临床微生物学概论
临床医学检验技术(师)：概论必看考点五
临床医学检验技术(师)：概论必看考点五1、单选免疫监视功能低下的机体易发生（）A.移植物排斥反应B.肿瘤C.反复感染D.超敏反应E.自身免疫病正确答案：B参考解析：免疫监视是指机体免疫系统可识别和清除体内表达新（江南博哥）生抗原的突变细胞和病毒感染细胞的一种功能。
该功能失调可致肿瘤发生和持续性病毒感染。
2、单选患者，男，45岁。
刺激性咳嗽2个月，痰中带血1个月。
胸片显示肺部有团块状阴影，痰中可见肿瘤细胞，诊断：肺癌。
患者全身免疫状态属于（）A.免疫防御过高B.免疫监视低下C.免疫自稳失调D.免疫耐受增强E.免疫防御低下正确答案：B参考解析：免疫系统的主要功能有免疫防御、免疫自稳和免疫监视，保持机体内环境稳定。
当免疫监视功能发生低下时，因不能杀伤并及时清除体内突变细胞，可导致肿瘤的发生。
3、单选除B细胞和Th细胞外，与抗体产生有关的细胞还有（）A.吞噬细胞B.嗜酸性粒细胞C.嗜碱性粒细胞D.肥大细胞E.NK细胞正确答案：A4、单选关于Th细胞正确的是（）A.需要同B细胞相互作用才能活化B.Th细胞是均一的细胞亚群C.需要识别抗原呈递细胞上同MHC-Ⅱ类分子结合的抗原D.参与TI-Ag的应答E.只辅助Tc细胞的免疫应答正确答案：C5、单选淋巴细胞再循环的起点、中途站和归巢的终点是（）A.骨髓B.胸腺C.中枢免疫器官D.外周免疫器官及外周淋巴组织E.脾和淋巴结正确答案：D参考解析：淋巴细胞在体内依靠归巢受体由住地经淋巴循环及血液循环不断往返于外周免疫器官、二级淋巴组织及全身器官组织。
外周免疫器官及外周淋巴组织有大量的淋巴细胞，是淋巴细胞居住、增殖、休整和其他细胞相互作用及信号传导的基地，这些部位既是淋巴细胞再循环的起点、中途站，也是归巢的终点。
6、单选下述正确的是（）A.在初次感染，IgG类抗体产生的最早B.抗细胞内寄生物的免疫与Tc有关C.B细胞分化成熟的标志是细胞膜上出现IgM分子D.吞噬异物是Mφ细胞唯一的功能E.中性粒细胞的吞噬作用与补体无关正确答案：B7、单选中和试验的原理是（）A.抗原的破坏B.抗原亲和性C.特异性受体与病毒结合D.特异性抗体抑制病毒的感染力E.细胞膜的选择性正确答案：D参考解析：中和试验是将病毒与特异性抗体进行免疫反应，使病毒失去感染性，在细胞内培养和活的机体内不出现病变的试验。
微生物学重点内容（考试必看）
微⽣物学重点内容（考试必看）⼗章、细菌学概论细菌（bacteria）：⼀类具有细胞壁、单细胞、以⽆性⼆分裂⽅式进⾏繁殖的原核细胞型微⽣物。
⼀、细菌的形态、结构与分类（p123-137）⼀）⼤⼩与形态1.⼤⼩：微⽶、光学显微镜2.基本形态（适宜条件、8-18h、主要有3种；观察选对数⽣长期最优）球菌Coccus 单、双、链、四联、⼋叠、葡萄球菌杆菌Bacillus 各种杆菌差异较⼤，排列分散、⽆⼀定形式螺形菌Spiral bacterium 弧菌：⼀个弯曲、螺菌：数个弯曲3.多形性：细菌在条件改变时，出现不规则形态，呈梨形、⽓球状、丝状等，条件适宜，可以恢复。
⼆）细菌的细菌结构（10分）★★★★★1.基本结构（所有细菌共有的结构）：细胞壁、细胞膜、细胞浆及核质。
1）细胞壁：坚韧、有弹性；保护细菌；含主要成分肽聚糖，特殊成分磷酸壁、脂多糖等。
A.⾰兰⽒阳性菌细胞壁★★★★★较厚，含丰富肽聚糖，少量磷壁酸a.肽聚糖由40层左右的⽹格状分⼦交织成厚的三维⽴体⽹状结构，由聚糖⾻架和四肽侧链及五肽桥组成。
聚糖⾻架由N-⼄酰葡糖胺（G）和N-⼄酰胞壁酸（M）经β-1,4糖苷键交替间隔排列⽽成。
肽聚糖⽀架相同，肽链肽桥随菌⽽异。
b.磷壁酸（G+特有成分）酸性多糖，由核糖醇或⽢油残基经磷酸⼆酯键互相连接⽽成的链状聚合物。
分壁磷壁酸（核糖醇型）和膜磷壁酸（⽢油型）具重要⽣理功能：①.P-结合阳离⼦，Mg2+提⾼细胞表⾯酶活性②.细胞壁表⾯抗原成分③.噬菌体吸附的特异受体④.调节⾃溶素活⼒⑤.增加细菌粘附性，与致病性有关。
B.⾰兰⽒阴性菌细胞壁较薄，肽聚糖含量低。
外膜层位于细胞壁肽聚糖层的外侧，包括脂多糖、脂质双层、脂蛋⽩三部分a.肽聚糖b.外膜①.脂蛋⽩：⼀端以蛋⽩质部分共价键连接于肽聚糖的四肽侧链上另⼀端以脂质部分连接在外膜的磷酸上，其功能是稳定外膜并将之固定于肽聚糖层。
②.脂质双层：脂蛋⽩外侧，脂质双层结构。
含有外膜蛋⽩。
《微生物学》期末复习资料知识点
《微生物学》期末复习资料知识点绪论一.微生物概念微生物是一种形体微小、结构简单、分布广泛、增值迅速、肉眼不能直接观察到，须借助显微镜放大几百倍、乃至数万倍才能看到的微小生物。
二.微生物的分类1.非细胞型微生物:最小的一类微生物，无典型的细胞结构，多数由一种核酸（DNA或RNA）和蛋白质衣壳组成。
2.原核型细胞微生物:细胞核分化程度低，仅有DNA盘绕而成的拟核，无核膜和核仁等结构，除核糖体外，无其他细胞器。
包括细菌、放线菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体等。
3.真核细胞型微生物:有细胞结构，细胞核分化程度高，有核膜、核仁和染色体，细胞质内有细胞器（如内质网、高尔基体和线粒体等），行有丝分裂。
三.正常菌群和条件治病菌人体的表面以及与外界相通的腔道（如口、鼻、咽部、肠道等）中都存在大量种类不同的微生物，在正常情况下这些微生物都是无害的，称为正常菌群。
但其中有一部分微生物在某些条件下也可以导致疾病的发生，故被称为条件致病性微生物。
第十章细菌学概论一.细菌的大小和形态1.细菌的测量单位:通常以微米（μm）为测量单位2.细菌的基本形态:1)球菌:单球菌、双球菌、链球菌、四联球菌、八叠球菌、葡萄球菌2)杆菌3)螺形菌:分为弧菌和螺菌二.细菌的细胞结构(一)细菌细胞的基本结构基本结构是维持细菌正常生理功能所必须的结构，是各种细菌细胞共同具有的结构。
包括细胞壁、细胞膜、细胞质、核质及细胞质内的内容物等。
1.细胞壁的主要功能:赋形、保护、纳泄、抗原作用。
2.胞质颗粒:细菌细胞内的一些颗粒状内含物，多为细菌贮存的营养物质，也有的属于细菌的代谢产物。
（二）细菌细胞的特殊结构某些细菌细胞在一定情况下才有的结构称为特殊结构。
包括荚膜、芽胞、鞭毛、菌毛。
1.荚膜的主要功能:抗吞噬作用、黏附作用、抗有害物质的杀伤作用、抗原性。
2.芽胞:休眠结构。
3.鞭毛:细菌的运动“器官”。
分为四种——单鞭毛、双鞭毛、丛鞭毛、周鞭毛。
4.菌毛:分为普通菌毛和性菌毛，性菌毛与细菌的遗传物质有关。
(完整版)临床医学概论重点总结(全)
临床医学概论复习范围第一篇诊断一常见症状（一）发热1发热：是指机体在致热源的作用下或由于各种原因导致体温调节中枢功能障碍,使机体产热大于散热而致体温升高超过正常水平成人正常体温:36-37℃,正常情况下24h内体温波动〈1℃2发生机制：（1）致热源性发热外源性致热源：病原微生物及其产物、炎性渗出物，无菌性坏死组织内源性致热源:白细胞致热源（2）非致热源性发热体温调节中枢直接受损（颅脑外伤）产热过多：甲亢散热减少：大面积皮肤病（银屑病）3病因（1）感染性发热病原体包括病毒、细菌、衣原体、支原体、立克次体（2）非感染性发热无菌坏死组织吸收（大手术）抗原抗体反应：风湿热内分泌与代谢疾病：甲亢④皮肤散热减少：广泛性皮炎⑤体温调节中枢功能障碍：脑出血⑥自主神经功能紊乱：夏季低热4临床表现:发热分度:低热37.3℃-38℃中等 38.1℃-39℃高热39。
1℃-41℃超高热≧41.1℃（1）发热过程体温上升期→高热持续期→体温下降区（2）热型及临床意义热型:是指将间隔一定时间测得的体温记录在体温单上，体温曲线的特点稽留热：体温持续在39℃-40℃达数天或数周,24小时内体温波动〈1℃（大叶性肺炎）弛张热：败血症热， T>39℃ 24小时内体温波动〉2℃（败血症）间歇热:体温骤升后持续数小时，而后骤降至无热期，高热期与无热期交替出现，不规则热：发热无规律，见于结核病回归热：体温骤升至39℃以上持续数天,而后骤至正常，高热期与无热期交替性出现，见于霍奇金病波状热:体温逐渐升至39℃，数天后逐渐降至正常,反复数个周期，见于布氏杆菌病毒(二）呼吸困难呼吸困难：指患者主观感觉空气不足,呼吸费力，客观表现为呼吸用力甚至鼻翼煽动，张口耸肩，辅助呼吸肌与呼吸运动,可伴有发绀，呼吸频率、深度、节律异常。
病因（1)呼吸系统疾病①气管、支气管疾病:气道堵塞（支气管哮喘) ②肺脏疾病：肺淤血、肺不张、肺水肿③胸廓、胸膜疾病：气胸，胸腔积液④神经—肌肉疾病：呼吸肌麻痹⑤膈肌运动障碍:腹水（2)循环系统疾病:心力衰竭（3)急性中毒：①代谢性酸中毒②急性药物中毒（吗啡、巴比妥）③急性毒物中毒（4)血液系统疾病重度贫血、大出血休克（5)神经精神因素：①颅脑疾患（呼吸中枢兴奋性降低) ②癔病临床表现（1）肺源性呼吸困难(呼吸系统）a.吸气性呼吸困难具体表现①吸气困难②三凹征：指胸骨上窝、锁骨上窝、肋间隙吸气时明显凹陷，伴干咳喉鸣b.呼气性呼吸困难具体表现①呼气费力，呼气时间明显延长，双肺哮鸣音C。
临床医学概论课程简介及教学大纲
“临床医学概论”课程简介及教学大纲课程代码：223010421课程名称：临床医学概论课程类别：专业方向课总学时/学分：48 / 3开课学期：第六学期适用对象：药学专业本科生先修课程：生理解剖学、微生物免疫学、药理学、生物化学。
内容简介：《临床医学概论》是一门研究诊断学基础及临床各科常见疾病的学科。
本课程论述了诊断疾病的基础理论，基本技能，诊断思维；临床常见急症、传染病、内、外、妇、儿等疾病的病因、发病机制、临床表现、诊断与鉴别诊断、治疗原则和预防方法。
一、课程性质、目的和任务《临床医学概论》是一门研究诊断学基础及临床各科常见疾病的学科。
本课程论述了诊断疾病的基础理论，基本技能，诊断思维；临床常见急症、传染病、内、外、妇、儿等疾病的病因、发病机制、临床表现、诊断与鉴别诊断、治疗原则和预防方法。
在教授课程过程中将重点讲述药物在预防、治疗、诊断疾病中的重要作用。
使学生了解药物与临床之间不可分割的关系，掌握合理用药的基本知识、重要原则及其重大意义。
二、课程教学内容及要求第一章诊断学基础［基本内容］临床常见症状的病因和临床表现。
问诊和体格检查在疾病诊断过程中的重要作用。
问诊和体格检查的基本内容、方法及注意事项。
［基本要求］掌握常见症状及体征并掌握其临床意义。
熟悉正确的病史采集方法和科学的诊断思维方法。
第二章急诊医学［基本内容］常见临床急症（心跳呼吸骤停、休克、急性呼吸衰竭、中毒等）的病因、临床表现、诊断和治疗。
［基本要求］了解常见临床急症的病因及发病机制。
熟悉其临床表现并能够根据病史、临床表现和辅助检查做出正确诊断。
掌握各种急症的处理方法和抢救药物的合理使用。
第三章传染病［基本内容］传染病的感染与机体免疫，传染病的流行过程和特征。
常见传染病的病因、发病机制、临床表现、实验室检查、诊断和鉴别诊断。
常见传染病的治疗和预防。
［基本要求］了解传染病的流行过程和特征，影响传染病流行过程的因素，常见传染病的病因、发病机制。
第一章 细菌
临床微生物学概论
伤寒沙门菌
痢疾志贺菌
9
三、临床微生物学及检验
10
---是医学微生物学、临床微生物学与微生物学技术密切 结合的一门新兴学科。
利用微生物学的基础理论与技能和临床微生物学的基 本知识，掌握各类与临床有关的微生物特性，通过系统的 检验方法，及时并且准确地对临床标本作出病原学诊断和 抗菌药物敏感性报告，为临床感染性疾病的诊断、治疗和 预防提供科学依据。
----研究病原生物与人体相互作用规律的科学，主要包括病原生 物的生物学特性、感染与免疫机制、致病机制、分布与流行规律 、特异性诊断和防治方法等。
----在这些病原微生物中，有一些是有致病性的，例如伤寒沙门 菌、痢疾志贺菌；而还有一部分是正常寄居于人体内，通常情况 下无致病性，只有在人体免疫力降低（肿瘤、疲劳）或微生物进 入非正常寄居部位时（手术后）才会引起疾病，称为机会致病微 生物或条件致病微生物。
22
临床微生物及检验的研究热点：
1、新出现的感染性疾病 2、致病菌的耐药性监测 3、实验室的生物安全 4、警惕、研究和防止生物恐怖
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5、病原生物学检验的自动化 6、病原生物的分子诊断 7、病原生物学检验的全面质
量控制 8、病原生物学检验的标准化
和规范化
24
四、细菌的命名和分类
25
命名原则：
3
微生物的特点：
1、个体微小 2、结构简单 3、种类多 4、分布广 5、繁殖快 6、易变异
4
根据微生物有无细胞结构、细胞器等结构特点，可以将 微生物分为三个大类：
1、非细胞型微生物：是最小的一类，无典型的细胞结构，只能存活 在活细胞内生长繁殖，主要包括病毒，例如：疯牛病的朊病毒、 艾滋病病毒等。
16
主要研究内容
微生物与免疫学复习重点
微生物与免疫学复习重点一、名词解释1.抗原〔Ag〕：是指能与淋巴细胞抗原受体〔BCR/TCR〕特异性结合，刺激机体免疫系统产生特异性免疫应答，并能与相应免疫应答产物〔指抗体或致敏淋巴细胞〕在体内、外发生特异性反应的物质。
其两个基本特性：免疫原性和免疫反应性2.免疫原性：指抗原能刺激机体产生特异性抗体或致敏淋巴细胞的特性3.免疫反应性：指抗原能与相应免疫应答产物〔抗体或致敏淋巴细胞〕发生特异性结合的特性。
4.完全抗原：同时具备免疫原性和免疫反应性两种特性的物质称为完全抗原。
5.半抗原：仅具备免疫反应性而不具有免疫原性的物质被称为半抗原。
：抗原分子中决定抗原特异性的基本结构或化学基团称为抗原表位，它是BCR/TCR及抗体特异性结合的基本单位，亦称为抗原决定基，通常由5～15个氨基酸残基、5～7个多糖残基或核苷酸组成。
7.交叉抗原：某些特定抗原不仅可与其诱导产生的抗体或致敏淋巴细胞结合或相互作用，还可与其他抗原诱生的抗体或致敏淋巴细胞发生反应。
这种抗原被称为交叉抗原。
8.交叉反应：交叉抗原与其他抗原所诱生抗体、免疫细胞结合或相互作用被称为交叉反应。
9.异嗜性抗原：指一类存在于人、动物、植物或微生物之间的共同抗原。
10.超抗原：是一类特殊的抗原性物质，在极低量水平〔1～10ng/ml〕能活化大量〔2%～20%〕T细胞或B细胞，并诱导强烈免疫应答。
11.丝裂原：亦称有丝分裂原，可致细胞发生有丝分裂，进而增殖。
12.免疫球蛋白〔Ig〕：即抗体，是血液和组织液中一类糖蛋白，由B细胞接受抗原刺激后增殖分化为浆细胞所产生，是体液免疫的重要效应分子。
13.多克隆抗体：是指将抗原注入机体后，刺激多个B细胞克隆所产生的抗体是针对多种抗原决定基的混合抗体。
其特点是来源广泛、制备容易。
14.单克隆抗体：单一抗原表位特异性B细胞克隆经融合、筛选和克隆化而获得单克隆杂交瘤细胞，其所产生的同源抗体称为单克隆抗体。
15.补体：是人和动物血清中的一组与免疫功能有关，经活化后具有酶活性的蛋白质。
微生物药物学
微生物药物学微生物药物概论1 从来源上分，微生物药物可分为哪三大类？答：1 来源于微生物整体或部分实体的药物：主动免疫制品；被动免疫制品；生物制品；2 来源于初级代谢产物的药物：生化药物3 来源于次级代谢产物的药物：抗生素；生理活性物质；2 随着抗生素研究的深入，抗生素曾有过不同的定义，60年代对抗生素的定义是什么？答：在低浓度下，能选择性地抑制或杀死它种微生物或肿瘤细胞的微生物次级代谢产物和采用化学或生物学等方法制得的衍生物与结构修饰物。
3 抗生素按其作用性质可分为哪4大类？答：根据作用性质分类：繁殖期杀菌；静止期杀菌；速效抑菌；慢效抑菌；4 抗生素按其作用机制可分为哪5大类？答：抑制或干扰细胞壁合成；抑制或干扰蛋白质合成；抑制或干扰细DNA、RNA合成；抑制或干扰细胞膜功能；作用于物质或能量代谢系统；5 标志中国抗生素工业开创的事件是什么？答：1953年1月在上海第三制药厂正式投入生产青霉素6 请概述微生物药物研究的一般流程。
答：1 微生物药物产生菌2 活性菌株的筛选3 活性菌株的保存4 生产菌株的选育5 发酵培养条件6 活性产物的分离纯化7 化学鉴别与结构测定8 药理与临床评价9 工业化研究10 基础研究7 20世纪70年代后,随着抗生素研究扩展为微生物药物的研究，___、____ 、____等生物技术在微生物药物研究的应用日益广泛。
答：基因工程，细胞工程，酶工程8 请概述微生物药物在实践中的应用。
答：一在临床医学上的应用:抗感染; 抗肿瘤; 免疫抑制;二农业上应用:植物病害的防治; 植物生长激素;三在畜牧业上的应用抗动物感染性疾病; 饲料添加剂;四食品工业中的应用食品的防腐、保鲜五工业上的应用工业制品的防腐、防霉六科学研究中的应用生化、分子生物学研究的工具；建立药物筛选模型；其它特殊作用；第二章抗菌药物产生菌的筛选1 分离放线菌的培养基一般情况下为什么必须添加抑制剂？常用的抑制剂有那些？答：抑制真菌和细菌的生长，增加放线菌的分出率。
2016年全国卫生系列正高级职称临床医学检验临床微生物技术复习题
概论1不属于与原核细胞型微生物的是B病毒A 细菌B 病毒C 立克次体D支原体E衣原体2属于非细胞型微生物的是（病毒亚病毒朊粒） E HIV3属于真核细胞型微生物的是（真菌原虫）D霉菌4属于原核细胞型微生物的是 B 志贺菌5下列叙述正确的是多选ABCEA荷兰列文虎克发明显微镜B 德国郭霍提出了郭霍法则C 法国巴斯德有机物的发酵是因酵母菌的作用 D 英国医师琴纳创立了固体培养基分量细菌方法E英国李斯特床用石炭酸喷洒手术室和煮沸手术用具消毒备注：荷兰列文虎克发明显微镜、德国郭霍首创固体培养基提出了郭霍法则、英国医师琴纳发明牛痘预防天花、法国巴斯德创造了巴氏消毒法、英国李斯特床用石炭酸喷洒手术室和煮沸手术用具消毒、俄国伊凡诺夫斯基发现第一种病毒烟草花叶病毒、德国的细菌学家欧立希首先合成治疗梅毒的坤凡纳明、英国的细菌学家弗来明首先发现青霉素能抑制金黄色葡萄球菌的生长、法国巴斯德有机物的发酵是因酵母菌的作用6有关正常菌群叙述正确的是：BCEB正常菌群对保持人体生态平衡和内环境的稳定有重要作用C 正常菌群受到破坏会导致菌群失调E 正常菌群在正常情况下是无害的7属于非细胞型微生物是AEA HBV E流行性感冒病毒B新生隐球菌C肺炎支原体D百日咳鲍特菌8检测某些细菌特征性酶：共用题干1问快速检测沙门菌的酶B辛酸酯酶2问检查卡他莫拉菌最特异的酶B丁酸酯酶3问检查难辨梭菌特有的酶是 D 谷氨酸脱氢酶4问检查白色念珠菌的酶是E脯氨酸肽酶（及N-乙酰D半乳糖苷酶）5问筛查O157：H7大肠埃希菌常用的酶C葡葡糖醛酸酶细菌感染及其检验技术1用于化脓链球菌鉴定的抗生素敏感性试验是 D 0.04ug杆菌肽实验2以抗毒素免疫为主的感染性疾病 C 破伤风梭菌感染3 下列属于原核细胞微生物的是 B 细菌C 支原体D立克次体4 细菌致病强弱主要取决于细菌的 C 侵袭力D毒力5 细菌基本检验技术包括传统检验技术和现代检验技术1问不属于传统检验技术的是E免疫银光技术2问不属于现代检验技术的是 A 染色标本技术6细菌的致病性主要取决于三方面：细菌的毒力侵入的数量及侵入的途径1问表示细菌致病性强弱程度的是B毒力2问有关致病性说法错误的是B不同细菌所致疾病的过程大致相同7细菌基本结构包括细胞壁细胞质细胞膜及核质等1问革兰阳性和革兰阴性菌的细胞壁共同成分E 肽聚糖2问与细菌耐药性形成有关的青霉素结合蛋白存在于 B 细胞膜8患儿男4岁不明原因呕吐性情改变头痛2周持续发热1周，经一般抗感染治疗无效，查体：鼻唇沟消失、眼睑下垂，心肺听诊无异常，脑膜刺激征阳性。
生物医学概论生化第1章概论
基因组大小(Mb)
0.58 1.83 4.20 4.60 13.50 12.50 466 165 97 2700 3000
基因数
470 1743 4100 4288 6034 4929 30000 13601 18424 30000 25000
染色体数*
无 无 无 无 16 16 21 4 6 20 23
-螺旋
中心法则
复
转录
制
逆转录
翻译
遗 传 密 码 表
蛋白质的生物合成途径
重组DNA技术（DNA克隆）
以质粒为载体的DNA克隆过程
基因工程产品
DNA 重 组 (DNA recombination) 是 指 不 同 DNA分子断裂和连接而产生DNA片段的交换 并重新组合形成新DNA分子的过程。
脂的结构
O O C H 2O -C -R 1 R 2C -O -C H O
C H 2O -P -O X OH
磷脂
胆固醇
磷 脂 双 分 子 层 的 形 成
核酸的结构
5′端
NH2
3’-5’磷酸二酯键
N O H O P O CH 2 O N O OH
OH OH
核苷酸
3′端
C A G
核酸
酵母发酵过程中存在“可溶性催化剂”——酶
一、叙述生物化学阶段
时间：18世纪中叶至19世纪末 研究内容：生物体的化学组成
CHRH3
COOC +NH3
H
L-氨甘丙基氨氨酸酸酸的通式
氨基酸通过肽键形成肽（蛋白质）
血红蛋白
糖的结构
淀粉——是植物中养分的储存形式
淀粉 颗粒
糖原——是动物体内葡萄糖的储存形式
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#3 #2 #1
从两个独立的皮肤位点采血，每瓶 采集10ml 35℃ 自动化仪器中孵育5天 每天检查浊度并翻转培养瓶
18小时后传进行次代培养 当培养瓶显示细菌生长时进行 革兰染色和传代培养
革兰阳性球菌接种血 平皿＋奥普托欣试验
#6
对重要病原菌 进行鉴定 和药敏试验 例如：肺炎链球菌 革兰阴性杆菌接种血平皿和 麦康凯平皿
10
标本的处理
涂片光镜检查
诊断病原最基本和快速的方法：脑脊液 直接形态学检查 革兰染色或特殊染色
分离培养和鉴定
动物接种
免疫学检查
11
痰标本
主要病原菌：肺炎链球菌，克雷伯菌属，流感嗜血杆菌，金黄色葡萄球菌，铜绿 假单胞菌。 非病原菌：酵母菌，草绿色链球菌，凝固酶阴性葡萄球菌
病人需用水清洁口腔， 深咳肺部痰， 不要唾液 肺炎链球菌
#1
进行革兰染色以评价标本是否适于接 种。 向临床医生尽快报告重要的革兰染色 结果
#2
拒绝：大量 扁平 上皮细胞
好：很少扁平 上皮细胞 奥普托欣纸片
胆汁溶菌＋ 金黄色葡萄球菌
#3
接种巧克力平皿，血 平皿和麦康凯平皿
奥普托欣＋
#5
对重要病原菌进行 鉴定&药敏试验
肺炎克雷伯菌
#4
CO2中孵育48 小时
8
试验菌的结果报告可用MIC（ug/ml ）或
用敏感(S)、中介(I)和耐药(R)报告。
16多点接种仪Fra bibliotek试管稀释法
试管稀释法
32
16
8
4
2
1
0.5
0.25
0.125
0.06
MIC＝1ug/ml
微量稀释法
微量稀释法
128 64 A B C D E F G H 32 16 8 4 2 1 0.5 0.25 0.125 0.06
厌氧菌：API 20A
32
菌种鉴定—鉴定到种
自动细菌鉴定/药敏仪 VITEK 2 Compact BD Phoenix System MicroScan BIOMIC V3微生物鉴定系统 BIOFOSUN微生物鉴定系统 鉴定到种 葡萄球菌？ 金黄色葡萄球菌！
33
细菌鉴定和药敏试验快速化是未来的趋势
稀释法的分类
稀释法药敏试验因介质不同可分为液体稀释法和琼脂稀释法。 因容器不同分为试管稀释法和微量稀释法，或称常量法和微量。 前者使用无菌的13mm×100 mm试管，每一浓度抗菌药的量至 少为1ml； 后者使用8×12的U型底小孔的微量稀释板，小孔内装有0.1ml 肉汤。 琼脂稀释法又因在平皿中进行而称为平皿稀释法。 微量稀释法的优点为试剂材料较节省，而且微量板中可预先配制 好抗菌药和培养基，冷藏后一定时期内使用，较为方便。 与试管稀释法相比，琼脂稀释法配合多点接种器使用，可同时进 行大量菌株的药敏试验，实验结果重复性好，缺点是不能进行最 低杀菌浓度(minimal bactericidal concentration, MBC)的测定。
临床微生物学概论
（第一部分）
复旦大学附属华山医院抗生素研究所
主要内容
标本采集 细菌的分离培养和鉴定 抗菌药物敏感性试验
2
正常菌群
在正常人体体表与外界相通的腔道：口腔、鼻咽腔、肠道
、泌尿生殖道存在的多种微生物。 在机体免疫功能正常时对人体有益无害，属人类正常微生 物群或环境中通常不致病的微生物，因以细菌和真菌为主 ，故称“正常菌群”。
肺炎克雷伯菌 对1或2种 重要病原菌进行鉴定&药 敏试验
β溶血链球菌
金黄色葡萄球菌为主
混合的2种肠道革兰阴性杆菌：2种均报 告；
铜绿假单胞菌
20
血培养
主要病原菌：沙门菌、布氏杆菌、其他革兰阴性杆菌、金葡菌、肺链、流感 以下菌应视为非病原菌(除非>1次血培养分离出)： 芽孢杆菌属、凝固酶阴性葡萄球菌、草绿色链球菌、棒状革兰阳性杆菌
菌株数
累积菌株数
MIC50
MIC90
0.125
0.25 0.5
1
2 1
1
3 4
1
2 4 8
0
2 2 2
4
6 8 10
2 8
琼脂稀释法
琼脂选择法是将药物混匀于琼脂培养基 中，配制含不同浓度药物平板，使用多 点接种器接种细菌。 经孵育后观察细菌生长情况，以抑制细
菌生长的琼脂平板所含药物浓度为最低
抑菌浓度（minimal inhibitory concentration，MIC ）
40
抗菌药物敏感性试验的意义
无法推测敏感或耐药 病人个体化治疗指南 提供经验治疗的依据
建立当地或国家处方政策
监测流行病学趋势
监测细菌耐药性
测试新抗菌药物的抗菌活性 检测新耐药机制的方法
41
抗菌药物敏感性试验分类
定量方法 (MIC, mg/L) 琼脂稀释法 肉汤稀释法 E-test 定性方法 (SIR) 纸片扩散法 自动化仪器
#4
CO2中孵育 72h
#5
将重要的革 兰染色结果 尽快通知临 床医生
革兰阴性双球菌或球杆 菌接种巧克力平皿和 血平皿
例如：肺炎克雷伯菌
21
细菌的分离培养
标本类型 呼吸道标本 尿液标本 血液标本
5%脱纤维 羊血平皿 √ √（菌落计 数）
巧克力 平皿 √
中国兰 平皿 √ √
血培养瓶
厌氧 培养瓶
√
√
#1
用酒精消毒伤口周围皮肤 最好的标本是吸取物和组织 最差的标本是拭子
#2
接种血平皿和麦康凯平皿 如果是吸取物或组织，进行 革兰染色，将重要结果通知 临床医生
中孵育48小时
#3
#5
当检出3种或更多病原菌时，报告“混合菌丛” 并描述性列出假单胞菌，金葡菌，变形杆菌，肠 道革兰阴性杆菌等。
#4
正常菌群的存在是保持人体健康的重要因素
反映出在正常情况下，宿主、正常菌群和外界环境相互适 应，保持平衡状态。
3
4
病原微生物
病原微生物(pathogen)： 引起人类感染性疾病的微生物
称为病原微生物或致病微生物。
细菌：如痢疾志贺菌、肠杆菌科细菌、金黄色葡萄球菌、肠球 菌属等
病毒：如单纯疱疹病毒、巨细胞病毒、乙型肝炎病毒等
抗菌药物对细菌的最低抑菌浓度（MIC）
结果判断和报告
读取椭圆抑菌环与E试验试条的交界点刻度值
E-试验结果阅读
纸片扩散法
纸片扩散法原理
将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种 测试菌的琼脂平板上
纸片中所含的药物吸收琼脂中水分溶解 后不断向纸片周围扩散形成递减的梯度 浓度
1-2 种病原菌。>2 种视为污染 100 纯培养的肠杆菌科菌 1000 潜在病原菌 100 个所有种类的潜在病原菌 任何数量（肉汤增菌，厌氧菌） 任何酵母菌
#4
菌落计数 19
脓，吸取物或组织标本
主要病原菌：金葡菌，化脓链球菌，其他β溶血链球菌，绿脓，其他革兰阴性杆菌。 非病原菌：凝固酶阴性葡萄球菌，少量的棒状革兰阳性杆菌
#6
病人 无症状 有症状但不需 卧床 有症状，性生 活活跃的女性 男性 所有 所有 所有
尿培养的评估标准 标本类型 清洁留取或留置管留 取 清洁留取 清洁留取 清洁留取 从导尿管中直接留取 外科或膀胱吸取 有争议
#5
若 2 种菌生长，对 每种菌进行鉴定和药 敏试验； 若>2种菌生长，报 告“混合菌群” 100,000 cfu/ml
30
流感嗜血杆菌的卫星现象
31
菌种鉴定—鉴定到种
根据纯分细菌的形态、菌落特征，特征性的生化反应，选 择合适的细菌鉴定系统。
如手工的API条和半自动的ATB
肠杆菌科细菌：API 20E
非发酵革兰阴性杆菌：API 20NE 葡萄球菌属：Slidex Staph Plus、API Staph 链球菌属：Slidex Strepto Kit、API Strep 奈瑟菌属、嗜血杆菌属：API NH
流感嗜血杆菌
12
革兰染色评估呼吸道标本是否合格？
有代表性的好标本 中性粒细胞多
白细胞>25/低倍视野
鳞状上皮细胞少
＜ 10/低倍视野
13
痰标本>10鳞状上皮细胞/每低倍视野=拒收
14
尿培养
主要病原菌：大肠埃希菌，变形杆菌，克雷伯菌，其他 革兰阴性杆菌，肠球菌，腐生葡萄球菌，纯的金葡球菌
#2 接种血平皿和麦康凯平
a
b a b
皿 0.001ml接种环
#3 #1 收集中段尿 注意:
GPC
空气孵育24小时
革兰阴性杆菌在血平 皿和麦 康凯平皿上均 生长良好 革兰阳性球菌仅在血 平皿上生长良好
有意义的病原菌 100,000 CFU/ml
GNR
50,000 cfu/ml
75,000 cfu/ml
真菌：如念珠菌属、曲霉属、毛霉属以及新型隐球菌等
其他：如支原体、衣原体、螺旋体
5
临床常见的病原微生物
革兰阳性菌：
葡萄球菌、溶血性链球菌、肠球菌 需氧球菌： 脑膜炎和淋病奈瑟球菌、卡他莫拉菌 需氧杆菌： 不动杆菌、假单胞菌、产碱杆菌、嗜 血杆菌 需氧和兼性厌氧：肠杆菌科细菌如大肠杆菌、肺杆 、伤寒、志贺菌。
42
稀释法的定义