大豆异黄酮

大豆副产物的抗氧化能力、酚类及大豆异黄酮的研究

Tan Seok Tyug a, K. Nagendra Prasad a, Amin Ismail a,b,*

摘要：

这篇文章旨在确定大豆副产品一般成分及其抗氧化能力，总酚含量，异黄酮和自由酚类化合物。与B级豆浆粉（GBSP）和大豆壳粉（SHP）相比，A级豆浆粉（GASP）中碳水化合物和蛋白质含量较高。据报道，大豆壳中的灰分，水分与总膳食纤维含量最高，而GBSP脂肪含量最高。据β-胡萝卜素脱色法推测出的几种物质的抗氧化能力顺序为SHP≈GBSP>GASP, Trolox等效抗氧化能力顺序为GASP≈GBSP>SHP，铁还原抗氧化能力顺序为GASP>GBSP>SHP。实验测定出总酚含量在

62.44-103.86毫克GAE/100克湿重范围，并且以自由形式存在的主要酚类化合物为阿魏酸，香草酸和没食子酸。利用酸水解能够增加所有大豆样品中提取出异黄酮的总量。

1、前言

抗氧化剂是加入到油脂或含油食物中后，可以通过延缓油脂氧化延长其货架期的化合物。人造抗氧化剂，如丁基羟基茴香醚（BHA）和二叔丁基对甲酚（BHT）在食品中的使用受到限制，因为它们可能会导致癌症（Namiki, 1990）。因此，近年来从加工副产物中提取天然抗氧化剂的受到越来越多的重视。它的吸引力在于其低廉的成本，以及广泛地原料来源，如外皮擦伤的原料等（Kong, Amin, Tan, & Rajab, 2010）。副产物中的有益成分来源于多种多样的酚类化合物（Amin & Mukhrizah, 2006）。这些酚类化合物包括酚酸、花青素、黄酮类化合物以及氢化桂皮酸衍生物。

大豆（Glycine max L.）是世界范围内消费最广的豆类食品，年均产量200万吨（FAO, 2006）。在亚洲国家，大豆被加工成各种产品，如豆浆粉，豆浆，豆腐，酱油，豆粉，豆油和豆豉。通常，大豆加工成豆浆粉主要包括三个主要步骤。首先，将大豆浸泡在水中以去除不适合食用的大豆皮。然而，这可能引出了大豆加工行业的主要处理问题，因为大皮壳约占整个大豆的8％

(Mateos-Aparicio, Redondo Cuenca, Villanueva-Suarez, & Zapata-Revilla, 2008)。大豆去皮后，将其烘干、研磨、过筛然后成浆煮熟。最后，将熟浆真空干燥即获得了A级豆浆粉。在正常情况下，在A级豆浆粉生产过程中产生的废物将被丢弃或用作动物饲料。然而，在马来西亚，废物被加工成质量第一级的粉末，称为B级豆浆粉（GBSP）。

以前的研究说明，大豆中富含大豆异黄酮和酚类化合物。大豆中含有的异黄酮主要为染料木苷和大豆苷，而主要的酚类化合物为丁香酸，绿原酸，没食子，阿魏酸（Kim et al., 2006）。迄今为止，几乎没有研究是从大豆副产物的的一般成分，抗氧化能力，酚类化合物和异黄酮物质的角度进行的。因此，本研究的目的是对大豆副产品的潜在利用进行探索并希望将其发展为营养保健品的配方成分。

2、材料和方法

2.1. 化学药品

分析纯和高效液相色谱级的溶剂，购买于Fisher Scientific (Loughborough, UK)；

高效液相色谱级 (大豆苷元，染料木素，绿原酸，丁香酸，阿魏酸，香荚兰酸，没食子酸)；总

膳食纤维检测试剂盒，β-胡萝卜素，亚油酸，吐温20，二丁基羟基甲苯(BHT)，Trolox，过硫酸钾，碳酸钠（Na2CO3），亚硝酸钠（NaNO2），六水合氯化铝（AlCl3∙6H2O），氢氧化钠(NaOH)，购买于Sigma Chemical Co (St. Louis, MO, USA)。2 ,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS) 购买于Merck (Darmstadt, Germany)。

2.2. 样品的制备

A级豆浆粉(GASP),B级豆浆粉(GBSP) 和大豆壳粉由Brilliant Point Sdn. Bhd, Kuala Lumpur, Malaysia提供。大豆壳用湿性搅拌机研磨成细小颗粒(MX-291 N, National, Osaka, Japan)。The ground soy husk was then passed through a 0.05 lm sieve, and the filtrate obtained was considered soy husk powder (SHP). 经研磨的大豆壳接着经过0.05μm的筛，过筛的粉末就是大豆壳粉（SHP）。

2.3. 近似分析

实验利用AOAC（1990）标准来衡量GASP、GBSP和SHP的水分和灰分含量，利用西格玛化工有

限公司（St. Louis, MO, USA）商业化检测试剂盒分析总膳食纤维，利用Clegg Anthrone法（Clegg, 1955）测定有效总糖含量，利用索氏提取和凯氏定氮法分别测定样品中脂肪和蛋白质含量(Tee, Rajam, Young, Khor, & Zakiyah, 1996)。

2.4.萃取物的准备

大豆粉是用70％（v/v）乙醇以1:25（g/v）的比率提取的，并在轨道摇床上（Unimax 1010, Heidolph Instruments GmbH & Co. KG, Germany）上以200rpm的在50℃下震荡2小时。提取之后，用将混合物用Whatman542号滤纸过滤纸，通过滤纸的部分在-20℃下保存用于分析。

2.5. 总酚含量的测定(TPC)

总酚含量测定用的是Velioglu, Mazza, Gao, and Oomah (1998)的方法，并对其方法稍作修改。首先，向0.2 ml样品提取液中加入约1.5 ml Folin–Ciocalteau试剂，并可以将混合物在室温下放置5分钟。然后，向混合物中加入1.5ml碳酸钠溶液（0.566 M），并在室温下放置90分钟。最后用分光光度计在725nm对其进行吸光度测量（Anthelie Junior Advanced 5 nm, Prim, SECOMAM, France），结果分别表示为每100克湿重没食子酸的当量。