果蝇的饲养

（3）果蝇的继代培养
转移果蝇至新培养瓶或麻醉瓶： 转移果蝇至新培养瓶或麻醉瓶： 取一新 培养瓶，略为松动棉塞，放置于右手侧， 培养瓶，略为松动棉塞，放置于右手侧，取欲 转移果蝇培养瓶于左手侧，以左手握住瓶颈， 转移果蝇培养瓶于左手侧，以左手握住瓶颈， 两指轻扣棉塞顶部， 两指轻扣棉塞顶部，以右手轻拍瓶底使果蝇掉 落于培养基表面，左手拔起棉塞以两指夹住， 落于培养基表面，左手拔起棉塞以两指夹住， 右手两指夹住棉塞新培养瓶棉塞， 右手两指夹住棉塞新培养瓶棉塞，并将新培养 瓶倒扣于旧培养瓶上， 瓶倒扣于旧培养瓶上，再以左手握住两瓶口相 接处，翻转使新培养瓶位于下方， 接处，翻转使新培养瓶位于下方，然后以右手 掌心轻拍旧培养瓶瓶底， 掌心轻拍旧培养瓶瓶底，使果蝇掉落于新培养 瓶内，迅速盖上各瓶棉塞。 瓶内，迅速盖上各瓶棉塞。
再麻醉
– 观察或计数过程中，果蝇可能苏醒，可准备 观察或计数过程中，果蝇可能苏醒， 一玻璃培养皿，内以胶带贴一小块棉球， 一玻璃培养皿，内以胶带贴一小块棉球，滴 入适量乙醚，培养皿口朝下置于一旁备用， 入适量乙醚，培养皿口朝下置于一旁备用， 如见果蝇翻身走动可将培养皿口朝下， 如见果蝇翻身走动可将培养皿口朝下，盖于 果蝇上方待其麻醉后再移开。 果蝇上方待其麻醉后再移开。
2.果蝇的生活史观察 2.果蝇的生活史观察
果蝇的生活史从 受精卵开始， 受精卵开始，经历幼 虫 ( 一至三龄 ) 、蛹 和成虫阶段， 和成虫阶段，是一个 完全变态过程 。
Fra Baidu bibliotek
生活史观察： 生活史观察：
成熟的雌蝇交尾后2 将卵产在培养基的表层。 ①卵 ：成熟的雌蝇交尾后 ～ 3d 将卵产在培养基的表层。用解剖针针尖 挑取一点培养基将其置于载玻片上， 滴清水， 挑取一点培养基将其置于载玻片上，滴1 滴清水，用解剖针将培养基展开后 放在显微镜低倍镜下仔细进行观察。果蝇的卵为椭圆形， 放在显微镜低倍镜下仔细进行观察。果蝇的卵为椭圆形，长约 0.5mm ，腹 面稍扁平，前端伸出的触丝可使卵附着在培养基表层而不陷入深层。 面稍扁平，前端伸出的触丝可使卵附着在培养基表层而不陷入深层。 幼虫： 受精卵经过1d的发育即可孵化为幼虫 的发育即可孵化为幼虫。 ②幼虫： 受精卵经过 的发育即可孵化为幼虫。幼虫在培养基内及瓶壁上 都有，培养基内的幼虫一般要小一些。 都有，培养基内的幼虫一般要小一些。果蝇的幼虫从一龄幼虫开始经两次蜕 形成二龄和三龄幼虫，长大的三龄幼虫往往爬到瓶壁上来化蛹， 皮，形成二龄和三龄幼虫，长大的三龄幼虫往往爬到瓶壁上来化蛹，长度可 幼虫一端稍尖为头部，黑点处为口器。 达 4 ～ 5mm 。幼虫一端稍尖为头部，黑点处为口器。 的发育开始化蛹。蛹一般附着在瓶壁上，淡黄色。 ③蛹： 幼虫经过 4 ～ 5d 的发育开始化蛹。蛹一般附着在瓶壁上，淡黄色。 随着发育颜色逐渐加深，最后为深褐色。 随着发育颜色逐渐加深，最后为深褐色。瓶壁上看到的几乎透明的蛹是已经 羽化完而遗留的蛹的空壳。 羽化完而遗留的蛹的空壳。 刚羽化出的果蝇虫体较长，翅膀也没有完全展开， ④成虫 ：刚羽化出的果蝇虫体较长，翅膀也没有完全展开，体表未完全几 丁质化所以成半透明透乳白色。随着发育，身体颜色加深， 丁质化所以成半透明透乳白色。随着发育，身体颜色加深，体表完全几丁质 后开始交配， 化。羽化出的果蝇在 8 ～ 12h 后开始交配，成体果蝇在 25 ℃ 条件下的寿 命为 37d 。
果蝇（ 是遗传学的重要实验材料，可用来进 果蝇（ fruit fly ）是遗传学的重要实验材料 可用来进 行三大定律及连锁互换、三点测交、 行三大定律及连锁互换、三点测交、唾腺染色体观察等多 方面的研究。果蝇 方面的研究。果蝇是一种模式生物，具有许多优点： 完成一个世代。 （1）生活史短，20-25℃条件下， 12-15d完成一个世代。 ）生活史短， ℃条件下， 完成一个世代 （2）繁殖率高，一对果蝇可产卵 ）繁殖率高，一对果蝇可产卵400-500只。 只 3）饲养方便，来源广泛。 （3）饲养方便，来源广泛。 （4）染色体数少，只有 4 对。 ）染色体数少， （5）突变性状多，且易于识别。 ）突变性状多，且易于识别。
果蝇转入麻醉瓶方法
死亡果蝇的标志
4.果蝇形态特征观察 4.果蝇形态特征观察
• • • • 果蝇成虫分为头、胸、腹三部分 头部有一对大的复眼，三个单眼和一对触角。 胸部有三对足，一对翅和一对平衡棒。 腹部背面有黑色环纹，腹面有腹片，外生殖器位 于腹面末端，全身有许多体毛和刚毛。
5.果蝇几种突变类型的观察 5.果蝇几种突变类型的观察
果蝇的饲养及形态性状观察
一、实验目的
1.了解果蝇生活史及各个阶段形态特征； 2.掌握果蝇成虫雌雄性别鉴定方法; 3.了解果蝇常见的突变型; 4.掌握果蝇的饲养方法。
二、实验原理
果蝇（Drosophila melanogaster ） 果蝇（ 中文名：黑腹果蝇（2n=8） 中文名：黑腹果蝇（2n=8） 属节肢动物门、昆虫纲、双翅目、 属节肢动物门、昆虫纲、双翅目、果蝇 果蝇属。 科、果蝇属。
• 果蝇具有丰富的外表型态差异， 果蝇具有丰富的外表型态差异，包 括眼色、眼形、翅形、翅脉横隔、 括眼色、眼形、翅形、翅脉横隔、刚毛 形状与数目、体色等。 形状与数目、体色等。
果蝇几种常见的突变类型
突变性状 • 白眼 • 棒眼 • 黑檀体 • 黑体 • 黄身 • 残翅 • 焦刚毛 • 小翅 基因符号 性状特征 复眼白色 W 复眼纵条形 B 体呈乌木色，黑亮 e 体呈深黑色 b 体呈浅黄色 y 翅退化，部分残留 vg sn 刚毛卷曲如烧焦状 m 翅较短，仅至腹端
牛奶瓶、 牛奶瓶、大中型指管 或三角瓶
灭菌温度121℃ ℃ 灭菌温度 灭菌时间20min 灭菌时间
（2）培养基的配制
果蝇培养基成份（100ml） 蒸馏水 玉米粉 糖 琼脂
丙酸（苯甲酸）
酵母粉
80ml 8.5g 6.５g １.０g 0.5ml （0.25g） 少许
果蝇饲料的几种配方： 果蝇饲料的几种配方： 玉米饲料 米粉饲料 水（ml） 200 100 琼脂（g） 1.5 2 蔗糖（g） 13 10 香蕉浆（g） 玉米粉（g） 17 米粉（g） 8 麸皮（g） 8 酵母粉（g）1.4 1.4 丙酸（ml） 1 1
果 蝇 的 生 活 史
果蝇的生活周期长短与温度有密切关系。 果蝇的生活周期长短与温度有密切关系。一 般来说， 果蝇不育或死亡， 般来说， 30 ℃ 以上温度能使 果蝇不育或死亡， 低温能使生活周期延长，生活力下降。 低温能使生活周期延长，生活力下降。饲养果蝇 的最适温度为 20 ～ 25 ℃。 果蝇在 25 ℃ 时，从 卵到成蝇需 10 d左右，成虫可活 26 ～ 33 d。 左右， 左右 。
三、实验用品
1、仪器：显微镜、双筒解剖镜或放大镜、恒温培养箱、
高压灭菌锅、培养瓶、麻醉瓶、白磁砖、毛笔、石棉网、 棉花、纱布、吸水纸、滤纸片、牛皮纸、小镊子等。
2、材料：果蝇野生型及不同突变型果蝇 3、试剂：乙醚、玉米粉、糖、酵母粉、琼脂、丙酸
四、实验操作流程
1.果蝇饲养。
（1）培养瓶、棉塞灭菌
翅脉横隔
♦ 野生型，具有横隔脉，突变型，缺横隔脉 野生型，具有横隔脉，突变型，
体色
翅形
长翅 短（小）翅
残翅
眼色
红眼 朱红眼
墨黑眼
白眼
刚毛形态
果蝇常见突变型
野生型
残翅
棒眼
小翅
黑檀体
白眼
6.果蝇的雌雄鉴别 果蝇的雌雄鉴别
♀ ：腹部背面有五条黑条纹 腹部背面有三条黑条纹， ♂ ：腹部背面有三条黑条纹，
六、注意事项
1、 麻醉剂的使用：乙醚有毒, 挥发性强，使 用时，要注意随时盖好瓶盖,防止乙醚挥发。 2、麻醉深度：麻醉果蝇时，要防止麻醉过度， 影响继代培养。 3、雌雄果蝇的准确识别。
转移果蝇时， 转移果蝇时，为避免麻醉的果蝇直接掉落于培养基表 面而粘着于培养基表面致死，可将培养瓶横放， 面而粘着于培养基表面致死，可将培养瓶横放，将麻 醉的果蝇倒于瓶壁，待其苏醒后再将培养瓶正立。 醉的果蝇倒于瓶壁，待其苏醒后再将培养瓶正立。 做好标记：新转移的培养瓶上需贴好标签， 做好标记：新转移的培养瓶上需贴好标签，注明继代 培养日期及实验者姓名。 培养日期及实验者姓名。
最后一条极宽， 最后一条极宽，并延伸到腹面
果蝇♀♂识别 果蝇♀♂识别 ♀♂
♀ ：无性梳 ♂ ：前腿跗节上有性梳
果蝇的雌雄鉴别
♀ 个体大小 腹背条纹 腹部末端 性梳 大 5 尖 无 ♂ 小 3 圆 有
五、结果分析
1、每人制备２瓶培养基 ． 每人制备２瓶 2、每人转移培养2瓶果蝇。要求每瓶至少３ 、每人转移培养2 对雌雄果蝇。 作业: 作业: 比较雌雄果蝇。
香蕉饲料
50
1.6 50 1.4 0.5-1
培养基配制方法：
取应加水量的一半，加入琼脂和蔗糖，煮沸，使充分溶解。 取应加水量的一半，加入琼脂和蔗糖，煮沸，使充分溶解。 取另一半水混和玉米粉，加热煮熟，调成糊状。 取另一半水混和玉米粉，加热煮熟，调成糊状。 玉 米 粉 糖 琼脂
将上述两者煮沸混匀，待稍冷后分装。 将上述两者煮沸混匀，待稍冷后分装。 最后加入酵母粉及丙酸。 最后加入酵母粉及丙酸。
3.果蝇的麻醉 3.果蝇的麻醉
麻醉剂： 麻醉剂：乙醚
麻醉方法： 麻醉方法：
取一麻醉瓶，瓶口与培养瓶大小相仿， 取一麻醉瓶，瓶口与培养瓶大小相仿， 取一棉花塞，在塞入瓶口的一面滴加3滴乙醚，将果 取一棉花塞，在塞入瓶口的一面滴加 滴乙醚， 滴乙醚 蝇转入麻醉瓶内，翻转麻醉瓶使瓶口朝上， 蝇转入麻醉瓶内，翻转麻醉瓶使瓶口朝上，迅速将滴 有适量乙醚的棉塞盖住麻醉瓶口， 有适量乙醚的棉塞盖住麻醉瓶口，约1min左右果蝇 左右果蝇 倒卧于瓶底，即可将果蝇倒出进行操作。 倒卧于瓶底，即可将果蝇倒出进行操作。