生物选修3知识点整理 ppt课件
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胚胎细胞核移植 体细胞核移植(卵母细胞:减二中期)
(三)动物细胞融合 1、诱导方法:聚乙二醇、电激、灭活的病毒 2、原理:细胞膜的流动性 (四)单克隆抗体 1、原理:免疫原理、动物细胞融合、动物细胞培养 2、 细胞类型(5种)、融合的细胞类型(3种) 3、杂交瘤细胞的特点:无限增殖、产生单一抗体 4、优点:特异性强、灵敏度高、产量大 5、应用:诊断试剂、 治疗疾病和运载药物(生物导弹)
DNA聚合酶 (3)人工合成(基因较小) 化学合成:DNA合成仪(已知序列) 反转录法:未知序列
Ⅱ构建表达载体(核心):
目的基因、启动子、终止子、标记基因
Ⅲ导入受体细胞
(1)植物细胞 农杆菌转化法:双子叶植物、裸子植物的体细胞或受精卵 基因枪法 花粉管通道法 (2)动物细胞:显微注射技术 受体细胞:受精卵(a含有目的基因表达所需的物质;b具有全能性) (3)微生物细胞:原核生物(繁殖快、多为单细胞、遗传物质相 对较少)作为受体细胞 大肠杆菌:Ca2+处理细胞(感受态细胞)
效率低
3.运载体
(1)作用: ①作为运载工具,将目的基因转移到宿主细胞内。 ②利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。 (2)种类:质粒、λ噬菌体的衍生物和动植物病毒等。 (3)条件: ①有一个或多个限制酶切位点 ②能自我复制 ③有标记基因 (4)一般来说,天然载体往往不能满足人类的所有要 求,因此在基因工程中,对某些天然的载体进行人工改 造。
固体培养基
激素:生长素、细胞分裂素(也有赤霉素)
生长素含量>细胞分裂素:诱导脱分化和根原基形成
生长素含量<细胞分裂素:诱导再分化和芽原基形成 注:愈伤组织之后需要给予光照条件
原理:植物细胞的全能性
生殖方式:无性生殖
2.植物体细胞杂交技术
去除细胞壁的方法:酶解法(纤维素酶和果胶酶)
物理法:离心、振动和电激
13.工程菌 第一种基因工程药物---重组人胰岛素 细胞因子、抗体、疫苗、激素等。 我国生产:白细胞介素-2、干扰素(糖蛋白,为我国第一个批量生 产的药物)、乙肝疫苗 14.体外基因治疗和体内基因治疗:都处于初期临床试验阶段
15.基因工程是在两个物种间转移基因,克服了两个物种间由于 生殖隔离不能进行基因交流的障碍,能定向培育生物新品种。
4.基因工程中形成的重组DNA是DNA分子片段的连接, 而不是合成DNA分子或转录合成mRNA的过程
5.DNA连接酶:不需要模板
DNA聚合酶:需要模板 DNA复制时 6.基因操作程序:
都形成磷酸二脂键
Ⅰ获取目的基因
Ⅱ构建表达载体(核心)
Ⅲ导入受体细胞
Ⅳ目的基因的检测与鉴定
Ⅰ获得目的基因
(1)基因组文库(所有的) 部分基因文库(部分的),如cDNA文库 (2)PCR技术扩增目的基因 原理:DNA复制 指数方式增加 需要:模板DNA,原料(游离的四种脱氧核苷酸),引物,
9.杀虫的基因:Bt毒蛋白基因(我国转基因抗虫棉)、蛋白酶 抑制剂基因、淀粉酶抑制剂基因、植物凝集素基因
10.病原微生物:病毒、真菌、细菌等。
11.转基因玉米:赖氨酸含量比对照提高30% 12.动物基因工程: 导入生长素基因---提高生长速度 导入肠乳糖酶基因---改善畜产品品质 生产药物---乳腺生物反应器或乳房生物反应器 优点:易提取、产量高、质量好、成本低 转基因动物作器官移植的供体 优点:抑制抗原基因的表达、或除去抗原决定的基因、无免疫 排斥反应
16.基因重组:1)有性生殖时:非等位基因的重新组合 2)DNA的拼接技术---基因工程
17.基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质 18.蛋白质工程:第二代基因工程 基因修饰或基因合成
第二章 细胞工程
一、植物细胞工程
1.植物的组织培养
脱分化
再分化
离体的组织、器官或细胞
愈伤组织
植物体
外植体
营养:蔗糖、矿质元素(无机盐)
动物细胞培养
原理
细胞增殖
目的
获得细胞或细 胞分泌蛋白
结果
获取大量细胞或细 胞产物
培养液成分
无机盐、维生素、激 素、氨基酸、核苷酸、 葡萄糖、 血清
液体培养基
植物组织培养 细胞全能性 脱毒植株、微型繁殖、人工种子
获得新植株
蔗糖、矿质元素、维生素、 植物激素、有机添加剂 固体培养基
(二)动物体细胞核移植技术 原理:动物细胞核的全能性
Ⅳ目的基因的检测与鉴定
1)检测:DNA分子杂交技术(原理:碱基互补配对) ①目的基因作探针 ②转录出mRNA③翻译成蛋白质:抗原抗体杂交 2)鉴定:个体生物学水平
7.逆转录形成的目的基因不含内含子 原因:mRNA形成时切掉了内含子转录的RNA 内含子:能转录不能翻译 外显子:能转录能翻译 真核生物基因编码区:内含子和外显子 原核和真核生物的非编码区:对遗传起调控作用(启动子 和终止子) 8.植物基因工程技术 ①提高农作物的抗逆能力 ②改良农作物的品质 ③利用植物生产药物
选修三重要知识点整理
第一章 基因工程
1.限制性核酸内切酶(限制酶)
主要从原核生物(用于切割外源DNA,保护自身)中分离纯化出来, 识别序列由6个核苷酸(或4、5、8个)组成。
末端种类:平末端和黏性末端
2.DNA连接酶
①E·coli DNA 连接酶来 作源 用特 :点 大肠:只 杆菌 连接黏性末端 ②T4DNA 连接酶来作源用:特点 T4噬:菌连体接黏性末端和平末端
(4)单倍体育种
(5)细胞产物的工厂化生产 例如:从愈伤组织中提取紫草素
二、动物细胞工程 (一)动物细胞培养
胰蛋白酶或胶原蛋白酶 1、过程:原代培养 幼龄动物的组织块
分散成单
个细胞
细胞悬液
细胞贴壁
胰蛋白酶或胶原蛋白酶 接触抑制
传代培养 10代以内,保持正常的二倍体核型
2、原理:细胞的增殖
百度文库
3、动物细胞培养条件: ①无菌、无毒 ②营养:糖、氨基酸、促生长因子、 无机盐、微量元素、动物血清(液体培养基) ③温度和PH ④ 气体环境(CO2、O2 )
诱导原生质体融合的方法: 化学法:聚乙二醇(PEG)
杂种细胞形成的标志:生成新的细胞壁 植物体细胞杂交的原理:细胞膜的流动性、植物细胞的全能性 意义:克服不同物种远缘杂交的障碍
3 植物细胞工程的应用 (1)微型繁殖 意义:保持亲本优良性状、快速繁殖 (2)作物脱毒 取材部位:茎尖、根尖(分生区) (3)人工种子:由胚状体和人工种皮(营养物质、杀菌剂)