平喘药实验

平喘药实验

(豚鼠肺支气管灌流法)

【实验原理与目的】

受体、α受体与M受体。

肺组织的肥大细胞、支气管平滑肌细胞细胞膜上存在着β

2

β2受体激动时，可激活细胞膜上的腺苷酸环化酶，后者又催化细胞内cAMP的合成。cAMP 水平提高对支气管平滑肌有稳定膜电位、扩张支气管的作用。α受体激动时则使细胞内cAMP水平降低，使支气管收缩。激动M胆碱受体，可激活鸟苷酸环化酶，使细胞内cGMP

受体激动时，可抑制组胺、慢反合成加速，cGMP水平提高，从而收缩支气管。同时，β

2

应物质等过敏介质的释放，α受体与M受体激动时则可促进过敏介质的释放。

本实验目的是通过观察药物对豚鼠肺支气管灌流量的影响，来分析这些药物对支气管平滑肌的作用，加深对药物作用机制的理解。了解离体肺支气管灌流方法。

【实验对象】

豚鼠，体重400~600g。

【实验器材和药品】

1．仪器超级恒温水浴器。

2．器械支气管灌流装置，培养皿，大小剪刀，镊子，血管钳， 1ml注射器，蛙板，量筒，烧杯。

3．药品乐氏液，0.01%异丙肾上腺素，1.0%乙酰胆碱，0.2%苯海拉明，0.5%组织胺。

4．其它棉线。

【实验步骤和观察指标】

1．仪器装置

预先安装好肺支气管灌流装置并连接恒温水浴器（如图2-6-3-1所示）。贮液瓶内充满含氧的乐氏液，经恒温（370C）水浴中的蛇形管到达灌液套管。

1．手术操作

（1）将豚鼠击毙，切开颈动脉放血，然后固定于蛙板上。迅速用粗剪刀打开胸腔暴露心肺。

（2）用小镊子分离出气管，于甲状软骨下2~3个气管环处剪断气管并用镊子提起，剪除周围组织连同心肺一并取出。

（3）立即置入盛有冰冷乐氏液的培养皿内并轻轻挤压数次，以排出肺内气体。

（4）去除心脏，然后将气管用线扎于灌流装置的套管上，缓慢打开灌流液开关，以乐氏液灌流之。待肺充分膨胀后，在肺脏表面用针头散在性穿孔数个至数十个。调节灌流速度至每分钟流出量28~32ml。

3．观察与记录

待灌流量恒定后即可按下列顺序给药，每给一组药物待其灌流量恢复正常后再给下一组药：

（1） 0.5%组织胺0.5毫升。0.5min后开始记录每分钟液体流出量，观察其作用高峰时间和维持时间。

（2）重复注入组织胺,待其作用明显后,给予0.01%异丙肾上腺素0.5毫升。观察灌流量有何变化，与步骤（1）比较。

（3）注入0.2%苯海拉明0.5毫升。待3~5min后，重复注入组织胺，观察灌流量有何变化，与步骤（1）比较。

（4）1.0%乙酰胆碱0.5毫升,同步骤（1）。

（5）重复注入乙酰胆碱，待作用明显后，注入0.01%异丙肾上腺素0.5毫升,观察流量变化,与步骤（4）比较。

（6）将结果记录于表1。

表1 豚鼠肺支气管灌流量（ml/min）

药后（min）

药物药前

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

组织胺

组织胺

异丙肾上腺素

苯海拉明

组织胺

乙酰胆碱

乙酰胆碱

异丙肾上腺素

【注意事项】

1.击毙豚鼠头部应以不出血为宜，若出血应倒提豚鼠（即头朝下），以免血块阻塞气管。灌流好的肺脏应无萎陷或凝血区域。

2.每次给药后应予少量乐氏液冲管。

3．整个实验过程应使贮液瓶中的乐氏液保持在一定高度，以免影响灌流量。

【思考题】

1.受试药物哪些引起灌流量减少，哪些引起灌流量增加，其机制是什么？哪些药物是特异性拮抗剂？哪些药物是生理性拮抗作用？

2.阿托品是否可以用于支气管哮喘，为什么？

3.异丙肾上腺素用于支气管哮喘，有哪些副作用？为什么？