细菌菌落总数检测常见误差原因分析讲课稿
食品中菌落总数的测定和不确定度分析
食品中菌落总数的测定和不确定度分析一、实验目的1.了解细菌在食品中的分布情况，掌握食品中菌落总数的测定方法；2.学习不确定度分析的基本原理和计算方法。
二、实验原理菌落总数是一个评估食品卫生状况的指标，可通过细菌在富养基上形成的可见菌落数来间接反映食品中细菌的总数。
菌落总数的测定方法主要包括表面菌落数和悬浮菌落数两种。
1.表面菌落数测定将待测食品取适量均匀涂布在含有富养基的琼脂平板上，经过一段时间后，培养基上出现的可见菌落即为表面菌落，通过计算菌落的数量可以得到菌落总数的测定结果。
2.悬浮菌落数测定将待测食品样品进行均质化处理，然后以一定比例取样，将取样液经过一系列稀释操作后，滴加在琼脂平板上，在适宜条件下进行培养，计算悬浮液中的菌落数量，以此推算原液中的菌落总数。
实验中使用的琼脂平板是一种可与菌落直接接触的透明胶状物质，其中含有滋养菌繁殖所需的成分，利于菌落的生长。
三、实验步骤1.取适量待测食品样品，进行均质化处理。
2.取一定量的琼脂平板，倒置于平顶培养皿中。
3.将待测食品样品均匀涂布在琼脂平板上，覆盖培养皿。
4.将培养皿以适当角度倒置，放入恒温箱中，在适宜温度下进行培养。
5.培养一段时间后，取出培养皿，观察并计算菌落总数。
四、实验注意事项1.操作过程中要注意最小化空气扰动和污染，避免细菌交叉感染。
2.在涂布琼脂平板时要注意均匀性，以避免过度或不足的涂布导致结果偏差。
3.培养过程中要控制好温度和时间，以保证菌落生长的适宜条件。
五、不确定度分析不确定度是指测量结果与所测量值的真实值之间的差异。
在菌落总数的测定中，存在多种不确定因素，如操作误差、环境条件、样品质量等。
进行不确定度分析是保证实验结果准确性的重要步骤。
不确定度的计算可以采用均匀型高斯不确定度扩展法。
首先根据实验数据计算菌落总数的平均值和标准偏差，然后根据高斯分布的原理，计算95%的置信区间。
通过比较置信区间和数据范围，评估实验结果的可信度。
微生物检测结果不准确原因分析
微生物检测结果不准确原因分析生物检测结果不准确，该从哪些方面找原因？对一个实验员来说最严重的投诉莫过于实验结果不准确。
当出现检测结果不准确时，可能的原因会有很多，千头万绪，如何剥茧抽丝，找到真正的原因，运用过程分析方法，分为8个方面去找原因。
一、实验过程我们可以将所有实验过程归纳为下面8个过程1：抽样过程2：样品制备过程3：有证标准物质对测试系统的影响4：仪器的校准过程5：分析（数据采集）过程6：数据处理过程7：结果的表达8：结果的解释二、8个实验过程具体原因分析1、抽样过程：－均匀性－具体的抽样策略的影响（例如，随机抽样、分层随机抽样、比例抽样等）－媒介移动的影响（尤其是密度选择）－媒介的物理状态（固体、液体、气体）－温度和压力影响－抽样过程是否影响组成？例如，在抽样系统中的差色吸附。
2、样品制备过程－均匀性和/或二级抽样的影响－干燥－碾磨－溶解－萃取－污染－衍生（化学或者物理的影响）－稀释误差－（预）浓缩－物种形成影响的控制3、有证标准物质对测量系统的影响－有证标准物质的不确定度－有证标准物质是否与样品匹配4、仪器的校准过程－使用有证标准物质的仪器校准误差－标准物质及其不确定度－校准用的物质是否与样品匹配－仪器的精密度5、分析过程－自动分析仪的进位－操作者的影响，例如色盲、视差、其他系统误差－基体、试剂或其他被分析物的干扰－试剂的纯度－仪器参数的设置，例如积分参数－重复性实验的精密度6、数据处理过程－平均－修约的控制－统计－运算法则（模型拟合，例如线性最小二乘法）7、结果的表达－最终结果－不确定度的估计－置信水平8、结果解释－对照限值/范围－法规的符合性－目的的适用性。
菌落总数不合格
菌落总数不合格菌落总数不合格是指在一定的培养条件下，菌落形成的数量超出了规定的标准。
分析菌落总数不合格的原因，可以从以下几个方面进行讨论：菌落的定义与计数方法、菌落总数的重要性、造成菌落总数不合格的原因、以及解决菌落总数不合格的方法。
下面将依次展开论述。
菌落是细菌在寒天培养基或琼脂培养基上形成的可见的单个或成片的生长。
菌落的计数方法通常使用平板计数法，即将涂有菌落的琼脂培养皿放在特定条件下培养一定时间，然后使用菌落计数器或显微镜进行计数。
菌落的形成与数量，可以反映出样品中的微生物总量及其中的污染情况。
菌落总数的合格性对于食品加工、卫生监督和生物实验等领域是至关重要的。
菌落总数的不合格可能代表着食品的品质低下，卫生条件差或实验过程出现污染。
因此，对于控制菌落总数并保持其合格性，具有重要的理论和现实意义。
然后，造成菌落总数不合格的原因可以从多个方面进行分析。
首先，可能是样品本身存在大量的菌落，比如在食品样品中，如果原材料或加工过程中存在不洁净的环境，就会导致样品中细菌数量较高。
其次，可能是培养基或菌落计数的操作过程不规范，比如培养基的制备不当，温度或湿度不适宜等都会影响菌落数量的形成和计数的准确性。
最后，也可能是实验室设备不干净或操作人员操作不规范，导致实验样品受到污染，从而影响菌落总数的合格性。
解决菌落总数不合格的方法可以从多个方面进行改进。
首先，应该加强生产过程中的卫生监控，确保原材料和生产环境的洁净。
其次，需要对实验过程进行严格的质量控制，包括培养基的制备，操作流程的规范化，设备的清洁与消毒等。
并且，应该加强操作人员的培训，提高其对菌落计数操作的熟练程度。
最后，对于不合格的菌落总数，必须采取及时有效的纠正措施，包括重新取样检测，追踪问题的原因，并采取相应的改进措施。
综上所述，菌落总数不合格对于食品卫生和实验过程的质量控制具有重要意义。
在解决菌落总数不合格的问题时，应该注重培养基和操作流程的规范，以及对样品的洁净和操作人员的熟练程度的要求。
菌落总数人员比对的允许误差-概述说明以及解释
菌落总数人员比对的允许误差-概述说明以及解释1.引言1.1 概述概述部分的内容可以根据以下模板进行撰写：概述部分应该从一个广阔的角度介绍研究的背景和目的。
它可以回答一些关键问题，如为什么该研究很重要、领域内的现有研究状况以及本研究的研究对象和目标。
在菌落总数人员比对的允许误差的长文中，概述部分可以按照以下内容进行撰写：引言部分：介绍菌落总数人员比对的背景和相关重要性，概述该研究的研究对象和目标。
首先，就菌落总数人员比对的背景来说，它是一种用于确定食品和环境中微生物菌落总数的常用方法。
通过测定菌落总数，我们可以对食品中是否存在微生物污染进行评估，从而保证食品的安全性。
而菌落总数人员比对则是指对不同的人员在同一实验条件下进行菌落总数测试，并对测试结果进行比对和分析。
这项工作的目的是为了评估不同人员在测试菌落总数时所存在的差异，进一步确保菌落总数的测试结果的准确性和可靠性。
其次，对于菌落总数人员比对的允许误差，它是指人员之间在测试菌落总数时存在的可接受的误差范围。
由于每个人在实验操作、观察判断以及数据记录等方面存在个体差异，因此在进行菌落总数人员比对时需要考虑这些误差因素。
因此，本文旨在对菌落总数人员比对的允许误差进行深入研究和分析，探讨不同人员之间的差异性以及其对菌落总数测试结果的影响。
通过建立合理的允许误差标准，可以帮助实验室和检测机构更好地评估和控制菌落总数测试的准确性，提高食品安全和环境卫生的监测能力。
综上所述，本篇长文旨在探讨菌落总数人员比对的允许误差，旨在为菌落总数测试提供更科学的依据，并为检测实验室的质量控制提供参考，进一步提高菌落总数测试的准确性和可靠性。
在接下来的章节中，我们将详细论述菌落总数人员比对的意义和允许误差的定义及其重要性。
1.2文章结构1.2 文章结构本文主要分为以下几个部分：1. 引言：介绍本文的背景和重要性，概述菌落总数人员比对的意义以及允许误差的定义和重要性。
2. 正文：2.1 菌落总数人员比对的意义：详细阐述菌落总数人员比对在何种情况下具有重要意义，例如在食品加工、医疗卫生领域中的应用，以及对研究、监控和质量控制的作用。
食品中菌落总数的测定和不确定度分析
食品中菌落总数的测定和不确定度分析1. 引言1.1 研究背景食品中菌落总数的测定和不确定度分析是食品质量安全管理中重要的内容。
菌落总数是指食品中菌落形成的总数量，是评价食品卫生质量的一个重要指标。
菌落总数的测定可以反映食品的卫生状况和是否受到了细菌的污染。
在食品加工和保存过程中，细菌的增殖和污染是不可避免的，因此及时准确地测定菌落总数对保障食品安全至关重要。
随着人们生活水平的提高，对食品安全的关注度也越来越高，食品生产企业和监管部门对食品中菌落总数的测定更加重视。
开展菌落总数的测定和不确定度分析研究具有重要的理论和实践意义。
通过深入研究测定方法和不确定度分析方法，可以为食品行业的食品质量检测提供科学依据，提高食品安全管理水平。
对实验步骤、结果分析和讨论的详细研究也有利于进一步完善食品安全监测体系，保障人民群众的身体健康。
【研究背景】部分到此结束。
1.2 研究目的本研究的目的是通过对食品中菌落总数的测定和不确定度分析，探讨食品卫生安全的相关问题。
菌落总数是衡量食品中微生物污染程度的重要指标，对食品的质量和安全具有重要意义。
目前，随着人们对食品安全的要求越来越高，对菌落总数的准确测定和不确定度分析成为食品行业的一项重要工作。
本研究旨在探讨不同测定方法和不确定度分析方法对菌落总数测定结果的影响，为提高食品质量和保障食品安全提供科学依据。
通过本研究，我们希望进一步加深对食品中微生物污染的认识，为食品行业的监管和管理提供参考依据，促进食品行业的健康发展和消费者的健康权益保障。
通过本研究，我们也希望能够为食品安全领域的研究工作提供新的思路和方法，为食品安全的提升和保障做出贡献。
2. 正文2.1 菌落总数的测定方法菌落总数的测定方法是食品微生物学中非常重要的一个指标，通过菌落总数的测定可以评估食品是否受到微生物污染，从而判断食品的卫生质量和安全性。
以下是一些常用的菌落总数测定方法：1.平板计数法：将样品在适当的培养基上平铺均匀，经过一定的培养时间后，用放大镜或显微镜观察样品上的菌落，再进行计数，以确定菌落总数。
对细菌总数结果出现异常现象的原因分析
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对细菌总数结果出现异常现象的原因分析
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细菌菌落数检测常见误差原因分析及控制
细菌菌落数检测常见误差原因分析及控制
遇婷;邓溪文;刘录春
【期刊名称】《职业与健康》
【年(卷),期】2008(24)24
【总页数】2页(P2673-2674)
【关键词】细菌菌落数;检测;误差;原因;控制
【作者】遇婷;邓溪文;刘录春
【作者单位】辽宁省鞍山钢铁集团公司卫生防疫站
【正文语种】中文
【中图分类】R446.5
【相关文献】
1.ATP生物荧光法检测细菌的准确性及菌落数的相关性 [J], 李璇; 何佩霞; 邰苏豫
2.超声洁治时口腔诊室空气中细菌菌落数的检测分析 [J], 徐雄均;陈晓川;陈琼玉;袁佳
3.菌落数检测的误差及其控制 [J], 胡巅;高葆真;张濛;张秀丽;廖兴广;炊惠霞
4.细菌菌落总数检测常见误差原因分析 [J], 孙笑非;李超
5.牛冷冻精液细菌菌落数检测 [J], 陆汉希
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食品中菌落总数的测定和不确定度分析
食品中菌落总数的测定和不确定度分析一、引言食品安全是人们关注的重点问题之一，而食品中的微生物污染更是引起广泛关注的话题。
菌落总数是一种常见的微生物指标，用于反映食品中细菌、酵母菌和霉菌的数量和品质，是评价食品卫生质量的重要指标之一。
食品中菌落总数的测定和不确定度分析显得格外重要。
二、菌落总数的测定方法菌落总数的测定方法一般采用霉菌总数计数法或者菌落总数计数法。
下面以菌落总数计数法为例，介绍菌落总数的测定方法。
1. 样品制备首先需要准备好待测样品，这里以蔬菜为例。
将蔬菜样品洗净并切碎，然后取适量样品加入适量生理盐水中，进行样品的制备。
2. 稀释根据样品的预期菌落总数选择适宜的稀释倍数，将样品进行适当的稀释，以便于后续操作。
3. 菌落计数培养基将稀释后的样品平铺在含有琼脂的培养基上，然后放置在适宜的温度和湿度条件下进行培养，产生菌落。
4. 菌落总数的计数培养一定时间后，观察菌落的形态，进行计数并计算出样品的菌落总数。
三、菌落总数的不确定度分析不确定度是指在一定测量条件下，由于一系列测量误差和环境条件等因素引起的测量结果的不确定性。
菌落总数的测定同样受到不确定度的影响，因此需要进行不确定度分析。
1. 实验误差在菌落总数的测定中，包括样品制备、稀释、计数等环节都存在测量误差。
样品制备过程中的称量误差，培养基制备过程中的体积误差等都会引起测定结果的不确定性。
2. 环境条件菌落总数的测定过程中，温度、湿度、光照等环境条件的变化都会对测定结果产生影响，因此需要对这些因素进行控制和修正。
四、不确定度的计算菌落总数的不确定度可以通过以下步骤进行计算：1. 确定测定方法的不确定度根据实验数据和测定方法的特点，确定测定方法的不确定度。
这个过程需要考虑到实际测定过程中的各种误差和环境因素对测定结果的影响。
2. 计算出测定结果的标准偏差根据测定方法的不确定度和实验数据，可以计算出测定结果的标准偏差，从而确定实验数据的不确定度。
影响微生物菌落总数测定准确度相关因素探讨
影响微生物菌落总数测定准确度相关因素探讨摘要：随着当今社会地不断发展和进步，人们对于生活的要求也在不断地提高之中，而作为当今社会中非常重要的食品行业来说同样也是如此。
如今人们对于食品的要求在不断地提高，因此食品中微生物的测定就变得越来越重要，在制作各类食品中的微生物都需要得到有效控制。
本文就侧重于对当前影响微生物菌落总数测定准确度的因素进行分析和探讨，在此基础上，本文还列举了一系列的解决方案，希望通过这些方案能够帮助到有需要的人。
关键词：食品微生物学检验；菌落总数测定；准确度影响因素引言：如今我国各种面点慢慢地成为了人们生活中必不可少的食品，为了能够有效的提高这种食品的质量，相关人员就需要能够做到有效地对其中所蕴含的微生物菌落进行分析和控制，并且通过一系列的检验来有效地检验出其准确性。
根据长时间的分析以及探究，相关工作人员可以有效地从中发现一些影响测定准确度的因素，并且通过对这些因素开展分析以及调查，以此来做到更加精准的微生物菌落测定。
一、菌落总数及测定的概念（一）菌落总数菌落总的来说是一种细菌的集合体，其自身都是通过细菌自身在培养基上生长繁殖而形成一系列的能够被肉眼识别的生长物，这种生长物其自身通常拥有着数量非常多的细菌集合，细菌本身是一种极其微小的生物，但是随着数量的增加以及聚集，越来越多的细菌就会集合在一起，这时候的细菌集合自身能够拥有一定的数量以及体积，人们在进行观察的时候就能够更加直观地观察到，从而更好地对其进行分析[1]。
根据《GB 4789.1-2016食品安全国家标准食品微生物学检验总则》和《GB 4789.2-2016食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》的标准要求，在对样品进行分析地时候，首先需要对样品进行一定的稀释工作，在完成稀释之后就可以与培养基进行混合。
工作人员需要提前将培养条件选择好，并且在实际的研究过程中就注重对培养环境地控制以及改善，使其能够保持在一个稳定的环境中，从而帮助每个细菌能够在其中进行生长以及繁殖，最后能够慢慢地形成可见的菌落。
药品微生物限度检查误差分析及应对措施
药品微生物限度检查误差分析及应对措施摘要：为了保障药品质量及安全，相关部门提出了微生物限度检查的方法，只有降低检查误差才能提高检查结果的准确性。
为此，本文重点从培养基导致的误差及应对措施、检品导致的误差及应对措施、菌落计数导致的误差及应对措施、无菌室导致的误差及应对措施等四个不同角度分析药品微生物限度检查工作中的误差并提出相应的解决对策。
关键词：药品；微生物限度检查；误差；应对措施药品主要用于疾病的预防与治疗，关系到人们的生命安全。
因此，还必须加强检查微生物的限度，提高药品质量，保障人们的用药安全。
然而结合实际工作可知，受到检查要求严格、周期长的特点，无法避免检查误差，还需要结合实际情况提出相应的解决对策。
1培养基导致的误差及应对措施微生物限度检查工作中培养基对其产生的检查而言是相当重要的一个环节，其直接对该工作的结果产生影响[1]。
若工作人员没有按照要求做好培养基的存放工作或没有在相应的条件下配置，导致培养基质量稳定性不强，一定程度上也会对微生物限度检查结果产生影响。
为了提高微生物限度检查结果的准确性，还必须加强检测培养基的质量，提高培养基的灵敏度和有效性。
因此，可从以下几个方面解决上述问题：首先，测试酸碱度。
细菌类型不同，其对培养基pH值的要求存在很大的差异，为了对培养基进行测试，了解其是否可以用于药品的微生物检查，还需要加大力度检测培养基的pH值。
若发现pH值达不到标准，可以用氢氧化钠进行调节，提高培养基使用效果。
工作人员在调节工作中应坚持少量多次，避免出现一次添加过量氢氧化钠的问题。
其次，开展已知菌试验。
检验初次购买的培养基时可以用已知菌对照试验的方法做好相关试验，可用酸度计测试其灵敏度，并借助不同类型的阳性菌针对各种培养基作对照试验，立足反应结果对培养基是否可以用于检查药品微生物限度进行确定，从根本上降低检查工作的误差[2]。
最后，制备后及时灭菌。
部分技术人员为了提高灭菌效果通常都是低温灭菌处理全部试验对象。
平板无菌落 误差分析
平板无菌落误差分析
一、菌种原因
菌种老化菌种如果经过连续频繁的传代达十几次甚至几十次，就会造成菌种老化，岀现生长缓慢甚至不生长的情况。
野生菌种相比于标准菌株，有一些野生分离的菌种本身比较脆弱，对营养要求比较高，对外界不良环境也比较敏感，难以在普通的平板上生长，往往需要加入特殊的营养物质。
二、人员操作不当
1、容器未洗刷干净，残留的抑菌成分导致菌不生长。
2、培养基配置过程中称量错误，加入添加剂比例错误等。
过度灭菌，有很多培养基成分不耐高温，过度灭菌会导致成分失效。
调pH值错误，不同温度下培养基的pH值也会不一样，未正确的调配pH值，也会导致菌不生长。
在实验操作过程中失误，特别是在稀释菌液过程中少接或者错接菌。
未放置合适的培养条件，根据不同菌对氧气的需求程度，可以分为需氧、厌氧、微需氧培养等。
根据不同菌对温度的需求，又可以在25°C、30°C、35°C、42°C、56°C等不同温度下培养。
三、培养基及添加剂原因
1、成品培养基本身质量不好，如原材料纯度不高、含有抑菌成分、原材料之间配比错误等都会导致成品培养基不合格。
2、特殊培养基及添加剂未正确存放，未遮光、冷藏、严格密封保存等导致失效。
3、培养基及添加剂超过有效期或者临近有限期，营养成分存在一定程度的失效导致菌不生长。
4、培养基及添加剂营养不够或者不适合培养某类菌种。
有一些菌种本身营养要求比较特殊，需要添加某些特殊营养后方能生长。
5、培养基pH值发生改变，有一些特殊的成品培养基pH值随时间会存在一定程度的改变，在使用前需要对pH值重新进行调整，否则也会导致菌不生长。
微生物检验偏差调查
xx年xx月xx日
汇报人：
微生物检验偏差调查
目录
contents
偏差调查的目的和意义微生物检验偏差调查的常见原因微生物检验偏差调查的方法微生物检验偏差调查的实例分析微生物检验偏差调查的结论和建议
01
偏差调查的目的和意义
微生物检验偏差调查是指通过分析和研究微生物检验过程中出现的不一致、不合理或异常结果，找出偏差的原因，采取必要的措施，以改进检验质量、提高检验的可靠性。
加强实验室质量控制
建立实验室质量控制体系，对实验过程进行全面监控，确保实验结果的准确性和可靠性。
要点三
通过制定行业标准，规范微生物检验的操作流程和质量控制要求，提高整个行业检验的准确性和可靠性。
建议相关机构加强微生物检验的质量控制
制定行业标准
相关机构应加强对微生物检验的监管力度，确保实验室按照标准进行操作，提高检验质量。
偏差内容
药物产品中微生物污染检测超标
调查过程
对实验室人员操作流程、仪器设备、生产环节进行详细检查，最终发现偏差原因为生产过程中未能严格控制卫生条件
实例四：某环保机构微生物检验偏差调查
某环保机构微生物实验室
调查对象
偏差内容
调查过程
偏差影响
水样中细菌种类鉴定出现偏差
对实验室人员操作流程、仪器设备、水样采集进行详细检查，最终发现偏差原因为水样采集位置不合理
微生物检验是临床诊断和治疗的重要依据，偏差调查有助于及时发现并解决影响患者安全的问题，降低医疗风险。
保障患者安全
偏差调查可以推动微生物检验学科的发展，提高检验技术的可靠性和准确性，促进学科的进步。
促进学科发展
历史
微生物检验偏差调查起源于20世纪中叶，当时随着临床微生物学的发展，人们开始关注微生物检验的准确性和可靠性。
菌落总数人员比对的允许误差
菌落总数人员比对的允许误差全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：菌落总数人员比对是一种常用的微生物检测方法，可以用来评估样品中微生物的数量。
在实际应用中，为了确保测试结果的准确性，需要对样品进行多次检测，并将各次检测结果进行比对。
然而在不同人员进行检测时，可能会出现一定的误差，这就需要确定一个允许误差范围，以确保测试结果的可靠性。
菌落总数人员比对的误差主要包括两个方面：一是设备误差，即使用的检测设备不同导致的误差；二是人为误差，即不同人员在操作过程中的差异性导致的误差。
设备误差可以通过标定和校准设备来进行控制，而人为误差则需要通过培训和标准化操作流程来进行控制。
在确定菌落总数人员比对的允许误差时，需要考虑到样品中微生物的真实浓度。
根据统计学原理，当微生物浓度较低时，允许的误差范围可以相对较大；而当微生物浓度较高时，允许的误差范围则需要相对较小。
需要根据具体情况来确定允许误差的范围。
一般来说，菌落总数人员比对的允许误差通常在正负10%以内。
这意味着当两个不同人员对同一样品进行菌落总数检测时，两次检测结果的差异在10%以内是可以接受的。
如果两次检测结果之间的差异超过了10%，则需要重新进行检测或者通过其他方式进行验证。
为了确保菌落总数人员比对的准确性，可以采取以下措施：1. 培训人员：确保所有进行检测的人员都接受过专业的培训，了解操作流程和技术要求。
2. 标准化操作流程：建立标准的操作流程，确保每个人员都按照相同的步骤进行检测。
3. 定期校准设备：定期对使用的检测设备进行校准，确保测试结果的准确性。
4. 进行质控：定期进行内部和外部质控，验证测试结果的可靠性。
第二篇示例：菌落总数是一种用来评估空气、水、食品等样品中细菌数量和质量的方法。
在实际应用中，人员之间的技术水平和操作规范可能会导致不同的结果，因此需要对菌落总数人员比对的允许误差进行控制和评估。
本文将探讨菌落总数人员比对的允许误差，并提出相应的建议和措施。
细菌菌落总数检测中存在的若干问题之探讨
细菌菌落总数检测中存在的若干问题之探讨388?疾病监测2006年7月30日第21卷第7期DiseaseSurveillance,July.30,2006,V o1.21,No.7细菌菌落总数检测中存在的若干问题之探讨沈红关键词:细菌;菌落总数;检测【中图分类号】R181.3【文献标识码】B【文章编号】1003—9961(2006)07—0388—02卫生细菌检验中细菌菌落总数检测的不确定问题正受到人们越来越多的重视,随着科学发展和检验技术进步对检验数据的准确性和可靠性提出了更高的要求,特别是检验数据质量高低需要得到规范,评价和承认.细菌菌落总数检测在食品中按{GB4789—94食品微生物学检验》标准检测;水样按卫生部《生活饮用水卫生规范2001.6.》标准检测;化妆品样品按《化妆品卫生规范2002)标准检测;消毒产品按《消毒技术规范2002)标准检测.要保证检测结果的准确性和可靠性,真实准确地反映所检样品中细菌污染的状况,在检测操作的每一过程都是关键的一环.本研究拟结合工作实践,对各类样品检测中存在的若干问题提出我们的浅见,以供商榷.1名称在国标中采用同样检测方法对细菌菌落总数名称有所不同.食品,化妆品的样品称之为菌落总数,生活饮用水,公共卫生场所,化妆品等样品称为细菌总数,消杀样品称为细菌菌落总数.为使国标中检测和测定结果名称统一,我们认为将已用数十年的菌落总数改为细菌菌落总数,其中的细菌二字不应省略,以便明确地排除也属于菌类的霉菌,酵母菌等真菌.细菌总数称谓也改为细菌菌落总数,因细菌总数代表着被检样品中除了37℃在营养琼脂培养一定时间内的菌落数外,它的含义很广,其还包括着嗜冷菌,嗜热菌,厌氧菌,微需氧菌及其他特殊营养要求的细菌等等各种细菌,而现检测方法是特指一群在营养琼脂上生长发育的嗜中温性需氧或兼性厌氧的菌落总数.故我们建议在所有国标中统一改为细菌菌落总数.2取样样品称量中对固体样品,按重量计是完全正确的,而对样品用体积计则有一定的误差.因体积对温度的差异较敏感,样品密度差异,量器上的粘附,有可能产生较大的取样误差[1l,所以取样时尽可避免上述情况所带来的误差.在{GB/T4789.33—2003食品卫生微生物学粮谷,果蔬类食品检验》中干果食品,烘炒食品样品处理,先用75%酒精消毒表面,再用剪刀剪去外壳,取出果肉,称量检测.实际上有些干果,烘炒食品的壳直接接触嘴或污染果肉进口的,检测果肉不能代表此样品微生物污染的程度,再则如此烦琐地处理样品有可能使没污染的样品被污染,以致【作者单位】浙江省绍兴市疾病预防控制中心,浙江绍兴312000 【作者简介]沈红(1962一),女,浙江省绍兴市人,副主任技师,主要从事卫生微生物检验工作【通讯作者]Err,Tel*************,Email:zjyshzjm@163,eom短篇论着?影响最后的细菌菌落总数结果的准确性.故我们建议此类样品检测时最好壳连果肉一起绞碎取样检测.涂抹取样检测细菌菌落总数中,采样的棉签头面积大小,也可影响结果的准确性和可比性,假如被检样品表面污染较严重或在超标准值附近,而只用小小面积的棉签头涂抹,此检测结果就没有可比性了.为防止局部漏采,建议用规定面积的纸片或无纺布粘贴,同时根据物表污染的程度而相应增加片数,并做好相应的空白对照.3稀释有些样品中含有不同浓度的防腐剂及不同pH等,抑制了细菌的生长,而稀释后,生理盐水缓解了某些抑菌物质的作用,细菌的生存环境有一定的改善,使细菌开始生长繁殖,因此出现了样品的第一稀释度无菌生长,而第二或第三稀释度有细菌生长的情况[2.我们认为应视样品不同,不能一概用生理盐水或一些营养液作稀释液,稀释液配制中加入适量的能中和防腐剂或缓冲pH值的稀释液,以免减少稀释带来的误差.4培养食品,化妆品等样品,由于样品本身营养成分丰富,加之细菌菌落总数检测培养48h,在48h看结果细菌菌落已经很大或很密;而饮用水中细菌菌落总数检测培养24h,生长菌落经常仅是隐约可见,关于这一点已有多位作者加以讨论,认为水中微生物处于消毒加工损伤或营养贫乏状况,接种后不能迅速脱离停滞期,因此业内人士普遍期待将国标统一定为37℃48h.在36℃24h培养的本意是检出外来污染菌,不计较原生菌,而分析结果表明,所谓原生菌主要来源于莫拉菌属,不动杆菌属,假单胞菌属, 包括部分条件致病菌,所以对这个问题的看法,存在着观念的差异,据报道_3],继续培育1d,细菌菌落总数增多,且直径增大.空白对照上如没有菌落生长,说明检测过程所用的培养基,空白稀释液,培养皿等用具的灭菌情况和检验的操作环境,操作过程符合无菌要求;但如有2个以上菌落生长,则需追加空白对照平板进行培养观察,以分别检测和判断是培养基,空白稀释液,还是平皿,吸管或空气可能存在的污染,如有可能则在消除污染之后重新检测.为减少误差,在检测过程中,将空白对照由1个增至2个,使空白对照的数量与样品每个稀释度测定的平板数量(均为2个平板)一致14],这样可以更好地反映本底(无样品)时细菌数量,而且可以反映器具和培养基的无菌情况以及无菌操作情况,从而有利于发现操作中问题和改进有关的检验环节,进而更加准确地测定样品的细菌菌落总数.疾病监测2006年7月30日第21卷第7期DiseaseSurveillance,July.30,2006,V o1.21,No.7?389?5计数与报告KLⅡN等报告样品中异氧菌对常规平板倾注45℃琼脂的短时间热力伤害较为敏感,而在使用平皿表面接触时菌数明显增加,这种现象也值得考虑.可采用直接涂抹平板或全自动旋转平板接种[51.若样品两个1O稀释度测定的平板上分别为1和O个菌落时,不能从国标中找到相应的报告方式,据调查了解,一般检验单位对这种情况的报告有3种,一是报告<10CFU/g(m1),二是报告10CFU/g(m1),三是取二个平行测定的平板的菌落数平均值而报告5CFU/g(m1),我们建议统一用第一种报告方式为宜.以上是我们对各类样品中细菌菌落总数测定中存在的几个问题提出的看法和建议,供大家探讨,希望有关部门予以重视这方面的问题,尽快完善与其当今市场发展需要的产品检验标准,使各类样品细菌菌落总数检测工作更好地开展.参考文献[1]包先金.卫生检验中有关样品计量问题的探讨【J】.中国卫生检验杂志,2001,11(2):234.【2]李晓玲,刘彩丽.对细菌总数结果出现异常现象的原因分析[J].中国卫生检验杂志,2002,12(4):480.【3]张文利.不同培育时间对样品细菌总数计数结果的影响【J]. 中国卫生检验杂志,2000,10(1):116.【4]胡巅.关于食品卫生微生物检验方法若干问题的探讨【J].中国卫生检验杂志,2002,12(6):737.[5]严纪文,宋曼丹,王海燕,应用全自动旋转平板接种,计数系统检测食品中菌落总数【J].中国卫生检验杂志,2004,14 (2):205—206.(收稿日期:2005一O7—21)(修定日期:2005-09-18)(上接第379页)2.5职业分布病例职业以学生为主,报告19例,占病例总数的42.22%;其次是农民17例,占37.78%,工人3例,教师,家务,驾驶员,商务人员,离退人员各1人.2,6临床表现与实验室结果大多数患者表现有恶心,纳差,乏力,茶色尿,皮肤和巩膜黄染,部份病人伴发热,肝大等症状和体征.45例病例中,血清ALT,血清胆红素水平均异常升高,并采用ELISA法测定抗HA V—IgM阳性35例,临床确诊1O例.2.7流行图素经流行病学调查,证实宁海县甲肝疫情是由甲型肝炎病毒污染棒冰引起的水型甲肝暴发.3O对病例对照调查研究结果表明:病例组病前食用毗邻象山县某棒冰厂生产的熊猫牌白糖棒冰是该县甲肝暴发的主要危险因素=10.56,OR值为15,OR的95%可信区间为2.95～76.16,P<O.O1),此结果与毗邻象山县甲肝暴发分析的流行因素一致.本次疫情病例发病高峰集中在9月12～25日,发病曲线为单峰型,说明本次暴发疫情为同源感染,根据甲肝的平均潜伏期推测,本次甲肝疫情的暴露时间可能分布在8月中下旬;对暴露期生产的库存熊猫牌棒冰抽样检测,菌落总数为5.3xlOcfu/m!,进一步说明该产品受到粪便的污染.3讨论3.1根据本次疫情的临床表现,流行病学调查,实验室检测结果,证实是一起由食用受甲型肝炎病毒污染的"小白糖"棒冰而引起的水型甲肝暴发疫情,并与象山县甲肝暴发疫情的流行因素一致.经介贝,毛蚶类引起的甲肝暴发流行在国内曾有报导],而这起因食用"棒冰"引起的甲肝暴发流行实属罕见.3.2主要控制措施对现症病人进行隔离正规治疗,隔离期间开展疫点的随时消毒工作,对病家进行终末消毒或消毒技术指导,动员学生和广大群众接种甲肝疫苗,利用新闻媒介,宣传版面等开展甲肝防治的广泛宣传;另一方面对库存熊猫牌"小白糖"棒冰进行封存.通过采取上述综合性预防控制措施,至1O月下旬甲肝疫情已回落至往年发病率水平.3.3此次疫情通过网络直报预警发现较早,预防控制措施及时落实,是将本次疫情控制在最小限度的关键.但同时也提示食品卫生监督部门要加强食品生产行业的生产及从业人员的卫生安全管理,如定期体检,产品检测等,以便及时发现危险因素,及时采取措施,杜绝传染病的扩散和蔓延.参考文献[1]中华人民共和国国家标准.甲型病毒性肝炎诊断标准及处理原则【S].[2]陈衡平,袁?胃.介毛蚶传播甲型肝炎暴发流行调查报告【J]_中华流行病学杂志,1991,12(2):87.(收稿日期:2005一O9—26)(修定日期:2006-04-10)(上接第359页)2002:30—35.[4]傅衍勇.天津市监狱囚犯中肺结核病人的DOTS管理及效果分析[J].中国防痨杂志,2003,25(5):286-288.[5]陈丽萍,苏文,胡永峰,等.1997~2003年湖北省武昌监狱肺结核病控制效果分析[J].中国防痨杂志,2005,27(3):148—150. (收稿日期:2006一O1—19)(修定日期:2006—05—20)。
菌落总数超标原因分析及解决(1)
饮料菌落总数超标原因分析及解决方法饮料的菌落总数就是指在一定条件下(如需氧情况、营养条件、pH、培养温度和时间等)每毫升(每克)检样所生长出来的细菌菌落总数。
菌落总数测定是用来判定饮料被细菌污染的程度及卫生质量，它反映饮料在生产过程中是否符合卫生要求，以便对被检样品做出适当的卫生学评价。
菌落总数的多少在一定程度上标志着饮料卫生质量的优劣。
饮用菌落总数超标的饮料，可能会引起急性中毒、呕吐、腹泻等症状，危害人体健康安全，而且会给公司带来直接的经济损失和信誉损失。
为什么有的饮料产品菌落总数会超标？下面我们就从人机料法环的角度来分析一下。
1. 人。
人在饮料生产中是比较活跃的因素，生产工艺中各个工序基本都有人在参与，由于人的不特定性，凡和饮料生产接触均有可能造成对饮料的二次污染。
一般情况下较为普遍的可能为:1.1从生产整个工序来看，饮料的调配工序和灌装工序，操作工人的个人卫生和操作习惯易对饮料造成微生物污染。
调配工序的操作工个人卫生和调配习惯不到位会给后面的杀菌工序造成杀菌不彻底，从而引起菌落总数超标。
灌装工序的操作工个人卫生清洁的不到位，更易造成饮料的菌落总数超标。
比如：在未洗手消毒的情况下，灌装过程中由于设备短暂停顿去触摸直接接触料液的设备及包装材料（瓶和盖子），造成个别产品出现菌落总数超标。
操作工衣服上的灰尘，来回走动时，增加了空间的浮游尘埃，加大空间的污染程度，使饮料加工环境变得恶劣。
1.2根据1.1的分析，所以操作工要洗手并消毒。
看图示对比试验：根据微生物的验证，灌装间的操作工在生产过程中要做到勤洗手消毒，减少个别饮料菌落总数超标的现象。
一般在下列情况下，需要对手进行清洗消毒：①凡是手触摸了非洁净的物品。
②操作工在上完卫生间后。
③操作工在生产过程中每小时对手进行清洗消毒一次。
1.3灌装间的操作工不要在车间随意走动，不要做与生产无关的动作，不要将与生产无关的东西带到生产现场。
杜绝在生产现场吃食物现象。
菌落总数不合格
菌落总数不合格1. 引言菌落总数是指在一定条件下，对样品中菌落的数量进行计数。
菌落总数是衡量食品、水源、环境等是否卫生安全的重要指标之一。
合格的菌落总数可以反映样品的卫生状况，而不合格的菌落总数可能暗示着潜在的卫生问题。
本文将从菌落总数不合格的原因、影响、检测方法和控制措施等方面进行详细介绍，以便更好地了解和解决菌落总数不合格的问题。
2. 不合格原因菌落总数不合格可能有多种原因，主要包括以下几个方面：2.1 不良生产环境不良的生产环境是导致菌落总数不合格的主要原因之一。
生产场所的卫生状况差、空气污染严重、设备不洁净等都会导致菌落总数超标。
2.2 原料污染原料的污染也是菌落总数不合格的重要原因。
原料可能受到外界污染，包括空气中的微生物、水源中的细菌等。
如果原料本身就存在细菌污染或者没有经过适当的处理，那么最终产品的菌落总数就会超标。
2.3 不当的储存条件不当的储存条件也会导致菌落总数不合格。
例如，食品在储存过程中没有采取适当的温度控制措施，导致细菌生长迅速，从而使菌落总数超过标准限制。
2.4 不合理的加工工艺加工工艺不合理也是导致菌落总数不合格的原因之一。
如果加工过程中没有采取适当的杀菌措施，或者杀菌工艺不到位，那么细菌会在产品中大量繁殖，导致菌落总数超标。
3. 不合格的影响菌落总数不合格可能对人体健康和企业形象产生不良影响。
3.1 对人体健康的影响菌落总数超标可能意味着食品、水源或空气中存在潜在的病原菌。
食用超标菌落总数的食品可能导致食物中毒、肠胃炎等疾病，对人体健康造成危害。
3.2 对企业形象的影响菌落总数不合格可能会给企业带来负面影响。
如果企业生产的产品频繁出现菌落总数超标的情况，消费者会对该企业的产品产生质量疑虑，降低对企业的信任度，从而对企业的形象和销售造成不利影响。
4. 检测方法菌落总数的检测是保障食品、水源和环境卫生安全的重要手段之一。
常用的菌落总数检测方法主要包括以下几种：4.1 培养基法培养基法是一种常用的菌落总数检测方法。
检验结果误差原因分析课件
建立考核制度，对操作人员进行定期考核，确保他们具备足够的技 能和知识。
持续学习
鼓励操作人员参加学术会议、研讨会等活动，了解最新的检验技术和 方法。
规范试剂的采购和使用流程
1 2
试剂质量评估
对试剂的质量进行评估，选择质量可靠、性能稳 定的试剂品牌和型号。
试剂验收
对采购的试剂进行验收，确保符合质量要求和实 验室标准。
确保仪器设备在规定的时间间隔内进行校准，并定期进行维护， 以保持其准确性和稳定性。
选择高精度仪器
选择具有高精度和低误差的仪器设备，能够提高检验结果的准确性。
仪器设备的质控
通过参与实验室间的比对、质控样品的检测等方式，评估仪器设备 的准确性和稳定性。
加强操作人员的培训和考核
培训计划
制定详细的培训计划，包括理论知识和实践操作方面的培训，提高 操作人员的技能水平。
误差对临床诊断的影响
误诊风险
01
由于检验结果的误差，可能导致医生对病情的误判，从而影响
诊断的准确性。
诊断延误
02
如果医生过于依赖不准确的检验结果，可能导致诊断延误，从
而影响患者的及时治疗。
患者安全
03
不准确的检验结果可能导致医生选择错误的治疗方案，从而影
响患者的治疗效果和生命安全。
误差对治疗策略的影响
02
检验结果误差原因分析
仪器误差
仪器校准不当
未定期对仪器进行校准， 导致测量结果偏离真实值。
仪器故障
仪器部件老化、损坏或内 部传感器失灵，导致测量 结果不准确。
仪器性能不稳定
仪器性能波动，影响测量 结果的重复性和准确性。
操作误差
操作不规范
实验员在操作过程中未严格遵守 操作规程，导致测量结果偏离真
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细菌总数监测常见误差分析
细菌菌落总数是水源地和地面废水样品检测必做的一项指标。
菌落总数检测同其他检验一样，也存在检测误差。
平板计数法是细菌总数常用方法之一，因此，该值准确与否直接关系水质好坏。
微生物平板计数的通常方法为每个样品用3个稀释度，每个稀释度常做3个重复。
但如何对平板菌落进行正确计数、3个稀释度以哪一个稀释度进行计数及微生物检测允许误差等问题，在饲料标准中并未有所规定，而这些问题与统计值的准确性密切相关。
我们就实际检测芽孢杆菌工作中遇到一些菌落计数的问题，与大家进行探讨。
1材料与方法
1．1试验材料
1．1．1样品：随机抽取微生态饲料添加剂合生素样品3份。
1．1．2 培养基：营养琼脂。
1．1．3仪器设备：磁力搅拌器，无菌培养皿，培养箱，振荡器。
1．2 试验方法
1．2．1样品的振荡时间对菌数检测的影响
选择1个样品，称取10 g，放人无菌锥形瓶内，加入90 mL无离子水，磁力搅拌分别为l0、20、30、40和60 rain。
用1 mL移液枪从中吸取1 mL样品悬浊液加入到盛有9 mL去离子水的试管中，用振荡器使样品充分均匀，以此类推，制成10一～1O一’不同稀释度的样品溶液。
平板涂布法检测菌含量：用移液枪从样品稀释液中各吸取200 L，每个样品稀释液3个重复；将平板倒置于35—37 cC培养箱中培养24 h。
1．2．2 检测方法对菌数检测的影响
各个样品称取l0 g，放入无菌锥形瓶内，加入90 mL无离子水，磁力搅拌分别为40 rain。
并稀释成10～～l0 不同稀释度的样品溶液。
倾注平板法检测菌含量：用移液枪从各个平行样品相应稀释液中各吸取1 mL，每个样品稀释液3个重复，待培养基表面干燥后，将平板倒置于35 37~(2培养箱中培养24 h。
平板涂布法检测菌含量：用移液枪从各个平行样品相应稀释液中各吸取200 L涂布平板，每个样品稀释液3个重复；将平板倒置于35～37℃培养箱中培养24 h。
2结果
2．1样品的振荡时间对菌数检测结果的影响
采用细菌平板计数的方法，不同振荡时间对合生素中芽孢杆菌检出量的结果见表1。
从表l中可见：不同振荡时间获得的细菌菌落数量有较大差别。
总体而言，在一定时间内，随着振荡时间的延长检出有效菌含量增加，说明细菌从载体上解析需要一定的时间；当振荡时间为40 rain后产品中的菌含量基本稳定。
采用适当振荡时间才能更精确的显示产品中有效菌的含量。
表1 震荡时间对有效菌含量结果的影响 '["／_．CFU／g 震荡时间对有效菌落含量结果的影响
3分析与讨论
3．1样品处理对结果的影响
取样时对样品取样口和取样工具要消毒，防止样品交叉污染。
3．2样品的均质处理对结果的影响
固体样品要用均质器或玻璃珠等充分均质，也可在稀释液中添加相应溶解液f如吐温80和液体石蜡等1的稀释液，以保证样品的充分均质。
测定芽孢杆菌活菌数时，不同振荡时间获得的细菌菌落数量有较大差别，因为细菌从载体上解析并均匀分散到溶液中需要一定的时间，待测样品应在振荡器上充分振荡，使得芽孢杆菌可以充分和均匀地分散到待测溶液中，避免因为菌体未完全释放而引起结果中细菌含量偏低的现象。
3．3 试验过程中操作方法的影响
加样l mL时，用1 mL的吸管并且每做一个稀释度都要换1支吸管，否则稀释度间菌落计数误差会超过10％，说明存在操作误差。
用吸管向平皿里加样，平皿开口要小，吸管要直立且加样结束后，让吸头接触皿底干燥处，保证加样的体积不少。
若采取倾注平板法时，平皿加样后要及时倾注琼脂，其间隔一般不超过20 min f最好在10 min内)。
以琼脂不烫手(约45℃)为宜，否则会杀灭细菌，太热也会使冷凝水过多，影响细菌的生长。
加入琼脂要及时摇匀，先向一个方向旋转，然后向另一方向旋转。
这样会减少菌落的集聚和连片现象。
另外，用力不要过大，使琼脂不溅到ⅡIL壁和肌盖上，保证计数结果的准确。
当琼脂凝。
当琼脂凝固后，要及时移人培养箱倒置培养。
若采用涂布平板法进行检测，放置适当时间后，则立即将平皿翻转后放置培养箱中进行培养，以避免菌落蔓延生长，难以计数。
为保证结果准确，除作琼脂的空白对照外，还要对菌落计数的全程做一对照。
3．4 菌落计数误差
菌落计数在完成培养后应立即进行，以防菌落继续生长蔓延从而影响测定
结果。
培养基中加入TrC f氯化一苯四氮唑)可使细菌菌落显红色，这样可与同样品颗粒和凝集物(白色)相区分，以提高菌落计数的准确性。
有学者认为：100 mL培养基中加入2～3 mL的TTC可使菌落着色且不抑制细菌的生长。
菌落计数时要2个人分别用菌落计数器计数菌落总数，取2个人的平均数报告菌落总数。
一般来说，每平板含20～200个菌落的稀释度的菌含量与实际结果最接近，超过200个／平皿或小于2O个／平皿的计数结果则可能与实际存在较大差别。
因此，应尽量选择20～200个／平皿的稀释度进行芽孢杆菌的计数，保证菌落计数的有效性。
报告结果要遵守国标中菌落计数的方法进行。
4小结
菌落数检测的误差可能来自于多个方面。
试验研究表明：除了检测环境和培养基之外，误差主要来自于样品和检验的操作过程，包括检验的准备环节。
一般认为，微生物样晶不能复检。
但当菌落总数在标准的临界或菌落出现明显的异常时，有时重新检测还是必要的。
这里所提到的重新检测是对同一批次未开封且保存的时间和温度都比较合适的样品。
这样，可以通过重新检测校正误差。