遗传学实验复习资料

1.什么是减数分裂?主要有哪些特征?

减数分裂是一种特殊方式的细胞分裂,仅在配子形成过程中发生。这一过程的特点是:连续进行两次核分裂,而染色体只复制一次,结果形成四个核,每个核只含单倍数的染色体,即染色体数减

少一半,所以称作减数分裂。另一个特点是前期特别长,而且变化复杂,包括同源染色体的配对、交换与分离等。

2.在哪些器官中可以观察到减数分裂?其中哪些是理想的实验材料?

在适当的时期采集植物的花蕾或动物的精巢。蚕豆花蕾,短脚斑腿蝗精巢。

3.在减数分裂制片时,选择合适的时期尤为重要,以蚕豆花蕾为例说明选择过程。

1)取已固定好的花序,按其花蕾大小,排列在小培养皿中2)拨开花蕾,先取中等大小的花蕾,取出花药,放在载玻片上3)加一滴醋酸洋红在花药上,用镊子夹碎花药壁,散出花粉母细胞4)加盖玻片,吸干周围染色液,用拇指适力下压5)镜检

4.在植物体的哪些部分可以观察到有丝分裂?其中哪些是制片比较理想的实验材料?

高等植物体细胞的有丝分裂,主要发生在茎尖、根尖、形成层等分生组织。洋葱根尖,蚕豆根尖。

5.什么是固定?我们所做的实验中,最常用的固定剂成分是什么?

固定是利用化学或物理的方法,使固定剂迅速透入组织和细胞,将其杀死,使蛋白质等物质变性,但在形态结构上尽量保持原来活着时的完整和真实状态,如细胞内染色体的分裂形态。同时固定更易于染色,可以较清楚的显现细胞在生活时不易看清的结构。

卡诺固定液:3份无水乙醇,1份冰醋酸(现配现用)。

6.植物根尖染色体制片中,预处理的方法有哪些?作用是什么?

冰冻预处理,药物预处理。对标本进行预处理,固定染色体,使其停留在某一时期便于观察。

药剂处理:可以用作染色体预处理的化学药品,主要有生物碱、甙类、酸类及其他物质;最常用的化学药品有秋水仙素、8-羟基喹啉及对二氯苯。

其作用是:①阻止或破坏纺垂体微管的形成,由于没有纺垂体的作用,细胞有丝分裂过程,被阻

抑在细胞分裂中期阶段,从而累计比较多的处于细胞分裂中期的染色体图象。②促进染色体浓缩变短,减少染色体之间相互缠绕重叠,有利染色体的高度分散。③改变胞质粘度,促进染色体清晰,促进细胞质清洁。

7.植物根尖的解离主要有哪两种方法?简述其主要程序。

酸水解:一般采用盐酸解离。用盐酸解离因材料不用而不同。洋葱根尖用0.1mol/L盐酸在60°C 下处理8min,蚕豆根尖用上述浓度温度时间延长15min。之后用70%酒精清洗几次,把残留的酸洗掉以免影响染色体着色。

酶处理:将固定的洋葱根尖用0.1mol/L的醋酸钠洗2次,然后放入酶液中(2%果胶酶和1%纤维素酶等量混合),在25°C恒温箱中处理1.5-2.5h,此时根尖较柔软,将根尖取出,用0.1mol/L醋酸钠洗2次,再放入60°C0.1mol/L盐酸溶液中水解2min。最后用45%醋酸钠清洗根尖。

8.植物根尖压片过程要注意哪些方面?

取一染色的根尖臵于载玻片中央,用吸水纸洗去多余的溶液,加1滴新鲜的染液,盖上盖玻片后,在盖玻片上盖上一些吸水纸,应以左手的拇指和中指固定盖片的位臵,用铅笔或橡皮轻轻敲打,使细胞核染色体均匀分散。

9.植物根尖的解离有何目的?酸解离有何优点?

目的是使分生组织细胞之间的果胶质层水解掉,并使细胞壁软化,便于压片. 酸解离优点是较酶水解速度快,强度大,但用酸处理后,必须要用70%酒精清洗,把残留的酸洗掉,以免影响染色体着色。

10.低渗处理的作用是什么?试说明这种处理的关键步骤。

使红细胞解体,白细胞膨胀,染色体分散。

取5ML 37°C低温的0.075M KCl溶液加入离心管中,用滴管轻轻冲打成细胞悬液,放入37°C 温箱中静臵20min。

11.果蝇唾腺染色体有哪些形态特征?

果蝇唾腺染色体比果蝇的其他体细胞染色体要长100-200倍,体积大上千倍,故有称巨大染色体。所有染色体的着丝点聚集在一起形成染色中心,因此唾腺染色体不但能进行配对,且所有染色体的着丝点聚集在一起形成染色中心,因此唾腺细胞染色体形态不是8条个别染色体,而是由染色中心向空间伸展的5条长臂和1条短臂构成。还表现出有明显的横纹,数目和空间排列是恒定的,代表着一些基因的位臵,具有种的特异性。

12.果蝇杂交试验中,亲本为何要用处女蝇?如何收集?

只有亲本是处女蝇才能保证雌蝇的生殖器里无精子,若非处女蝇则可能使果蝇后代不是所用雄蝇交配得来的。

一般来说,刚羽化出来的果蝇在12小时之内是不进行交配的,所以这段时间内选出的雌蝇即为处女蝇。为保险起见,可在羽化后10h内挑选。

13.秋水仙素处理为何可以诱发多倍体的形成?

秋水仙素的诱导作用在于阻止有丝分裂细胞纺锤丝的形成,但对染色体的结构和复制无显著影响。若浓度适合,药剂在细胞中扩散后,不致发生严重的毒害,这样纵裂为二的染色体不能向两极分开,因而便产生了染色体加倍的核。当药剂作用消除后,由于多倍体细胞继续分裂,便得到多倍体组织,以后则产生新的多倍体植株。

14.扼要叙述空气干燥法制片的步骤。

滴片后,不加热或任何处理,使载片在室温下自然干燥的方法。收集细胞—细胞经秋水仙素处理—低渗处理—离心—充分固定—滴片。(用吸管吸取细胞悬液自1m高处滴在冰冻的载玻片上,一片1-3滴,晾干,收存)

15.可用于常规核型分析的中期分裂相要具备哪些因素?

染色体清晰,数目为46条,大小合适,分散度合适,背景干净

16.人体外周血淋巴细胞培养中,植物血球凝集素(PHA)、秋水仙素、肝素钠和双抗分别有何作用?

外周血淋巴细胞是不能增殖的分化细胞群,在体外无菌培养条件下,若于培养基中植物凝集素(PHA)则可刺激处G。期的淋巴细胞转化为淋巴母细胞,重新有丝分裂的能力,经一段时间的培养即可获得大量分裂期细胞以供染色体分析。

秋水仙素(或秋水酰胺)可通过干扰微管组装而抑制纺锤丝形成,使细胞分裂顺利进入后期而停滞于中期,从而可在短期内积累大量最适于进行染色体分裂中期分裂相。此外,秋水仙素还能使染色单体缩短、分开,使染色体呈现明显形而利于辨认。

肝素,主要起抗凝血作用

双抗,为防止培养时期细菌的污染

17.果蝇雌雄(成虫期)鉴别最主要或最准确的方法是什么?

最准确的是看性梳,性梳是雄果蝇的第二性征,雄果蝇的第一对前足的第一个跗节上,因形状与梳头的梳子非常相似,又与性别有关而得名。雌果蝇没有这个结构。但是性梳这一性状需要借助显微镜观察。

除了性梳之外,还有一些其它性状都可以用肉眼直接观察。具体如下:

雄蝇,个体较小,腹部条纹3(腹片4片),腹部末端圆钝,颜色深。

雌蝇,个体较大,腹部条纹5(腹片6片),腹部末端尖,颜色浅。

18.本学期我们做了哪些遗传学实验?通过这些实验你了解和掌握了哪些生物学基本实验技能?

本学期一共做了六次遗传学实验分别是: