DNS法测定还原糖 ppt课件
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实验二 3,5-二硝基水杨酸法测定还原糖
一、实验目的 二、实验原理 三、实验器材
四、材料与试剂
五、操作方法
六、注意事项
一、实验目的
1．掌握还原糖定量测定的原理和方法 2．掌握分光光度计的使用方法 3. 掌握标准曲线的制作方法
二、实验原理
1．还原糖的定义
2. 哪些糖是还原糖？
3. 还原糖测定的基本原理
标准液浓度选择一般应能包括待测样品的可能 变异最低与最高值。 通常情况下的标准工作曲线是一条过原点的直 线（直线方程回归，相关系数R2）。
三、实验器材
1. 常规的玻璃器皿 2. 分光光度计 波长：540nm 模式：ABS 比色皿 3. 沸水浴 注意安全
四、材料与试剂
1．原始实验材料
小麦粉
2. 其它试剂
6 mol/L HCl；6 mol/L NaOH；碘-碘化钾溶 液；1 mg/L葡萄糖溶液；3.5-二硝基水杨酸
五、操作方法
1．取13个试管，写好标记。 2.1-9号做葡萄糖标准曲线用（一个空白样）， 10-11号测还原糖，12-13号测总糖用。 3.根据教材上的表格添加相应试剂。 4.沸水浴中反应5min。
日下午1：00开始上课。
今天的值日：第3-4组
5.反应液中加入4ml蒸馏水，测定OD540值。
6.整理数据，计算还原糖含量和总糖含量。
7.完成实验报告，下次实验课交给任课老师。
六、注意事项
1．用移液管准确吸取所需试剂。 2. 放入沸水浴时把试管捆好，保证整齐。 3. 沸水浴中反应时不要盖盖子，时刻关注水 浴锅中的水位，及时添加水。
4.沸水浴结束后，可放入冷水浴或冰水浴加速
冷却。
六、注意事项
6. 测定OD值时，混匀试管，使其颜色均匀。 7. 测定OD值时，从浓度低到浓度高的顺序测 定，未知浓度样品最后测定。 8. 洗涤比色皿时，先冲洗污物后，用酒精冲
洗几遍，晾干。禁止用硬质毛刷洗涤。
9. 计算浓度时注意稀释倍数。
10.作图注意加标注和单位。
六、注意事项
下次实验：实验八 氨基酸的纸层析 4月4日的课由于清明放假顺延一周，即4月11
二、实验原理
还原糖测定的基本原理
棕红色化合物 540nm波长下 有最大吸收
标准曲线
Βιβλιοθήκη Baidu
标准曲线（英文为 standard curve ）是指通 过测定一系列已知组分的标准物质的某理化性 质，而建立标准物质的物理 / 化学属性跟仪器 响应之间的函数关系。建立标准曲线的目的是 推导待测物质的理化属性。
一、实验目的 二、实验原理 三、实验器材
四、材料与试剂
五、操作方法
六、注意事项
一、实验目的
1．掌握还原糖定量测定的原理和方法 2．掌握分光光度计的使用方法 3. 掌握标准曲线的制作方法
二、实验原理
1．还原糖的定义
2. 哪些糖是还原糖？
3. 还原糖测定的基本原理
标准液浓度选择一般应能包括待测样品的可能 变异最低与最高值。 通常情况下的标准工作曲线是一条过原点的直 线（直线方程回归，相关系数R2）。
三、实验器材
1. 常规的玻璃器皿 2. 分光光度计 波长：540nm 模式：ABS 比色皿 3. 沸水浴 注意安全
四、材料与试剂
1．原始实验材料
小麦粉
2. 其它试剂
6 mol/L HCl；6 mol/L NaOH；碘-碘化钾溶 液；1 mg/L葡萄糖溶液；3.5-二硝基水杨酸
五、操作方法
1．取13个试管，写好标记。 2.1-9号做葡萄糖标准曲线用（一个空白样）， 10-11号测还原糖，12-13号测总糖用。 3.根据教材上的表格添加相应试剂。 4.沸水浴中反应5min。
日下午1：00开始上课。
今天的值日：第3-4组
5.反应液中加入4ml蒸馏水，测定OD540值。
6.整理数据，计算还原糖含量和总糖含量。
7.完成实验报告，下次实验课交给任课老师。
六、注意事项
1．用移液管准确吸取所需试剂。 2. 放入沸水浴时把试管捆好，保证整齐。 3. 沸水浴中反应时不要盖盖子，时刻关注水 浴锅中的水位，及时添加水。
4.沸水浴结束后，可放入冷水浴或冰水浴加速
冷却。
六、注意事项
6. 测定OD值时，混匀试管，使其颜色均匀。 7. 测定OD值时，从浓度低到浓度高的顺序测 定，未知浓度样品最后测定。 8. 洗涤比色皿时，先冲洗污物后，用酒精冲
洗几遍，晾干。禁止用硬质毛刷洗涤。
9. 计算浓度时注意稀释倍数。
10.作图注意加标注和单位。
六、注意事项
下次实验：实验八 氨基酸的纸层析 4月4日的课由于清明放假顺延一周，即4月11
二、实验原理
还原糖测定的基本原理
棕红色化合物 540nm波长下 有最大吸收
标准曲线
Βιβλιοθήκη Baidu
标准曲线（英文为 standard curve ）是指通 过测定一系列已知组分的标准物质的某理化性 质，而建立标准物质的物理 / 化学属性跟仪器 响应之间的函数关系。建立标准曲线的目的是 推导待测物质的理化属性。