氨基酸态氮含量

实验五酱油中氨基酸态氮含量的测定

1 实验内容

用电位滴定法测定酱油中氨基酸的总量。

2 实验目的与要求

2.1 了解电位滴定法测定氨基酸总量的原理与操作要点。

2.2 熟练使用酸度计。

3 实验原理

氨基酸含有酸性的－COOH，也含有碱性的－NH2。它们互相作用使氨基酸成为中性的内盐。加入甲醛溶液时，-NH2与甲醛结合，其碱性消失。这样就可以用碱来滴定－COOH，并用间接的方法测定氨基酸的含量。用碱完全中和－COOH时的pH值约为8.5～9.5,可以利用酸度计来指示终点。

4 材料及试剂

酱油、甲醛、0.050 mol/L氢氧化钠标准溶液

5 仪器

酸度计、复合玻璃电极、碱性滴定管

6 实验步骤

准确吸取酱油5.0mL，置于100mL容量瓶中，加水至标线，混匀后吸取5.0 mL置于200mL烧杯中，加水60 mL，插入酸度计的复合玻璃电极，用0.05mo1/L 氢氧化钠标准溶液滴定至酸度计指示pH8.2，记录消耗的氢氧化钠标准溶液的体积。

向上述溶液加入2.5mL甲醛溶液，混匀。再用0.05mol/L的氢氧化钠标准溶液继续滴定至pH9.2，记录消耗氢氧化钠标准溶液的体积(V1）。

同时取80mL蒸馏水置于另一200mL烧杯中，先用0.05mo1/L氢氧化钠标准溶液滴至pH8.2(此时不记碱耗量），再加入2.5mL甲醛溶液，混匀。用0.05mo1/L 的氢氧化钠标准溶液继续滴定至pH9.2，作为空白实验。记录消耗氢氧化钠标准溶液的体积( V2）。

比较：

组观测数求和平均方差

列 1 2 34.9 17.45 68.445

列 2 2 35.5 17.75 91.125

方差分析

差异源SS df MS F P-value F crit

组间0.09 1 0.09 0.001128 0.976258 18.51282

组内159.57 2 79.785

总计159.66 3

∵F＜F crit ∴不显著