南五味子中粗多糖提取与总糖含量测定(精)
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南五味子中粗多糖提取与总糖含量测定
更新日期:2011-05-18 点击:纪耀华孙莹张晓滨韩璟辰卢志平
提要采用比色法测定南五味子粗多糖中总糖含量,南五味子粗多糖收率为9.7%,总糖含量为58.27%。
关键词南五味子;比色法;多糖;含量测定
The Collect Rate of Polysacharides and the Determinatio n of Polysacharides Content in South Wuweizi
Ji Yaohua, Sun Ying, Zhang Xiaobin, et al
Specialized Institute of Higher Learning in Medicine, Changchu n 130031
Abstract Polysacharide content in South Wuweizi is de termined by using the method of comparing colours. The collect rate of coarse Po lysacharides is 9.7%, polysacharides content is 58.27%.
Key words South Wuweizi; Method of comparing; P olysacharides; Content determination
南五味子为木兰科植物华南五味子的干燥果实。五味子是在化学、药理和临床上研究较为深入的中药之一,尤其是近几年发现五味子多糖具有保肝[1]、抗衰老、耐缺氧[2]、增强机体免疫力[3]等活性,已经引起人们的广泛兴趣和注意。为了充分利用五味子资源,本文对南五味子中多糖进行了提取和含量测定。
1 材料与仪器
1.1 材料:经鉴定为木兰科植物华南五味子Schisan dra sphenanthera Rehd et will的干燥成熟果实,购自长春市药材公司。
1.2 仪器:721型分光光度计,电光分析天平,其它试剂为分析纯。
2 方法与结果
2.1 南五味子粗多糖的提取:取生药500 g,用90%乙醇渗漉,醇提后的五味子用蒸馏水提取3次,合并提取液,浓缩至100 ml左右,加95%乙醇至含醇量为 80%,放置过夜,抽滤,依次用乙醇、丙酮、乙醚洗,挥散溶剂至干,即得南五味子粗多糖无定型粉末,收率为9.7%。
2.2 标准曲线的制备
据报道五味子总多糖是由七种以上单糖组成的杂多糖的混合物[4]。因此本实验是以与总多糖组分相似的干燥至恒重的标准单糖混合物为标准品,精密称定,用蒸馏水溶解定容,使其浓度为101.00 μg/ml的标准溶液。
精密吸取标准溶液10,20,40,60,80,100 μl,分别置于具塞试管中,各加蒸馏水使体积为2.0 ml,再各加苯酚试液1.0 ml,摇匀,迅速滴加浓硫酸5.0 ml,摇匀后放置5 min,置水浴上加热15 min,取出冷却至室温,另以蒸馏水2 ml,加苯酚和浓硫酸,同上操作为空白对照。于490 nm处测定吸收度,绘制标准曲线,建立回归方程: A=0. 005584 W-0.005400,
γ=0.9989。
2.3 南五味子粗多糖中总糖的含量测定:精密称取干燥至恒重的南五味子粗多糖约 2.5 mg(3份),用蒸馏水溶解,并稀释至刻度,使其浓度约为100 μg/ml的样品液,按标准曲线项下方法测定吸收度,依回归方程求得南五味子粗多糖中总糖平均含量为58.27%, RSD 为1.57%,n=3。
2.4 回收率试验:精密吸取样品液0.5 ml(5份),再分别精密加入浓度不同的标准溶液0.5 ml,依样品测定方法测定吸收度,计算回收率平均值为101.51%, RSD=1.46%,n=5。
2.5 精密度试验:同批南五味子样品,重复测定5次,RSD=1.21%,n=5。
3 小结与讨论
3.1 实验结果表明,南五味子粗多糖的含量略高于北五味子(7% )[4],说明药材中多糖的含量与产地及生长环境有关。同时,也说明南五味子在多糖的开发利用上颇具前景。
3.2 硫酸-苯酚法测定多糖,方法简便易行,重现性好。
作者简介:纪耀华:女,1961年生,讲师,学士
作者单位:纪耀华孙莹张晓滨:长春医学高等专科学校,长春130031;韩璟辰:长春市绿园区中医院130062
卢志平:东北师范大学,长春130024
参考文献
1 睢大,高普军,吕忠智,等.北五味子保肝作用的药理研究.吉林中医药,199 5(1)∶37
2 李巧如.五味子药理作用的研究进展.西北药学杂志,1995,10(1)∶46~50
3 李岩,曲绍春,张明淑.北五味子粗多糖对环磷酰胺所致小鼠免疫功能低下的保护作用 .白求恩医科大学学报,1995,21(6)∶583~585
4 徐世忱,李广全,孙莹.北五味子粗多糖的提取与成分分析.吉林医药工业,1992,(4) ∶15~18