胸腹水的实验室检查

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2. 蛋白质测定
1)蛋白定性试验—黏蛋白试验(Rivalta test) 浆膜上皮细胞在炎性反应的刺激下分泌粘蛋白量增加, 粘蛋白是一种酸性糖蛋白,等电点为PH3-5,因此可在稀 乙酸中出现白色沉淀。
漏出液为阴性 渗出液为阳性 但实际工作中并不能单靠本试验来鉴别, 最好由蛋白定量 来确定。 注意:标本应离心;结果观察仔细;最好有阳性对照。
渗出液(transudate):为炎症性积液,血管通透性
增加,大分子物质及有形成分多 2.按其形成的原因分为肿瘤性和非肿瘤性。
漏出液
发生机制及病因
A.毛细血管内流体静脉压增大:
心衰、缩窄性心包炎、静脉栓塞
B.血浆胶体渗透压降低:
低蛋白血症(肝硬化、肾病、重度营养不良等)
C.淋巴回流受阻:
肿瘤压迫、丝虫病等
胸腹水的实验室检查
检验科 万芙荣
内容提要
一、胸腹水的来源及形成机制 二、胸腹水的标本留取 三、胸腹水的检查内容 四、胸腹水的临床应用
一、胸腹水的来源及形成机制
浆膜 (serosa ):衬在体腔壁和转折包于内 脏器官表面的薄膜,分为壁层和脏层
浆膜腔:浆膜壁层和脏层之间的间隙,分为胸 膜腔、腹膜腔、心包腔等。腔内有少许浆液, 起润滑作用,病理情况下可增多
4)SCCA: 近来人有人提出用浆膜腔积液检测鳞状细胞癌抗原组织多
肽抗原,对扁平上皮细胞癌、原发性肺癌的诊断有参考价值。
7、其他特殊成分测定
1) 铁蛋白(feritin,Ft):
癌性积液中铁蛋白多大于1500μ g/L,结核性时也升高但 一般小于600μ g/L ,因此如果与溶菌酶一起测定对癌性和结 核性鉴别则有价值,癌性积液铁蛋白明显升高,积液Ft/血清 Ft>1,而溶菌பைடு நூலகம்含量不高;结核性者两者均升高,溶菌酶升 高极为明显。 2) 纤维连结蛋白(fibronectin,FN):
6、肿瘤标志物测定
1)癌胚抗原(carcinoembryonicantigen,CEA ):CEA是一 种分子量较大的糖蛋白,当积液中CEA>20μ g/L,积液CEA/血 清CEA比值>1时,应高度怀疑为癌性积液。有时强调胸水CEA/ 血清CEA比值>4.3是恶性病变的一个指标。
2)甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP ):血清AFP作为原 发性肝癌的标志物。腹水中AFP检测结果与血清AFP呈正相关。 检测腹水中AFP>25μ g/L时对诊断原发性肝癌引起的腹水是有 价值的。
前两种原因常为多浆膜腔积液,且伴有组织间液增多引 起的水肿。
渗出液
发生机制及病因 A.感染性:如化脓性细菌、分枝杆菌等 B.非感染性:
1)化学性刺激(血液、胰液、胃液) 2)恶性肿瘤 3)风湿性疾病等
渗出液常表现为单侧浆膜腔积液
二、胸腹水的标本留取
1. 胸腹水标本由临床医师行胸腔穿刺术或腹腔 穿刺术分别采集。
中性粒细胞
淋巴细胞
间皮细胞
3、脱落细胞检查 尤其是恶性肿瘤细胞
4、结晶检查 胸水胆固醇结晶----见于陈旧性胸膜炎
5、染色体检查
胆固醇结晶:
常见于有脂肪变性 的陈旧性胸腔积液, 胆固醇性胸膜炎所 致的胸腔积液,与 结核杆菌感染有关。
(四)、病原生物学检查
1、寄生虫及虫卵 2、细菌学检测
寄生虫:
(一)一般检查
颜色 透明度 比重 凝固性
漏出液
淡黄色 清晰透明 小于1.018 不易凝固
渗出液
黄色或其他颜色 呈不同程度混浊
大于1.018 易自行凝固
(二)胸腹水的生化及免疫学检验
1、酸碱度测定 2、蛋白质测定 3、葡萄糖测定 4、脂类测定 5、酶类测定 6、肿瘤标志物测定 7、其他特殊成分测定
5、酶类测定
1)乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LD)
主要用于鉴别渗出液与漏出液、良性与恶性积液。 浆膜腔积液中LD>200U/L,积液LD/血清 LD比值>0.6可作为渗出液的指 标。在各类渗出液中化脓性感染积液LD活性>癌性>结核性>正常。LD同 功酶测定如 LD3、LD4、LD5或仅LD5增高可疑为恶性肿瘤。
2. 送验标本最好留取中段液体于消毒容器试管 或消毒瓶内,常规细胞学检查约留取2毫升,生 化检验及特种蛋白检测留2毫升,微生物培养留1 毫升,脱落细胞学检查则约需10毫升。如查结核 杆菌则约需10毫升。
3. 为防止出现凝块,细胞变性、细菌破坏自 溶等,应即时送验及检查,常规及细胞学检查 可用EDTA·K2抗凝,生化检查标本可用肝素抗 凝。加留1管不加任何抗凝剂用以观察有无凝 固现象。
判断。CRP<10mg/L为漏出液,CRP>10mg/L为渗出液。 6) 免疫球蛋白:
渗出液:积液IgG(IgA)/血清IgG(IgA) >0.5。 7) γ -干扰素(γ -IFN):
结核性浆膜腔积液中γ -IFN含量升高,平均为91U/ml, 而其它性质的胸腔积液γ -IFN含量均低于2U/ml。
浆膜起源于间胚叶,为间皮细胞所覆盖,组 成成分为:间皮和结缔组织
人体的浆膜腔分布
浆膜腔 少量液体 润滑作用 浆膜腔积液
胸腔 <20ml
胸水
腹腔 <50ml
腹水
胸腹水的分类
1.根据浆膜腔积液的原因及性质不同,积液可分为两大类:
漏出液(exudate):为非炎症性积液,大分子物质及
有形成分少
2. 蛋白质测定
2) 蛋白质定量(总蛋白定量以及蛋白电泳) 测定方法与血清蛋白定量相同 渗出液蛋白质 >30g/L ;积液总蛋白/血清总蛋白比值≥ 0.5; 漏出液蛋白质 <25g/l ;积液总蛋白/血清总蛋白比值<0.5;
蛋白质如为25-30 g/L ,则难以判明其性质(中间型积液)
2. 蛋白质测定
乳糜样积液中有时可见 微丝蚴;包虫病积液中 可见棘球蚴的头节和小 钩;阿米巴的积液可见 阿米巴滋养体。
细菌:
感染性积液常见的微生 物有脆弱类杆菌、大肠 杆菌、粪肠球菌、铜绿 假单胞菌、结核杆菌等。 多需由细菌培养来确认。
四、胸腹水检验的临床应用
1、积液性质的鉴别 漏出液与渗出液 非癌性与癌性积液 结核性与非结核性积液。
2)腺苷脱氢酶(adenosine deaminase,ADA)
ADA大于40U/L应考虑为结核性,结核性 >癌性>非炎症性积液,当抗
结核药物治疗有效时,其胸腹炎内ADA也应随之下降,因此也能作为抗结 核治疗效观察指标。
5、酶类测定
3)溶菌酶(lysozyme,LZM)
结核性积液中溶菌酶含量超过30mg/L,积液和血清中溶菌酶比值>1.0, 明显高于癌性积液、结缔组织病。因此测定积液中溶菌酶对结核性胸膜炎 的诊断有帮助,连续观察可估计预后。而癌细胞不含溶酶体,无LZM产生, 故癌性积液LZM无增高。
1. 酸碱度测定(PH)
PH测定时标本应抽取在肝素化的真空注射器具内, 注意与外界空气隔绝。即时送验及时检查。检测方法同 血气分析。 漏出液PH>7.4; 渗出液一般偏低,化脓性感染时积液PH<6.8 PH降低还可见于类风湿病、结核、恶性肿瘤、红斑狼 疮性胸膜炎。 胸水PH<6,对诊断食道破裂有参考价值。
4)淀粉酶(amylase,AMY)
大多数胰腺炎患者其胰腺创伤所致腹腔积液中淀粉酶活性/血清淀粉酶 > 1。 当食道破裂时唾液经食道穿孔处流进胸腔,此时胸腔积液淀粉酶也升高,
5、酶类测定
5)碱性磷酸酶(alkaline phoephatase,ALP):
积液中因肿瘤细胞释放大量ALP,使积液ALP/血清ALP比值 >1,而其他性质积液ALP/血清ALP比值<1.0。 另外,小肠扭转穿孔患者的腹腔穿刺液中ALP活性升高,约 为血清ALP的2倍,发病2-3小时即升高,并随病情进展而增 加。
内容提要
一、胸腹水的来源及形成机制 二、胸腹水的标本留取 三、胸腹水的检查内容 四、胸腹水检验的诊断提示
三、胸腹水的检查内容
(一)一般检查(量、色、混浊度、凝固性、比密、PH) (二)化学检测(黏蛋白试验、蛋白定量、电泳、葡萄糖等) (三)显微镜细胞学检测(细胞计数、分类) (四)病原生物学检测
③淋巴细胞为主—慢性炎症(结核, 梅毒) 肿瘤性积液
④其 他 细 胞-----间皮细胞,狼疮细胞
间皮细胞
形态描述:胞体呈圆形或椭圆形,直径1040um,核呈圆形,直径10-20um,多居中, 亦可偏位。核染色质粗细不一,有的可见核仁。
新脱落者胞质嗜碱性而染成蓝色,脱落时间较 久者胞质变酸而染成淡紫红色,前者称为嗜碱 性间皮细胞,后者为嗜酸性间皮细胞
渗出液
炎症、肿瘤、理化刺激 不定、血性、脓性、乳糜 混浊
>1.018 能自凝
<6.8 阳性
>30g/L
>0.5 低于血糖
>200
> 0.6 >500×106/L 中性或淋巴细胞 可有 可找到病原菌
胸水常见于:
结核性胸膜炎(54.8% ) 恶性肿瘤(40%) 血胸 充血性心力衰竭 上腔静脉阻塞或血栓 肺炎 类风湿关节炎 SLE
纤维连结蛋白是一种多糖蛋白,认为肿瘤细胞可合成分 泌FN。腹水FN>75mg/L可高度怀疑癌性腹水。
有报告癌性腹水FN为173.9±65.9mg/L,非癌性腹水为13.4±6.8mg/L
7、其他特殊成分测定
3) 乳酸:
浆膜腔乳酸含量测定有助于细菌性感染与非感染性的鉴 别诊断,当乳酸高达6mmol/L以上时,应高度提示有细菌 感染,尤其在应用抗生素治疗后的胸水,一般细菌检查又为 阴性时更有价值。类风湿病、充血性心力竭及恶性肿瘤引起 的积液中乳酸含量也可见轻度升高。
(三) 显微镜常规检查
1、细胞计数
漏出液<100106/L 渗出液>500106/L
2、细胞分类 离心→沉淀→涂片→
瑞氏染色 巴氏染色 HE染色
漏出液以淋巴细胞和间皮细胞为主
渗出液中细胞成分较多:
①中 性 粒 细 胞 —化脓性积液 结核性积液早期
②嗜酸性粒细胞—气胸,血胸,过敏性疾病, 寄生虫性疾病
6、肿瘤标志物测定
3) 糖类抗原标志物(carbohydrateantigen, CA):
主要用于各种肿瘤转移所致的恶性积液的诊断与鉴别诊断 CA125:腹水中CA125>1000u/ml常作为卵巢癌转移的指标,灵敏感性为85%, 特异性可达95%,近年来报道在胃癌、结直肠癌、肝癌和胰腺癌中也有较 高的阳性检出率; CA199是胰腺癌和结、直肠癌的标志物; CA50是胰腺和结、直肠癌的标志物; CA242作为腺癌的标志物.
2、寻找积液的病因
漏出液与渗出液鉴别诊断
鉴别要点
原因
颜色 透明度 比密 凝固性
PH 粘蛋白定性 蛋白定量 积液/血蛋白 葡萄糖定量
LD 积液/血LD 细胞计数 细胞分类 肿瘤细胞 细菌
漏出液
非炎症 淡黄、浆液性 透明或微混
<1.015 不自凝
>7.4 阴性
<25g/L
<0.5 与血糖相近
<200
< 0.6 <10×106/L 淋巴,间皮细胞为主 无 无
葡萄糖定量 测定方法与血清葡萄糖定量相同。
漏出液:葡萄糖含量与血糖相近或稍低些。 渗出液:葡萄糖因受细菌或炎症细胞的酵解作用,积液中葡
萄糖含量降低(〈2.22mmol/L) 化脓性细菌感染< 1.1mmol/L 结核性〈3.0mmol/L 肿瘤性积液一般不低于3.3mmol/L
4、脂类测定
脂类:包括胆固醇、甘油三酯、脂蛋白电泳测定 1.主要用于真性与假性乳糜积液的鉴别。真性乳糜 积液胆固醇低于血清胆固醇、甘油三酯高于血清甘 油三酯、脂蛋白电泳有明显乳糜微粒区带。 2.胆固醇性胸膜炎的胸腔积液中主要为胆固醇结晶, 胆固醇含量可高达26mmol/L(1000mg/L)。 3.积液胆固醇>2.86mmol/L,则肿瘤的可能性大。
4) 纤维蛋白原降解产物(fibrin degradation products,FDP):
在癌性积液中FDP明显高于结核性,而结核性又高于肝 硬化引起的积液。因此提出积液中FDP≥1000mg/L时,考虑 癌性可能性较大。
7、其他特殊成分测定
5) C反应性蛋白(C-resctive protein,CRP): CRP为急性时相反应蛋白,可用于漏出液及渗液的鉴别
3) 蛋白电泳: 漏出液:α2和γ球蛋白等大分子蛋白质比例低
于血浆,白蛋白相对较高。 渗出液:蛋白电泳谱与血浆相近似,其中大分
子量蛋白质显著高于漏出液。
2. 蛋白质测定
4)白蛋白梯度(血清/积液白蛋白梯度, SAAG): 渗出液SAAG<11g/L; 漏出液SAAG>11g/L
3、葡萄糖测定
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