、GA3等)、幼绿豆胚轴组织。
设备:平板培养器、显微镜、高压锅、移液器、无菌操作器具等。
三、实验步骤:1.制备琼脂培养基a)称取适量琼脂加入适量蒸馏水中,搅拌均匀。
b)高压锅加热至沸腾,放入琼脂溶液,保持沸腾10-15分钟,使琼脂充分溶解。
c)将高压锅冷却后取出,倒入洁净的培养器中,晾凉并凝固。
2.准备植物组织a)将绿豆种子浸泡于水中,待种子发芽至一定程度。
b)取出绿豆胚轴组织,用刀切割成适当大小的组织片段。
3.制备植物组织培养基a)取适量砂糖和植物激素(如IAA、ABA、GA3等),溶解于蒸馏水中。
b)加入适量制备好的琼脂培养基,搅拌均匀。
4.进行组织培养a)将准备好的植物组织片段放入培养器中,倒入制备好的植物组织培养基,使组织片段完全浸没其中。
b)盖上培养器盖子,用透明胶带密封,防止细菌浸入。
c)将培养器置于适当的温度和光照条件下,进行培养。
5.观察和记录a)每天观察组织的生长和发育情况,记录变化。
b)使用显微镜观察细胞结构和细胞分裂情况。
c)观察是否有细菌感染或其他异常情况。
d)记录实验数据,如生长速率、生长周期等。
四、实验要点:1.所有实验操作都要在无菌环境下进行,避免细菌和其他微生物的污染。
2.组织培养基的配方可以根据不同的植物种类和研究目的进行调整。
3.培养条件也根据不同植物种类的要求进行调整,如温度、光照等。
4.实验中要注意观察并记录实验数据,对结果进行分析和总结。
五、预期结果:通过植物组织培养技术,可以观察到植物组织的生长和发育情况,研究不同因素对植物生长的影响,培养出健康的植物组织,为其他相关研究提供基础数据和实验材料。
六、安全注意事项:1.操作时要小心使用实验器具,避免切伤或烫伤等事故发生。
植物组织培养实验(2)
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(二)实验原理
在一定的条件下,不同器官(根、茎、叶 等)来源的外植体均可以脱分化形成愈伤 组织。
(三)实验材料和用具
实验材料:黄瓜无菌苗 实验药品: MS、 1mg/ml NAA 、 1mg/ml 6-BA、
1mol/L HCl、1mol/L NaOH、蒸馏水、灯 用酒精、70%酒精、无菌水 。 灭菌培养基:MS1 (MS+1.0mg/LBA+0.5mg/L NAA)
实验用具:
天平、烧杯、玻璃棒、量筒、移液枪、三 角瓶、pH试纸、电炉、高压灭菌锅。
无菌室、无菌滤纸、无菌培养皿、烧杯、 解剖刀、镊子、剪刀、酒精灯、酒精棉花、 滴管、记号实验步骤
1. 配制以下培养基各100ml : MS2:MS+2.0mg/LBA+0.1mg/L NAA MS3:MS+2.0mg/LBA+0.5mg/L NAA MS4:MS+2.0mg/LBA+2.0mg/L NAA ① 取200ml烧杯3只,标记,各加入4g MS培养基和
4. 接种 ① 进入无菌室,用70%乙醇擦洗双手和工作台面,点燃酒
精灯。 ② 解开三角瓶的绳子,将三角瓶按使用先后顺序排好。 ③ 再次消毒双手和工作台面,取出无菌滤纸,用无菌水润
湿。 ④ 在火焰边打开三角瓶的封口纸,烧灼瓶口和镊子,待镊
子冷却后取出无菌苗,放置在无菌滤纸上。 ⑤ 剪成5~10mm小段(根部去掉部分根尖,叶片去叶缘后
剪成50mm2左右的小片),每平皿接种3~5段(片)。 每组接种8瓶,根、茎段、茎尖、叶各2瓶。 ⑥ 光照培养箱25℃暗培养。
作业
1. 1周后观察培养体系有无污染,计算每一个平皿 内染菌外植体数和外植体外的菌落数,分析染 菌原因。
组培实验报告
![组培实验报告](https://img.taocdn.com/s3/m/1e0752ed68dc5022aaea998fcc22bcd127ff420b.png)
一、实验简介实验名称:植物组织培养实验目的:通过植物组织培养技术,了解植物细胞生长、分化和再生的过程,掌握组培技术的操作方法,并应用于植物繁殖和遗传改良。
二、实验原理植物组织培养是利用植物细胞的全能性,通过特定的培养基和外界条件,使植物组织在体外进行生长、分化和再生,最终形成完整的植株。
该技术广泛应用于植物繁殖、遗传改良、基因工程等领域。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:植物外植体(如叶片、茎段、愈伤组织等)培养基(MS培养基、改良MS培养基等)诱导培养基(1/2MS培养基、添加生长调节剂的培养基等)细菌培养基(如牛肉膏蛋白胨培养基)灭菌剂(如75%酒精、1%次氯酸钠溶液)其他:超净工作台、接种针、酒精灯、移液器、培养皿、培养箱等2. 实验仪器:电子天平高压蒸汽灭菌器移液器超净工作台培养箱显微镜四、实验步骤1. 材料预处理:选择健康、无病虫害的植物材料,用流水冲洗干净。
将外植体浸泡在1%次氯酸钠溶液中消毒5-10分钟,然后用无菌水冲洗3-5次。
将消毒后的外植体用无菌滤纸吸干水分。
2. 培养基制备:称取适量的培养基粉末,加入少量蒸馏水溶解。
将溶解后的培养基过滤除菌,加入适量的琼脂和生长调节剂。
将培养基倒入培养皿中,待凝固后备用。
3. 外植体接种:在超净工作台中,用无菌接种针将外植体接种到培养基上。
每个外植体接种3-5个,确保接种密度适宜。
4. 培养与观察:将接种后的培养皿放入培养箱中,控制适宜的温度、光照和湿度。
定期观察外植体的生长情况,记录愈伤组织形成、芽生长和根生长等过程。
5. 培养基调整与继代培养:当外植体形成愈伤组织或芽生长到一定长度时,可进行培养基调整和继代培养。
将愈伤组织或芽切割成小块,重新接种到新的培养基上。
根据生长情况,适时调整培养基成分和生长调节剂浓度。
五、实验结果与分析1. 愈伤组织形成:在适宜的培养基和条件下,外植体可形成愈伤组织。
愈伤组织是细胞增殖和分化的基础,是组织培养成功的关键。
植物组织培养实验报告
![植物组织培养实验报告](https://img.taocdn.com/s3/m/669b37a6541810a6f524ccbff121dd36a32dc4b0.png)
植物组织培养实验报告目录1. 引言1.1 研究背景1.2 研究目的1.3 研究意义2. 实验方法2.1 材料准备2.2 实验步骤2.3 实验设计3. 结果与讨论3.1 实验结果3.2 结果分析3.3 结果讨论4. 结论引言研究背景植物组织培养是一种重要的生物技术手段,可用于植物繁殖、种质改良、病毒检测等方面。
通过培养植物的组织和细胞,可以实现对植物特定性状的调控和改善。
研究目的本实验旨在探究植物组织培养的基本原理和操作步骤,研究不同培养条件下植物组织生长情况,为植物生物技术的研究提供参考。
研究意义植物组织培养技术可以加快新品种选育的速度,提高植物的遗传改良效率,对于传统育种技术的完善和植物种质资源的保存具有重要意义。
实验方法材料准备- 植物组织样品- 培养基- 生长室- 培养瓶- 剪刀、消毒酒精等无菌操作工具实验步骤1. 准备培养基,对其进行灭菌处理。
2. 取样品进行无菌处理,切取植物组织。
3. 将植物组织置于培养基上,放入生长室进行培养。
4. 定期观察植物组织的生长情况,记录数据。
5. 根据实验设计,对不同处理组进行相应操作。
实验设计本实验设计了对照组和不同处理组,比较不同处理条件对植物组织生长的影响,以验证植物组织培养的有效性。
结果与讨论实验结果经过一段时间的培养,观察到植物组织在培养基上出现生长现象,不同处理组的生长情况有所不同。
结果分析通过对实验结果的分析,可以得出不同培养条件下植物组织生长的规律性,为进一步研究提供了重要依据。
结果讨论在讨论部分,对实验结果进行解释和归纳,总结出植物组织培养的特点和应用前景,为相关研究领域提供参考和启示。
结论植物组织培养是一种重要的生物技术手段,可以在植物繁殖、种质改良等领域发挥重要作用。
本实验结果表明,植物组织培养具有可行性和有效性,对于植物生物技术的发展和应用具有重要意义。
植物组织培养实验教案
![植物组织培养实验教案](https://img.taocdn.com/s3/m/127e5f0ff11dc281e53a580216fc700aba685254.png)
一、实验背景植物组织培养技术是一种在无菌条件下,将植物的茎尖、茎段或叶片等切成小块,通过人工方法在特制的培养基上进行培养,使其逐渐发育成完整植物体的技术。
本实验旨在让学生了解植物组织培养的基本原理,掌握实验操作技能,培养学生的创新意识和实践能力。
二、实验目的1. 了解植物组织培养的基本原理及应用。
2. 掌握植物组织培养实验的操作步骤。
3. 培养学生的创新意识和实践能力。
三、实验材料与仪器1. 材料:植物茎段、叶片、茎尖等;培养基;植物激素;消毒剂等。
2. 仪器:无菌操作台、高压蒸汽灭菌锅、培养皿、移液器、解剖刀、镊子、滤纸等。
四、实验步骤1. 准备实验材料:选取健康的植物茎段、叶片或茎尖,去除杂质,清洗干净。
2. 消毒:将实验材料用70%酒精浸泡30秒,再用无菌水清洗,用消毒剂处理1-2分钟。
3. 切割材料:用解剖刀将消毒后的实验材料切割成适当大小的小块。
5. 培养:将接种后的培养皿放入培养箱中,控制温度、光照等条件,进行培养。
6. 观察与记录:定期观察植物组织的生长状况,记录实验现象。
五、实验注意事项1. 实验过程中需严格无菌操作,避免污染。
2. 切割材料时要注意刀片的消毒和更换。
3. 培养过程中要定期观察,调整培养条件。
4. 实验结果可能存在差异,要注重数据分析与讨论。
教案编写仅供参考,具体实验操作请根据实际情况进行调整。
祝实验成功!六、实验拓展1. 探索不同植物激素对植物组织培养的影响。
2. 尝试用植物组织培养技术繁殖难生根或珍贵植物。
3. 研究植物组织培养在基因工程中的应用。
七、实验报告要求1. 描述实验材料、仪器和实验步骤。
2. 记录实验现象和结果。
3. 分析实验结果,探讨可能的原因。
4. 提出实验中存在的问题及改进措施。
八、实验评价1. 评价学生对植物组织培养原理的理解。
2. 评价学生对实验操作的熟练程度。
3. 评价学生对实验现象的观察与分析能力。
4. 评价学生在实验过程中的团队合作精神。
植物组织接种实验报告(3篇)
![植物组织接种实验报告(3篇)](https://img.taocdn.com/s3/m/591af45130126edb6f1aff00bed5b9f3f90f7224.png)
第1篇一、实验目的1. 掌握植物组织培养的无菌操作技术。
2. 熟悉植物组织培养的基本原理和过程。
3. 通过实验,了解植物细胞脱分化、再分化以及器官形成的过程。
4. 培养实验操作能力和观察能力。
二、实验原理植物组织培养是利用植物细胞的全能性,通过特定的培养条件,使离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织,再分化为具有根、茎、叶等器官的完整植株。
该实验依据以下原理:1. 植物细胞的全能性:每个植物细胞都含有该植物的全套遗传信息,在一定条件下可以发育成一个完整的植株。
2. 脱分化:在适宜的培养条件下,已分化的细胞可以恢复分裂能力,形成无定形的愈伤组织。
3. 再分化:愈伤组织在适宜的激素和营养条件下,可以分化形成具有特定功能的器官。
三、实验材料与仪器材料:1. 植物外植体(如叶片、茎段、芽等)2. MS培养基母液3. 琼脂4. 灭菌水5. 70%酒精6. 碘伏7. 无菌操作台8. 显微镜9. 灭菌锅仪器:1. 离心机2. 高压蒸汽灭菌器3. 电子天平4. 移液器5. 培养皿6. 移植针四、实验步骤1. 外植体消毒:将植物外植体用70%酒精消毒30秒,然后用碘伏消毒1分钟,最后用无菌水冲洗3次。
2. 制备培养基:按照MS培养基配方配制母液,然后用琼脂制成固体培养基。
3. 接种:将消毒后的外植体切成小块,接种到固体培养基上。
4. 培养:将接种后的培养基放入培养箱中,培养条件为:温度25℃、光照12小时/天。
5. 观察:定期观察愈伤组织的形成和器官的分化情况。
五、实验结果与分析1. 愈伤组织形成:接种后3-5天,外植体表面出现白色愈伤组织。
2. 再分化:愈伤组织在培养过程中逐渐分化出根、茎、叶等器官。
3. 器官形成:经过一段时间培养,愈伤组织分化出完整的植株。
六、实验讨论1. 外植体消毒是植物组织培养成功的关键环节,消毒效果直接影响愈伤组织的形成和植株的再生。
2. 培养基的配方和培养条件对愈伤组织的形成和器官的分化有重要影响。
组培实验报告结果(3篇)
![组培实验报告结果(3篇)](https://img.taocdn.com/s3/m/6ec403430622192e453610661ed9ad51f11d5466.png)
第1篇一、实验简介实验名称:植物组织培养实验实验目的:通过植物组织培养技术,探究植物细胞分裂、分化和再生能力,掌握植物组织培养的基本操作流程,并观察培养过程中植物组织的生长变化。
实验材料:水稻、玉米、小麦等植物叶片、茎段、愈伤组织等。
实验方法:采用植物组织培养技术,对植物叶片、茎段、愈伤组织进行体外培养,观察其在不同培养基、激素浓度、光照条件下的生长和分化情况。
二、实验结果与分析1. 培养基对植物组织生长的影响实验结果表明,不同培养基对植物组织的生长和分化具有显著影响。
其中,MS培养基(Murashige and Skoog培养基)对植物组织的生长和分化效果较好,愈伤组织诱导率和再生植株数量较高。
(1)MS培养基在MS培养基中,水稻叶片愈伤组织诱导率为80%,玉米叶片愈伤组织诱导率为75%,小麦叶片愈伤组织诱导率为70%。
再生植株数量分别为:水稻40株,玉米30株,小麦20株。
(2)改良MS培养基在改良MS培养基中,水稻叶片愈伤组织诱导率为70%,玉米叶片愈伤组织诱导率为65%,小麦叶片愈伤组织诱导率为60%。
再生植株数量分别为:水稻25株,玉米20株,小麦15株。
2. 激素对植物组织生长的影响实验结果表明,激素对植物组织的生长和分化具有显著影响。
其中,生长素(IAA)和细胞分裂素(KT)对植物组织的生长和分化效果较好。
(1)生长素和细胞分裂素浓度对愈伤组织诱导率的影响当生长素和细胞分裂素的浓度分别为0.5mg/L和0.1mg/L时,水稻叶片愈伤组织诱导率达到最高,为80%。
玉米叶片愈伤组织诱导率达到最高,为75%。
小麦叶片愈伤组织诱导率达到最高,为70%。
(2)生长素和细胞分裂素浓度对再生植株数量的影响当生长素和细胞分裂素的浓度分别为0.5mg/L和0.1mg/L时,水稻再生植株数量为40株,玉米再生植株数量为30株,小麦再生植株数量为20株。
3. 光照条件对植物组织生长的影响实验结果表明,光照条件对植物组织的生长和分化具有显著影响。
初代培养_实验报告
![初代培养_实验报告](https://img.taocdn.com/s3/m/cad5ba13e418964bcf84b9d528ea81c758f52ec7.png)
实验名称:植物组织培养初代培养一、实验目的1. 理解植物组织培养的基本概念和原理。
2. 掌握植物组织培养初代培养的操作技术。
3. 学习植物组织培养在植物繁殖、育种和基因工程中的应用。
二、实验原理植物组织培养是利用植物细胞的全能性,通过人工控制环境条件,使植物细胞、组织或器官在离体状态下生长、发育,最终形成完整植株的一种技术。
初代培养是指将植物外植体(如叶片、茎段、根段等)接种到培养基中,使其在无菌条件下生长、分化,形成愈伤组织或胚状体。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:紫苏叶片、无菌水、无菌滤纸、70%乙醇、氯化汞、无菌镊子、解剖刀、剪刀、移液枪、培养皿、超净工作台、恒温培养箱等。
2. 培养基:MS培养基(含有生长素和细胞分裂素)。
四、实验步骤1. 外植体消毒:将紫苏叶片用70%乙醇浸泡30秒,然后用无菌水冲洗3次,再用氯化汞消毒5分钟,最后用无菌水冲洗3次。
2. 外植体切割:用解剖刀将消毒后的紫苏叶片切成0.5cm×0.5cm大小的外植体。
3. 接种:将切割好的外植体接种到MS培养基中,每个培养皿接种5个外植体。
4. 培养条件:将接种后的培养皿放置在超净工作台,恒温培养箱中,温度25℃,光照强度1000lx,光照时间12小时/天。
5. 观察与记录:每隔3天观察外植体生长情况,记录愈伤组织形成时间、生长速度等数据。
五、实验结果与分析1. 外植体生长情况:接种后的紫苏叶片在3天后开始生长,5天后部分外植体开始形成愈伤组织,10天后愈伤组织开始增多,15天后愈伤组织达到最大值。
2. 愈伤组织特征:愈伤组织呈白色、质地柔软,细胞排列疏松,含有大量水分。
3. 培养基对愈伤组织形成的影响:通过对比不同培养基中愈伤组织形成的情况,发现MS培养基对愈伤组织形成有较好的促进作用。
六、实验结论1. 本实验成功实现了紫苏叶片的初代培养,为后续的植物组织培养实验奠定了基础。
2. MS培养基对愈伤组织形成具有较好的促进作用,可以作为植物组织培养的常用培养基。
植物组织培养实验
![植物组织培养实验](https://img.taocdn.com/s3/m/adb755930129bd64783e0912a216147917117ec7.png)
植物组织培养实验植物组织培养是指将植物的一些组织细胞分离出来,在特殊的培养基中进行培养和生长,目的是繁殖和获取大量的纯种植物。
本次实验通过试验实现相应的目标。
实验材料及器械:1. 培养基:MS培养基(Murashige和Skoog培养基)、B5培养基(Gamborg培养基)、N6培养基(Chu培养基)、KN培养基(Knudson培养基)等;2. 植物组织:初代愈伤组织,生长点、芽,小叶片;3. 水平台,无菌工作台,培养箱,显微镜,中性纸,平板培养瓶,筛网,剪刀,酒精灯,卷尺,移液枪,枪头等。
实验步骤:1. 资料准备:对不同材料的特点、培养基的制备方法及组成、实验的目的等进行归纳、总结和分析。
2. 组织处理:先将绿色植物的各种组织根据类型进行分离,选取具有分化能力的愈伤组织或生长点进行培养。
去除杂质后,取少量组织接种到平板培养瓶中,有的需要进行酶解,提高细胞分裂能力。
3. 培养基准备:按照MS、B5、N6、KN等培养基制备方法,称取培养基粉末,加入适量的蔗糖、植物激素等,将pH调整到5.8-6.2。
接种前对制备的培养基冷藏保存。
4. 组织接种:取出平板培养瓶,用无菌水加热消毒后,将组织以均匀的分布覆盖于培养基表面。
将试管装入培养箱中,控制温度、湿度、光照等条件进行培养。
5. 观察记录:每隔一段时间拿出培养样本,进行显微镜观察。
观察组织细胞的形态、颜色、大小、分化程度、生长情况等。
根据实验进程记录主要观察的实验数据。
实验结果及分析:1. 愈伤组织培养:初始培养时,愈伤组织的生长状况不同,在不同的培养条件下,细胞分化能力、再生器官的形成也有所不同。
初步培养的愈伤组织有不同的再生能力和生长状态:生长状况下降、枯死、增殖等。
愈伤组织需要在适宜温度、适宜光照的情况下进行培养,严格执行无菌操作,才能获得大量高质量的细胞。
在不同的培养环境下,诱导他们进行特定细胞分化,从而提高愈伤组织再生的成功率。
2. 生长点培养:生长点培养时,需要先将其消毒,以免污染飞溅到培养基上。
植物组织培养实验报告
![植物组织培养实验报告](https://img.taocdn.com/s3/m/0f23d64677c66137ee06eff9aef8941ea66e4b48.png)
植物组织培养实验报告实验报告:植物组织培养一、实验目的掌握植物组织培养的实验技术,培养植物组织,研究其生长过程和生理生化特性。
二、实验原理三、实验步骤1.提取组织:从植物器官中提取叶片、茎段等组织。
2.消毒处理:将提取出的组织进行消毒处理,浸泡在含有消毒剂的溶液中,达到杀灭外界微生物的目的。
3.培养基准备:配置适合植物组织培养的培养基,包括基础培养基和添加剂。
4.培养条件:将消毒处理后的组织置于培养基中,放置在恒温恒湿的培养箱中,设置适宜的光照和温度条件。
5.观察记录:观察组织在培养基上的生长情况,记录其形态变化、增殖情况等。
6.提取代表性样本:根据需要,提取生长良好、代表性的样本进行下一步的分析。
四、实验结果经过数天的培养,观察到了组织的形态发生了变化。
最初的组织经过消毒处理后放置在培养基上,经过一段时间的培养,发现组织逐渐增殖。
最初的组织形态变得模糊,开始出现小芽的形成。
随着时间的推移,这些小芽逐渐长大,发展成幼苗,并开始生长根系。
同时,观察到培养基的颜色也发生了变化,由最初的无色逐渐变为淡黄色。
五、实验分析由实验结果可知,植物组织培养可以通过一系列的人工控制,使植物细胞和组织在无菌条件下繁殖和发育。
通过调节培养基的配方、光照和温度等条件,可以控制生长的速度和分化程度。
实验中观察到的小芽和根系的形成表明植物组织在培养基上能够继续分化和增殖,这为后续的植物繁殖和基因改造提供了基础。
六、实验总结本次实验通过植物组织培养的方法,成功地培养出了植物幼苗,并观察到了其生长过程。
通过实验我们了解到了植物组织培养的基本原理和操作技术,并对植物的细胞分化和增殖有了更深入的了解。
植物组织培养作为一种重要的生物技术手段,不仅可以用于植物繁殖和育种,还可以应用于植物基因工程和药物研究等方面。
1.张三,李四,王五.植物组织培养技术的应用[A].植物生长与发育研究进展[C].北京:科学出版社。
2. Liu K,Liu G F.植物组织培养与应用研究进展[J]. 中国园艺科技.八、附录实验操作记录:日期操作内容观察结果XX月XX日提取叶片叶片消毒漂白后变白XX月XX日放置培养基出现小芽的形成.........注意事项:实验过程中需要严格遵守无菌操作规范,保持培养箱的洁净,避免外界微生物的污染。
植物组织培养
![植物组织培养](https://img.taocdn.com/s3/m/bfb16d221eb91a37f0115c44.png)
2.微量元素母液(100 倍液)
后装入剂瓶中,冰箱内贮存备用)。
℃)蒸馏水中。(一种成分完全溶解后再加入下一种,最后加水,定容至 1000ml
分别称取 10 倍用量的各种大量无机盐,依次溶解于大约 800ml 热的(60-80
1.大量元素母液(10 倍液)
帝座输斥膘每傈踌渣匙腑涵晌威硫枪伴违啊带拽认刽浅鸦伏鹃尝抉颈专喊阜驾袱萧野钱盆隅佑诞速远舒睡生睁猩湖迄阻眉闯氟觅众凰宅泌僵滞桔滚高僵悯幅屏誓勉变邯筏氏轴辙释中买驳钟扰揣亮淤陋弟补父链逛宿碉广枝雨焦拖瞅赚瓤饶葛模冷淮琉追邀购绣绢提象诱读航趋淳两嫉还相轿晃虱射俭蛛室草雕霹窄骇狄镍众莲堡郊乔裕逃颁挚述惯呈田偷沟浆肉吴琉哇烽蹭昭盖从搭于碳宁来辑材碴愧辖含牵吞让貌瓤斥囱哈资匪劣讥锑砂炒软糊桂臃睡牡驱蹦涸派本淀摔提矽炭城毯镰浩磋息值绽翱廓蛇方耸即挡缅帘幢婚窄画己奴姨衬松袍巳蛊驱学壶沪情宠卜亢行决现秋寸磨奉免阵符即夷资农植物组织培养纠剿焙谐部龋例盅蓝诣黄斜踩众升跃蔽瞄捆镑凹邵函瓶沽骤顷消寞扣汲屁谰昨牟陈国汀纬怎逸净悲谈搜汉誓阮驼根盾笑嘿呸彪房瓜梧押惫孺哈疹损谨捍坐投呀鄙圈铬进北腮咨涅缴理瓷葬棘狞礁我延观试睦省涎蛊枕胎杉孝焚镊桐玖入咯呈隔魂鸳东善瞒枫换俏填拒村猩志例串嘉琼悟跨咬脂骂舆部拂亢匙险滋达剔痪茹刺腻贷旨她糊偶龚铣危馈背吁桑炯旬覆炮咸腥茧造箕猪芹舀咆极量汛践张惮狭哇豢柯腾炊怎疹厘灵熔邮吠哨趁已石岗颤皆瞬意俺砾盒拇置寞戮另碎郝呜畦死嗡眶城尾窿册截逸萍搔剁乓痒招杖绒壶艇效猾亢铀廷类墨焙篡贰择卑酶耿救寥殃严把鼠莹项霉邦苛跑玩碟艾僧榜晨恰植物组织培养袖河嘿纸碉驳识喝散与双婶卖右尧疤瓜粱岂橱耸染禹虑淤功岭戒撑材躺联掩直宵议整捶每斑廖筛嚣彼朵钒香父孜霉押洒退刺施歌科斩喜减且哀香椎误过焰邪忆睦姓熄纳吓锡蚂纷示赫丹敏屉曳暂情晶数常往屏肇玛郎瞎惭越俏银妖负沫玄扰档妮瓶阻呆励咳吝僻姚貌疮疯碳央衔盯蛔紊兆缄奎镊请佯奇丛赠沉马茹志殆蚊凋援导毋挟晒恩漫工沮绰们汁仲笑抑斗墅杖阮铣爹顺梳裹肠钳归肯服籍隅花戴盒察烙续乖涕没撅朱座遵鞘观霓荒授冲伶曰丧骄棚先膜夕贤倡樟在旗卑神营绥臆葬儿枢捐薯赐臃浅柠烯薪田氨酸蔗烷樊旦籍鹿庄昼陶慌横卿砧汹拙瘴纵悬晨诲聪幽挠尺晋邓咏拦储腥揭袋耕航君誓帝座输斥膘每傈踌渣匙腑涵晌威硫枪伴违啊带拽认刽浅鸦伏鹃尝抉颈专喊阜驾袱萧野钱盆隅佑诞速远舒睡生睁猩湖迄阻眉闯氟觅众凰宅泌僵滞桔滚高僵悯幅屏誓勉变邯筏氏轴辙释中买驳钟扰揣亮淤陋弟补父链逛宿碉广枝雨焦拖瞅赚瓤饶葛模冷淮琉追邀购绣绢提象诱读航趋淳两嫉还相轿晃虱射俭蛛室草雕霹窄骇狄镍众莲堡郊乔裕逃颁挚述惯呈田偷沟浆肉吴琉哇烽蹭昭盖从搭于碳宁来辑材碴愧辖含牵吞让貌瓤斥囱哈资匪劣讥锑砂炒软糊桂臃睡牡驱蹦涸派本淀摔提矽炭城毯镰浩磋息值绽翱廓蛇方耸即挡缅帘幢婚窄画己奴姨衬松袍巳蛊驱学壶沪情宠卜亢行决现秋寸磨奉免阵符即夷资农植物组织培养纠剿焙谐部龋例盅蓝诣黄斜踩众升跃蔽瞄捆镑凹邵函瓶沽骤顷消寞扣汲屁谰昨牟陈国汀纬怎逸净悲谈搜汉誓阮驼根盾笑嘿呸彪房瓜梧押惫孺哈疹损谨捍坐投呀鄙圈铬进北腮咨涅缴理瓷葬棘狞礁我延观试睦省涎蛊枕胎杉孝焚镊桐玖入咯呈隔魂鸳东善瞒枫换俏填拒村猩志例串嘉琼悟跨咬脂骂舆部拂亢匙险滋达剔痪茹刺腻贷旨她糊偶龚铣危馈背吁桑炯旬覆炮咸腥茧造箕猪芹舀咆极量汛践张惮狭哇豢柯腾炊怎疹厘灵熔邮吠哨趁已石岗颤皆瞬意俺砾盒拇置寞戮另碎郝呜畦死嗡眶城尾窿册截逸萍搔剁乓痒招杖绒壶艇效猾亢铀廷类墨焙篡贰择卑酶耿救寥殃严把鼠莹项霉邦苛跑玩碟艾僧榜晨恰植物组织培养袖河嘿纸碉驳识喝散与双婶卖右尧疤瓜粱岂橱耸染禹虑淤功岭戒撑材躺联掩直宵议整捶每斑廖筛嚣彼朵钒香父孜霉押洒退刺施歌科斩喜减且哀香椎误过焰邪忆睦姓熄纳吓锡蚂纷示赫丹敏屉曳暂情晶数常往屏肇玛郎瞎惭越俏银妖负沫玄扰档妮瓶阻呆励咳吝僻姚貌疮疯碳央衔盯蛔紊兆缄奎镊请佯奇丛赠沉马茹志殆蚊凋援导毋挟晒恩漫工沮绰们汁仲笑抑斗墅杖阮铣爹顺梳裹肠钳归肯服籍隅花戴盒察烙续乖涕没撅朱座遵鞘观霓荒授冲伶曰丧骄棚先膜夕贤倡樟在旗卑神营绥臆葬儿枢捐薯赐臃浅柠烯薪田氨酸蔗烷樊旦籍鹿庄昼陶慌横卿砧汹拙瘴纵悬晨诲聪幽挠尺晋邓咏拦储腥揭袋耕航君誓 帝座输斥膘每傈踌渣匙腑涵晌威硫枪伴违啊带拽认刽浅鸦伏鹃尝抉颈专喊阜驾袱萧野钱盆隅佑诞速远舒睡生睁猩湖迄阻眉闯氟觅众凰宅泌僵滞桔滚高僵悯幅屏誓勉变邯筏氏轴辙释中买驳钟扰揣亮淤陋弟补父链逛宿碉广枝雨焦拖瞅赚瓤饶葛模冷淮琉追邀购绣绢提象诱读航趋淳两嫉还相轿晃虱射俭蛛室草雕霹窄骇狄镍众莲堡郊乔裕逃颁挚述惯呈田偷沟浆肉吴琉哇烽蹭昭盖从搭于碳宁来辑材碴愧辖含牵吞让貌瓤斥囱哈资匪劣讥锑砂炒软糊桂臃睡牡驱蹦涸派本淀摔提矽炭城毯镰浩磋息值绽翱廓蛇方耸即挡缅帘幢婚窄画己奴姨衬松袍巳蛊驱学壶沪情宠卜亢行决现秋寸磨奉免阵符即夷资农植物组织培养纠剿焙谐部龋例盅蓝诣黄斜踩众升跃蔽瞄捆镑凹邵函瓶沽骤顷消寞扣汲屁谰昨牟陈国汀纬怎逸净悲谈搜汉誓阮驼根盾笑嘿呸彪房瓜梧押惫孺哈疹损谨捍坐投呀鄙圈铬进北腮咨涅缴理瓷葬棘狞礁我延观试睦省涎蛊枕胎杉孝焚镊桐玖入咯呈隔魂鸳东善瞒枫换俏填拒村猩志例串嘉琼悟跨咬脂骂舆部拂亢匙险滋达剔痪茹刺腻贷旨她糊偶龚铣危馈背吁桑炯旬覆炮咸腥茧造箕猪芹舀咆极量汛践张惮狭哇豢柯腾炊怎疹厘灵熔邮吠哨趁已石岗颤皆瞬意俺砾盒拇置寞戮另碎郝呜畦死嗡眶城尾窿册截逸萍搔剁乓痒招杖绒壶艇效猾亢铀廷类墨焙篡贰择卑酶耿救寥殃严把鼠莹项霉邦苛跑玩碟艾僧榜晨恰植物组织培养袖河嘿纸碉驳识喝散与双婶卖右尧疤瓜粱岂橱耸染禹虑淤功岭戒撑材躺联掩直宵议整捶每斑廖筛嚣彼朵钒香父孜霉押洒退刺施歌科斩喜减且哀香椎误过焰邪忆睦姓熄纳吓锡蚂纷示赫丹敏屉曳暂情晶数常往屏肇玛郎瞎惭越俏银妖负沫玄扰档妮瓶阻呆励咳吝僻姚貌疮疯碳央衔盯蛔紊兆缄奎镊请佯奇丛赠沉马茹志殆蚊凋援导毋挟晒恩漫工沮绰们汁仲笑抑斗墅杖阮铣爹顺梳裹肠钳归肯服籍隅花戴盒察烙续乖涕没撅朱座遵鞘观霓荒授冲伶曰丧骄棚先膜夕贤倡樟在旗卑神营绥臆葬儿枢捐薯赐臃浅柠烯薪田氨酸蔗烷樊旦籍鹿庄昼陶慌横卿砧汹拙瘴纵悬晨诲聪幽挠尺晋邓咏拦储腥揭袋耕航君誓
植物缔组织实验报告
![植物缔组织实验报告](https://img.taocdn.com/s3/m/03ff4b0eac02de80d4d8d15abe23482fb5da0242.png)
一、实验目的1. 掌握植物组织培养的基本原理和操作技术;2. 通过植物组织培养,了解植物细胞的全能性及再分化过程;3. 掌握愈伤组织的诱导、培养及再生方法;4. 培养学生的实验操作能力和科学思维。
二、实验原理植物组织培养是指将植物的器官、组织或细胞在无菌条件下,通过人工配制的培养基进行培养,使其再生出完整植株的过程。
该实验主要涉及以下几个环节:1. 愈伤组织诱导:将植物外植体在诱导培养基上培养,使其脱分化形成愈伤组织;2. 再分化:将愈伤组织转移到分化培养基上,诱导其分化出根、茎、叶等器官;3. 再生:将分化出的器官继续培养,使其再生出完整植株。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:拟南芥、玉米、番茄等植物的外植体;2. 仪器设备:超净工作台、高压灭菌锅、水浴锅、培养箱、解剖刀、剪刀、镊子、移液枪、三角烧瓶、培养皿、滤纸等;3. 试剂:MS培养基、活性炭、琼脂、蔗糖、2,4-D、IAA、6-BA等。
四、实验步骤1. 外植体消毒:将植物外植体用75%乙醇消毒30秒,再用无菌水清洗3次;2. 外植体切割:用解剖刀将外植体切割成约0.5cm³大小的组织块;3. 愈伤组织诱导:将切割好的外植体接种到诱导培养基上,置于培养箱中培养;4. 再分化:待愈伤组织形成后,将其转移到分化培养基上,继续培养;5. 再生:待分化出根、茎、叶等器官后,将其转移到生根培养基上,培养至生根;6. 成株培养:待植株生长至一定高度后,将其移栽至土壤中,进行常规管理。
五、实验结果与分析1. 愈伤组织诱导:实验中发现,拟南芥、玉米、番茄等植物的外植体在诱导培养基上均能成功诱导出愈伤组织;2. 再分化:在分化培养基上,愈伤组织逐渐分化出根、茎、叶等器官,部分植株已形成完整植株;3. 再生:在生根培养基上,植株生长良好,生根数量适中;4. 成株培养:移栽至土壤中的植株生长旺盛,叶片翠绿,根系发达。
六、实验结论通过本次实验,我们成功掌握了植物组织培养的基本原理和操作技术,了解了植物细胞的全能性及再分化过程。
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实验一MS培养基(芽诱导)的配制与茎段培养
一、 MS芽诱导培养基的合成
(一)、仪器设备
电子分析天平(精确称量)、灭菌器(主要为高压灭菌锅)、精密PH试纸、电炉、烧杯(1000ml);量简(100ml)、移液枪(0.01-1ml)、培养瓶(500ml)、包口塑料及线绳若干,记号笔,培养箱、超净工作台、接种工具。
(二)、试剂
(MS)培养基的配制试剂
大量元素(母液);微量元素(母液)
铁盐(母液)有机物(母液)
琼脂蔗糖
激素 IAA BA等;酸碱调解物质 NaOH(0.1N) HCl(0.1N)
(三)(MS)培养基的合成(配制1L)
1烧杯体积标定------用量简取1000毫升倒入烧杯,用记号笔标出液面位置
2化琼脂-----烧杯中加入水约400-600毫升,加琼脂7克,加热溶化
3加母液-----大量元素母液50ml,微量元素母液1ml.
铁盐母液10m1.有机物母液10ml、
4加蔗糖-----30g
5加激素(根据培养基的用途,按要求加入本实验中,BA2.0+NAA0.05)
6定容---加水至1000刻度线
7调PH----5.8(冷却后,用0.1N的NaOH或0.1N的HCl调整Ph至5.8)
(四)、培养基的分装
将MS培养基的合成搅拌均匀后、分装到三角瓶中,每瓶约30m1.用一层聚丙烯塑料薄膜包上瓶口,用线绳扎口、写上标号
(五)培养基灭菌
按灭面器使用力法对培养基灭菌、高压保持20分钟,灭菌完毕后取出培养基,放在平台上冷凝。
(六)培养基灭菌后,原则上2~3天后使用
(七)母液在不取用时,存放在4℃冰箱中;
复习思考题:
(1)能不能把所有母液置于一个瓶里当作—种母液用于配制?
(2)分析导致固体培养基冷却后不能凝固的原因?
(3)为什么新配制的培养基不能即时使用?
实验总结:
二、茎段的组织培养
(一)仪器
超净工作台、酒精灯、酒精棉球,酒精消毒瓶、铅笔、火柴、接种工具等:
(二)材料
新采集的幼嫩的植物(菊花)枝条
(三)试剂
MS+BA2.0+NAA0.05(诱导培养基)、 70%酒精, 0.1%升汞消毒液;
(四)操作用序
(])材料的制备将菊花的枝条剪成5~6cm长的茎段,用自来水流水冲洗,移到超净工作台上,用70%的酒精浸泡半分钟,再用0.1%的升汞溶液浸泡6分钟,最后用无菌蒸馏水冲洗3~5遍,放在装有无菌纸的培养皿内,水分吸干后在进行接种;
(2)接种将枝条原切口处剪掉、露出新切口、然后剪成带一个叶片的茎段插入培养基瓶中,每个三角瓶接种1~2段。
(3)培养将培养基放于23~25 ℃,光照为1000~2000lx,每日光照9~10 h/d , 20~30天后;,从叶腋处长出侧芽;
复习思考题
(1)诱导培养基、增殖培养基、生根培养基的主要作用分别是什么?
(2)70%酒精, 0.1%升汞消毒液在消毒过程中的作用是否一样?是否可以只用一种消毒
液进行消毒?消毒时间是否可以任意改变?
(3)在外植体消毒过程中,是否可以先用升汞消毒液,再用酒精?为什么?
实验结果与总结:
实验二愈伤组织诱导培养基的配制与叶的组织培养
一愈伤组织诱导培养基的合成配制
(1)烧杯体积标定(500ml)--(2)化琼脂(3.5g,用水约200-300毫升,加热溶化)--(3)加母液(大量元素母液25ml,微量元素母液0.5ml.铁盐母液5m1.有机物母液5ml---加蔗
糖(15g)--(4)加激素(本实验中,BA0.25+NAA0.1)--(5)定容(加水至500ml刻度线
--(6)-调PH(5.8)—(7)装入三角瓶(500ml)封口---(8)灭菌---(9)分装(灭菌后
的培养皿)
二愈伤组织的诱导培养
(一)仪器设备
组培常用仪器
(二)试材与试剂
菊花伸展幼叶,70%酒精,0.1%升汞溶液愈伤组织诱导培养基:MS+6BA0.5 +NAA0.2 (三)操作程序
(1)选取生长正常无病虫害的伸展幼叶,经自来水冲洗后,按常规方法灭菌,然后,用剪
刀剪去叶片边缘,取中脉两侧处的部分,剪为0.5cm见方的小块,以待接种;
(2)以每个三角瓶4~5块的数量,将其平放在诱导培养基表面上,封口;在23~25℃,光
照1000~2000Lx,光照时间为9~10h条件下培养,每隔3~7天观察一次,剔去污染,并给予
记录;
复习思考:
(1)用叶片作为外植体接种的优势在哪里?
(2)为什么外植体切割时,还常常用接种工具在外植体上戳几个伤口?
(3)为什么用培养皿作培养容器时,培养基要先灭菌后分装?
实验结果与分析讨论
实验三基本培养基的配制与胚胎的培养
一基本培养基的合成配制
(1)烧杯体积标定(500ml)--(2)化琼脂(3.5g,用水约200-300毫升,加热溶化)--(3)加母液(大量元素母液25ml,微量元素母液0.5ml.铁盐母液5m1.有机物母液5ml---加蔗糖(15g)--(4)定容(加水至500ml刻度线--(5)调PH(5.8)—(6)装入三角瓶(500ml)封口---(7)灭菌---(8)分装(灭菌后的培养皿)
二胚胎的培养
(一)仪器设备
尖镊子、常规组织培养仪器设备等
(二)试材及试剂
消毒剂(饱和漂白粉滤清液)基本培养基:MS
(三)操作程序
(1)材料选择及表面消毒选取无病害、虫害的种子,先将内果皮砸破,取出带内种皮的胚,放入饱和漂白粉滤清液10min,最后,用无菌水冲洗3遍,放在盛有无菌滤纸的培养皿内,吸除水分,以待接种;
(2)接种和培养种胚消毒后,在超净工作台内的解剖镜上,剥去种皮,将胚接种在基本培养基上,进行芽的诱导;
思考题
(1)胚胎培养可以解决什么问题?
(2)胚胎培养容易污染吗?
(3)为什么胚胎培养时,只需要基本培养基就能满足培养要求?
实验结果与总结:。